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標(biāo)題: 中獸藥的血清藥物化學(xué)與代謝動(dòng)力學(xué)研究動(dòng)態(tài) [打印本頁]

作者: 魁罡 時(shí)間: 2008-1-28 15:48
標(biāo)題: 中獸藥的血清藥物化學(xué)與代謝動(dòng)力學(xué)研究動(dòng)態(tài)
陳杖榴　曾振靈　劉開永　　華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院廣州 510642

　　中藥及復(fù)方研究的基本困難在于藥效物質(zhì)基礎(chǔ)不明，直接造成了中藥不能建立與國際接軌的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。目前傳統(tǒng)中藥及復(fù)方研究方法仍停留在分步提取、藥效追蹤的體外水平，所確定的成分是否是體內(nèi)藥效的代表性成分尚待商榷。多數(shù)中藥和復(fù)方現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中所談及或測(cè)定的所謂“有效成分”多為主要藥物的主要成分或指標(biāo)成分，并無充分依據(jù)證明其為有效成分[1]。

　　中藥血清藥物化學(xué)和中藥藥代動(dòng)學(xué)是研究中藥作用物質(zhì)基礎(chǔ)的兩個(gè)重要途徑，本文主要簡(jiǎn)述血清藥物化學(xué)、中藥藥代動(dòng)力學(xué)等研究概況，以求為中獸藥的基礎(chǔ)研究拋磚引玉。

　　1．中獸藥的血清藥物化學(xué)

　　1.1 血清藥物化學(xué)研究的意義

　　血清藥理學(xué)的方法被國內(nèi)學(xué)者廣泛引用并取得了很好的效果[2]，但血清中成分不清楚，還是一種黑箱操作，仍不能闡明中藥的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，于是血清藥理學(xué)的研究自然而然地引出了血清藥物化學(xué)。近幾年，血清藥物化學(xué)的假說得到了廣泛的認(rèn)可，并逐漸付諸于實(shí)踐。

　　中藥血清藥物化學(xué)定義為：以藥物化學(xué)的研究手段和方法為基礎(chǔ)，多種現(xiàn)代技術(shù)綜合運(yùn)用，分析鑒定中藥口服后血清中轉(zhuǎn)運(yùn)成分，研究其藥效相關(guān)性，確定中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)并研究其體內(nèi)過程的一門應(yīng)用學(xué)科[3-5]。血清藥物化學(xué)依據(jù)是：傳統(tǒng)中藥多為內(nèi)服給藥，內(nèi)服給藥后藥物成分或經(jīng)過消化道直接吸收入血；或經(jīng)消化液、消化酶及腸內(nèi)菌群的作用分解成次生代謝產(chǎn)物被吸收入血；或經(jīng)肝微粒體酶代謝成有活性的代謝產(chǎn)物；無論經(jīng)過上述何種途徑，其有效物質(zhì)必須以血液為介質(zhì)輸送到靶點(diǎn)，從而產(chǎn)生作用；因而給藥后的血清才是真正起作用的“制劑”，血清中含有的成分才是中藥的體內(nèi)直接作用物質(zhì)。其組成包括：中藥及復(fù)方所含成分的原形，中藥及復(fù)方所含成分的代謝產(chǎn)物，還有這些成分作用的產(chǎn)物。雖然中藥成分復(fù)雜，但是進(jìn)入血液循環(huán)成分的數(shù)目是相對(duì)有限的[6]。所以，血清藥物化學(xué)的研究對(duì)推動(dòng)中藥血清藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法的完善，促進(jìn)中藥藥代動(dòng)力學(xué)的發(fā)展，建立與國際接軌的中藥及復(fù)方質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，闡明中藥復(fù)方的配伍機(jī)制，促進(jìn)新藥的開發(fā)等方面都具有深遠(yuǎn)的意義[7]。

　　1.2 血清藥物化學(xué)的研究方法

　　血清藥物化學(xué)研究方法是利用現(xiàn)代高端儀器（HPLC、LC-MS、LC-MS-MS、HPLC-NMR等）建立一種有效的微量的中藥及復(fù)方成分的分析方法，對(duì)內(nèi)服的中藥進(jìn)行體外分析，控制給藥前中藥的質(zhì)量（指紋圖譜），保證原型成分在體外能夠檢出，并用相同的方法分析血清及含藥血清中的化學(xué)成分，然后對(duì)給藥后體內(nèi)外成分的分析結(jié)果進(jìn)行比較，確定內(nèi)服給藥后血中的轉(zhuǎn)運(yùn)成分及其來源，進(jìn)而定向分離制備相關(guān)成分，進(jìn)行藥效、藥理、體內(nèi)動(dòng)態(tài)及代謝化學(xué)方面的研究，闡明中藥復(fù)方的作用機(jī)制[4-5，7] 。

