畜牧人
標題: 植物血凝素 [打印本頁]
作者: 魁罡 時間: 2007-2-28 22:07
標題: 植物血凝素
植物血凝素(Phytohaemagglutinin)是一種有絲分裂原,主要用于激活免疫細胞—淋巴細胞。是一種干擾素誘導(dǎo)劑,不僅可以刺激機體產(chǎn)生白介素-2和干擾素;還可以刺激機體產(chǎn)生非特異性抗體。由于其較難提純,且成本極高,所以一直以來僅在實驗室中作為刺激淋巴細胞增殖的試劑。
植物血凝素在動物疾病防止上的應(yīng)用,主要進行以下實驗:
1.利用雞的白細胞脾細胞雞胚成纖維細胞以有機鍺(Ce—123)新城疫弱毒株(NDV-F)植物血凝素(PHA)聚肌胞(POLYI:C)為誘生劑,對外源性干擾素(IFN)誘生條件如誘生劑量誘生時間及培養(yǎng)條件進行了比較分析和探討,結(jié)果發(fā)現(xiàn)以Ce—123誘生IFN的能力為最強,其他依次為:PHA NDV-F POLYI:C;且雞脾細胞和雞白細胞產(chǎn)生的IFN效價高于雞胚成纖維細胞;并且最佳誘生劑量依次為:Ce—123為70微克/毫升;雞NDV-F為128HAU/毫升;POLYI:C為60微克/毫升;PHA為20毫克/毫升。該研究表明,植物血凝素在機體內(nèi)刺激機體產(chǎn)生干擾素的能力是聚肌胞的30倍,所產(chǎn)生的作用是是直接服用干擾素的300倍,所以服用1mg植物血凝素相當(dāng)于服用30mg的聚肌胞和直接服用300mg干擾素。
2.PHA對家禽的新城疫、傳染性法氏囊病、傳染性支氣管炎、傳染性喉氣管炎、腦脊髓炎、流感等疾病的預(yù)防及治療效果。結(jié)果表明PHA對下列病毒感染的保護率分別為新城疫77。5%、傳染性法氏囊病92。5%、傳染性支氣管炎85%、傳染性喉氣管炎77。5%、腦脊髓炎90%、流感80%。
1.PHA刺激T細胞增殖分化產(chǎn)生大量效應(yīng)T細胞和細胞毒T細胞;效應(yīng)T細胞分泌產(chǎn)生大量細胞因子(如干擾素等)殺傷病毒;細胞毒T細胞可直接殺傷病毒。
2..PHA同時可刺激B細胞轉(zhuǎn)化為漿母細胞然后增殖分化為漿細胞,漿細胞產(chǎn)生大量的非特異性抗體來中和病毒。
為了驗證植物血凝素對雞新城疫、傳染性法氏囊病、雞腎型傳支等6種病毒病的預(yù)防效果,指導(dǎo)臨床合理用藥,特進行了本實驗。
1.2實驗動物及分組 1日齡肉雞520只,購自南京邁本橋雞廠,用溫控育雛籠正常飼養(yǎng),從21日齡開始給藥,至28日齡用于實驗。隨即分組3組,每組40只,處理祥見表一
1.3攻毒用毒株NDV強毒,IBDV強毒,腎型IBV強毒,ILTV強毒,AEV強毒,HAV強毒,南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院預(yù)防醫(yī)學(xué)系傳染病組饋贈。
1.4人工發(fā)病 參考常維山等方法,即種毒經(jīng)37℃水浴融化,用滅菌生理鹽水加雙抗20倍稀釋后,4℃冰箱作用30分鐘,按每胚0。2ml接種10日齡雞胚,37℃孵育,棄取24h內(nèi)死亡雞胚,接毒后36h將雞胚放入4℃冰箱過夜,無菌收集尿囊液。除健康對照組外,其余各組進行人工感染各種毒株強毒,感染劑量1ml含毒尿囊液,滴鼻或點眼0。5ml,肌肉注射0。5ml。同時雞舍斷電降低舍溫,適當(dāng)減少飲水供給以誘使發(fā)病。
1.5預(yù)防實驗 28天后按表一進行感染,實驗期14天,每天定時觀察各組雞的采食、飲水、精神狀況、臨床癥狀,記錄死亡情況,并對病死雞進行尸體剖檢。
1.6.1 死亡率:具有各種傳染病的各種典型癥狀及病變的死亡雞占該實驗組雞的百分比。
1.6.2治愈率:經(jīng)用藥治療后,存活病雞臨床癥狀完全消失的占該實驗組的百分比。
