畜牧人

標(biāo)題: 干擾素相關(guān)技術(shù)匯總（望版主加精加亮） [打印本頁(yè)]
作者: futingbin    時(shí)間: 2008-11-16 12:03
標(biāo)題: 干擾素相關(guān)技術(shù)匯總（望版主加精加亮）
豬用干擾素

干擾素是一組具有多種功能的活性蛋白質(zhì)（主要是糖蛋白），是一種由單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子。它們?cè)谕N細(xì)胞上具有廣譜的抗病毒、影響細(xì)胞生長(zhǎng)和分化、調(diào)節(jié)免疫功能等多種生物活性。

干擾素的分類

根據(jù)干擾素蛋白質(zhì)的氨基酸結(jié)構(gòu)、抗原性和細(xì)胞來源，可將其分為：IFN-α、IFN-β、IFN-γ。IFN-ω屬于IFN-α家族，其結(jié)構(gòu)和大小與其它IFN-α稍有差異，但抗原性有較大的不同。

現(xiàn)在公認(rèn)IFN-β和IFN-γ只有一個(gè)亞型，而IFN-α有約二十余個(gè)亞型。

自80年代以來，許多研究顯示，干擾素(尤其是α-干擾素及γ-干擾素)除具有抗病毒、免疫調(diào)節(jié)的作用外，還具有明顯的抗細(xì)胞增殖作用。因此，目前干擾素已被用于治療多種白血病。

什么叫干擾素（IFN）？

自1957年發(fā)現(xiàn)干擾素以來，已知曉干擾素是真核細(xì)胞（真核細(xì)胞：微生物按其結(jié)構(gòu)、組成等差異，可分為三大類：①真核細(xì)胞型微生物：細(xì)胞核的分化程度較高，有核膜、核仁和染色體；胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器完整。真菌屬此類。②非細(xì)胞型微生物：體積微小，能通過除菌濾器；沒有典型的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，無產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng)，只有在宿主活細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)繁殖。病毒屬之。③原核細(xì)胞型微生物：僅有原生核質(zhì)，無核膜或核仁，細(xì)胞器不很完整。此類微生物眾多，有細(xì)菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體和放線菌。）對(duì)各種刺激作出反應(yīng)而自然形成的一組復(fù)雜的蛋白質(zhì)。如果用醫(yī)學(xué)上更為詳細(xì)的說法則是：干擾素是由病毒和其他種類的干擾素誘導(dǎo)劑，刺激網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞以及體細(xì)胞所產(chǎn)生的一種糖蛋白。這種蛋白具有多種生物活性，包括抗增殖、免疫調(diào)節(jié)、抗病毒和誘導(dǎo)分化作用。

干擾素的相對(duì)分子質(zhì)量小，對(duì)熱穩(wěn)定，4℃可保存很長(zhǎng)時(shí)間，-20℃可長(zhǎng)期保存其活性，56℃則被破壞，pH（酸堿度）2~10范圍內(nèi)干擾素不被破壞。自然就能產(chǎn)生干擾素，經(jīng)一定的制劑加工過程也能制造成藥物-干擾素制劑。

干擾素制劑如何分類？

要了解這一點(diǎn)，先要知道人天然干擾素的分類。天然干擾素分為三種多肽：IFN-α、IFN-β及IFN-γ。IFN-α和IFN-β分別由白細(xì)胞和成纖維細(xì)胞產(chǎn)生，在酸性環(huán)境中穩(wěn)定，并且結(jié)合相同的受體。而IFN-γ主要由T淋巴細(xì)胞分泌，對(duì)酸不穩(wěn)定，結(jié)合的受體與前兩者不同，IFN-γ的免疫刺激活性在三者中最強(qiáng)。IFN-β和IFN-γ只由單個(gè)基因編碼，而IFN-α由至少23個(gè)不同基因，群聚在第9對(duì)染色體上，編碼產(chǎn)生多于15種的功能蛋白。

干擾素制劑的分類，按制作方法不同，可分為利用基因工程生產(chǎn)的重組α-干擾素和人自然干擾素兩大類。

基因工程干擾素再按基因表達(dá)分子結(jié)構(gòu)和抗原性可分為α、β、γ型，同一型內(nèi)按氨基酸組成差異再分20多個(gè)亞型：α1、α2、α3……在同一亞型內(nèi)又因氨基酸的差異而細(xì)分，如α2：有三種：α2a、α2b、α2c。