　　1.3 血清藥物化學(xué)研究進(jìn)展

　　1.3.1 中藥復(fù)方血清藥物化學(xué)
由于現(xiàn)代檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展，目前血清藥物化學(xué)的研究方興未艾，有單方或復(fù)方的研究，多限于試驗(yàn)動(dòng)物

　　田代真一等在對(duì)三黃瀉心湯進(jìn)行研究時(shí)發(fā)現(xiàn)前后采集的血清相比，服藥后2h 采集血清的色譜中出現(xiàn)了一些新峰，而三黃瀉心湯本身的色譜圖中并未見到這些成分的峰。于是認(rèn)為對(duì)血中的成分進(jìn)分析會(huì)發(fā)現(xiàn)與藥效平行的血中濃度升高的成分，此成分為有效成分的概率比較高，然后從血中分離、精制該有效成分，并確定了其結(jié)構(gòu)[8]。

　　柴胡、金銀花等組成的復(fù)方安替威膠囊具有抗流感、SAS病毒等功效 [9]，王喜軍等研究發(fā)現(xiàn)動(dòng)物服用復(fù)方安替威后血中轉(zhuǎn)運(yùn)成分主要來源于金銀花、黃芩、連翹和柴胡，而這4味藥為其抗病毒、抗炎、解熱及雙向調(diào)節(jié)機(jī)體免疫作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，還發(fā)現(xiàn)綠原酸、黃芩苷既是入血的主要成分又是眾多代謝產(chǎn)物的前體化合物，因而其最有可能成為藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)，以其為指標(biāo)進(jìn)行工藝及其相關(guān)研究，將能夠體現(xiàn)藥物的內(nèi)在質(zhì)量[10]。

　　有人利用大鼠血藥指紋圖譜檢測(cè)來源于雙參寧心方的血中成分，并利用體外心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果給藥后血清樣本中，共檢測(cè)到15 個(gè)來源于雙參寧心方的原型成分，其中確定了人參皂苷 Rg1、丹酚酸 B、延胡索乙素、脫氫紫堇堿 4 個(gè)化學(xué)成分；在對(duì)心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷的實(shí)驗(yàn)中，人參皂苷 Rg1、脫氫紫堇堿能抑制心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷導(dǎo)致的乳酸脫氫酶活性升高(P<0.05)；丹酚酸 B、延胡索乙素則能顯著抑制乳酸脫氫酶的升高(P<0.01)，對(duì)心肌細(xì)胞具有保護(hù)作用，這提示人參皂苷 Rg1、丹酚酸 B、延胡索乙素、脫氫紫堇堿可能是雙參寧心方抗心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷的有效物質(zhì)基礎(chǔ)，可用于復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)的指標(biāo)檢測(cè)[11]。

　　也有報(bào)導(dǎo)，兔服四物湯有效部位血漿中阿魏酸的含量與補(bǔ)血藥效進(jìn)行了多指標(biāo)相關(guān)性研究，結(jié)果服藥后血漿中阿魏酸濃度的經(jīng)時(shí)變化與四物湯的藥效作用密切相關(guān)，得出阿魏酸是四物湯補(bǔ)血和活血的有效成分之一的結(jié)論[12]。