1.6.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理:用常規(guī)統(tǒng)計學(xué)方法(X2檢驗)對各組死亡率,治愈率進行顯著性檢驗。
實驗期各用藥組存活雞的臨床癥狀逐漸減輕消失,精神、采食、飲水逐漸恢復(fù)正常;用藥組死亡率明顯低于感染對照組,剖檢可見同一時間死亡的病雞比感染對照組病變輕。各組死亡率、治愈率,見表二。
PHA主要通過誘導(dǎo)干擾素產(chǎn)生,提高機體免疫力,達到預(yù)防疾病的效果。從本實驗結(jié)果看出,PHA對家禽雞新城疫、傳染性法氏囊病、傳染性傳支氣管炎、傳染性喉氣管炎、腦脊髓炎、流感等疾病的預(yù)防效果明顯,治愈率分別為雞新城疫77.5%、傳染性法氏囊病92.5%、傳染性傳支氣管炎85%、傳染性喉氣管炎72.5%、腦脊髓炎90%、流感80%。
為了比較有機鍺(Ce—123)新城疫弱毒株(NDV-F)植物血凝素(PHA)聚肌胞(POLYI:C)四種誘生劑對雞白細胞、脾細胞、雞胚成纖維細胞的誘生干擾素作用,本實驗進行了此四種誘生劑的體外誘生干擾素的能力研究,為臨床使用提供一定的依據(jù)。
新城疫弱毒株(NDV-F),水泡性口炎病毒(VSV),長春凱旋制藥廠提供。雞白細胞、脾細胞、雞胚成纖維細胞均由南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院微生物教研室提供。有機鍺(Ce—123)植物血凝素(PHA)聚肌胞(POLYI:C)由生化試劑公司提供。細胞培養(yǎng)基DMEM,干粉培養(yǎng)基均為美國CibcoBRL公司產(chǎn)品,小牛血清為杭州四季清生物公司產(chǎn)品。
1.2.1雞白細胞、脾細胞、雞胚成纖維細胞干擾素的誘導(dǎo)。參照Carter等人和鄭茂林報道方法,設(shè)立4個比較試驗。
在制好的雞胚成纖維細胞懸液中,加入Ce—123(70ug/ml),NDV-F(128HAU/ml),PHA(20ug/ml),POLYI:C(60ug/ml)37℃靜置培養(yǎng),分別在培養(yǎng)12、18、24、30、36h收獲細胞培養(yǎng)的上清液,每個時間組3瓶,測定IFN效價后取平均值。
1.2.1.2培養(yǎng)溫度對誘生作用的影響
在制好的雞胚成纖維細胞懸液中,加入Ce—123(70ug/ml),NDV-F(128HAU/ml),PHA(20ug/ml),POLYI:C(60ug/ml),分別在30℃和37℃靜置培養(yǎng),培養(yǎng)24h收獲細胞培養(yǎng)的上清液,每個溫度組3瓶,測定IFN效價后取平均值。
有機鍺(Ce—123)設(shè)4個劑量組:10、40、70、100ug/ml新城疫弱毒株(NDV-F)設(shè)4個劑量組:64、128、256、512HAU/ml植物血凝素(PHA)設(shè)4個劑量組:10、20、30、40ug/ml聚肌胞(POLYI:C)設(shè)4個劑量組:20、40、60、80ug/ml收獲上清液,每個劑量組3瓶,測定IFN效價后取平均值。
1.2.1.4不同細胞、不同IFN誘生劑在靜置培養(yǎng)條件下產(chǎn)生IFN的比較研究。
以雞白細胞、脾細胞、雞胚成纖維細胞作為生產(chǎn)IFN的細胞,分別加入Ce—123(70ug/ml),NDV-F(128HAU/ml),PHA(20ug/ml),POLYI:C(60ug/ml)作干擾素誘生劑,37℃靜置培養(yǎng)24h。
采用細胞病變抑制法測定IFN效價。以VSV作為被干擾病毒,用雞胚成纖維細胞作為檢測系統(tǒng),能抑制50%細胞病變的最高稀釋度為一個干擾素活性單位。以
Log2CPEI50/ml或國際單位/毫升(U/ml).
