畜牧人
標(biāo)題: 現(xiàn)代生物工程制劑：豬生長素釋放因子基因質(zhì)粒 [打印本頁]
作者: iamtao216 時間: 2008-4-8 21:06
標(biāo)題: 現(xiàn)代生物工程制劑：豬生長素釋放因子基因質(zhì)粒
四川農(nóng)業(yè)大學(xué)、東北農(nóng)業(yè)大學(xué)、中國農(nóng)科院畜牧所都曾做過大量關(guān)于豬生長激素釋放因子（pGRF）基因質(zhì)粒的研究，本品在廣東、福建規(guī)模豬場試用效果顯著，斷奶至出欄階段增重可以提高7%-10%，料肉比降低0.2-0.3，明顯提高豬抗病能力，是生物技術(shù)給畜牧業(yè)帶來的革命性的產(chǎn)品，大大提高養(yǎng)殖效率。
豬生長素釋放因子基因質(zhì)粒（安牠靈）
pGRF
DNA
Porcine Growth Releasing Factor DNA
豬生長素釋放因子基因質(zhì)粒（獸用）
【藥品名稱】
通用名稱：
豬生長素釋放因子DNA
商品名稱：
安牠靈注射液
英文名稱：
Porcine Growth Releasing Factor DNA
漢語拼音：
Zhukangling Zhusheye
【有效成份】
本品主要成份及其化學(xué)名稱：雙鏈環(huán)狀脫氧核糖核酸(DNA)
化學(xué)組成
pGRF DNA由5,195堿基對組成。其堿基組成如下：
|
| A
| G
| C
| T
|
| 堿基數(shù)目
| 1234
| 1344
| 1459
| 1158
|
| %
| 24
| 26
| 28
| 22
|
質(zhì)粒結(jié)構(gòu)
pGRF質(zhì)粒由下列各部分組成
|
|
|
|
|
|
| file:///C:/DOCUME~1/QINSHE~1/LOCALS~1/Temp/msohtml1/01/clip_image001.gif |
|
|
| file:///C:/DOCUME~1/QINSHE~1/LOCALS~1/Temp/msohtml1/01/clip_image002.gif |
|
|
file:///C:/DOCUME~1/QINSHE~1/LOCALS~1/Temp/msohtml1/01/clip_image003.gifOri
pUC19復(fù)制起點
KanR
卡那霉素抗性基因
file:///C:/DOCUME~1/QINSHE~1/LOCALS~1/Temp/msohtml1/01/clip_image004.gifPromoter
豬骨骼α-肌動蛋白激活子和增強子
pGRF
豬生長素釋放因子和前導(dǎo)序列cDNA
Poly A
聚腺苷酸信號和3’非翻譯區(qū)
質(zhì)粒內(nèi)切酶圖譜
利用內(nèi)切酶圖譜鑒定pGRF質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)，經(jīng)內(nèi)切酶切斷的pGRF，用瓊脂糖凝膠(1.2 %濃度)電泳顯現(xiàn)片段)。
| 內(nèi)切酶名稱
| 內(nèi)切酶位點
| 片段長度(bp)
|
| Xho I
| 3
| 485, 2652, 2058
|
| Hind III
| 2
| 4527, 668
|
file:///C:/DOCUME~1/QINSHE~1/LOCALS~1/Temp/msohtml1/01/clip_image006.gif
由左至右：第1和第27行：標(biāo)記DNA (1 kb + Ladder,Invitrogen Inc.)