　　有學(xué)者建立了六味地黃丸及內(nèi)服六味地黃丸后大鼠血清的HPLC指紋色譜分析方法，分析比較六味地黃丸、缺味處方、單味生藥以及各組分給藥后所得血清樣品，鑒定了內(nèi)服六味地黃丸后大鼠血中轉(zhuǎn)運(yùn)成分、來源生藥及其代謝產(chǎn)物，結(jié)果表明六味地黃丸后從血中發(fā)現(xiàn)了11個(gè)入血成分，其中4個(gè)為代謝產(chǎn)物，7個(gè)成分為六味地黃丸所含成分的原形，其中有一成分雖為地黃中所含成分的原形，但其它兩種藥材也能代謝產(chǎn)生，得出了血中轉(zhuǎn)運(yùn)成分及代謝產(chǎn)物成為六味地黃丸的體內(nèi)直接作用物質(zhì)的結(jié)論[13]。耿放應(yīng)用中藥血清藥物化學(xué)的方法對(duì)口服六味地黃丸后血中主要代謝成分1號(hào)成分進(jìn)行研究，經(jīng)過初步研究己經(jīng)確定該成分由熟地黃、山茱萸、澤瀉三味藥材所含成分共同入血或代謝產(chǎn)生；后來他從熟地黃中定向分離得到該成分，并通過GC- MS，LC- MS， 1H- NMR， 13C- NMR進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，確定其結(jié)構(gòu)為5-羥甲基-2-糠醛(5 -HMFA )，進(jìn)一步研究得知5 – HMFA是由5-羥甲基-糠醛（5- HMF)經(jīng)過體內(nèi)轉(zhuǎn)化而來；鑒于六味地黃丸、熟地黃及5 - HMFA的前體化合物5 - HMF均具有改善血液流變學(xué)的藥理作用，在對(duì)其血中主要代謝成分5 - HMFA和六味地黃丸甲醇提取物進(jìn)行抗衰老和改善血液流變學(xué)相關(guān)活性的認(rèn)證試驗(yàn)后，得出5 - HMFA和六味地黃丸具有抗衰老和改善血液流變性的結(jié)論，且二者具有相關(guān)性，因此5-HMFA為六味地黃丸抗衰老及改善血液流變學(xué)的主要藥效物質(zhì)基礎(chǔ)[14]。

　　兔內(nèi)服心舒口服液，分別以阿魏酸、川芎嗪的血藥濃度實(shí)測(cè)值為自變量，以含藥血清對(duì)血管平滑肌細(xì)胞增殖的抑制率和含藥血清對(duì)血小板聚集的抑制率為因變量，采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)其進(jìn)行單因素相關(guān)性檢驗(yàn)和多元線性回歸分析，結(jié)果阿魏酸和川芎嗪與藥效密切相關(guān)，說明了這兩種成分是主要藥效物質(zhì)基礎(chǔ)[15]。

　　1.3.2 中藥單方血清藥物化學(xué)

　　臨床上中藥多以復(fù)方形式給藥，所以單方的血清藥物化學(xué)研究較少。宋玨等采用大鼠灌胃方法，測(cè)定不同取血點(diǎn)血清樣本中的黃芩苷含量，運(yùn)用血清藥理學(xué)方法，觀察血清樣本對(duì)細(xì)胞氧化損傷模型的保護(hù)作用，黃芩苷體內(nèi)、外均具有抗氧化作用，且效應(yīng)的時(shí)效關(guān)系與血清中黃芩苷的時(shí)量關(guān)系呈正相關(guān)，說明其是主要藥效物質(zhì)[16]。獸醫(yī)臨床研究表明：穿心蓮在雞的血清藥物化學(xué)研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，雞內(nèi)服穿心蓮超微粉后60min，利用LC-MS技術(shù)，發(fā)現(xiàn)9個(gè)入血成分，通過對(duì)體內(nèi)穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯、新穿心蓮內(nèi)酯和脫氧穿心蓮內(nèi)酯的定性分析，確定了這4個(gè)主要成分來源于穿心蓮原藥材；同時(shí)分析了這4個(gè)成分與SOD活力升高率、NO的升高率和淋巴細(xì)胞增值率的相關(guān)性，結(jié)果表明各成分與效應(yīng)都有良好的相關(guān)性，說明這4種成分是主要藥效物質(zhì)，基本與血清藥物化學(xué)的研究思路吻合[17]。

　　2 中獸藥在動(dòng)物體內(nèi)的代謝

　　中藥及復(fù)方的體內(nèi)代謝研究是闡明藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制的前沿?zé)狳c(diǎn)領(lǐng)域，同時(shí)也為深層詮釋中醫(yī)藥科學(xué)內(nèi)涵、中醫(yī)藥理論的現(xiàn)代創(chuàng)新以及中藥的現(xiàn)代化提供了有效的途徑。

