畜牧人
標(biāo)題:
滅活疫苗史上的偉大里程碑
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作者:
石榴石
時間:
2008-3-27 19:19
標(biāo)題:
滅活疫苗史上的偉大里程碑
滅活疫苗史上的偉大里程碑
--
創(chuàng)造綠色環(huán)境的禽用類脂滅活疫苗
全面啟動機(jī)體免疫系統(tǒng)
--
免疫
5-7
天即可抵御野毒的攻擊
堅強(qiáng)持久的免疫持續(xù)期
--
保護(hù)期可長達(dá)
200
天
綠色無殘留的環(huán)保效果
--
肉雞免疫不影響肉質(zhì),不影響出口
簡單便捷的保存運輸
--
常溫保存,有效期
1
年,
0-8
℃
保存,有效期
2
年
無與倫比的抗應(yīng)激功能
--
產(chǎn)蛋高峰期免疫不影響產(chǎn)蛋率
具有高度生物學(xué)活性的純天然物質(zhì)
—
類脂
類脂系從多年生毛白楊中提取的一種橙黃色脂溶性物質(zhì),由于其獨有的天然生物學(xué)活性,在
畜牧
獸醫(yī)、醫(yī)學(xué)方面都有著廣泛的應(yīng)用前景。
全面的多維替代能力
--
類脂富含多維素,其中胡蘿卜素高達(dá)
60mg/kg
,維生素
E
高達(dá)
1968 mg/kg
,其他維生素亦可完
全滿足畜禽正常生長發(fā)育需要。
卓越的提高產(chǎn)蛋性能
—
類脂中含有高達(dá)
1730IU/kg
的修復(fù)生殖系統(tǒng)的生育酚,足可使產(chǎn)蛋雞的產(chǎn)蛋高峰維持時間更長、產(chǎn)蛋率更高。
堅強(qiáng)的抗熱應(yīng)激性能
—
類脂中含有豐富的亞油酸、亞麻酸,
30-35
℃
的高溫也不影響雞群的生產(chǎn)性能。
劃時代的免疫佐劑技術(shù)革命
—
類脂
榮獲:
中國林業(yè)部科學(xué)技術(shù)進(jìn)步獎三等獎
國家級新產(chǎn)品證書
第五屆亞太國際貿(mào)易博覽會金獎
山東省工業(yè)利用一等獎
山東省科技攻關(guān)項目
濱州市科技星火一等獎
國家專利產(chǎn)品
具有高度生物學(xué)活性的純天然物質(zhì)---
“類脂”
楊樹皮類脂(Poplar Lipid)系從楊樹皮中提取的一種橙黃色脂溶性物質(zhì),由于其獨有的天然生物學(xué)活性,在畜牧獸醫(yī)、醫(yī)藥方面都有著廣泛的應(yīng)用前景。最早記載楊樹皮的藥用功效及應(yīng)用范圍的藥物學(xué)史著—《本草綱目》的第2037頁記載:“[主治]—毒風(fēng)腳腫、四肢緩弱不隨...酒漬服之...”,表明楊樹皮在治療皮膚病方面有一定的功效。在國外,前蘇聯(lián)阿列克謝娃與杰姆欽柯等人首先對山楊(Poplar tremuloides)樹皮類脂的加工工藝、化學(xué)成分及其在醫(yī)藥、日化產(chǎn)品和飼料方面的應(yīng)用進(jìn)行了研究。20世紀(jì)70年代初,德國V.kull等對香脂楊(P.balsamifera)不同采伐季節(jié)的楊樹皮類脂中脂肪含量進(jìn)行了研究。此外,加拿大、美國、中國等學(xué)者也對某些楊樹皮提取物進(jìn)行了廣泛的試驗研究。
1楊樹皮類脂的提取與成分分析
1.1楊樹皮類脂的提取
楊樹是常見的闊葉速生豐產(chǎn)林樹種之一。樹皮約占木材的12%~15%左右,楊樹皮類脂廣泛存在于楊樹皮中,在國內(nèi),以東北生長的小葉楊和毛白楊樹皮的類脂含量最高。
制備楊樹皮類脂一般采用醚萃取法。通過對鮮楊樹皮進(jìn)行切碎、烘干粉碎,再利用醚類物質(zhì)進(jìn)行萃取,萃取物過濾除渣后進(jìn)行蒸發(fā),收物即為粗制楊樹皮類脂。楊樹皮類脂的產(chǎn)量與質(zhì)量受原料的質(zhì)量、萃取的溫度、液固相比例、萃取時間、原料微粒直徑等因素影響。研究表明,將楊樹皮切碎烘干粉碎,樹皮粒度以4~5mm為宜,加入醚類進(jìn)行萃取,萃取的時間控制在4~5小時,萃取溫度57℃左右,萃取后過濾去掉殘渣,而后進(jìn)行蒸發(fā)處理即可得到楊樹皮類脂。溫度的過高過低都會影響萃取質(zhì)量和產(chǎn)量,而且,液固相的比例與得率似乎也存在最佳配合,石油醚:樹皮干粉約為2.5~3:1時效果最好。另外,原料的貯存會降低產(chǎn)品數(shù)量和質(zhì)量,試驗證明,經(jīng)長時間放置的楊樹皮與鮮楊樹皮分別進(jìn)行烘干萃取,以鮮楊樹皮萃取產(chǎn)品得率較高。
1.2楊樹皮類脂的成分分析
通過常規(guī)方法和氣相色譜儀等儀器設(shè)備對楊樹皮類脂進(jìn)行成分測定,其中半固體物含量為90%,胡蘿卜素0.010%~0.012%,維生素E約0.10%~0.15%,磷脂約1.0%,不飽和甾醇2.0%~2.5%,不飽和脂肪酸60%~70%,蠟狀物16%~18%,中性物26%~28%,皂化值100%~120mg.KOH/g,折光指數(shù)ND25=1.49,碘值100~125。