四種誘生劑培養(yǎng)不同時間誘生IFN的結(jié)果見表三。
由表三可以看出:Ce—123,NDV-F和PHA的誘生IFN峰值在24h,而POLYI:C的峰值在18h,因此Ce—123,NDV-F和PHA的誘生IFN的收獲時間以24h為宜,而POLYI:C的收獲時間以18h最佳。
表三四種誘生劑培養(yǎng)不同時間誘生IFN效價(log2U/ml)
2.2培養(yǎng)溫度對誘生作用的結(jié)果
兩種不同培養(yǎng)溫度對對誘生作用的影響結(jié)果見表四。
由表四可以看出,37℃時四種誘生劑的誘生能力好于30℃的誘生能力,因此本實驗選用37℃作為四種誘生劑的培養(yǎng)溫度。
又表五可以看出,Ce—123隨著添加量的增加,其誘生能力增強,中等劑量與高劑量相比,略低,比低劑量和最低劑量高,差異顯著;NDV-F和PHA在低劑量時誘生效果最好,高劑量反而下降;POLYI:C在中等劑量誘生效果最佳。因此,Ce—132 NDV-F PHA 和POLYI:C的最佳誘生劑量分別為70ug/ml,128HAU/ml,20ug/ml,60ug/ml.
表四 四種誘生劑不同培養(yǎng)溫度誘生IFN效價(log2U/ml)
表五 四種誘生劑不同劑量誘生IFN效價(log2U/ml)
2.4不同細胞、不同IFN誘生劑在靜置培養(yǎng)條件下生產(chǎn)IFN的比較研究
不同細胞、不同IFN誘生劑在靜置培養(yǎng)條件下生產(chǎn)IFN的比較結(jié)果見表六。
由表六可以看出,以Ce—132為誘生IFN的能力最強,其次是PHA,POLYI:C的效果最差。此四種誘生劑,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析,誘生能力差異顯著(P<0)。三種細胞產(chǎn)生IFN的滴度差異顯著(P<0),脾細胞與白細胞相當(dāng),差異不顯著(P>0),比雞胚成纖維細胞效果好,差異顯著(P<0)。
表六不同細胞、不同IFN誘生劑在靜置培養(yǎng)條件下生產(chǎn)IFN的效價(log2U/ml)
由上述結(jié)果可以看出,Ce—132誘生IFN的能力最強,其他依次是PHA,NDV-F,POLYI:C,且雞脾細胞和雞白細胞產(chǎn)生的IFN的效價高于雞胚成纖維細胞。Ce—132 NDV-F PHA 和POLYI:C的最佳誘生劑量分別為70ug/ml,128HAU/ml,20ug/ml,60ug/ml.。
通過PHA 和POLYI:C的比較可以看出,植物血凝素在機體內(nèi)刺激機體產(chǎn)生干擾素的能力約為聚肌胞的30倍,所產(chǎn)生的作用是直接服用干擾素的300倍,所以服用1mg植物血凝素相當(dāng)于服用30mg的聚肌胞和直接服用300mg干擾素。
作用與用途:廣譜抗病毒,用于畜禽各種病毒性疾病的預(yù)防和治療。
肌注 用適量生理鹽水稀釋 可用于雛雞2000只 成雞1000只
豬 牛 羊 用5ml生理鹽水稀釋 每千克體重0。02ml
貯藏:常溫,遮光,干燥處保存植物血凝素(phytohaemagglutinin,PHA),是一種有絲分裂原,主要用于激活免疫細胞—淋巴細胞。是利用國際先進的超低溫冷凍技術(shù)從紅蕓豆中提取的一種物質(zhì),由于其較難提純,且成本極高,所以一直以來僅在實驗室中作為刺激巴細胞增殖的試劑。
一、主要成分
植物血凝素的主要成分為植物多肽,是一種低聚糖(由D-甘露糖、氨基酸葡萄糖酸衍生物構(gòu)成)與蛋白質(zhì)的復(fù)合物。
二、藥理作用
1.植物血凝素為廣譜抗病毒藥,可刺激T淋巴細胞增殖分化產(chǎn)生大量效應(yīng)T細胞和細胞毒T細胞,效應(yīng)T細胞分泌產(chǎn)生大量細胞因子(如干擾素等)殺傷病毒,細胞毒T細胞可直接殺傷病毒。
2.植物血凝素可同時刺激B細胞轉(zhuǎn)化為漿母細胞后增殖分化為漿細胞,漿細胞產(chǎn)生大量非特異性抗體來中和病毒。