　　目前中藥代謝研究多集中于單一活性成分，而對(duì)單味藥、有效部位和復(fù)方的代謝研究很少，建議在深入研究單一活性成分體內(nèi)代謝的同時(shí)，應(yīng)適當(dāng)加強(qiáng)有效部位、單味藥材和復(fù)方中藥的研究，同時(shí)也應(yīng)開展中藥活性成分結(jié)構(gòu)與代謝相關(guān)性以及中藥代謝影響因素的研究。

　　2.1 中獸藥的體內(nèi)過程與代謝

　　中藥大多數(shù)是經(jīng)內(nèi)服給藥的，所以其體內(nèi)過程同西藥一樣，都有ADME/TOX過程。但是許多中藥成分是在消化道菌群作用下代謝的，特別是腸道內(nèi)細(xì)菌的苷鍵水解酶系對(duì)具有苷鍵的藥物水解是腸道內(nèi)細(xì)菌代謝藥物的一大特征。

　　目前對(duì)中藥的代謝研究多集中在腸道菌群代謝、肝臟代謝上。番瀉苷(sennoside)A 、B 是大黃和番瀉葉的主要瀉下成分，它們本身并沒有瀉下活性，內(nèi)服后在小腸不被吸收，在大腸經(jīng)腸內(nèi)菌群代謝生成有活性的大黃酸蒽酮( rheinanthrone)，李雪駝等將番瀉苷給小鼠靜注40 mg/kg 無瀉下作用，而經(jīng)口投予則有100%的瀉下效果；經(jīng)內(nèi)服投予無菌動(dòng)物無藥效；給小鼠服用抗生素后，藥效降低。這說明番瀉苷被腸內(nèi)菌群代謝，主要途徑可能是: 番瀉苷A 和B 首先被單一葡萄糖苷酶水解成番瀉素( sennidin)A 和B，然后被降解成大黃酸蒽酮。楔樣狀芽孢桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌和青春型雙歧桿菌等都較易將番瀉素轉(zhuǎn)變?yōu)榇簏S酸蒽酮；但分離到能將番瀉苷水解成番瀉素的腸道菌株很少[18-19]。沈燕等利用大鼠整體實(shí)驗(yàn)方法研究了參附湯體內(nèi)代謝情況，結(jié)果顯示內(nèi)服參附湯后，烏頭類生物堿卡米查林(carmichaeline，Ⅰ)、塔拉胺(talatisamine，Ⅱ)、附子靈(fuziline，Ⅲ) 以原形形式被吸收，人參皂苷經(jīng)腸內(nèi)細(xì)菌代謝后以代謝產(chǎn)物Compound K 形式吸收進(jìn)入體內(nèi)[20]。

　　獸醫(yī)研究表明，利用HPLC-DAD、HPLC-UV及HPLC-MS系統(tǒng)地研究了穿心蓮內(nèi)酯在雞體內(nèi)代謝，發(fā)現(xiàn)內(nèi)服穿心蓮內(nèi)酯后，血液中出現(xiàn)一個(gè)代謝產(chǎn)物脫水穿心蓮內(nèi)酯，膽汁和腸內(nèi)容物中均有4個(gè)代謝產(chǎn)物。靜脈注射，血液和膽汁中均有8個(gè)代謝產(chǎn)物。代謝產(chǎn)物是穿心蓮內(nèi)酯的異構(gòu)體或脫去一分子水的異構(gòu)體，脫氧和脫水穿心蓮內(nèi)酯，14-去氧-11-氧化穿心蓮內(nèi)酯等；在給予穿心蓮超微粉的雞的膽汁中的成分經(jīng)HPLC-MS分析發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)是來源于穿心蓮原藥，小部分是代謝產(chǎn)物[17]。

　　2.2 中獸藥代謝酶與研究方法

　　隨著中藥使用的日益廣泛，中藥的安全性和不良反應(yīng)問題逐漸顯現(xiàn)。中藥以合并用藥為主且其中許多成分是CYP450酶的底物、誘導(dǎo)劑或抑制劑。