飽和脂肪酸占脂肪酸含量的4.47%,不飽和脂肪酸占脂肪酸含量的95.43%,其中,月桂酸為0.14%,硬脂酸0.18%,十二碳烯酸0.16%,油酸82.40%,肉豆蔻酸0.17%,亞油酸11.19%,十四碳烯酸0.19%,花生酸0.08%,棕櫚酸3.90%,亞麻酸11.19%,異棕櫚酸微,十六碳烯酸0.04%。
在小葉白楊中磷脂、甾醇、維生素E、β-胡蘿卜素的含量分別為:2.6%、3.86%、1968mg/kg、60mg/kg,毛白楊分別為:0.96%、2.42%、1478mg/kg、129mg/kg。
氨基酸大體含量(%)為:天冬氨酸0.620,蘇氨酸0.318,絲氨酸0.316,谷氨酸0.801,脯氨酸0.286,甘氨酸0.385,丙氨酸0.414,半胱氨酸0.087,擷氨酸0.418,蛋氨酸0.051,異亮氨酸0.343,亮氨酸0.560,組氨酸0.122,色氨酸0.146,苯丙氨酸0.371,賴氨酸0.448,精氨酸0.0312。
此外,楊樹皮類脂還含有大量的常量元素如:Na 0.12%、Mg 0.09%,P 0.06%,Ca 0.36,K 0.25%,微量元素如:Cu 0.51(mg/Kg),F(xiàn)e 726(mg/Kg),Zn 41(mg/Kg),Co 0.76(mg/Kg),Mn 347(mg/Kg),Se 4.6(mg/Kg),Mu 0.12(mg/Kg)等。
2、楊樹皮類脂的作用機(jī)理
2.1楊樹皮類脂的功效
楊樹皮類脂不僅含有動物體內(nèi)不可缺少的如磷脂、糖脂、固醇等構(gòu)成生物膜的重要結(jié)構(gòu)組分,還能夠促進(jìn)食物中脂溶性維生素A、D、E、K的消化吸收。由于楊樹皮類脂含有豐富的多種天然生物活性物質(zhì)如多種常量、微量元素、多種維生素、18種氨基酸以及大量的不飽和脂肪酸、甾醇、磷脂等。研究表明,楊樹皮類脂可作為生物活性添加劑用于飼料添加劑方面,能夠提高肉用畜禽體重,替代部分維生素,較強(qiáng)的抗熱應(yīng)激作用,提高產(chǎn)蛋量等功能。在預(yù)防、治療畜禽疾病方面,由于楊樹皮類脂含有大量的不飽和脂肪酸,具有類似維生素PP的生物活性,對癬、疥、濕疹、潰瘍、紅斑、瘙癢等皮膚病有顯著療效,亦可作為抗血管硬化的有效藥物,不飽和甾醇可用于治療和預(yù)防動脈粥狀硬化等,在治療非典型性新城疫、大腸桿菌病等疾病方面也具有顯著的療效。
2.1 楊樹皮類脂畜牧領(lǐng)域中的應(yīng)用
楊樹皮類脂富含不飽和脂肪酸、磷脂、甾醇以及未知的生命活性物質(zhì)。必須脂肪酸的最重要功能之一是參與磷脂分子結(jié)構(gòu),也是前列腺素的前體。前列腺素是具有廣泛類激素調(diào)節(jié)作用的化合物,已證明它能夠參與凝血、腎臟的血流動、胃腸活動、內(nèi)分泌和神經(jīng)遞素的釋放、繁殖等功能,特別是對雌性器管的運動機(jī)能具有調(diào)節(jié)作用。生命重要物質(zhì)如腎上腺皮質(zhì)激素、雌激素、雄激素、膽汁酸等在體內(nèi)由甾醇合成。動植物體內(nèi)執(zhí)行結(jié)構(gòu)功能的主要是磷脂和甾醇,與蛋白質(zhì)一起構(gòu)成動植物體細(xì)胞和亞細(xì)胞所有生物膜的組分,調(diào)節(jié)一些有機(jī)物和礦物質(zhì)的選擇性、通透性。
楊樹皮類脂中含有大量維生素E(1730IU/Kg)。維生素E又叫生育酚,在類脂中,以a生育酚含量最高。目前有9種酚(8種生育酚、1種生育三烯酚)具有維生素E的生物學(xué)活性,其中以a-生育酚活性最高,該物質(zhì)為淡黃色油狀物質(zhì),不溶于水而溶于脂肪,不易被酸、堿、熱等因素破壞,但易氧化,動物體對a-生育酚的吸收依賴于脂肪和膽鹽的存在,并隨乳糜微粒吸收和轉(zhuǎn)運。其生理功能是作為生物催化劑參與物質(zhì)代謝,抗氧化作用,與硒協(xié)同保護(hù)飽和脂肪酸,使其不被氧化破壞,保護(hù)和維持細(xì)胞膜的正常脂類結(jié)構(gòu),維持骨骼肌、心肌、平滑肌及其外周血管系統(tǒng)的構(gòu)造與功能,維持動物體組織中核酸含量及核酸的正常代謝;維持動物生殖系統(tǒng)的正常功能。上述理論支持了楊樹皮類脂提高蛋雞產(chǎn)蛋率、提高受精率的試驗結(jié)果。研究表明,楊樹皮類脂及其添加劑具有較強(qiáng)的促進(jìn)蛋雞產(chǎn)蛋,對中型蛋雞,添加0.03%的楊樹皮類脂能使產(chǎn)蛋率穩(wěn)步提高5%以上,對輕型蛋雞,如京白904,添加0.02%的劑量效果最好,使產(chǎn)蛋率提高6%以上,并且,添加純類脂0.03%和添加含有相同量的以松針粉為載體的類脂飼料添加劑,其效果無顯著差異。
