午夜理论欧美理论片,东京热一精品无码AV

植物血凝素Phytohaemagglutinin

植物血凝素(Phytohaemagglutinin)是一種有絲分裂原，主要用于激活免疫細(xì)胞—淋巴細(xì)胞。是一種干擾素誘導(dǎo)劑，不僅可以刺激機(jī)體產(chǎn)生白介素-2和干擾素；還可以刺激機(jī)體產(chǎn)生非特異性抗體。由于其較難提純，且成本極高，所以一直以來僅在實(shí)驗(yàn)室中作為刺激淋巴細(xì)胞增殖的試劑。

植物血凝素在動物疾病防止上的應(yīng)用，主要進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)：

1．利用雞的白細(xì)胞脾細(xì)胞雞胚成纖維細(xì)胞以有機(jī)鍺（Ce—123）新城疫弱毒株（NDV-F）植物血凝素（PHA）聚肌胞（POLYI:C）為誘生劑，對外源性干擾素（IFN）誘生條件如誘生劑量誘生時(shí)間及培養(yǎng)條件進(jìn)行了比較分析和探討，結(jié)果發(fā)現(xiàn)以Ce—123誘生IFN的能力為最強(qiáng)，其他依次為：PHA NDV-F POLYI:C；且雞脾細(xì)胞和雞白細(xì)胞產(chǎn)生的IFN效價(jià)高于雞胚成纖維細(xì)胞；并且最佳誘生劑量依次為：Ce—123為70微克/毫升；雞NDV-F為128HAU/毫升；POLYI:C為60微克/毫升；PHA為20毫克/毫升。該研究表明，植物血凝素在機(jī)體內(nèi)刺激機(jī)體產(chǎn)生干擾素的能力是聚肌胞的30倍，所產(chǎn)生的作用是是直接服用干擾素的300倍，所以服用1mg植物血凝素相當(dāng)于服用30mg的聚肌胞和直接服用300mg干擾素。

2．PHA對家禽的新城疫、傳染性法氏囊病、傳染性支氣管炎、傳染性喉氣管炎、腦脊髓炎、流感等疾病的預(yù)防及治療效果。結(jié)果表明PHA對下列病毒感染的保護(hù)率分別為新城疫77。5%、傳染性法氏囊病92。5%、傳染性支氣管炎85%、傳染性喉氣管炎77。5%、腦脊髓炎90%、流感80%。

PHA的作用機(jī)理

1．PHA刺激T細(xì)胞增殖分化產(chǎn)生大量效應(yīng)T細(xì)胞和細(xì)胞毒T細(xì)胞；效應(yīng)T細(xì)胞分泌產(chǎn)生大量細(xì)胞因子（如干擾素等）殺傷病毒；細(xì)胞毒T細(xì)胞可直接殺傷病毒。

2..PHA同時(shí)可刺激B細(xì)胞轉(zhuǎn)化為漿母細(xì)胞然后增殖分化為漿細(xì)胞，漿細(xì)胞產(chǎn)生大量的非特異性抗體來中和病毒。

植物血凝素對雞常見病毒病的療效研究

為了驗(yàn)證植物血凝素對雞新城疫、傳染性法氏囊病、雞腎型傳支等6種病毒病的預(yù)防效果，指導(dǎo)臨床合理用藥，特進(jìn)行了本實(shí)驗(yàn)。

1．1藥物植物血凝素，由生化試劑公司提供。

1．2實(shí)驗(yàn)動物及分組 1日齡肉雞520只，購自南京邁本橋雞廠，用溫控育雛籠正常飼養(yǎng)，從21日齡開始給藥，至28日齡用于實(shí)驗(yàn)。隨即分組3組，每組40只，處理祥見表一

表一實(shí)驗(yàn)雞感染與用藥

不用藥，不感染

不用藥，28日齡感染

飲水，連用7日，28日齡感染

1．3攻毒用毒株NDV強(qiáng)毒，IBDV強(qiáng)毒，腎型IBV強(qiáng)毒，ILTV強(qiáng)毒,AEV強(qiáng)毒，HAV強(qiáng)毒，南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院預(yù)防醫(yī)學(xué)系傳染病組饋贈。