自然干擾素是通過分別刺激淋巴母細(xì)胞和體白細(xì)胞，然后提純制備而得。目前市場(chǎng)供應(yīng)的只有由類淋巴母細(xì)胞產(chǎn)生的干擾素（IFN）…αN1，是天然的多亞型的混合物。臨床用的主要是重組制劑，有α2a、α2b和α2b。

臨床上常用的干擾素有哪些制劑？

1、自然干擾素

體淋巴母細(xì)胞樣多亞型天然干擾素（IFN-N1），葛蘭素威康公司（英國(guó)）生產(chǎn)

2、白細(xì)胞重組干擾素


IFN-α2a：羅氏公司（瑞士）生產(chǎn)的羅擾素，有300萬U/支和450萬U/支兩種劑量，粉劑和水劑兩種劑型；
IFNα2b：先靈葆雅（美國(guó)）公司生產(chǎn)的干擾能300萬U/支和500萬U/支，均為粉劑；天津華立司生產(chǎn)的，300萬U/支，粉劑
3、復(fù)合干擾素

特威公司（英國(guó)）生產(chǎn)的復(fù)合干擾素其為針對(duì)治療目的而設(shè)計(jì)的一種非體能自然產(chǎn)生的生物合成干擾素。干復(fù)津的特異活性被定位每毫克蛋白質(zhì)功能單位，在體外已證實(shí)其活性至少比α2a或α2b干擾素高出5倍，干復(fù)津所用的微克是質(zhì)量測(cè)量單位，而其他干擾素所用的國(guó)際單位出）是活性測(cè)量單位。干復(fù)津有9μg、15μg兩種劑量的劑型。其9μg的療效與300萬U的IFN-α2b相似。

干擾素有哪些不良反應(yīng)?

1、 發(fā)熱：治療第一針常出現(xiàn)高熱現(xiàn)象。以后逐漸減輕或消失；

2、感冒樣綜合征：多在注射后2～4個(gè)小時(shí)出現(xiàn)。有發(fā)熱、寒戰(zhàn)、乏力、肝區(qū)痛、背痛和消化系統(tǒng)癥狀，如惡心、食欲不振、腹瀉及嘔吐。治療2～3次后逐漸減輕。可于注射后2小時(shí)，給撲熱息痛等解熱鎮(zhèn)痛劑，對(duì)癥處理，不必停藥

3、骨髓抑制：出現(xiàn)白細(xì)胞及血小板減少，一般停藥后可自行恢復(fù)。治療過程中白細(xì)胞及血小板持續(xù)下降，要嚴(yán)密觀察血象變化。當(dāng)白細(xì)胞計(jì)數(shù)＜3.0×10^9/L或中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)＜1.5×10^9/L，或血小板計(jì)數(shù)＜40×10^9/L時(shí)，需停藥，并嚴(yán)密觀察，對(duì)癥治療，注意出血傾向。血象恢復(fù)后可重新恢復(fù)治療。但需密切觀察。

4、神經(jīng)系統(tǒng)癥狀：如失眠、焦慮、抑郁、興奮、易怒、精神病。出現(xiàn)抑郁及精神病癥狀應(yīng)停藥。

5、少見的副反應(yīng)有：如癲癇、腎病綜合征、間質(zhì)性肺炎和心律失常等。出現(xiàn)這些疾病和癥狀時(shí)，應(yīng)停藥觀察。

6、誘發(fā)自身免疫性疾?。喝缂谞钕傺?、血小板減少性紫癜、溶血性貧血、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、紅斑狼瘡樣綜合征、等，停藥可減輕。