由于維生素的補充多數(shù)需要從外界獲得,多數(shù)維生素是輔酶的組成成分,而輔酶與酶蛋白相結(jié)合才能使酶具有催化作用。缺乏維生素A時,動物體表現(xiàn)為受胎率下降、發(fā)生難產(chǎn)、流產(chǎn)、怪胎等,缺乏維生素E時,動物體生殖機(jī)能障礙、精子數(shù)減少、睪丸退化、不孕、流產(chǎn)、喪失生育能力,同時對內(nèi)分泌系統(tǒng)的發(fā)育以及機(jī)體的代謝活動產(chǎn)生不良的影響,并造成肌肉及神經(jīng)系統(tǒng)機(jī)能失調(diào),運動器官發(fā)生麻痹,肝機(jī)能障礙,肌肉萎縮變白,心臟衰弱等癥狀。由于楊樹皮類脂中維生素含量豐富,因此可代替部分多維素。試驗飼喂AA肉雞854只,試驗期為56天,對照組多維素以標(biāo)準(zhǔn)量添加,試驗組以標(biāo)準(zhǔn)量的1/4量添加,另外添加0.2%楊樹皮飼料添加劑,其它條件相同。試驗結(jié)果表明,試驗組無任何多維素缺乏癥狀;試驗組比對照組多耗料114.5克/只,但飼料成本降低1.7%—2.1%、成活率提高6%、飼料轉(zhuǎn)化率對照組2.16:1,試驗組2.04:1。用加有某品牌多維的配合飼料飼喂法國巴巴里種鴨,種蛋受精率降至40%,當(dāng)飼料中加入1.5%楊樹皮類脂后受精率在2周內(nèi)提高到91.5%。
動物生長發(fā)育必需的氨基酸如賴氨酸、蛋氨酸、色氨酸、精氨酸、組氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、擷氨酸等在楊樹皮類脂中大量存在。對雛雞、育成豬,由于在生長發(fā)育階段要求限制性氨基酸存在,才能促使生長迅速如蛋氨酸、賴氨酸、蘇氨酸等。這些氨基酸通過飼喂楊樹皮類脂可以得到很好的補充。在前蘇聯(lián)B.и.希尼欽等人在列寧格勒勝利農(nóng)場以山楊樹皮類脂為添加劑進(jìn)行試驗,喂養(yǎng)俄羅斯白豬,每千克活重每日添加量0.05g,比對照組增重46.5%。在康多波加養(yǎng)禽場對蛋雞進(jìn)行飼喂試驗,每千克活重每日添加0.1g,產(chǎn)蛋率提高12%~15%,雞的肝臟中,類胡蘿卜素含量提高5%~6%,維生素E增加50%,蛋中胡蘿卜素、維生素A、B2含量都增加。北京農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院通過試驗觀察到在飼料中添加0.1%~0.2% 楊樹皮類脂飼料添加劑能夠使肉用仔雞體重較對照組增高9%。
亞油酸與亞麻酸在對抗動物機(jī)體對抗熱應(yīng)激方面具有重要的作用。在對高溫季節(jié)蛋雞生產(chǎn)性能的影響試驗中,添加0.01%的楊樹皮類脂不足以對抗因高溫引起蛋雞產(chǎn)蛋性能變化的影響,產(chǎn)蛋率變幅隨溫度的升高而波動較大,0.02%的劑量較0.01%的劑量抗熱應(yīng)激的效果好,0.03%的劑量效果最好,產(chǎn)蛋率在較高的溫度范圍內(nèi)只發(fā)生了較小的波動,0.04%的添加劑量雖然產(chǎn)蛋率變幅較小,但整個試驗期內(nèi)產(chǎn)蛋率呈下降趨勢,說明0.04%的添加量已過量,這可能是由于添加物中含游離脂肪酸過多,代謝產(chǎn)物中過氧化物含量高,產(chǎn)蛋雞的正常產(chǎn)蛋能力受到抑制的緣故。另據(jù)邯鄲市肉種雞廠利用楊樹皮類脂作為飼料添加劑進(jìn)行飼喂試驗的結(jié)果表明,種蛋受精率分別為試驗組92.98%、對照組82.38%,孵化率分別為試驗組87.77%、對照組80.50%,差異極顯著。
2.2獸醫(yī)學(xué)領(lǐng)域
作為具有生物學(xué)活性的物質(zhì),楊樹皮類脂中含有大量的多糖類、有機(jī)酸、甾醇、甙類、黃酮類物質(zhì),這些物質(zhì)在動物體內(nèi)協(xié)調(diào)統(tǒng)一,大大提高動物體的免疫機(jī)能。多糖類具有促胸腺體液反應(yīng)、刺激網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng),提高機(jī)體特異性免疫反應(yīng)能力;有機(jī)酸具有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的作用,能夠刺激和促進(jìn)單核吞噬細(xì)胞功能,對抗免疫抑制對免疫器官的抑制作用;甙類能夠加速抗體的產(chǎn)生、促進(jìn)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化和增強(qiáng)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)功能等作用。
山東濱州博萊威生物技術(shù)有限
公司
在國際上首次將楊樹皮類脂用于畜禽用疫苗作為免疫增強(qiáng)劑并獲得成功,并于
2002
年獲得中試批號,所研制成功的禽用類脂系列疫苗產(chǎn)品包括復(fù)合新城疫、傳支、減蛋、傳染性鼻炎、霉形體、大腸桿菌、禽霍亂、傳染性漿膜炎等。利用楊樹皮類脂作為免疫佐劑用于制備獸用滅活疫苗具有以下優(yōu)點:(
1
)產(chǎn)生堅強(qiáng)免疫力的時間持久:電鏡下的類脂顆粒能與病毒粒子形成復(fù)雜的免疫刺激復(fù)合物,類脂呈彌漫性存在,病毒粒子散在、鑲嵌其中,并且病毒粒子仍保持了完整的形態(tài)結(jié)構(gòu),從而使疫苗釋放抗原的時間大大延長。實驗表明:
30
日齡初免激發(fā)機(jī)體免疫系統(tǒng)的初次應(yīng)答,
60
日齡加強(qiáng)免疫,引起更為強(qiáng)烈的免疫反應(yīng),使抗體很快升高并維持在一個高水平狀態(tài),持續(xù)時間可可長達(dá)
