霉菌毒素檢測方法綜述

由于產(chǎn)生毒素的霉菌無處不在，以及我們對大多數(shù)有利于霉菌生長和霉菌毒素產(chǎn)生的條件控制不力，造成食品和飼料的霉菌毒素污染問題越來越成為現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中不可忽視的重大難題。在各種農(nóng)產(chǎn)品上生長著的各種各樣的霉菌，這些霉菌都能產(chǎn)生霉菌毒素，霉菌毒素是有毒的化合物，有些甚至是致癌的。霉菌毒素有很多種(CAST,2003)，包括黃曲霉毒素，主要是黃曲霉毒素B1和M1(Aflatoxins，FB1、FM1)；赭(棕)曲霉毒素A(OchratoxinA，OA)；雜色(柄)曲霉毒素(Terigmatocystin)；展青霉素(Patulin,PTL)；玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN(F－2));串珠鐮刀菌素(Moniliformin,MF)，三硝基丙酸以及屬于單端孢霉烯族化合物(Trichothecenes)的T－2毒素(T－2toxin,T－2)；脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(嘔吐毒素)(Deoxynivalenol,DON)；二乙酰鑣草鐮刀菌烯醇(Diacetoxyscirpenol，DAS)等。

   聯(lián)合國糧農(nóng)組織在近期的報道中指出，全世界至少99個國家，占世界人口的87％，針對糧食和飼料的霉菌毒素污染問題都有相關(guān)的規(guī)定。在未來的幾年里，與不斷變化的全球氣候有關(guān)的氣象突發(fā)事件的增多將進一步向我們提出挑戰(zhàn)。霉菌毒素污染給食品企業(yè)、糧油加工企業(yè)、畜禽養(yǎng)殖場以及飼料的加工企業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。

目前霉菌毒素檢測常用的方法如下幾種：

一、  薄層層析法：

TLC法是針對不同的樣品，用適宜的提取溶劑將霉菌毒素從樣品中提取出來，經(jīng)柱層析凈化，再在薄層板上層析展開、分離，利用霉菌毒素的熒光性，根據(jù)熒光斑點的強弱與標(biāo)準(zhǔn)比較測定其最低含量。TLC法樣品前處理繁瑣，且提取和凈化效果不夠理想，提取液中雜質(zhì)較多，在展開時影響斑點的熒光強度。

二、色譜法：

色譜法，包括薄層色譜、氣相色譜、液相色譜等，一直是最重要的霉菌毒素的化學(xué)分析方法?，F(xiàn)在比較普遍的霉菌毒素的分析方法還是液相色譜法，包括液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)。該法快速而準(zhǔn)確，但需要昂貴的儀器設(shè)備，僅限于專業(yè)檢測機構(gòu)獲得科研和調(diào)查分析、監(jiān)測使用，未能在企業(yè)及基層廣泛推廣使用，而且其結(jié)果的滯后效應(yīng)大大降低了對生產(chǎn)實際的指導(dǎo)效果。

三、免疫化學(xué)檢測法： (膠體金免疫層析法，酶聯(lián)免疫吸附法)

免疫學(xué)檢測方法是基于抗體與抗原或半抗原之間的選擇性反應(yīng)而建立起來的一種生物化學(xué)分析法。通常具有高的選擇性和很低的檢出限，廣泛用于各種抗原、半抗或抗體的測定，一般可分為熒光免疫法、發(fā)光免疫法、免疫法及電化學(xué)免疫法等非放射免疫法和放射免疫法，其中在飼料霉菌毒素檢測中應(yīng)用較廣的主要是酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)和膠體金免疫層析法。

免疫學(xué)檢測方法由于其快速、靈敏、準(zhǔn)確、可定量、操作簡便、無需貴重儀器設(shè)備，且對樣品純度要求不高等特性，特別適用于飼料廠、糧油/食品加工廠、養(yǎng)殖場等企業(yè)進行原料或成品的檢測以及工商質(zhì)監(jiān)部門現(xiàn)場檢測。

該類方法有以下特點：

1) 靈敏度高

2) 干擾?。嚎贵w抗原的免疫反應(yīng)特異性很強，結(jié)構(gòu)類似物、熒光物質(zhì)、有色物質(zhì)對檢測的干擾很小。

3) 操作簡便快捷：由于特異性強，簡化了樣品的預(yù)處理和提取純化過程，同時操作步驟也非常簡便，測定時間也短。

4) 安全性高，污染少，成本低廉：不需要昂貴的測定儀器，所用試劑也相對較少，特別是因為靈敏度高，毒素標(biāo)準(zhǔn)品的濃度可以很低，減少了對檢測人員和環(huán)境的潛在危害和污染。