益生菌對(duì)肉仔雞生產(chǎn)性能及盲腸內(nèi)容物、小腸絨毛的影響 倪耀娣 李睿文 張慶茹 魯改儒 黃仁錄 (河北農(nóng)業(yè)大學(xué)中獸醫(yī)學(xué)院, 河北 定州 073000) | |||||||||||||||||||||||||||||
關(guān)鍵詞:活菌 ; 肉仔雞;生產(chǎn)性能；盲腸內(nèi)容物；小腸絨毛 目前，我國(guó)大多數(shù)雞場(chǎng)仍在采用添加抗生素來(lái)預(yù)防畜禽傳染病，其結(jié)果人們發(fā)現(xiàn)：濫用抗生素不僅使動(dòng)物體抗病力減弱，藥物殘留問(wèn)題嚴(yán)重，肉、奶、蛋產(chǎn)品質(zhì)量降低，而且創(chuàng)造出任何抗生素都無(wú)法消滅的超級(jí)細(xì)菌。同類研究中存在只注重結(jié)果、而闡明作用機(jī)理的不太全面。本試驗(yàn)在研究口服益生菌對(duì)肉雞生產(chǎn)性能影響同時(shí)，主要從幾個(gè)方面說(shuō)明其作用機(jī)理：口服益生菌的作用效果與抗生素的關(guān)系；口服益生菌肉雞盲腸菌群（乳酸桿菌、大腸桿菌、厭氧菌）數(shù)量的變化；口服益生菌對(duì)肉仔雞小腸中腸絨毛形態(tài)、數(shù)量、長(zhǎng)短的變化的影響；口服益生菌對(duì)肉仔雞血液激素水平GH、T3、T4含量的高低的影響；口服益生菌對(duì)肉仔雞ND抗體水平的影響。 1材料與方法 1 .1 材料與方法 1 .1 .1 益生菌的制備：購(gòu)進(jìn)SPF成年雞200只，無(wú)菌取其盲腸內(nèi)容物1：10作成懸液，取樣檢其沙門(mén)氏桿菌、溶血性大腸桿菌、球菌為陰性者為合格。將制成的懸液接種在液體培養(yǎng)基上（接種所用的液體培養(yǎng)基1210 C滅菌15min,冷卻后再接種）置恒溫320C搖床培養(yǎng)48h。將培養(yǎng)液離心（5000g）20min ,單獨(dú)收集菌體細(xì)胞用腐植酸（游離腐植酸含量為31%，含N量4%）吸附并混合，即是本實(shí)驗(yàn)所用的益生菌產(chǎn)品，該活菌數(shù)為5×108CFU/g ，將該產(chǎn)品保存在40C以下備用。 1 .1 .2 試驗(yàn)用雞：1日齡AA肉雞200只，平均分成4組，每組50只，同組雛雞放進(jìn)一個(gè)雞籠（480cm-480cm）,籠內(nèi)溫度距籠底5 cm處，控制在300C-320C,環(huán)境溫度200C-250C，相對(duì)濕度30%左右。 1.1.3沙門(mén)氏桿菌強(qiáng)毒株：河北省生物研究所提供沙門(mén)氏桿菌強(qiáng)毒株批號(hào)80-552，經(jīng)肉湯培養(yǎng)計(jì)數(shù)攻毒量4000萬(wàn)菌落形成單位/雞。 1.1.4VH-28/86-120三聯(lián)弱毒苗，夠自北京生物制品公司， 1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與日糧組成 1 .2 .1 日糧組成：在整個(gè)試驗(yàn)期分為二個(gè)階段，1-4周為前期，5-8周為后期，二個(gè)階段所用的日糧配方參考NRC(1998)飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)設(shè)計(jì)試驗(yàn)飼料配方。 1 .2 .2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)：將本實(shí)驗(yàn)的4個(gè)組中第一組、第二組籠內(nèi)剛孵出1-3日齡的50只雛雞，每天灌服混合菌液（含活菌109CFU/g）0 .5ml ,連服7天。