1.4人工發(fā)病參考常維山等方法，即種毒經(jīng)37℃水浴融化，用滅菌生理鹽水加雙抗20倍稀釋后，4℃冰箱作用30分鐘，按每胚0。2ml接種10日齡雞胚，37℃孵育，棄取24h內(nèi)死亡雞胚，接毒后36h將雞胚放入4℃冰箱過夜，無菌收集尿囊液。除健康對照組外，其余各組進(jìn)行人工感染各種毒株強(qiáng)毒，感染劑量1ml含毒尿囊液，滴鼻或點(diǎn)眼0。5ml，肌肉注射0。5ml。同時(shí)雞舍斷電降低舍溫，適當(dāng)減少飲水供給以誘使發(fā)病。

1．5預(yù)防實(shí)驗(yàn) 28天后按表一進(jìn)行感染，實(shí)驗(yàn)期14天，每天定時(shí)觀察各組雞的采食、飲水、精神狀況、臨床癥狀，記錄死亡情況，并對病死雞進(jìn)行尸體剖檢。

1．6療效評價(jià)指標(biāo)

1．6．1 死亡率：具有各種傳染病的各種典型癥狀及病變的死亡雞占該實(shí)驗(yàn)組雞的百分比。

1．6．2治愈率：經(jīng)用藥治療后，存活病雞臨床癥狀完全消失的占該實(shí)驗(yàn)組的百分比。

1．6．3數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理：用常規(guī)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法（X2檢驗(yàn)）對各組死亡率，治愈率進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)期各用藥組存活雞的臨床癥狀逐漸減輕消失，精神、采食、飲水逐漸恢復(fù)正常；用藥組死亡率明顯低于感染對照組，剖檢可見同一時(shí)間死亡的病雞比感染對照組病變輕。各組死亡率、治愈率，見表二。

表二PHA的預(yù)防結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)有癥狀雞數(shù)（只）

3．結(jié)論與討論

PHA主要通過誘導(dǎo)干擾素產(chǎn)生，提高機(jī)體免疫力，達(dá)到預(yù)防疾病的效果。從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果看出，PHA對家禽雞新城疫、傳染性法氏囊病、傳染性傳支氣管炎、傳染性喉氣管炎、腦脊髓炎、流感等疾病的預(yù)防效果明顯，治愈率分別為雞新城疫77．5%、傳染性法氏囊病92．5%、傳染性傳支氣管炎85%、傳染性喉氣管炎72．5%、腦脊髓炎90%、流感80%。

四種誘生劑誘生干擾素實(shí)驗(yàn)

為了比較有機(jī)鍺（Ce—123）新城疫弱毒株（NDV-F）植物血凝素（PHA）聚肌胞（POLYI:C）四種誘生劑對雞白細(xì)胞、脾細(xì)胞、雞胚成纖維細(xì)胞的誘生干擾素作用，本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了此四種誘生劑的體外誘生干擾素的能力研究，為臨床使用提供一定的依據(jù)。

新城疫弱毒株（NDV-F），水泡性口炎病毒（VSV），長春凱旋制藥廠提供。雞白細(xì)胞、脾細(xì)胞、雞胚成纖維細(xì)胞均由南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院微生物教研室提供。有機(jī)鍺（Ce—123）植物血凝素（PHA）聚肌胞（POLYI:C）由生化試劑公司提供。細(xì)胞培養(yǎng)基DMEM，干粉培養(yǎng)基均為美國CibcoBRL公司產(chǎn)品，小牛血清為杭州四季清生物公司產(chǎn)品。

1．2．1雞白細(xì)胞、脾細(xì)胞、雞胚成纖維細(xì)胞干擾素的誘導(dǎo)。參照Carter等人和鄭茂林報(bào)道方法，設(shè)立4個(gè)比較試驗(yàn)。