第2至6行：完整質(zhì)粒
第7至26行：質(zhì)粒的內(nèi)切酶圖譜
【性狀】
本品溶于生理鹽水或鹽水加佐劑，呈無色透明液體。
【藥理作用】
該質(zhì)粒為表達生長素釋放因子pGRF的載體。經(jīng)肌肉注射后，目的基因pGRF具有在肌肉細胞內(nèi)特異表達豬GRF蛋白的功能，刺激腦垂體產(chǎn)生內(nèi)源性的生長激素(GH)，再促進類胰島素生長因子(IGF-1)分泌，通過促進仔豬小腸絨毛的發(fā)育，最終促進豬的生長和降低料重比,提高豬的生產(chǎn)性能。同時，還具有增強豬體的免疫力以及緩解細菌性引起的高熱肺炎癥的功效。
【毒理作用】
本品無致突變作用；在亞急性毒性評價中，對豬單次肌肉注射5倍正常劑量的pGRF DNA，連續(xù)135天觀察和檢測，受試豬無任何不良的生理生化反應(yīng)；其血液學(xué)指標(biāo)、血液生化指標(biāo)和器官系數(shù)等檢測結(jié)果正常；病理組織學(xué)檢查未表現(xiàn)出劑量反應(yīng)關(guān)系，也不發(fā)生隨試驗期延長而加重的變化，因此，對豬的亞急性毒性較小，試驗使用的劑量安全性較高。出欄時的殘留水平至少比先前建立的“安全口服劑量(20mg/kg)”還低6250萬倍。
由農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心主持完成了急性經(jīng)口毒性試驗、小鼠骨髓微核試驗、精子畸形試驗、Ames試驗、90天喂養(yǎng)(亞急性毒性)試驗及傳統(tǒng)致畸試驗，結(jié)果表明肌肉注射豬生長素釋放因子(pGRF) DNA生成豬肉食用性是安全的。
綜上所述，可以認為pGRF質(zhì)粒對豬、人及環(huán)境都是安全的。
【藥代動力學(xué)】
本品注射入肌肉后，進入到注射部位的肌肉細胞，但不會整合到寄主細胞的基因組中，以非組合的形式存在并表達。藥效在注射后可持續(xù)至35天；在豬只出欄前，絕大部分質(zhì)粒被降解消失, 注射部位的質(zhì)粒殘留低于注射量的0.0003%。在注射后7日內(nèi),雖然有極少量漂散到心肝脾腎等內(nèi)臟器官和血液中，但在血漿中DNA酶作用下很快全部被降解清除掉,各個臟器和血液內(nèi)檢測不出殘留。
注射后35天，受試豬血液中GRF、GH和IGF-1含量水平得到提高，但都在正常生理范圍內(nèi)。在出欄階段(注射后135天)，受試組與對照組已完全沒有差異。
【功能與主治】
提高生產(chǎn)性能，促進生長；降低料重比，提高飼料利用率；縮短生長周期，提早出欄以及不會降低豬肉品質(zhì)；增強仔豬機體免疫力，提高仔豬對高溫的耐受性，緩解細菌引起的高熱肺炎，減少仔豬死亡率。
【用法用量】
肌肉注射。在仔豬35-40日齡時，一次性(臀部)肌肉注射2ml(含4.5mg)。
【不良反應(yīng)】
注射本品無任何不良反應(yīng)。
【停藥期】
考慮到質(zhì)粒的殘留,豬出欄前一個月停止用藥。由于大中豬的注射增重效果不明顯,建議只對35-40日齡的仔豬使用。因此,實際使用中不存在停藥期問題。
【注意事項】
1
注射前針頭消毒。
2
每注射10頭，要更換針頭。建議使用16g規(guī)格的針頭。
3
插入(臀部)肌肉后，輕輕注射，并輕柔注射部位；盡量避免pGRF注射液回流溢出體外。
4
輕搖混勻pGRF注射液并待其溫度為室溫時使用。
【藥物相互作用】
未發(fā)現(xiàn)本品與其它任何藥物發(fā)生相互作用，造成藥效減低或其它毒副作用。
【藥物過量】
不建議過量使用，但使用過量也不會出現(xiàn)任何不良癥狀。
【規(guī)格】
4.5mg /2ml (支)
【貯藏】
4℃，避光密封保存。
【包裝】
50ml/瓶(25頭份/瓶)，20瓶/盒，6盒/箱
【有效期】
二年
【批準(zhǔn)證書】中華人民共和國農(nóng)業(yè)生物安全證書(生產(chǎn)應(yīng)用)-農(nóng)基安證字(2003)第008號
【生產(chǎn)企業(yè)】
企業(yè)名稱：香港格蘭柏生化科技有限公司
地
址：香港新界沙田生物科技路2號
作者: boarsow 時間: 2008-4-11 00:13