8-12
個月。(
2
)
免疫空白期短:
電子顯微鏡下的疫苗中存在少量裸露游離的病毒粒子和類脂佐劑,接種機(jī)體后可迅速刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答,
5-7天即可產(chǎn)生堅強(qiáng)免疫力,
應(yīng)答時間比油佐劑疫苗提前
10
天左右
。
(
3
)刺激性小,無副作用:
實驗表明,傳統(tǒng)疫苗由于采用礦物油為佐劑制備疫苗,因此,刺激性大、毒副作用強(qiáng),引起機(jī)體長時間處于免疫力低下期,通常這一時間持續(xù)24-48小時,病原菌很容易在這段時間乘虛而入造成免疫后24-48小時內(nèi)爆發(fā)疾病
研究表明,該疫苗注射后,無注苗反應(yīng),免疫所造成的應(yīng)激小,不影響精神、食欲,注射局部無腫脹,無壞死,而且它本身是一種純天然物質(zhì),無殘留,符合動物性食品衛(wèi)生出口要求;(
4
)保存運輸方便:該疫苗打破了傳統(tǒng)疫苗保存溫度的限制,可在較大的溫度范圍下保存運輸,實驗研究表明,
0-30
℃環(huán)境中保存
6
個月不變色、不分層,不影響免疫期等。
研究表明,以25%的楊樹皮類脂治療兔、牛疥癬,類脂具有較強(qiáng)的向痂皮內(nèi)滲透的作用,這一作用對不進(jìn)行痂皮處理的患部特別有利,它可以很快的滲入痂皮內(nèi)部起殺滅螨蟲的作用,類脂還具有較快的止癢作用,涂藥后約經(jīng)3、4小時,患病動物變安靜,不再有啃咬現(xiàn)象。類脂對螨蟲卵亦有破壞作用,在涂藥后3小時,鏡檢患部皮膚,螨蟲大多死亡、螨蟲卵變形,6小時后,無活螨,涂藥后24小時,患部痂皮大部分脫落,皮膚開始愈合。
將楊樹皮類脂與吸附劑按一定比例混合,制成含10%的類脂制劑,在應(yīng)用時與飼料均勻混合,使料中純類脂終濃度為0.2%,然后在病雞群中應(yīng)用。結(jié)果表明,楊樹皮類脂對肉雞大腸桿菌病有明顯的療效,飼喂后第2天排稀便癥狀便明顯減輕,死亡減少,至第5天,病雞停止死亡,排便正常。在楊樹皮類脂的抑菌試驗中研究也發(fā)現(xiàn),無論是純楊樹皮類脂還是50%的類脂油溶液均有明顯的抑菌作用。另外在治療雛雞球蟲病時,類脂不能阻礙雞球蟲在腸道內(nèi)生長發(fā)育,但可降低雞的死亡率20%。在治療蛋雞非典型性新城疫時,飼喂0.2%類脂添加劑僅3天,病雞排稀便便明顯減少,死亡停止。另外對治療因寒冷、轉(zhuǎn)群等應(yīng)激引起的腹瀉也有明顯的療效。
3 結(jié)語
由于楊樹皮類脂所具有的高效生物學(xué)活性,被應(yīng)用于廣泛的領(lǐng)域,同時利用楊樹皮萃取類脂,有效的解決了工業(yè)生產(chǎn)中原料浪費的問題,使資源得以充分利用。在畜牧獸醫(yī)方面,楊樹皮類脂不但可以提高畜禽的日增重率、產(chǎn)蛋率、受精率,而且,對畜禽疾病的預(yù)防與治療亦有顯著的效果。但是由于楊樹皮類脂成分復(fù)雜,并且作為植物萃取液,發(fā)揮作用時又常常是各種成分協(xié)同進(jìn)行,因此,對楊樹皮類脂能夠提高畜禽生產(chǎn)率和預(yù)防治療畜禽疾病的機(jī)理有待于進(jìn)一步的研究。
創(chuàng)造綠色環(huán)境的生物技術(shù)
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滅活疫苗史上的偉大里程碑
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創(chuàng)造綠色環(huán)境的禽用類脂滅活疫苗
全面啟動機(jī)體免疫系統(tǒng)
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免疫
5-7
天即可抵御野毒的攻擊
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保護(hù)期可長達(dá)
200
天
綠色無殘留的環(huán)保效果
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肉雞免疫不影響肉質(zhì),不影響出口
簡單便捷的保存運輸
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常溫保存,有效期
1
年,
0-8
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保存,有效期
2
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無與倫比的抗應(yīng)激功能
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產(chǎn)蛋高峰期免疫不影響產(chǎn)蛋率
具有高度生物學(xué)活性的純天然物質(zhì)
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類脂