1.2.1.1誘生時(shí)間的研究

在制好的雞胚成纖維細(xì)胞懸液中，加入Ce—123（70ug/ml），NDV-F（128HAU/ml），PHA（20ug/ml），POLYI:C（60ug/ml）37℃靜置培養(yǎng)，分別在培養(yǎng)12、18、24、30、36h收獲細(xì)胞培養(yǎng)的上清液，每個(gè)時(shí)間組3瓶，測定IFN效價(jià)后取平均值。

1.2.1.2培養(yǎng)溫度對誘生作用的影響

在制好的雞胚成纖維細(xì)胞懸液中，加入Ce—123（70ug/ml），NDV-F（128HAU/ml），PHA（20ug/ml），POLYI:C（60ug/ml），分別在30℃和37℃靜置培養(yǎng)，培養(yǎng)24h收獲細(xì)胞培養(yǎng)的上清液，每個(gè)溫度組3瓶，測定IFN效價(jià)后取平均值。

1．2．1．3誘生劑添加量的比較

有機(jī)鍺（Ce—123）設(shè)4個(gè)劑量組：10、40、70、100ug/ml新城疫弱毒株（NDV-F）設(shè)4個(gè)劑量組：64、128、256、512HAU/ml植物血凝素（PHA）設(shè)4個(gè)劑量組：10、20、30、40ug/ml聚肌胞（POLYI:C）設(shè)4個(gè)劑量組：20、40、60、80ug/ml收獲上清液，每個(gè)劑量組3瓶，測定IFN效價(jià)后取平均值。

1.2.1.4不同細(xì)胞、不同IFN誘生劑在靜置培養(yǎng)條件下產(chǎn)生IFN的比較研究。

以雞白細(xì)胞、脾細(xì)胞、雞胚成纖維細(xì)胞作為生產(chǎn)IFN的細(xì)胞，分別加入Ce—123（70ug/ml），NDV-F（128HAU/ml），PHA（20ug/ml），POLYI:C（60ug/ml）作干擾素誘生劑，37℃靜置培養(yǎng)24h。

1．2．2誘生干擾素效價(jià)測定實(shí)驗(yàn)。

采用細(xì)胞病變抑制法測定IFN效價(jià)。以VSV作為被干擾病毒，用雞胚成纖維細(xì)胞作為檢測系統(tǒng)，能抑制50%細(xì)胞病變的最高稀釋度為一個(gè)干擾素活性單位。以

Log2CPEI50/ml或國際單位/毫升（U/ml）.

2．1誘生時(shí)間的研究結(jié)果

四種誘生劑培養(yǎng)不同時(shí)間誘生IFN的結(jié)果見表三。

由表三可以看出：Ce—123，NDV-F和PHA的誘生IFN峰值在24h，而POLYI:C的峰值在18h，因此Ce—123，NDV-F和PHA的誘生IFN的收獲時(shí)間以24h為宜，而POLYI:C的收獲時(shí)間以18h最佳。

表三四種誘生劑培養(yǎng)不同時(shí)間誘生IFN效價(jià)（log2U/ml）

2.2培養(yǎng)溫度對誘生作用的結(jié)果

兩種不同培養(yǎng)溫度對對誘生作用的影響結(jié)果見表四。

由表四可以看出，37℃時(shí)四種誘生劑的誘生能力好于30℃的誘生能力，因此本實(shí)驗(yàn)選用37℃作為四種誘生劑的培養(yǎng)溫度。

2．3誘生劑最佳誘生劑量的研究

誘生劑最佳誘生劑量的結(jié)果見表五。

又表五可以看出，Ce—123隨著添加量的增加，其誘生能力增強(qiáng)，中等劑量與高劑量相比，略低，比低劑量和最低劑量高，差異顯著；NDV-F和PHA在低劑量時(shí)誘生效果最好，高劑量反而下降；POLYI:C在中等劑量誘生效果最佳。因此，Ce—132 NDV-F PHA 和POLYI:C的最佳誘生劑量分別為70ug/ml,128HAU/ml,20ug/ml,60ug/ml.