樓主：不好意思，我來給你潑潑涼水了！
之前，我做論文的時候就有實驗室的哥們做的是pGRF，且不說其效果不確切，光注射質(zhì)粒造成的豬只體內(nèi)轉(zhuǎn)座子片斷的存在極易產(chǎn)生局部遺傳基因的改變。
豬肉是吃的，不是做試驗的，這樣的豬肉基因安全上存在一定的隱患。
我就不明白了，明明可以表達成蛋白質(zhì)，干嗎不生產(chǎn)pGRF蛋白，卻一定要注射什么鬼質(zhì)粒。
希望樓主慎重推廣
作者: boarsow 時間: 2008-4-11 00:17
由農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心主持完成了急性經(jīng)口毒性試驗、小鼠骨髓微核試驗、精子畸形試驗、Ames試驗、90天喂養(yǎng)(亞急性毒性)試驗及傳統(tǒng)致畸試驗，結(jié)果表明肌肉注射豬生長素釋放因子(pGRF) DNA生成豬肉食用性是安全的。
這個是忽悠，這些片面性的試驗不能保證DNA生成食品的安全性，基因突變是概率事件，不能用簡單的幾次試驗來確信??！:5s:
作者: iamtao216 時間: 2008-4-11 14:08
搞成GRF蛋白就成激素了，殘留更厲害，還不方便使用，持續(xù)期較短，如果你沒有進行深入了解，請謹慎發(fā)言，沒有研究就沒有發(fā)言權(quán)。社會在進步，科技在發(fā)展，當(dāng)初酶的使用不適也經(jīng)歷了從認識到普及的過程嗎，任何新事物總要時間和實踐來檢驗。目前農(nóng)業(yè)部已經(jīng)給產(chǎn)品發(fā)了“轉(zhuǎn)基因安全證書”，安全性是沒有問題的，不要談轉(zhuǎn)基因就談虎色變，就像當(dāng)初教會抵制“日心說”一樣。相信生物技術(shù)會給我們帶來更美好的生活和更高效的資源利用！
[ 本帖最后由 iamtao216 于 2008-4-11 14:10 編輯 ]
作者: iamtao216 時間: 2008-4-19 15:15
豬生長激素釋放因子基因質(zhì)粒(安牠靈)推廣中客戶關(guān)心問題解答
北京誠益農(nóng)生物技術(shù)有限公司 新技術(shù)產(chǎn)品部
1. 安牠靈的產(chǎn)品性質(zhì)、安全性？
本產(chǎn)品由于其化學(xué)成分是核酸，是豬體內(nèi)所本身所具有的物質(zhì)，對豬的健康沒有任何危害，對畜產(chǎn)品安全和人類健康也沒有任何負面影響，也不會對環(huán)境生物安全有任何潛在隱患，是根本不同于“瘦肉精”類的綠色、安全、無公害產(chǎn)品，是生物技術(shù)對養(yǎng)豬業(yè)、對農(nóng)民、對消費者帶來的福音。作為嚴格管制的農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品，2000年1月向中國政府提出申請，2001年7月就被農(nóng)業(yè)部“基因安全委員會”審批并發(fā)放中試批文。本產(chǎn)品的安全性是100%的。
通過“三致”檢測實驗表明，本品無致畸、致癌、致突變作用；在亞急性毒性評價中，對豬單次肌肉注射5倍正常劑量的pGRF DNA，連續(xù)135天觀察和檢測，受試豬無任何不良的生理生化反應(yīng)；其血液學(xué)指標(biāo)、血液生化指標(biāo)和器官系數(shù)等檢測結(jié)果正常；病理組織學(xué)檢查未表現(xiàn)出劑量反應(yīng)關(guān)系，也不發(fā)生隨試驗期延長而加重的變化，因此，對豬的亞急性毒性較小，試驗使用的劑量安全性較高。出欄時的殘留水平至少比先前建立的“安全口服劑量(20mg/kg)”還低6250萬倍。
由農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心主持完成了急性經(jīng)口毒性試驗、小鼠骨髓微核試驗、精子畸形試驗、Ames試驗、90天喂養(yǎng)(亞急性毒性)試驗及傳統(tǒng)致畸試驗，結(jié)果表明肌肉注射豬生長素釋放因子(pGRF) DNA生成豬肉食用性是安全的。
綜上所述，可以認為pGRF質(zhì)粒對豬、人及環(huán)境都是安全的。
