畜牧人

標(biāo)題: 小肽的檢測(cè)技術(shù) [打印本頁(yè)]

作者: 秋水伊人 時(shí)間: 2008-1-28 15:25
標(biāo)題: 小肽的檢測(cè)技術(shù)
恩能生物科技集團(tuán)技術(shù)服務(wù)資料-小肽檢測(cè)方法
<檢測(cè)原理及方法>
一、原理：利用三氯醋酸作蛋白質(zhì)沉淀劑，將酶解蛋白粉中的蛋白質(zhì)和肽鏈較長(zhǎng)的肽沉淀，并將其中的短鏈小肽用酸溶解出來(lái)，經(jīng)離心、過(guò)濾、消化、蒸餾，測(cè)定其蛋白質(zhì)含量。本方法是參照中華人民共和國(guó)輕工行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)大豆肽粉標(biāo)準(zhǔn)(QB/ T 2653 -2004)基礎(chǔ)上修訂而來(lái)。
二、試劑及儀器：
1）100ml燒杯；
2）10ml、25ml移液管；
3）干過(guò)濾裝置；
4）半微量粗蛋白質(zhì)測(cè)定試劑和裝置；
5）15％三氯醋酸溶液（TCA溶液）；
6）4000 轉(zhuǎn)/ 分鐘的離心機(jī)。
三、方法：準(zhǔn)確稱(chēng)取樣品3克于100 ml燒杯中,加入15 %TCA (三氯乙酸) 溶液25 毫升,混合均勻,靜置5 分鐘。將溶液定量轉(zhuǎn)移,在4000 轉(zhuǎn)/ 分鐘下離心10 分鐘后,取全部上清液，用干的濾紙過(guò)濾，準(zhǔn)確移取其濾液10ml于消化管中，按測(cè)定粗蛋質(zhì)方法消化、定容（100 ml）、移取1 0ml消化液蒸餾，測(cè)定其粗蛋白質(zhì)含量（半微量定氮法）。同時(shí)做空白試驗(yàn)。
四、結(jié)果：
小肽%（占干基）=｛（V-V0）×C（HCl）×6．25×0．014×2．5（25ml÷10ml）×10（100 ml÷10ml）｝÷m×100%
式中： V---樣品消耗HCl的體積，ml；
V0---空白消耗HCl的體積，ml；
C（HCl）---鹽酸的摩爾濃度，mol/l；
6．25×0．014---蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)換系數(shù)。
m---稱(chēng)取樣品質(zhì)量，ｇ。
小肽%（占蛋白質(zhì)）=小肽%（占干基）÷粗蛋白質(zhì)%×100

重復(fù)性: A）、每個(gè)試樣取兩個(gè)平行樣進(jìn)行測(cè)定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果； B）、允許絕對(duì)偏差為10%；
C）、以小肽占粗蛋白質(zhì)的百分含量上報(bào)結(jié)果。

作者: 川牧人 時(shí)間: 2008-1-28 15:31
最新消息：飼料小肽的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)已經(jīng)立項(xiàng)，由四川一家公司正在起草，08年將會(huì)公布！

作者: fjcwr 時(shí)間: 2008-1-28 19:50
訪方法對(duì)可溶性氨基酸沒(méi)有扣除，不準(zhǔn)確

作者: bigcake1022 時(shí)間: 2008-1-28 22:47
標(biāo)準(zhǔn)怎能交由公司來(lái)定呢？？？？？:haqian:

作者: 許小紅 時(shí)間: 2008-1-29 08:39
有實(shí)際意義的技術(shù)資料！

作者: 楊春陽(yáng) 時(shí)間: 2008-2-28 15:52
標(biāo)題: 謝謝樓主
真的是挺好的，不過(guò)需要繼續(xù)改進(jìn)，這方面是新的開(kāi)墾天空

作者: 楊春陽(yáng) 時(shí)間: 2008-2-28 15:53
呵呵，老校友，青島農(nóng)業(yè)大學(xué)

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