類脂系從多年生毛白楊中提取的一種橙黃色脂溶性物質(zhì),由于其獨有的天然生物學(xué)活性,在
畜牧
獸醫(yī)、醫(yī)學(xué)方面都有著廣泛的應(yīng)用前景。
全面的多維替代能力
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類脂富含多維素,其中胡蘿卜素高達(dá)
60mg/kg
,維生素
E
高達(dá)
1968 mg/kg
,其他維生素亦可完
全滿足畜禽正常生長發(fā)育需要。
卓越的提高產(chǎn)蛋性能
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類脂中含有高達(dá)
1730IU/kg
的修復(fù)生殖系統(tǒng)的生育酚,足可使產(chǎn)蛋雞的產(chǎn)蛋高峰維持時間更長、產(chǎn)蛋率更高。
堅強(qiáng)的抗熱應(yīng)激性能
—
類脂中含有豐富的亞油酸、亞麻酸,
30-35
℃
的高溫也不影響雞群的生產(chǎn)性能。
劃時代的免疫佐劑技術(shù)革命
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類脂
榮獲:
中國林業(yè)部科學(xué)技術(shù)進(jìn)步獎三等獎
國家級新產(chǎn)品證書
第五屆亞太國際貿(mào)易博覽會金獎
山東省工業(yè)利用一等獎
山東省科技攻關(guān)項目
濱州市科技星火一等獎
國家專利產(chǎn)品
具有高度生物學(xué)活性的純天然物質(zhì)---
“類脂”
楊樹皮類脂(Poplar Lipid)系從楊樹皮中提取的一種橙黃色脂溶性物質(zhì),由于其獨有的天然生物學(xué)活性,在畜牧獸醫(yī)、醫(yī)藥方面都有著廣泛的應(yīng)用前景。最早記載楊樹皮的藥用功效及應(yīng)用范圍的藥物學(xué)史著—《本草綱目》的第2037頁記載:“[主治]—毒風(fēng)腳腫、四肢緩弱不隨...酒漬服之...”,表明楊樹皮在治療皮膚病方面有一定的功效。在國外,前蘇聯(lián)阿列克謝娃與杰姆欽柯等人首先對山楊(Poplar tremuloides)樹皮類脂的加工工藝、化學(xué)成分及其在醫(yī)藥、日化產(chǎn)品和飼料方面的應(yīng)用進(jìn)行了研究。20世紀(jì)70年代初,德國V.kull等對香脂楊(P.balsamifera)不同采伐季節(jié)的楊樹皮類脂中脂肪含量進(jìn)行了研究。此外,加拿大、美國、中國等學(xué)者也對某些楊樹皮提取物進(jìn)行了廣泛的試驗研究。
1楊樹皮類脂的提取與成分分析
1.1楊樹皮類脂的提取
楊樹是常見的闊葉速生豐產(chǎn)林樹種之一。樹皮約占木材的12%~15%左右,楊樹皮類脂廣泛存在于楊樹皮中,在國內(nèi),以東北生長的小葉楊和毛白楊樹皮的類脂含量最高。
制備楊樹皮類脂一般采用醚萃取法。通過對鮮楊樹皮進(jìn)行切碎、烘干粉碎,再利用醚類物質(zhì)進(jìn)行萃取,萃取物過濾除渣后進(jìn)行蒸發(fā),收物即為粗制楊樹皮類脂。楊樹皮類脂的產(chǎn)量與質(zhì)量受原料的質(zhì)量、萃取的溫度、液固相比例、萃取時間、原料微粒直徑等因素影響。研究表明,將楊樹皮切碎烘干粉碎,樹皮粒度以4~5mm為宜,加入醚類進(jìn)行萃取,萃取的時間控制在4~5小時,萃取溫度57℃左右,萃取后過濾去掉殘渣,而后進(jìn)行蒸發(fā)處理即可得到楊樹皮類脂。溫度的過高過低都會影響萃取質(zhì)量和產(chǎn)量,而且,液固相的比例與得率似乎也存在最佳配合,石油醚:樹皮干粉約為2.5~3:1時效果最好。另外,原料的貯存會降低產(chǎn)品數(shù)量和質(zhì)量,試驗證明,經(jīng)長時間放置的楊樹皮與鮮楊樹皮分別進(jìn)行烘干萃取,以鮮楊樹皮萃取產(chǎn)品得率較高。
1.2楊樹皮類脂的成分分析
通過常規(guī)方法和氣相色譜儀等儀器設(shè)備對楊樹皮類脂進(jìn)行成分測定,其中半固體物含量為90%,胡蘿卜素0.010%~0.012%,維生素E約0.10%~0.15%,磷脂約1.0%,不飽和甾醇2.0%~2.5%,不飽和脂肪酸60%~70%,蠟狀物16%~18%,中性物26%~28%,皂化值100%~120mg.KOH/g,折光指數(shù)ND25=1.49,碘值100~125。
飽和脂肪酸占脂肪酸含量的4.47%,不飽和脂肪酸占脂肪酸含量的95.43%,其中,月桂酸為0.14%,硬脂酸0.18%,十二碳烯酸0.16%,油酸82.40%,肉豆蔻酸0.17%,亞油酸11.19%,十四碳烯酸0.19%,花生酸0.08%,棕櫚酸3.90%,亞麻酸11.19%,異棕櫚酸微,十六碳烯酸0.04%。
在小葉白楊中磷脂、甾醇、維生素E、β-胡蘿卜素的含量分別為:2.6%、3.86%、1968mg/kg、60mg/kg,毛白楊分別為:0.96%、2.42%、1478mg/kg、129mg/kg。