2. 安牠靈在實際生產(chǎn)中的效果？
經(jīng)華南農(nóng)業(yè)大學(xué)、四川農(nóng)業(yè)大學(xué)及廣東、河北、浙江、福建等地各大豬場等先后對本產(chǎn)品在養(yǎng)豬生產(chǎn)上的使用效果做的長期、大量的精確測定表明，本產(chǎn)品的作用效果主要表現(xiàn)在以下幾個方面：
加快商品豬生長速度。綜合使用結(jié)果表明本產(chǎn)品可提高生長育肥豬增重7%～10%，或提前豬90千克出欄時間7～15天，節(jié)省飼料40～50千克/頭，加快豬群周轉(zhuǎn)，提高出欄率，每頭豬可增加效益70～120元，投入產(chǎn)出比1:2.0～4.0。
改善商品豬胴體品質(zhì)。本產(chǎn)品對商品豬胴體品質(zhì)有明顯的改善作用，可使瘦肉率提高3%～6%，眼肌面積提高10%～14%，三點背膘厚降低5%～8%，并增加肌間脂肪，改善肉質(zhì)風(fēng)味，使豬肉品質(zhì)提高一個等級。
另通過生產(chǎn)實踐發(fā)現(xiàn)，本產(chǎn)品還可以增強仔豬機體免疫力，提高仔豬對高溫的耐受性，緩解細菌引起的高熱肺炎，降低仔豬死亡率。
3. 安牠靈的注射是否會影響豬場免疫程序？是否影響其它疫苗的效果？
經(jīng)華南農(nóng)業(yè)大學(xué)、廣東東進農(nóng)牧集團惠東豬場試驗和使用結(jié)果，注射本產(chǎn)品可以促進仔豬的細胞免疫，增加淋巴細胞的含量，增強白細胞的吞噬作用，提高機體抗病能力；另和豬瘟疫苗、偽狂犬疫苗、PRRS疫苗等豬場常用苗同時注射，能增強疫苗效價，提高抗體滴度。因此注射本產(chǎn)品不會對其他疫苗效果造成不良影響，不會影響豬場正常免疫程序。
4. 安牠靈注射后有無不良反應(yīng)？
經(jīng)大量推廣實踐證明，本產(chǎn)品注射后無過敏、應(yīng)激等不良反應(yīng)。
5. 是否會對肉質(zhì)產(chǎn)生影響？對豬生長發(fā)育產(chǎn)生影響？
四川農(nóng)業(yè)大學(xué)關(guān)于pGRF基因質(zhì)粒對商品豬肉質(zhì)性狀的影響研究結(jié)果表明，注射本產(chǎn)品均可降低背膘厚，增大眼肌面積。且其肉色和大理石紋評分均在3～4分的正常范圍內(nèi)。45min pH值均高于5.8，24h pH值均低于6.0，都在正常范圍內(nèi)。滴水損失值也正常。這表明，商品豬注射本產(chǎn)品對胴體品質(zhì)有提高，能提高豬肉等級，但對肉質(zhì)無不良影響。
華南農(nóng)業(yè)大學(xué)研究表明，商品豬注射本產(chǎn)品后心、肺、腎、肝、脾等內(nèi)臟器官生長發(fā)育正常，無不良影響。
6. 安牠靈注射后對豬群管理和飼料有什么特殊要求？
商品豬注射本產(chǎn)品后要加強豬群健康監(jiān)測，保證豬群健康，這也是保證產(chǎn)品效果的基礎(chǔ)；飼喂采取自由采食、保證清潔飲水；飼料養(yǎng)分全價、平衡；如可稍提高蛋白比例(1%～2%)，并適量提高賴氨酸比例，這樣可以保證機體蛋白合成效率，則能更好發(fā)揮產(chǎn)品效果。其他飼養(yǎng)管理程序按豬場原有程序進行，無特殊要求。
7. 注射日齡，中大豬注射有沒有效果？
本產(chǎn)品非激素類產(chǎn)品，完全按照動物生理特點發(fā)揮效果，因此注射－轉(zhuǎn)化－表達－發(fā)揮效果有一個較長的過程。通過生產(chǎn)實踐證明，商品豬35日齡、50日齡、65日齡、80日齡注射本產(chǎn)品后，生產(chǎn)效果呈階梯狀下降，35日齡注射效果最佳。因此建議在仔豬階段注射，在中大豬階段使用本產(chǎn)品投入產(chǎn)出比較小。
[ 本帖最后由 iamtao216 于 2008-4-19 15:17 編輯 ]
作者: iamtao216 時間: 2008-5-5 15:56
這么好的東西就沒人關(guān)注？在原料、飼養(yǎng)成本高漲的情況下，應(yīng)該進行一些變革。
| 歡迎光臨 畜牧人 (http://ffers.com.cn/) |
Powered by Discuz! X3.5 |