第二組、第三組7天后用沙門(mén)氏菌攻擊，第三組次日用氟哌酸抗生素拌料（50ppm）,第四組為對(duì)照組，各組于8日齡時(shí)每只雞滴鼻VH-28/86-120三聯(lián)弱毒苗。 1.3 樣品的采集和監(jiān)測(cè)指標(biāo) 1.3.1 生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)及屠宰實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)用雞以組為單位統(tǒng)計(jì)40日齡平均體重、和料肉比，并記錄雞群1-8周健康狀況、記錄死亡只數(shù)和計(jì)數(shù)雞群死亡率、成活率。 1.3.2盲腸微生物的計(jì)數(shù) 將實(shí)驗(yàn)雞50日齡時(shí)，各組隨機(jī)抽取5只雞屠宰后，在無(wú)菌條件下取出盲腸內(nèi)容物，并置于厭氧稀釋液中，邊均質(zhì)邊進(jìn)行梯度稀釋，將內(nèi)容物放進(jìn)Broth 培養(yǎng)基中以供活菌分析。根據(jù)食品微生物鑒定方法提要 (APHA1976)所提供的方法對(duì)乳酸桿菌、總厭氧菌、大腸桿菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，所用的數(shù)據(jù)經(jīng)Excel統(tǒng)計(jì)并應(yīng)用SAS(1989) 統(tǒng)計(jì)分析軟件包括對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行 GLM方法統(tǒng)計(jì)分析和多重比較。 1 .3 .3 肉雞小腸粘膜組織結(jié)構(gòu)的顯微鏡觀察 飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束的前一天，各組隨機(jī)抽取5只雞進(jìn)行剖檢，取相同部位小腸1-2段，長(zhǎng)約2-3cm ,腸管中注入波恩液，兩端扎緊，放入預(yù)先準(zhǔn)備好的波恩液中固定24小時(shí)后將腸管一段剪開(kāi)，放入70%酒精溶液中保存，采用石蠟包埋法制作小腸組織切片， H-E染色，樹(shù)膠封固，顯微觀察，并測(cè)其腸絨毛的長(zhǎng)度和腸壁厚度。 2結(jié)果 2.1 生產(chǎn)性能的變化： 口服益生菌第一組比處理第四組在增重方面差異極顯著(P<0 .01) ，在降低肉料比方面差異極顯著(P<0 .01)，見(jiàn)表3 從下表結(jié)果可見(jiàn)：第一組比第四組能顯著提高平均體重，比對(duì)照組增加16.58%；降低料肉比，比對(duì)照組降低18%，提高了飼料轉(zhuǎn)化率。其主要原因：未處理的雛雞胃腸道發(fā)育不完善，同時(shí)現(xiàn)代化、集約化生產(chǎn)使肉仔雞腸道微生物的定植較慢，且活菌平衡較易被破壞，當(dāng)飼喂了有益的益生菌后，使體內(nèi)的活菌平衡發(fā)生了變化，正常微生物在體內(nèi)生長(zhǎng)旺盛，可以增強(qiáng)畜禽對(duì)飼料中各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和減少能量的不必要的消耗而提高生產(chǎn)性能。 表3肉仔雞平均體重和料肉比
從表5看出：加活菌A日糧組盲腸厭氧菌數(shù)明顯高于C對(duì)照組，差異顯著（P<0 .05）,但與加氟哌酸B差異不顯著（P>0 .05），B組實(shí)驗(yàn)雞盲腸大腸桿菌數(shù)略高于A、C組，但差異不顯著（P>0 .05）。從乳酸桿菌數(shù)量看A、B組數(shù)量均高于C組，差異極其顯著（P<0 .01）。這是因?yàn)槲挂嫔闺r雞體內(nèi)減少抗生藥物，不僅促進(jìn)雛雞生長(zhǎng)，而且由于體內(nèi)的大量有益微生物的活化作用，提高肉品質(zhì)。從實(shí)驗(yàn)雞盲腸微生物的數(shù)量看，添加益生菌對(duì)降低肉雞盲腸中的大腸桿菌數(shù)、增加有益菌乳酸桿菌有一定的效果。 表5盲腸中乳酸桿菌、大腸桿菌、厭氧菌的數(shù)量變化