氨基酸大體含量(%)為:天冬氨酸0.620,蘇氨酸0.318,絲氨酸0.316,谷氨酸0.801,脯氨酸0.286,甘氨酸0.385,丙氨酸0.414,半胱氨酸0.087,擷氨酸0.418,蛋氨酸0.051,異亮氨酸0.343,亮氨酸0.560,組氨酸0.122,色氨酸0.146,苯丙氨酸0.371,賴氨酸0.448,精氨酸0.0312。
此外,楊樹皮類脂還含有大量的常量元素如:Na 0.12%、Mg 0.09%,P 0.06%,Ca 0.36,K 0.25%,微量元素如:Cu 0.51(mg/Kg),F(xiàn)e 726(mg/Kg),Zn 41(mg/Kg),Co 0.76(mg/Kg),Mn 347(mg/Kg),Se 4.6(mg/Kg),Mu 0.12(mg/Kg)等。
2、楊樹皮類脂的作用機(jī)理
2.1楊樹皮類脂的功效
楊樹皮類脂不僅含有動物體內(nèi)不可缺少的如磷脂、糖脂、固醇等構(gòu)成生物膜的重要結(jié)構(gòu)組分,還能夠促進(jìn)食物中脂溶性維生素A、D、E、K的消化吸收。由于楊樹皮類脂含有豐富的多種天然生物活性物質(zhì)如多種常量、微量元素、多種維生素、18種氨基酸以及大量的不飽和脂肪酸、甾醇、磷脂等。研究表明,楊樹皮類脂可作為生物活性添加劑用于飼料添加劑方面,能夠提高肉用畜禽體重,替代部分維生素,較強(qiáng)的抗熱應(yīng)激作用,提高產(chǎn)蛋量等功能。在預(yù)防、治療畜禽疾病方面,由于楊樹皮類脂含有大量的不飽和脂肪酸,具有類似維生素PP的生物活性,對癬、疥、濕疹、潰瘍、紅斑、瘙癢等皮膚病有顯著療效,亦可作為抗血管硬化的有效藥物,不飽和甾醇可用于治療和預(yù)防動脈粥狀硬化等,在治療非典型性新城疫、大腸桿菌病等疾病方面也具有顯著的療效。
2.1 楊樹皮類脂畜牧領(lǐng)域中的應(yīng)用
楊樹皮類脂富含不飽和脂肪酸、磷脂、甾醇以及未知的生命活性物質(zhì)。必須脂肪酸的最重要功能之一是參與磷脂分子結(jié)構(gòu),也是前列腺素的前體。前列腺素是具有廣泛類激素調(diào)節(jié)作用的化合物,已證明它能夠參與凝血、腎臟的血流動、胃腸活動、內(nèi)分泌和神經(jīng)遞素的釋放、繁殖等功能,特別是對雌性器管的運動機(jī)能具有調(diào)節(jié)作用。生命重要物質(zhì)如腎上腺皮質(zhì)激素、雌激素、雄激素、膽汁酸等在體內(nèi)由甾醇合成。動植物體內(nèi)執(zhí)行結(jié)構(gòu)功能的主要是磷脂和甾醇,與蛋白質(zhì)一起構(gòu)成動植物體細(xì)胞和亞細(xì)胞所有生物膜的組分,調(diào)節(jié)一些有機(jī)物和礦物質(zhì)的選擇性、通透性。
楊樹皮類脂中含有大量維生素E(1730IU/Kg)。維生素E又叫生育酚,在類脂中,以a生育酚含量最高。目前有9種酚(8種生育酚、1種生育三烯酚)具有維生素E的生物學(xué)活性,其中以a-生育酚活性最高,該物質(zhì)為淡黃色油狀物質(zhì),不溶于水而溶于脂肪,不易被酸、堿、熱等因素破壞,但易氧化,動物體對a-生育酚的吸收依賴于脂肪和膽鹽的存在,并隨乳糜微粒吸收和轉(zhuǎn)運。其生理功能是作為生物催化劑參與物質(zhì)代謝,抗氧化作用,與硒協(xié)同保護(hù)飽和脂肪酸,使其不被氧化破壞,保護(hù)和維持細(xì)胞膜的正常脂類結(jié)構(gòu),維持骨骼肌、心肌、平滑肌及其外周血管系統(tǒng)的構(gòu)造與功能,維持動物體組織中核酸含量及核酸的正常代謝;維持動物生殖系統(tǒng)的正常功能。上述理論支持了楊樹皮類脂提高蛋雞產(chǎn)蛋率、提高受精率的試驗結(jié)果。研究表明,楊樹皮類脂及其添加劑具有較強(qiáng)的促進(jìn)蛋雞產(chǎn)蛋,對中型蛋雞,添加0.03%的楊樹皮類脂能使產(chǎn)蛋率穩(wěn)步提高5%以上,對輕型蛋雞,如京白904,添加0.02%的劑量效果最好,使產(chǎn)蛋率提高6%以上,并且,添加純類脂0.03%和添加含有相同量的以松針粉為載體的類脂飼料添加劑,其效果無顯著差異。
由于維生素的補充多數(shù)需要從外界獲得,多數(shù)維生素是輔酶的組成成分,而輔酶與酶蛋白相結(jié)合才能使酶具有催化作用。缺乏維生素A時,動物體表現(xiàn)為受胎率下降、發(fā)生難產(chǎn)、流產(chǎn)、怪胎等,缺乏維生素E時,動物體生殖機(jī)能障礙、精子數(shù)減少、睪丸退化、不孕、流產(chǎn)、喪失生育能力,同時對內(nèi)分泌系統(tǒng)的發(fā)育以及機(jī)體的代謝活動產(chǎn)生不良的影響,并造成肌肉及神經(jīng)系統(tǒng)機(jī)能失調(diào),運動器官發(fā)生麻痹,肝機(jī)能障礙,肌肉萎縮變白,心臟衰弱等癥狀。由于楊樹皮類脂中維生素含量豐富,因此可代替部分多維素。試驗飼喂AA肉雞854只,試驗期為56天,對照組多維素以標(biāo)準(zhǔn)量添加,試驗組以標(biāo)準(zhǔn)量的1/4量添加,另外添加0.2%楊樹皮飼料添加劑,其它條件相同。試驗結(jié)果表明,試驗組無任何多維素缺乏癥狀;試驗組比對照組多耗料114.5克/只,但飼料成本降低1.7%—2.1%、成活率提高6%、飼料轉(zhuǎn)化率對照組2.16:1,試驗組2.04:1。用加有某品牌多維的配合飼料飼喂法國巴巴里種鴨,種蛋受精率降至40%,當(dāng)飼料中加入1.5%楊樹皮類脂后受精率在2周內(nèi)提高到91.5%。