3.可增加機體免疫功能,提高骨髓造血機能,促進機體白細胞及多核白細胞明顯增加;提高機體細胞誘生干擾素,增加機體免疫力,促進抗體形成,增強機體對病原微生物的吞噬作用。
4.植物血凝素與黃芪多糖、左旋咪唑、阿糖腺苷配伍,有明顯的增效作用;與部分抗生素等配伍具有相加作用。
5.植物血凝素肌肉注射后約5~15分鐘血藥濃度達高峰,口服后約1小時后血藥濃度達高峰,代謝產(chǎn)物主要從尿液排出。
三、特點
1.使用方便、廣泛,可以與許多藥物同時使用,據(jù)有協(xié)同作用或相加作用。在粉、散劑中添加植物血凝素,具有明顯提高原有產(chǎn)品療效的作用,同時不干擾源產(chǎn)品的檢測,且無種屬特異性,可廣泛應(yīng)用于家禽、豬、牛等動物。
2.使用安全,首先使用植物血凝素后不影響機體抗體水平,可用于預(yù)防肉仔雞后期常發(fā)的病毒性疾病,避免了由于加強免疫引起的抗體水平過高、疫苗應(yīng)激反應(yīng)、藥殘嚴重,影響家禽產(chǎn)品出口。其次植物血凝素抗病毒譜廣,毒性小、安全范圍大。
3.可以與疫苗同時使用,能起到彌補免疫空白期、緩減疫苗應(yīng)激反應(yīng)、增強免疫效果的作用。
4.植物血凝素經(jīng)特殊加工可口服給藥,不受消化酶和胃酸的破壞,可常溫保存兩年( 液體保存時一般6個月左右就開始出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象,降低療效)。避免了一般干擾素質(zhì)量不穩(wěn)定、應(yīng)用時口服吸收差易被破壞,必須低溫保存的缺陷。
四、作用
1.主要用于激活免疫細胞——淋巴細胞,是一種干擾素誘導(dǎo)劑,不僅可以刺激機體產(chǎn)生白介素-2和干擾素,還可以刺激機體產(chǎn)生非特異性抗體。
2.廣譜抗病毒藥,可用于防制家禽、家畜病毒性疾病,如雞的傳支、傳喉、新城疫、傳染性法氏囊病、雞痘;鴨瘟、鴨病毒性肝炎;豬圓環(huán)病毒病、藍耳病、豬傳染性胃腸炎、豬病毒性腹瀉、豬繁殖與呼吸綜合征、非典型豬瘟;犬、水貂的犬瘟熱、犬細小病毒等病毒性疾病。
3.植物血凝素可作為動物免疫增強劑進行治療、輔助用藥或用于免疫功能受損引起的疾病,用來增強動物機體免疫力、提高藥物的療效。
五、臨床應(yīng)用
用于預(yù)防肉雞常發(fā)生病毒病,30日齡左右使用1~2次,可預(yù)防或減輕肉雞后期病毒性疾病的發(fā)生;
用于預(yù)防仔豬斷奶前后病毒性疾病,與強力霉素、頭孢類抗生素等合用,避免了仔豬在斷奶后因母乳抗體的喪失而導(dǎo)致的免疫力下降造或造成大面積發(fā)病和死亡;
植物血凝素+抗病毒藥物+廣譜抗生素可用于治療雞病毒性疾?。ㄈ绶堑湫托鲁且摺睾托颓萘鞲?、傳染性法氏囊病初期、各型傳支、雞痘、染性喉氣管炎),急性病毒病慎用;
配合頭孢類抗生素,每月對健康蛋雞進行一次預(yù)防,可有效防止蛋雞發(fā)生病毒性疾?。?br />
植物血凝素配合法氏囊抗體、慶大霉素或丁胺卡那可用于治療急慢性傳染性法氏囊病;配合呼吸道藥物應(yīng)用可用于治療家禽傳染性支氣管炎、傳染性喉氣管炎等由病毒引起的呼吸道系統(tǒng)疾?。慌c鴨病毒性肝炎血清或黃芪多糖配合應(yīng)用用于治療鴨病毒性肝炎;與黃芪多糖和丁胺卡那配合應(yīng)用,可用于治療鴨瘟。
作者: 雪絨 時間: 2007-3-5 20:46
好大的篇幅呀,看的我眼睛都花了,有點在上課的感覺:L
改天不打瞌睡的時候來認真看看
現(xiàn)在路過,打個招呼的
作者: gl83 時間: 2007-3-9 20:41
標題: 不錯,
:) :) :) :) :) :) :) :) :) 俺有這個產(chǎn)品,需要的跟俺聯(lián)系,QQ463721799
作者: cj630 時間: 2007-3-11 16:59
又是個槍手
堅決打擊
作者: wlszzz 時間: 2007-4-11 15:16
真的有這么好的功效?是不是試驗所得?