2 .3 對(duì)肉雞小腸組織結(jié)構(gòu)的影響。見(jiàn)下表6 通過(guò)顯微鏡觀察肉仔雞小腸組織切片發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組比較，加益生菌組，肉仔雞腸絨毛明顯增多、變粗、變長(zhǎng)且排列整齊，腸壁增厚，腸腺發(fā)達(dá)。這種組織結(jié)構(gòu)的變化更有利于消化酶的分泌，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。第二組是由于加益生菌而又被細(xì)菌攻擊，所以腸絨毛變細(xì)而長(zhǎng)、腸壁薄。第三組是由于被細(xì)菌攻擊而又經(jīng)抗生素治療，所以腸絨毛變的紊亂、數(shù)量減少，腸壁變薄，腸腺不發(fā)達(dá)，使得肉雞采食量減少，發(fā)育緩慢。從表6各組肉雞小腸絨毛長(zhǎng)度和腸壁厚度我們看出，加益生菌第一組，肉雞小腸絨毛長(zhǎng)度和腸壁厚度明顯高于對(duì)照組，差異極顯著（ P<0 .01）,但與第二組加益生菌又攻毒組相比差異不顯著（P>0 .05）。同樣第二組、第三組由于都沒(méi)有加益生菌，所以小腸絨毛長(zhǎng)度和腸壁厚度比較接近差異不顯著（P>0 .05），但都與第一組有較大的差異。 表6 各組肉雞小腸絨毛長(zhǎng)度和腸壁厚度（μm）
3討論 3.1 益生菌對(duì)肉雞盲腸微生物數(shù)量的影響 本試驗(yàn)得出大腸桿菌平均數(shù)在實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比明顯減少；乳酸桿菌平均數(shù)在實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組差異顯著的結(jié)論（P<0 .0）。對(duì)于腸道微生物菌群而言，乳酸桿菌在其生長(zhǎng)過(guò)程中產(chǎn)生的乳酸由Veillinllaalcaleascens 代謝能轉(zhuǎn)化為揮發(fā)性脂肪酸（VFA）（Fuller 1989[1]）,使腸道PH值降低，而VFA有抑菌及殺菌作用，能阻止病原菌在腸道內(nèi)的生長(zhǎng)繁殖，同時(shí)乳酸菌可產(chǎn)生乳酸鏈球肽，對(duì)腸道粘膜起到占位性保護(hù)作用，所以它能減少盲腸中沙門(mén)氏桿菌、大腸桿菌等有害菌的繁衍和寄居，使活菌平衡更趨于穩(wěn)定[2]。 3.2 益生菌對(duì)肉雞小腸絨毛的影響 小腸是養(yǎng)分吸收的主要場(chǎng)所，小腸組織切片的顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)：加益生菌組能改善小腸的組織結(jié)構(gòu)，比對(duì)照組小腸絨毛變長(zhǎng)、排列整齊，且小腸粘膜上皮變薄，這一變化更有利于小腸對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。益生菌提高腸絨毛的長(zhǎng)度,這一結(jié)果與顧天劍（1999）[3]的實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致，絨毛腸度的增大，增加了腸道中食糜接觸的上皮細(xì)胞表面積，促進(jìn)了腸道的吸收能力[4]。GylesCL (1993)[5]的實(shí)驗(yàn)表明，益生菌依劑量的不同可刺激小腸上皮細(xì)胞增生。 |
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