　　體內(nèi)試驗(yàn)中可采用在體探針?biāo)幬锘蛴脙?nèi)源性物質(zhì)的代謝來表征體內(nèi)代謝酶的活性，找出藥物代謝與某些代謝酶活性的相關(guān)性。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中運(yùn)用相應(yīng)選擇性探針?biāo)幬锟梢杂糜谒幬锎x中主要的CYP450同工酶的研究。國際上，一般采用肝微粒體內(nèi)的天然CYP450與藥物作用，然后用不同的分離分析方法(如HPLC、LC/MS)測(cè)定藥物及其代謝產(chǎn)物，以研究藥物對(duì)代謝酶的誘導(dǎo)和抑制，研究藥物的相互作用[21] ?。大鼠體內(nèi)研究報(bào)告也表明人參提取物具有CYP1A抑制劑的作用，而且其作用強(qiáng)于對(duì)CYP2B的抑制，并用“Cocktail（雞尾酒）”方法在大鼠研究了人參皂苷Re 對(duì)CYP1A2，CYP3A4，CYP2E1和CYP2C19 的影響，發(fā)現(xiàn)Re可以抑制CYP1A2 和CYP3A4 的活性，而不影響CYP2E1和CYP2C19的活性[22-23] 。在雞的體內(nèi)除含有CYPlA、CYP2B、CYP2C、CYP2D、 CYP2E和CYP3A等亞型外，還含有P450 2H [24-38 ]；在家禽上，有研究表明穿心蓮超微粉給予雞內(nèi)服一段時(shí)間后，采用探針法研究其對(duì)肝細(xì)胞色素氧化酶的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)對(duì)亞型CYP1A2有誘導(dǎo)作用P<0.05）；對(duì)CYP3A4有誘導(dǎo)作用但是差異不明顯（P>0.05）；對(duì)肝細(xì)胞色素氧化酶亞型CYP2E1（P<0.01）及CYP2C19也有誘導(dǎo)作用（P<0.05）[17]。

　　2.3 中獸藥的代謝組學(xué)

　　代謝組學(xué)的研究近3年來在國內(nèi)中醫(yī)界引起了極大的重視，也獲得了可喜的發(fā)展。勾藤等多味中藥組成的“多動(dòng)合劑”的生物化學(xué)機(jī)制研究中應(yīng)用代謝物組學(xué)方法，采用測(cè)定給藥動(dòng)物血清中多種內(nèi)源性神經(jīng)遞質(zhì)的動(dòng)態(tài)變化，而不是測(cè)定藥物有效成分的變化進(jìn)行該項(xiàng)目研究，從代謝物組成成分和含量的經(jīng)時(shí)變化發(fā)現(xiàn)具有療效的生物標(biāo)示物，認(rèn)為藥物的整體作用產(chǎn)生的生物化學(xué)物質(zhì)(神經(jīng)遞質(zhì))是其藥效的基礎(chǔ)物質(zhì)，證明“多動(dòng)合劑”的作用機(jī)制與DA受體有關(guān)[29]。
研究表明，大鼠灌胃給予淫羊藿醇提液，收集正常組、模型組和給藥組的血清和尿樣，用LC-MS系統(tǒng)，測(cè)定淫羊藿提取物的化學(xué)成分譜、各組生物樣品中的代謝物譜、以及進(jìn)入體內(nèi)的藥物成分及其代謝產(chǎn)物；對(duì)比正常組、模型組及給藥組大鼠尿液的代謝物指紋圖譜，發(fā)現(xiàn)造模4天后大鼠尿液中眾多代謝物的相對(duì)濃度發(fā)生了較大變化，產(chǎn)生了不正常代謝途徑；給藥組大鼠尿液的代謝物與正常組相應(yīng)代謝物相比有趨于一致的趨勢(shì)，給藥時(shí)間越長(zhǎng)，相對(duì)濃度越接近，表明淫羊藿使不正常代謝途徑逐漸得以修復(fù)；比較淫羊藿提取物、給藥前后血清及尿樣的成分譜發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷、朝藿定C可能為其主要藥效物質(zhì)基礎(chǔ)[30]。

　　報(bào)導(dǎo)也指出關(guān)木通給大鼠連續(xù)內(nèi)服給藥6 d，12d后收集尿樣，測(cè)定1H-NMR譜，并進(jìn)行血漿生化指標(biāo)和腎臟組織病理學(xué)檢查。結(jié)果大鼠腎臟出現(xiàn)不同程度的炎癥壞死，尿樣中氧化三甲胺、檸檬酸、?；撬?、肌酐、甜菜堿等代謝物均有不同程度的下降，而醋酸、丙氨酸則顯著上升；結(jié)果經(jīng)主成分分析表明，給藥組與對(duì)照組的代謝譜有明顯差異，能夠被區(qū)分開，而造成組間差異的主要影響因素是醋酸和氧化三甲胺的變化。不同劑量條件下，各組動(dòng)物的代謝譜也各不相同，與腎臟病理和血漿生化改變相一致，所以關(guān)木通能夠?qū)δI臟造成損害，且大鼠尿液的代謝物譜與關(guān)木通毒性作用強(qiáng)度密切相關(guān)[31]。