由滅活的或活的病毒作用于易感細(xì)胞后，由易感細(xì)胞基因組編碼而產(chǎn)生的一組抗病毒物質(zhì)。除病毒以外，細(xì)菌、真菌、原蟲、立克次氏體、植物血凝素以及某些人工合成的核苷酸多聚物（如聚肌胞）等都能刺激機(jī)體產(chǎn)生干擾素。凡能刺激機(jī)體產(chǎn)生干擾素的物質(zhì)統(tǒng)稱為干擾素誘生劑。干擾素的主要成分是糖蛋白，按其抗原性不同可分為α、β和γ三種主要類型。其活性及抗原性皆取決于分子中的蛋白質(zhì)，而與其糖基無關(guān)。脊椎動(dòng)物細(xì)胞是產(chǎn)生干擾素的主要細(xì)胞，但無脊椎動(dòng)物（甲殼類及昆蟲）及植物細(xì)胞（如丁香等）亦發(fā)現(xiàn)有干擾素類似物。干擾素對(duì)細(xì)胞表面的干擾素受體有高度親和力，它與受體的相互作用可激發(fā)細(xì)胞合成新的mRNA，產(chǎn)生多種效應(yīng)蛋白，發(fā)揮抗病毒、抗種瘤及免疫調(diào)節(jié)等作用。干擾素不具有特異性，即由一種病毒所誘發(fā)產(chǎn)生的干擾素，能抗御多種病毒甚至其他的胞內(nèi)寄生的病原生物的能力。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明，干擾素能抑制多種致癌性DNA病毒和RNA病毒，從而抑制病毒誘發(fā)的腫瘤生長(zhǎng)。干擾素制劑可用以治療某些病毒性感染（如慢性乙型肝炎、帶狀皰疹等），以及治療多種腫瘤（如骨肉瘤、白血病、多發(fā)性骨髓瘤等）。
作者: futingbin    時(shí)間: 2008-11-16 12:06
標(biāo)題: 干擾素治療的不良反應(yīng)如何應(yīng)對(duì)？
現(xiàn)在長(zhǎng)效干擾素的發(fā)燒比過去用的普通干擾素要來得輕，而且它持續(xù)的時(shí)間絕大多數(shù)是24小時(shí)不到，個(gè)別的是在兩三天，如果病人覺得肌肉疼痛，可以吃一點(diǎn)退燒藥。其次就是白血球，血小板的下降，病人在開始治療的時(shí)候每半個(gè)月查一次血常規(guī)來觀察一下，現(xiàn)在的干擾素治療我們有一個(gè)專家共識(shí)，如果真的跌得很厲害我們適當(dāng)用一些升白的藥，有的時(shí)候可以打一點(diǎn)白激素11，這些病人問題是不大的，另外從國(guó)外的治療經(jīng)驗(yàn)來看，干擾素在丙肝治療的時(shí)候并沒有看到像腫瘤化療的時(shí)候或者是自身免疫性疾病用免疫抑制劑的時(shí)候，白細(xì)胞低的時(shí)候會(huì)容易發(fā)生感染，像我們乙肝治療發(fā)生感染的情況比較少。 　　第三個(gè)有一些神經(jīng)的癥狀，有的病人有點(diǎn)焦慮不安，有的病人心跳快，有一些睡眠不好，有一些精神沮喪甚至精神憂郁，這個(gè)我們醫(yī)生跟病人談話的時(shí)候要謹(jǐn)慎一點(diǎn)，程度比較嚴(yán)重的可以用一些改善精神類的藥物，我們也碰到過干擾素引起嚴(yán)重的精神憂郁甚至病人有自殺行為，但是這方面見得也比較少。
　　其它還有可能出現(xiàn)的反應(yīng)就是掉頭發(fā)，我有個(gè)病人頭發(fā)掉了三分之一，但是停止治療后就長(zhǎng)出了，還有就是體重減輕，有的病人比較怕了，一年下來體重減輕5到10斤，有的病人減了20斤，我碰到一個(gè)最厲害的是減了50斤，但是這個(gè)病人原來是大胖子，所以減了以后還蠻高興的，其他可能都是極個(gè)別的，有的病人可能吃了有點(diǎn)胃的不舒服，拉肚子。
　　這些副作用有一些不需要治療，像體重減輕到后期會(huì)逐步正常，還有可能引起甲狀腺功能的改變，有的人甲狀腺機(jī)能減退，所以我們治療的時(shí)候定期做一個(gè)甲狀腺功能檢查，有時(shí)候請(qǐng)內(nèi)分泌醫(yī)生會(huì)診一下進(jìn)行一下處理基本也不會(huì)有什么問題，關(guān)鍵是我們醫(yī)生治療病人的時(shí)候也要注意一點(diǎn)，如果病人有嚴(yán)重的自身免疫性疾病的，就需要把自身免疫性疾病治好以后再來治療，或者家族史里面有嚴(yán)重的精神憂郁的，或者本身肝功能黃疸很深的這種病人就不考慮了，所以干擾素也不是所有的人都可以用的，還有就是已經(jīng)妊娠了也絕對(duì)不能用。
作者: futingbin    時(shí)間: 2008-11-16 12:10
標(biāo)題: 獸用干擾素的研究進(jìn)展
獸用干擾素的研究進(jìn)展
連京華,李玉峰,高廣堯,蔡　蕊,王愛琴
(山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所,山東濟(jì)南,250023)

