畜牧人

標(biāo)題: 求助豬自家抗體血清的制備和使用方法 [打印本頁(yè)]

作者: 草哥 時(shí)間: 2007-1-3 20:30
標(biāo)題: 求助豬自家抗體血清的制備和使用方法
本人前陣子場(chǎng)內(nèi)豬發(fā)生了藍(lán)耳病,有些豬耐受過(guò)了就成了僵豬,繼續(xù)飼養(yǎng)那些僵豬,已經(jīng)沒(méi)什么價(jià)值了,想將那些僵豬殺了,來(lái)制備豬自家抗體血清,然后再用來(lái)治療病豬,可是自已不知道該怎么做,所以想請(qǐng)教在場(chǎng)的高手指點(diǎn),謝謝

作者: lionpig 時(shí)間: 2007-1-4 17:11
我講講，參考一下首先你確證是prrs么？？prrs來(lái)說(shuō)血清當(dāng)然是會(huì)有效的，如果不是或者有其他病的繼發(fā)感染，這樣做的風(fēng)險(xiǎn)很高。 1.取血，將豬沖洗干凈固定于“X”型的保定架上，仰臥保定，將豬尾一頭墊高，用碘酒清洗左側(cè)胸前口，用酒精脫碘，待酒精揮發(fā)后，用準(zhǔn)備好（指消毒、烘干）的約30cm長(zhǎng)，直徑約1cm的空心銅管（一端為尖，一端平，平的一端套硅橡膠管），經(jīng)消毒的胸前口捅入豬的心臟（不要刺太深防止完全穿透心臟），放血。 2.接血，消毒烘干好的容器（如果是離心法收集就用大的離心瓶，如果是自然析出可以用500ml的注射用生理鹽水瓶），將膠管的一頭貼住瓶壁，血順瓶壁留下，裝約400-500ml（離心瓶依照儀器要求）。 3.取血清，離心法：400×4離心機(jī)按一般血液離心要求進(jìn)行即可，自然析出的封好瓶口，冷卻到室溫，放入4度冰箱過(guò)夜，異日取出，取血清，另外裝瓶、封口。 4.滅活，56度溫箱中1.5小時(shí)（保證全瓶血清維持在56度時(shí)間至少1小時(shí)），自然冷卻，加入抗生素（一般是雙抗，具體劑量還要看各廠的實(shí)際情況），將血清冷凍保存（隨解凍隨用，大約可以保存12周）。 5.血清的無(wú)菌檢查，血清通過(guò)接種瓊脂平板，溫箱培養(yǎng)看是否有菌落生長(zhǎng)，另外（雙抗的量加多少可以通過(guò)培養(yǎng)情況來(lái)確定） 6.安全性實(shí)驗(yàn)，通過(guò)培養(yǎng)無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)的血清注射小豬約10頭（5日齡-10日齡）（腹腔注射），觀察一周（每日量體溫，觀察是否發(fā)病）如發(fā)病務(wù)必確診發(fā)病原因。

作者: 草哥 時(shí)間: 2007-1-4 22:34
謝謝樓上的朋友, 你講得很詳細(xì),能否再說(shuō)明一下,制備后,應(yīng)該怎樣注射在豬身上呢,是不是肌肉注射還是腹腔注射,而且是連續(xù)每天注射還是只注射一次呢?先謝了

作者: 吠聲天外 時(shí)間: 2007-1-5 13:22
PRRS的血液帶毒期大約30－45天，而正常血清特異性抗體大約是在40-50天時(shí)最高。如果沒(méi)有持續(xù)感染，兩個(gè)月以后，效價(jià)就會(huì)降低。那時(shí)的使用價(jià)值就會(huì)大打折扣。除了二樓老師的方法，建議對(duì)血清進(jìn)行鈷－60輻照消毒。使用時(shí)，每只豬肌肉注射就可以。一般注射一次就有延緩發(fā)病的效果，間隔5天再注射一次，效果更好一些。另外，按照我的經(jīng)驗(yàn)，在4攝氏度的條件下，出的血清量會(huì)相對(duì)少些，但效價(jià)一般不會(huì)因冷凍而減少。以上僅供參考

作者: lionpig 時(shí)間: 2007-1-5 13:45
關(guān)于什么時(shí)候取血的問(wèn)題，我個(gè)人認(rèn)為在發(fā)病后3-6個(gè)月比較合適，雖然這個(gè)時(shí)候抗體水平不一定最高，但是IgG、IgM之類的中和抗體水平是不低的（prrs有3-6個(gè)月的排毒期，這個(gè)也是通過(guò)部分空群來(lái)實(shí)現(xiàn)凈化的一個(gè)理論基礎(chǔ)），關(guān)于到使用方面我的看法和經(jīng)驗(yàn)是哺乳、保育豬在滿足操作條件的基礎(chǔ)上還是腹腔注射比較好，至于中豬可以肌肉注射，大豬基本上沒(méi)有必要使用，母豬如果已經(jīng)是陽(yáng)性場(chǎng)的，還是用弱毒苗吧。至于鈷-60輻照滅菌、應(yīng)用范圍受到很多條件上的限制，在基層很難開(kāi)展。個(gè)人淺見(jiàn)大家賜教

作者: ren1001 時(shí)間: 2010-4-6 20:14
:)3:學(xué)習(xí)了

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