作者: 三金 時間: 2007-4-28 14:04
是呀,效果真有這么好嗎?
各位生產(chǎn)中用過的感覺效果如何?
作者: 我心依舊 時間: 2007-5-2 21:17
在豬這方面使用效果如何?盼回音
作者: 虛心求助 時間: 2007-8-19 08:10
質(zhì)量或是方法問題,我們這個地方對這個玩意持否定態(tài)度。
作者: 山中的漫游者 時間: 2007-8-19 17:36
感覺有點而懸:5s:
作者: tiger121123 時間: 2007-8-24 16:18
我們公司是作獸藥經(jīng)銷的
這東西去年的時候進過一批
豬用效果一般,沒有說明得那么好
而且要看養(yǎng)豬的用的飼料類型
泔水豬打上之后基本沒什么用
飼料豬按劑量注射,效果還行
雞上沒用過,不知道效果怎么樣
總之一句話,價格貴,療效一般,針對性不強!
作者: xiangtl168 時間: 2008-8-22 21:28
研究結(jié)果,效果特佳,曾用過原料,但發(fā)現(xiàn)效果不如資料介紹,請問啥原因?
作者: 左肩 時間: 2008-8-25 18:26
效果不是沒有,俺有此類產(chǎn)品并且負責(zé)全國銷售。各地經(jīng)銷商褒貶不一!
作者: nick335 時間: 2008-9-1 16:28
:wulai: :wulai: :wulai: :wulai: :wulai: :wulai: :wulai:
作者: qyw444 時間: 2008-9-8 15:11
:wulai: 用了不如不用,最好別用,宣傳這東西好的大都是賣這個的。就等著你買呢。
作者: xiangtl168 時間: 2008-9-11 15:03
相當(dāng)好的產(chǎn)品,畜禽的救星。但發(fā)現(xiàn)市場上沒有一家是真正的植物血凝素。嗨!國人太聰明了,養(yǎng)殖戶遭秧啊!
作者: 農(nóng)夫 時間: 2008-9-12 01:00
原帖由 tiger121123 于 2007-8-24 16:18 發(fā)表 
我們公司是作獸藥經(jīng)銷的
這東西去年的時候進過一批
豬用效果一般,沒有說明得那么好
而且要看養(yǎng)豬的用的飼料類型
泔水豬打上之后基本沒什么用
飼料豬按劑量注射,效果還行
雞上沒用過,不知道效果怎么樣
總之
:hehes: :hehes: 說真話的來了~~~~~~~~
作者: ffyuhan 時間: 2008-10-4 13:01
血凝素在國內(nèi)有什么好的產(chǎn)品嗎?見過都是國外進口的,今天看見一個牌子是丹麥威特生物制品公司出的,批準文號:(2006)外獸藥準字196號,上網(wǎng)查了,根本沒有這個注冊文號。
作者: ffyuhan 時間: 2008-10-4 13:02
會不會是假的?@@007: @@007:
作者: 雷楨 時間: 2008-10-31 19:31
不知是真是假,以前試過治禽流感,好像沒有效果
作者: xiangtl168 時間: 2008-11-2 16:12
確實有點懸,我們曾經(jīng)植物血凝素的臨床試驗,根本不像廠家說的那么好,了解了廠家推介的獸藥廠使用情況,反映一樣不像資料中介紹的。
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