表四四種誘生劑不同培養(yǎng)溫度誘生IFN效價(jià)（log2U/ml）

表五四種誘生劑不同劑量誘生IFN效價(jià)（log2U/ml）

2．4不同細(xì)胞、不同IFN誘生劑在靜置培養(yǎng)條件下生產(chǎn)IFN的比較研究

不同細(xì)胞、不同IFN誘生劑在靜置培養(yǎng)條件下生產(chǎn)IFN的比較結(jié)果見表六。

由表六可以看出，以Ce—132為誘生IFN的能力最強(qiáng)，其次是PHA，POLYI:C的效果最差。此四種誘生劑，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，誘生能力差異顯著（P<0）。三種細(xì)胞產(chǎn)生IFN的滴度差異顯著（P<0），脾細(xì)胞與白細(xì)胞相當(dāng)，差異不顯著（P>0），比雞胚成纖維細(xì)胞效果好，差異顯著（P<0）。

表六不同細(xì)胞、不同IFN誘生劑在靜置培養(yǎng)條件下生產(chǎn)IFN的效價(jià)（log2U/ml）

雞胚成纖維細(xì)

由上述結(jié)果可以看出，Ce—132誘生IFN的能力最強(qiáng)，其他依次是PHA，NDV-F，POLYI:C，且雞脾細(xì)胞和雞白細(xì)胞產(chǎn)生的IFN的效價(jià)高于雞胚成纖維細(xì)胞。Ce—132 NDV-F PHA 和POLYI:C的最佳誘生劑量分別為70ug/ml,128HAU/ml,20ug/ml,60ug/ml.。

通過PHA 和POLYI:C的比較可以看出，植物血凝素在機(jī)體內(nèi)刺激機(jī)體產(chǎn)生干擾素的能力約為聚肌胞的30倍，所產(chǎn)生的作用是直接服用干擾素的300倍，所以服用1mg植物血凝素相當(dāng)于服用30mg的聚肌胞和直接服用300mg干擾素。