動物生長發(fā)育必需的氨基酸如賴氨酸、蛋氨酸、色氨酸、精氨酸、組氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、擷氨酸等在楊樹皮類脂中大量存在。對雛雞、育成豬,由于在生長發(fā)育階段要求限制性氨基酸存在,才能促使生長迅速如蛋氨酸、賴氨酸、蘇氨酸等。這些氨基酸通過飼喂楊樹皮類脂可以得到很好的補充。在前蘇聯(lián)B.и.希尼欽等人在列寧格勒勝利農(nóng)場以山楊樹皮類脂為添加劑進(jìn)行試驗,喂養(yǎng)俄羅斯白豬,每千克活重每日添加量0.05g,比對照組增重46.5%。在康多波加養(yǎng)禽場對蛋雞進(jìn)行飼喂試驗,每千克活重每日添加0.1g,產(chǎn)蛋率提高12%~15%,雞的肝臟中,類胡蘿卜素含量提高5%~6%,維生素E增加50%,蛋中胡蘿卜素、維生素A、B2含量都增加。北京農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院通過試驗觀察到在飼料中添加0.1%~0.2% 楊樹皮類脂飼料添加劑能夠使肉用仔雞體重較對照組增高9%。
亞油酸與亞麻酸在對抗動物機(jī)體對抗熱應(yīng)激方面具有重要的作用。在對高溫季節(jié)蛋雞生產(chǎn)性能的影響試驗中,添加0.01%的楊樹皮類脂不足以對抗因高溫引起蛋雞產(chǎn)蛋性能變化的影響,產(chǎn)蛋率變幅隨溫度的升高而波動較大,0.02%的劑量較0.01%的劑量抗熱應(yīng)激的效果好,0.03%的劑量效果最好,產(chǎn)蛋率在較高的溫度范圍內(nèi)只發(fā)生了較小的波動,0.04%的添加劑量雖然產(chǎn)蛋率變幅較小,但整個試驗期內(nèi)產(chǎn)蛋率呈下降趨勢,說明0.04%的添加量已過量,這可能是由于添加物中含游離脂肪酸過多,代謝產(chǎn)物中過氧化物含量高,產(chǎn)蛋雞的正常產(chǎn)蛋能力受到抑制的緣故。另據(jù)邯鄲市肉種雞廠利用楊樹皮類脂作為飼料添加劑進(jìn)行飼喂試驗的結(jié)果表明,種蛋受精率分別為試驗組92.98%、對照組82.38%,孵化率分別為試驗組87.77%、對照組80.50%,差異極顯著。
2.2獸醫(yī)學(xué)領(lǐng)域
作為具有生物學(xué)活性的物質(zhì),楊樹皮類脂中含有大量的多糖類、有機(jī)酸、甾醇、甙類、黃酮類物質(zhì),這些物質(zhì)在動物體內(nèi)協(xié)調(diào)統(tǒng)一,大大提高動物體的免疫機(jī)能。多糖類具有促胸腺體液反應(yīng)、刺激網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng),提高機(jī)體特異性免疫反應(yīng)能力;有機(jī)酸具有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的作用,能夠刺激和促進(jìn)單核吞噬細(xì)胞功能,對抗免疫抑制對免疫器官的抑制作用;甙類能夠加速抗體的產(chǎn)生、促進(jìn)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化和增強(qiáng)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)功能等作用。
山東濱州博萊威生物技術(shù)有限
公司
在國際上首次將楊樹皮類脂用于畜禽用疫苗作為免疫增強(qiáng)劑并獲得成功,并于
2002
年獲得中試批號,所研制成功的禽用類脂系列疫苗產(chǎn)品包括復(fù)合新城疫、傳支、減蛋、傳染性鼻炎、霉形體、大腸桿菌、禽霍亂、傳染性漿膜炎等。利用楊樹皮類脂作為免疫佐劑用于制備獸用滅活疫苗具有以下優(yōu)點:(
1
)產(chǎn)生堅強(qiáng)免疫力的時間持久:電鏡下的類脂顆粒能與病毒粒子形成復(fù)雜的免疫刺激復(fù)合物,類脂呈彌漫性存在,病毒粒子散在、鑲嵌其中,并且病毒粒子仍保持了完整的形態(tài)結(jié)構(gòu),從而使疫苗釋放抗原的時間大大延長。實驗表明:
30
日齡初免激發(fā)機(jī)體免疫系統(tǒng)的初次應(yīng)答,
60
日齡加強(qiáng)免疫,引起更為強(qiáng)烈的免疫反應(yīng),使抗體很快升高并維持在一個高水平狀態(tài),持續(xù)時間可可長達(dá)
8-12
個月。(
2
)
免疫空白期短:
電子顯微鏡下的疫苗中存在少量裸露游離的病毒粒子和類脂佐劑,接種機(jī)體后可迅速刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答,
5-7天即可產(chǎn)生堅強(qiáng)免疫力,
應(yīng)答時間比油佐劑疫苗提前
10
天左右
。
(
3
)刺激性小,無副作用:
