標(biāo)題: 免疫增強劑有機硒在生長豬上的應(yīng)用研究 [打印本頁] 作者: yuren925 時間: 2007-12-17 11:10 標(biāo)題: 免疫增強劑有機硒在生長豬上的應(yīng)用研究 免疫增強劑有機硒在生長豬上的應(yīng)用研究
摘 要 選擇日齡相近、平均體重(30.0±0.5) kg的杜×長×大三元雜交小母豬20頭，隨機分為2個處理，每個處理10頭，對照組為基礎(chǔ)日糧組，處理組為基礎(chǔ)日糧+有機硒（硒酵母200mg/kg），研究有機硒替代抗生素對生長豬免疫性能的影響。試驗結(jié)果表明：在飼料中添加有機硒，能夠提高生長豬血清中球蛋白與白蛋白比值，提高牛血清白蛋白（BSA）免疫抗體OD值（免疫第7d時差異達(dá)顯著水平，P<0.05）及植物血球凝集素（PHA）刺激皮褶厚度增加值。
關(guān)鍵詞 有機硒；生長豬；生產(chǎn)性能；免疫性能
中圖分類號 S852.4
硒是動物必需的微量元素之一，它與動物生長、發(fā)育和疾病發(fā)生有著密切的關(guān)系。硒以無機硒和有機硒形式存在，無機硒包括亞硒酸鈉、硒酸鈉、硒化鈉、亞硒酸鈣；有機硒包括硒酵母、硒代蛋氨酸、硒代胱氨酸等。有機硒的生物利用率高于無機硒，易于動物吸收利用，且有機硒毒性小，不會對人和環(huán)境造成不良影響[1]。硒與動物的免疫狀況密切相關(guān)，被稱為免疫促進劑[5]。硒能刺激免疫球蛋白及抗體的生成，提高機體體液免疫、細(xì)胞免疫和非特異免疫功能；缺硒可導(dǎo)致免疫能力低下，而補硒可提高機體免疫力。日前有機硒對促進生長豬免疫機能方面的研究在國內(nèi)外報道較少，為尋求抗生素替代品，提高生長豬自身免疫力，以生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)無公害豬肉而開展了本試驗研究，旨在探討有機硒對生長育肥豬免疫性能的影響，為今后指導(dǎo)生產(chǎn)提供參考。
1 試驗材料及方法
1.1 試驗地點及試驗動物
試驗在河南省黃泛區(qū)農(nóng)場第一種豬場進行。選擇日齡相近、平均體重（30.0±0.5）kg的杜×長×大三元雜交小母豬20頭，隨機分為2個處理，每個處理10頭，對照組為基礎(chǔ)日糧組，處理組為基礎(chǔ)日糧+有機硒（硒酵母0.02%）。
1.2 試驗飼料及飼養(yǎng)管理
試驗日糧營養(yǎng)水平采用NRC(1998)標(biāo)準(zhǔn)，飼料配方及營養(yǎng)水平指標(biāo)見表1。試驗期間試驗豬飼養(yǎng)管理采用常規(guī)飼養(yǎng)管理模式，試驗豬按常規(guī)飼養(yǎng)管理程序進行驅(qū)蟲和免疫，采用干粉料日喂3次，自由采食、自由飲水，豬只發(fā)生病變或異常，要及時處理并記錄豬只耳號。
1.3 試驗檢測指標(biāo)及方法
.3.1 血液生化指標(biāo)
總蛋白(TP)、球蛋白（GLB）、清蛋白（ALB）、計算血清球蛋白與白蛋白的比值（G/A）。
1.3.2 免疫指標(biāo)
1.3.2.1 體液免疫指標(biāo)
使用牛血清白蛋白(BSA)試劑，采用酶聯(lián)免疫吸附測定法，在酶聯(lián)免疫自動讀數(shù)儀492nm處讀數(shù)，以1：50倍稀釋光吸收值表示其抗體生成，測定血清中BSA抗體效價(OD值)。
1.3.2.2 細(xì)胞免疫指標(biāo)
遲發(fā)性過敏反應(yīng)的測定，在生長豬左腿內(nèi)側(cè)皮下注射植物血球凝集素（PHA），右側(cè)注射生理鹽水，測定24h后腿皮褶厚度增厚差值。
1.4 試驗處理
在正式試驗開始后的第7d，每個處理（對照組和處理組）選取3頭體重相近的健康豬，每千克體重耳后肌肉注射牛血清白蛋白(BSA)1mg進行免疫，并在免疫后的0d(試驗的第7d)、7d(試驗第14d)和21d(試驗第28d)用10ml真空采血管頸靜脈采血5ml,3 000r/min離心15min，制備血清，-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?