性狀：白色疏松團(tuán)塊，遇水可快速溶解。

作用與用途：廣譜抗病毒，用于畜禽各種病毒性疾病的預(yù)防和治療。

肌注用適量生理鹽水稀釋可用于雛雞2000只成雞1000只

豬牛羊用5ml生理鹽水稀釋每千克體重0。02ml

隔日1次連用2次

混飲藥量加倍溶解于飲水中每日1次連用3次

包裝規(guī)格：10只/盒×12盒/箱

貯藏：常溫，遮光，干燥處保存植物血凝素（phytohaemagglutinin,PHA），是一種有絲分裂原，主要用于激活免疫細(xì)胞—淋巴細(xì)胞。是利用國際先進(jìn)的超低溫冷凍技術(shù)從紅蕓豆中提取的一種物質(zhì)，由于其較難提純，且成本極高，所以一直以來僅在實(shí)驗(yàn)室中作為刺激巴細(xì)胞增殖的試劑。
　　一、主要成分
　　植物血凝素的主要成分為植物多肽，是一種低聚糖(由D-甘露糖、氨基酸葡萄糖酸衍生物構(gòu)成)與蛋白質(zhì)的復(fù)合物。
　　二、藥理作用
　　1．植物血凝素為廣譜抗病毒藥，可刺激T淋巴細(xì)胞增殖分化產(chǎn)生大量效應(yīng)T細(xì)胞和細(xì)胞毒T細(xì)胞，效應(yīng)T細(xì)胞分泌產(chǎn)生大量細(xì)胞因子（如干擾素等）殺傷病毒，細(xì)胞毒T細(xì)胞可直接殺傷病毒。
　　2．植物血凝素可同時(shí)刺激B細(xì)胞轉(zhuǎn)化為漿母細(xì)胞后增殖分化為漿細(xì)胞，漿細(xì)胞產(chǎn)生大量非特異性抗體來中和病毒。
　　3．可增加機(jī)體免疫功能，提高骨髓造血機(jī)能，促進(jìn)機(jī)體白細(xì)胞及多核白細(xì)胞明顯增加；提高機(jī)體細(xì)胞誘生干擾素，增加機(jī)體免疫力，促進(jìn)抗體形成，增強(qiáng)機(jī)體對病原微生物的吞噬作用。
　　4．植物血凝素與黃芪多糖、左旋咪唑、阿糖腺苷配伍，有明顯的增效作用；與部分抗生素等配伍具有相加作用。
　　5．植物血凝素肌肉注射后約5~15分鐘血藥濃度達(dá)高峰，口服后約1小時(shí)后血藥濃度達(dá)高峰，代謝產(chǎn)物主要從尿液排出。
　　三、特點(diǎn)
　　1．使用方便、廣泛，可以與許多藥物同時(shí)使用，據(jù)有協(xié)同作用或相加作用。在粉、散劑中添加植物血凝素，具有明顯提高原有產(chǎn)品療效的作用，同時(shí)不干擾源產(chǎn)品的檢測，且無種屬特異性，可廣泛應(yīng)用于家禽、豬、牛等動物。
　　2．使用安全，首先使用植物血凝素后不影響機(jī)體抗體水平，可用于預(yù)防肉仔雞后期常發(fā)的病毒性疾病，避免了由于加強(qiáng)免疫引起的抗體水平過高、疫苗應(yīng)激反應(yīng)、藥殘嚴(yán)重，影響家禽產(chǎn)品出口。其次植物血凝素抗病毒譜廣，毒性小、安全范圍大。
　　3．可以與疫苗同時(shí)使用，能起到彌補(bǔ)免疫空白期、緩減疫苗應(yīng)激反應(yīng)、增強(qiáng)免疫效果的作用。
　　4．植物血凝素經(jīng)特殊加工可口服給藥，不受消化酶和胃酸的破壞，可常溫保存兩年（液體保存時(shí)一般6個(gè)月左右就開始出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象，降低療效）。避免了一般干擾素質(zhì)量不穩(wěn)定、應(yīng)用時(shí)口服吸收差易被破壞，必須低溫保存的缺陷。
　　四、作用
　　1．主要用于激活免疫細(xì)胞——淋巴細(xì)胞，是一種干擾素誘導(dǎo)劑，不僅可以刺激機(jī)體產(chǎn)生白介素-2和干擾素，還可以刺激機(jī)體產(chǎn)生非特異性抗體。
　　2．廣譜抗病毒藥，可用于防制家禽、家畜病毒性疾病，如雞的傳支、傳喉、新城疫、傳染性法氏囊病、雞痘；鴨瘟、鴨病毒性肝炎；豬圓環(huán)病毒病、藍(lán)耳病、豬傳染性胃腸炎、豬病毒性腹瀉、豬繁殖與呼吸綜合征、非典型豬瘟；犬、水貂的犬瘟熱、犬細(xì)小病毒等病毒性疾病。
　　3．植物血凝素可作為動物免疫增強(qiáng)劑進(jìn)行治療、輔助用藥或用于免疫功能受損引起的疾病，用來增強(qiáng)動物機(jī)體免疫力、提高藥物的療效。
　　五、臨床應(yīng)用
　　用于預(yù)防肉雞常發(fā)生病毒病，30日齡左右使用1~2次，可預(yù)防或減輕肉雞后期病毒性疾病的發(fā)生；
　　用于預(yù)防仔豬斷奶前后病毒性疾病，與強(qiáng)力霉素、頭孢類抗生素等合用，避免了仔豬在斷奶后因母乳抗體的喪失而導(dǎo)致的免疫力下降造或造成大面積發(fā)病和死亡；
　　植物血凝素+抗病毒藥物+廣譜抗生素可用于治療雞病毒性疾?。ㄈ绶堑湫托鲁且?、溫和型禽流感、傳染性法氏囊病初期、各型傳支、雞痘、染性喉氣管炎），急性病毒病慎用；
　　配合頭孢類抗生素，每月對健康蛋雞進(jìn)行一次預(yù)防，可有效防止蛋雞發(fā)生病毒性疾病；
　　植物血凝素配合法氏囊抗體、慶大霉素或丁胺卡那可用于治療急慢性傳染性法氏囊病；配合呼吸道藥物應(yīng)用可用于治療家禽傳染性支氣管炎、傳染性喉氣管炎等由病毒引起的呼吸道系統(tǒng)疾??；與鴨病毒性肝炎血清或黃芪多糖配合應(yīng)用用于治療鴨病毒性肝炎；與黃芪多糖和丁胺卡那配合應(yīng)用，可用于治療鴨瘟。