　　3 中獸藥藥代動(dòng)力學(xué)

　　3.1 中獸藥藥代動(dòng)力學(xué)的研究方法及研究進(jìn)展

　　中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)研究方法大體可分為兩大類:血藥濃度法和生物效應(yīng)法?？v觀近年來的中藥藥動(dòng)學(xué)的研究，80％以上是有效成分的藥動(dòng)學(xué)。中藥制劑，特別是中藥復(fù)方制劑成分復(fù)雜，缺乏體內(nèi)微量定量分析方法，然而，中藥不等于一般的植物藥，它必須具備中藥應(yīng)有的真正的內(nèi)涵，離開了中醫(yī)藥整體觀，單純追求西藥化，將使中藥藥代動(dòng)力學(xué)研究的路子越走越窄。所以采用毒理、藥理效應(yīng)法研究中草藥藥代動(dòng)力學(xué)正是這種整體觀的體現(xiàn)。

　　在如何用藥代動(dòng)力學(xué)方法認(rèn)識(shí)中藥的整體作用，近年來國內(nèi)產(chǎn)生的一些研究理論和研究方法，如血清藥理學(xué)、證治藥代動(dòng)力學(xué)和脾主藥代動(dòng)力學(xué)、血清藥物化學(xué)、代謝組學(xué)等理論方法對(duì)我國的中藥藥代動(dòng)力學(xué)研究有所應(yīng)用。再者 PK/PD同步分析的研究方法，對(duì)綜合評(píng)價(jià)藥物活性物質(zhì)群的藥代動(dòng)力學(xué)和藥效動(dòng)力學(xué)，在反映藥物作用的整體觀等方面意義尤為突出。另外建立植物化學(xué)-藥效學(xué)-藥代動(dòng)力學(xué)的三維研究體系，配合體外-體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)化學(xué)指紋-藥效指紋-藥代指紋的關(guān)系，鑒別指紋圖譜的變化，研究有效部位(成分)的指紋和藥代指紋的一致性和差異性，進(jìn)而建立新的三維模型，實(shí)現(xiàn)認(rèn)識(shí)中藥作用的整體觀念，也能為現(xiàn)代科學(xué)闡明藥物作用的物質(zhì)基礎(chǔ)提供新的研究方法。

　　對(duì)于多成分體系，不管是中藥還是西藥，只研究單個(gè)成分藥物動(dòng)力學(xué)行為，不研究整方的藥物動(dòng)力學(xué)總量藥物動(dòng)力學(xué)行為，這與中西藥復(fù)方藥相悖，怎樣用一個(gè)整體模型來整合各單個(gè)成分動(dòng)力學(xué)數(shù)學(xué)模型及參數(shù)是解決中藥(復(fù)方)藥物動(dòng)力學(xué)研究的核心問題。賀福元等用總量統(tǒng)計(jì)矩模型研究了補(bǔ)陽還五湯的藥動(dòng)學(xué)，該模型又能溝通單個(gè)成分(微觀、可測(cè))與整體總量(宏觀、可算)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)關(guān)系，又能結(jié)合中藥復(fù)方(有效部位)的指紋圖譜，由于該數(shù)學(xué)模型能適應(yīng)中藥(復(fù)方)藥動(dòng)學(xué)研究，并已有初步研究結(jié)果面世，該項(xiàng)目已獲2004年國家自然科學(xué)基金資助[32]。

　　有研究表明：雞內(nèi)服穿心蓮超微粉后10～480min，穿心蓮超微粉有效成分穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯在雞體內(nèi)過程符合一級(jí)吸收二室模型。穿心蓮內(nèi)酯的主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)為：tmax51.5±3.5 min，Cmax1.60±0.32 μg/mL，t1/2β104.8±12.8 min， AUC 329.3±28.8 μg/mL·min。脫水穿心蓮內(nèi)酯的主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)為：tmax 37.2±2.8 min，Cmax 1.44±0.088 μg/mL，t1/2β143±12.8 min， AUC 329.1±25.5 μg/mL·min。穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯為穿心蓮主要活性成分，且含量較高，國內(nèi)學(xué)者對(duì)穿心蓮內(nèi)酯研究較為廣而深，故穿心蓮內(nèi)酯具有一定代表意義[17]。但是通過對(duì)脫水穿心蓮內(nèi)酯的研究也表明其意義的重要性，兩者消除半衰期差異顯著，說明以某個(gè)成分來解釋全方的藥動(dòng)學(xué)是不全面的。