于試驗正式開始后的第14d，對處理組剩余的豬只隨機選取2頭，進行皮膚過敏試驗。其中在1頭豬的左大腿內(nèi)側(cè)腹骨溝皮下注射0.5ml PHA（250μg/ml），右腿注射0.5ml生理鹽水，圈圓圈標(biāo)記。并分別于注射前和注射24h后用厚度計測定注射部位的皮褶厚度（3次讀數(shù)，求平均值），再求出兩腿皮褶增厚的差值，觀察過敏反應(yīng)程度。另外1頭左腿注射1ml PHA（250μg/ml），右腿注射1ml生理鹽水(其它處理同上1頭豬)，測定24h后皮褶厚度增厚值。
2 試驗結(jié)果與分析
2.1 血液生化指標(biāo)
分別于正式試驗開始后的第7d、第14d、第28d前腔靜脈采血制備血清，檢測血清中的總蛋白、白蛋白，并計算血清球蛋白與白蛋白比值（G/A），試驗結(jié)果見表2。
血清球蛋白的主要作用是用以維持機體血管內(nèi)滲透壓的平衡和物質(zhì)的運輸。抗體是球蛋白重要的組成部分，炎癥反應(yīng)和應(yīng)激狀態(tài)下，血清球蛋白的含量增加。由表2可見，對照組與處理組豬血清總蛋白含量在試驗1～28d時均有上升趨勢；且對照組上升幅度大于處理組，但統(tǒng)計分析差異不顯著（P<0.05）。在整個試驗期間對照組血清中白蛋白含量上升，而且對照組血清中白蛋白含量高于處理組；處理組豬血清中白蛋白含量在試驗的第14d時稍有下降，而在試驗的第28d時上升。在整個試驗期，處理組和對照組血清中G/A值均表現(xiàn)出先升高后降低的趨勢，同時，在試驗的第7d、第14d、第28d，處理組血清中G/A值均高于對照組，其中第7d和第14d時血清中G/A值統(tǒng)計分析差異達(dá)到顯著水平（P<0.05）。本試驗結(jié)果表明，在經(jīng)過抗原牛血清白蛋白刺激后，機體的免疫系統(tǒng)被激活，更多的蛋白質(zhì)用于抗體的合成，隨著抗體產(chǎn)生量的提高，血液中的球蛋白含量隨之增加，G/A值升高。表明有機硒具有提高生長豬體液免疫的作用。
2.2 牛血清白蛋白（BSA）抗體OD值
前腔靜脈采取BSA免疫后第0d、第7d、第21d的試驗豬血清，檢測BSA抗體OD值。對照組和處理組的牛血清白蛋白（BSA）抗體OD值結(jié)果見表3。
分析發(fā)現(xiàn)，在BSA免疫前，豬血清中已經(jīng)含有BSA抗體，且變異很大，而試驗設(shè)計時認(rèn)為BSA為一種異源蛋白抗原，豬血清中BSA抗體水平應(yīng)該為零。估計這種抗體是由于許多疫苗如豬瘟疫苗中含有牛血清白蛋白成分(例如作為佐劑)造成的，而在本試驗開始之前，該豬場已對試驗豬群進行過兩次豬瘟疫苗免疫。盡管如此，當(dāng)以注射BSA抗體OD值為1時，用各時間點的OD值與之比較，則比值仍可出現(xiàn)較明顯的規(guī)律性變化，即免疫后第7d時，BSA抗體的OD值均升高，而且，處理組與對照組相比差異達(dá)顯著水平(P<0.05)。免疫后第21d時BSA抗體的OD值均下降，且處理組(有機硒組)下降幅度大于對照組，表明有機硒能被用來合成谷胱甘肽過氧化酶（ＧＳＨ-Ｐｘ）,以消除由于應(yīng)激而產(chǎn)生的更多自由基(主要是通過降低氧化磷酸化的偶聯(lián)作用，導(dǎo)致電子滲透的增加和超氧化基的過量產(chǎn)生)，具有降低免疫反應(yīng)程度，避免機體長期處于高度應(yīng)激狀態(tài)，從而達(dá)到促進動物機體生長的作用。
2.3 皮褶厚度增加值
分別于正式試驗開始后的第7d、第14d、第28d每個處理隨機選擇1頭豬，在豬的左腿內(nèi)側(cè)肌肉注射植物血球凝集素（PHA）0.5ml，右腿內(nèi)側(cè)注射0.5ml生理鹽水；再另外分別選擇1頭豬，在豬的左腿內(nèi)側(cè)肌肉注射植物血球凝集素1.0ml，右腿內(nèi)側(cè)注射1.0ml生理鹽水，并于24h后用厚度測量儀檢測左、右腿皮褶厚度增加值，計算左右腿24h后皮褶厚度增厚差值，試驗結(jié)果見表4。
PHA是一種促有絲分裂原。動物皮下組織對PHA的反應(yīng)狀況是細(xì)胞免疫的一項指標(biāo)[6-8]。免疫組織學(xué)分析，這種皮下反應(yīng)的主要參與者為單核細(xì)胞和致敏的T淋巴細(xì)胞，其反應(yīng)包括局部發(fā)炎感染并向皮下擴散，血管周圍白細(xì)胞聚集成套狀、水腫以及皮膚膠原蛋白隆起。由表4可見，試驗組豬PHA注射后24h皮褶厚度增厚值大于對照組（在試驗第14d時，0.5ml PHA注射劑量試驗組豬24h后皮褶厚度增厚值小于對照組，這可能與個體差異有關(guān)），并且給試驗豬注射1ml PHA皮褶厚度增厚差值大于注射0.5mlPHA劑量時皮褶增厚差值，表明給生長豬注射PHA 24h后皮褶厚度的增厚差值與注射PHA的劑量有關(guān)。同時，本試驗結(jié)果顯示，在試驗的第14d時，皮褶增厚差值大于第7d時的皮褶增厚差值，而在試驗的第28d時，皮褶增厚差值又下降，表明隨日齡增加，生長豬機體免疫功能逐漸完善。本試驗結(jié)果表明，在生長豬飼料中添加有機硒有提高生長豬細(xì)胞免疫的作用。
綜上所述，有機硒(硒酵母)有提高生長豬血液中G/A值的作用，提高牛血清白蛋白（BSA）免疫抗體OD值（免疫第7d時差異達(dá)顯著水平，P<0.05）及植物血球凝集素（PHA）刺激皮褶厚度增加值的作用，即具有提高動物機體免疫性能的能力。
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9 張巧娥，劉紅霞，楊庫，等.有機硒對生長育肥豬生產(chǎn)性能的影響 [J].寧夏農(nóng)學(xué)院學(xué)報，2002（1）：28～29作者: 新新寶貝 時間: 2009-8-25 10:38
樓主有沒有測試過硒含量的最高限量為多少?