組別	用藥	死亡率（%）	治愈率（%）	實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)有癥狀雞數(shù)（只）
1	陽性對照組	0	—	—
NDV組攻毒	陽性對照組	42．5（17/40）	17．5	16
NDV組攻毒	PHA組	15（6/40）	77．5	3
IBDV組攻毒	陽性對照組	32．5（13/40）	27．5	16
IBDV組攻毒	PHA組	5（2/40）	92．5	1
攻毒 IBV組	陽性對照組	35（14/40）	22．5	17
攻毒 IBV組	PHA組	7．5（3/40）	85	3
攻毒 ILTV組	陽性對照組	30（12/40）	25	18
攻毒 ILTV組	PHA組	15（6/40）	72．5	5
攻毒 AEV組	陽性對照組	20（8/40）	22．5	23
攻毒 AEV組	PHA組	7．5（3/40）	90	1
攻毒 HAV組	陽性對照組	47．5（19/40）	15	15
攻毒 HAV組	PHA組	17．5（7/40）	80	1

時(shí)間（h）	Ce—123	NDV-F	PHA	POLYI:C
12	6.0132±0.1054	3.9868±0.1126	4.1245±0.1137	3.7546±0.0314
18	7.3541±0.0946	5.7842±0.0613	6.1547±0.0971	7.8134±0.0134
24	9.7931±0.1542	8.1453±0.1431	8.6457±0.1671	7.2314±0.1148
30	8.1354±0.1125	7.0014±0.1247	7.3145±0.0856	5.4217±0.0841
36	6.2147±0.0786	2.8734±0.0941	2.9863±0.0538	2.5467±0.0452

	30℃	37℃
Ce—132	9．0273±0。1342	9．5381±0。0457
NDV-F	7．9214±0。1496	8．2436±0。1671
PHA	8．1249±0。1054	8．7136±0。1148
POLYI:C	7．0104±0。1215	7．3725±0。1431

	Ce—132	NDV-F	PHA	POLYI:C
高劑量	10．0153±0。0954	4．5868±0。0612	4．1245±0。1137	6．8135±0。0134
中劑量	9．8324±0。1425	6．0134±0。1306	6．7154±0。1097	7．9542±0。1413
低劑量	7．3541±0。0946	8．3217±0。0431	8．8575±0。1134	7．0137±0。1084
最低劑量	4．2514±0。1341	5．7834±0。1004	5．3145±0。0931	5．7189±0。0913

	Ce—132	NDV-F	PHA	POLYI:C
白細(xì)胞	9．7312±0。1405	8．1937±0。0978	8．9868±0。1062	7．0135±0。1034
脾細(xì)胞	9．5841±0。0964	8．1531±0。1063	8．9004±0。1214	6．9542±0。1013
雞胚成纖維細(xì)	8．7931±0。1254	7．3014±0。1431	8．0457±0。1071	4．0137±0。1084

組別	雞只數(shù)	用藥	用法
1	40	陽性對照組	不用藥，不感染
2	40	陽性對照組	不用藥，28日齡感染
3	40	PHA組	飲水，連用7日，28日齡感染

畜牧人