　　3.2 中獸藥的藥代動(dòng)力學(xué)/藥效學(xué)（PK/PD）同步模型

　　復(fù)方進(jìn)入體內(nèi)的物質(zhì)與復(fù)方效應(yīng)間是否存在的內(nèi)在聯(lián)系尚未得到科學(xué)的闡明，這是復(fù)方藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究的難點(diǎn)，也是目前復(fù)方藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究的關(guān)鍵問題。所以藥代動(dòng)力學(xué)/ 藥效學(xué)（PK/PD）同步模型的運(yùn)用將為中藥藥代的研究提供一個(gè)良好的平臺(tái)，但是中藥復(fù)方的PK-PD同步模型有深度也有很大的難度，如中藥的多峰現(xiàn)象、效應(yīng)指標(biāo)的選擇的難度較大。
迄今為止，中藥的PK-PD模型很少有報(bào)導(dǎo)，但是PK、PD相關(guān)性的研究較多，甘洪全建立同時(shí)測(cè)定冠心II號(hào)中丹參素、原兒茶醛、芍藥苷、阿魏酸的同時(shí)，測(cè)定冠狀動(dòng)脈血流和心臟收縮舒張功能做藥效指標(biāo)，結(jié)果顯示阿魏酸與藥效呈良好的相關(guān)，證明了阿魏酸是藥效物質(zhì)的觀點(diǎn)[33]。
有報(bào)道表明：Beagl犬服用蝠葛蘇林堿和蝙蝠葛堿后，體內(nèi)的血藥濃度并以給藥后的Q-Tc間期延長(zhǎng)率作為效應(yīng)指標(biāo)，建立了蝠葛蘇林堿和蝙蝠葛堿的 PK-PD結(jié)合模型，明確了藥物效應(yīng)E，血藥濃度及時(shí)間t之間的關(guān)系，較為成功地預(yù)則蝠葛蘇林堿和蝙蝠葛堿的血藥濃度及其效應(yīng)[34]。也有研究顯示，給犬經(jīng)食道給予心寧緩釋片或心寧片后，不同時(shí)間測(cè)定的冠狀動(dòng)脈血流量，并采用HPLC法測(cè)定血漿中丹酚酸B、HJJ的濃度，結(jié)果顯示藥理效應(yīng)與靶器官內(nèi)血藥濃度之間的關(guān)系符合Hill方程，建立了丹酚酸B、HJJ在犬體內(nèi)PK-PD量效方程[25]。

　　4 展望

　　中藥血清化學(xué)和中藥藥代動(dòng)力學(xué)是研究中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的兩種途徑。我們認(rèn)為進(jìn)一步的研究應(yīng)注重于以下方面：①進(jìn)一步深入研究中藥復(fù)方的血清化學(xué)。目前，中藥血清化學(xué)研究尚在起步階段，只對(duì)少數(shù)幾味藥進(jìn)行了血清化學(xué)研究，同時(shí)，研究手段也大都采用高效液相色譜。利用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)等新型分離分析手段鑒定入血成分的結(jié)構(gòu)，有助于我們更清楚地了解中藥復(fù)方進(jìn)入體內(nèi)的化學(xué)成分。此外，采用血清指紋圖譜思路考察復(fù)方入血成分的動(dòng)態(tài)分布也是值得探索的研究途徑。 ②開展中藥復(fù)方多組分的藥代動(dòng)力學(xué)研究，根據(jù)能表征復(fù)方物質(zhì)基礎(chǔ)的多種藥效成分的血藥濃度測(cè)定結(jié)果，建立復(fù)方整體藥代動(dòng)力學(xué)模型。 ③建立中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)和藥效動(dòng)力學(xué)同步分析統(tǒng)一模型（PK/PD），逐步完善中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)研究方法。④隨著生物信息學(xué)包含的各種組學(xué)的發(fā)展，代謝組學(xué)將成為中醫(yī)藥現(xiàn)代研究的一種重要的技術(shù)手段。

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