實驗表明,傳統(tǒng)疫苗由于采用礦物油為佐劑制備疫苗,因此,刺激性大、毒副作用強(qiáng),引起機(jī)體長時間處于免疫力低下期,通常這一時間持續(xù)24-48小時,病原菌很容易在這段時間乘虛而入造成免疫后24-48小時內(nèi)爆發(fā)疾病
研究表明,該疫苗注射后,無注苗反應(yīng),免疫所造成的應(yīng)激小,不影響精神、食欲,注射局部無腫脹,無壞死,而且它本身是一種純天然物質(zhì),無殘留,符合動物性食品衛(wèi)生出口要求;(
4
)保存運輸方便:該疫苗打破了傳統(tǒng)疫苗保存溫度的限制,可在較大的溫度范圍下保存運輸,實驗研究表明,
0-30
℃環(huán)境中保存
6
個月不變色、不分層,不影響免疫期等。
研究表明,以25%的楊樹皮類脂治療兔、牛疥癬,類脂具有較強(qiáng)的向痂皮內(nèi)滲透的作用,這一作用對不進(jìn)行痂皮處理的患部特別有利,它可以很快的滲入痂皮內(nèi)部起殺滅螨蟲的作用,類脂還具有較快的止癢作用,涂藥后約經(jīng)3、4小時,患病動物變安靜,不再有啃咬現(xiàn)象。類脂對螨蟲卵亦有破壞作用,在涂藥后3小時,鏡檢患部皮膚,螨蟲大多死亡、螨蟲卵變形,6小時后,無活螨,涂藥后24小時,患部痂皮大部分脫落,皮膚開始愈合。
將楊樹皮類脂與吸附劑按一定比例混合,制成含10%的類脂制劑,在應(yīng)用時與飼料均勻混合,使料中純類脂終濃度為0.2%,然后在病雞群中應(yīng)用。結(jié)果表明,楊樹皮類脂對肉雞大腸桿菌病有明顯的療效,飼喂后第2天排稀便癥狀便明顯減輕,死亡減少,至第5天,病雞停止死亡,排便正常。在楊樹皮類脂的抑菌試驗中研究也發(fā)現(xiàn),無論是純楊樹皮類脂還是50%的類脂油溶液均有明顯的抑菌作用。另外在治療雛雞球蟲病時,類脂不能阻礙雞球蟲在腸道內(nèi)生長發(fā)育,但可降低雞的死亡率20%。在治療蛋雞非典型性新城疫時,飼喂0.2%類脂添加劑僅3天,病雞排稀便便明顯減少,死亡停止。另外對治療因寒冷、轉(zhuǎn)群等應(yīng)激引起的腹瀉也有明顯的療效。
3 結(jié)語
由于楊樹皮類脂所具有的高效生物學(xué)活性,被應(yīng)用于廣泛的領(lǐng)域,同時利用楊樹皮萃取類脂,有效的解決了工業(yè)生產(chǎn)中原料浪費的問題,使資源得以充分利用。在畜牧獸醫(yī)方面,楊樹皮類脂不但可以提高畜禽的日增重率、產(chǎn)蛋率、受精率,而且,對畜禽疾病的預(yù)防與治療亦有顯著的效果。但是由于楊樹皮類脂成分復(fù)雜,并且作為植物萃取液,發(fā)揮作用時又常常是各種成分協(xié)同進(jìn)行,因此,對楊樹皮類脂能夠提高畜禽生產(chǎn)率和預(yù)防治療畜禽疾病的機(jī)理有待于進(jìn)一步的研究。
創(chuàng)造綠色環(huán)境的生物技術(shù)
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禽用類脂滅活疫苗系列產(chǎn)品
1
、類脂疫苗的穩(wěn)定性
類脂作為一種純天然植物提取物,
不僅含有動物體內(nèi)不可缺少的如磷脂、糖脂、固醇等構(gòu)成生物膜的重要結(jié)構(gòu)組分,還含有豐富的多種天然生物活性物質(zhì)如常量、微量元素、多種維生素、18種氨基酸以及大量的不飽和脂肪酸、甾醇、磷脂等,不但能夠促進(jìn)食物中脂溶性維生素A、D、E、K的消化吸收,而且對于改善畜禽生產(chǎn)性能、提高機(jī)體免疫力方面具有顯著功效。
由于類脂成分復(fù)雜,因此,在制備佐劑的過程中,為使這些有效成分盡量的得到提取,就不可避免的會將各種物質(zhì)甚至由于過濾篩的影響出現(xiàn)一些灰色細(xì)小的沉淀成分,因此,在制備疫苗的過程中,往往能夠看到一段時間后,疫苗的包裝瓶底部會出現(xiàn)少許淺黃色、灰色沉積,搖晃后即可溶解于疫苗液中。實驗表明,這些成分并不影響機(jī)體的吸收與利用,而且對于疫苗本身而言,這些物質(zhì)的存在在一定程度上能夠提高免疫效果的確實性。
系列產(chǎn)品
1
、類脂疫苗的穩(wěn)定性
類脂作為一種純天然植物提取物,
不僅含有動物體內(nèi)不可缺少的如磷脂、糖脂、固醇等構(gòu)成生物膜的重要結(jié)構(gòu)組分,還含有豐富的多種天然生物活性物質(zhì)如常量、微量元素、多種維生素、18種氨基酸以及大量的不飽和脂肪酸、甾醇、磷脂等,不但能夠促進(jìn)食物中脂溶性維生素A、D、E、K的消化吸收,而且對于改善畜禽生產(chǎn)性能、提高機(jī)體免疫力方面具有顯著功效。
由于類脂成分復(fù)雜,因此,在制備佐劑的過程中,為使這些有效成分盡量的得到提取,就不可避免的會將各種物質(zhì)甚至由于過濾篩的影響出現(xiàn)一些灰色細(xì)小的沉淀成分,因此,在制備疫苗的過程中,往往能夠看到一段時間后,疫苗的包裝瓶底部會出現(xiàn)少許淺黃色、灰色沉積,搖晃后即可溶解于疫苗液中。實驗表明,這些成分并不影響機(jī)體的吸收與利用,而且對于疫苗本身而言,這些物質(zhì)的存在在一定程度上能夠提高免疫效果的確實性。
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