　　摘　要:干擾素是動(dòng)物機(jī)體最重要的細(xì)胞因子之一,自被發(fā)現(xiàn)以來,由于其廣譜高效抗病毒、抗腫瘤活性及其強(qiáng)大的免疫調(diào)節(jié)作用,而成為當(dāng)今免疫學(xué)、病毒學(xué)、細(xì)胞學(xué)、分子生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、腫瘤學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。本文就獸用干擾素的基本特性、作用機(jī)理以及其臨床應(yīng)用等方面作一綜述。
　　關(guān)鍵詞:干擾素;作用機(jī)理;應(yīng)用;研究進(jìn)展
　　干擾素(Interferon,IFN)最早是1957年由英國(guó)科學(xué)家Alick Isaacs和Iean Lindenmann在利用雞胚絨毛尿囊膜研究流感病毒干擾現(xiàn)象時(shí)發(fā)現(xiàn),一類能干擾和抑制病毒復(fù)制的可溶性細(xì)胞分泌物〔1〕?，F(xiàn)定義為:干擾素是在特定的誘導(dǎo)劑作用下,由細(xì)胞產(chǎn)生的一種具有高度生物學(xué)活性的糖蛋白,當(dāng)它再作用于其他細(xì)胞時(shí),使其它細(xì)胞立即獲得抗病毒和抗腫瘤等多方面的免疫力。近半個(gè)世紀(jì)以來,干擾素一直是免疫學(xué)、病毒學(xué)、細(xì)胞學(xué)、分子生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、腫瘤學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。特別是近幾年來,隨著干擾素在一些畜禽病毒性疾病及腫瘤性疾病的治療方面取得良好療效,獸醫(yī)科研工作者越來越重視干擾素在動(dòng)物體內(nèi)的免疫特性及其臨床制品的研究。
1　干擾素的基本特性
1·1　干擾素的分類
　　目前,一般將干擾素分為Ⅰ型和Ⅱ型兩類,幾乎所有的脊椎動(dòng)物均可產(chǎn)生這兩類干擾素。Ⅰ型干擾素主要包括α干擾素(IFN-α)和β干擾素(IFN-β)等,α干擾素是單核細(xì)胞產(chǎn)生的相對(duì)分子量18000的多肽,β干擾素主要是由成纖維細(xì)胞產(chǎn)生的相對(duì)分子量20000的糖蛋白,兩者都具有抗酸性作用,主要參與抗病毒、抗腫瘤作用;Ⅱ型又稱免疫干擾素,只包括γ干擾素(IFN-γ),主要是由T細(xì)胞產(chǎn)生的相對(duì)分子量21000~24000的單體糖蛋白,其大小取決于糖醛化程度,共同具有18000的多肽成分,對(duì)酸性敏感,主要參與誘導(dǎo)組織相容性抗原(MHC)的表達(dá)和免疫調(diào)節(jié)效應(yīng),但其抗病毒作用比Ⅰ型干擾素弱。
1·2　干擾素的理化特性
　　IFN由多種氨基酸組成,不含核酸,所以不被DNA酶或RNA酶破壞,對(duì)蛋白酶(胰蛋白酶、糜蛋白酶和V-8蛋白酶)敏感。對(duì)熱比較穩(wěn)定,在4℃下其活性可保持幾個(gè)月,-70℃下可長(zhǎng)期保存。Ⅰ型IFN在pH 2~10時(shí)穩(wěn)定,但Ⅱ型IFN在pH 2時(shí)易被滅活〔2〕。
1·3　干擾素的生物學(xué)特性
1·3·1　高度的生物活性　干擾素具有很高的生物活性,1mg即具有10億個(gè)活性單位。IFN具有廣譜抗病毒活性,由一種誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生的IFN,既可抑制多種RNA病毒,又可抑制多種DNA病毒的復(fù)制。此外,IFN還有抑制病毒以外其他微生物的生長(zhǎng),抑制細(xì)胞分裂,抑制腫瘤細(xì)胞增殖和參與調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答等功能。
1·3·2　相對(duì)的種屬特異性　IFN的活力具有相對(duì)的種屬特異性,即某一種屬動(dòng)物(或組織細(xì)胞)產(chǎn)生的IFN只能對(duì)同種屬或種屬非常接近的動(dòng)物或細(xì)胞有保護(hù)力,如雞產(chǎn)生的干擾素只能保護(hù)雞而不能保護(hù)兔,但對(duì)于親緣關(guān)系較近的動(dòng)物卻有交叉保護(hù)現(xiàn)象,如猴與人之間,地鼠與小鼠之間等。
2　干擾素產(chǎn)生機(jī)理
　　干擾素是機(jī)體受到干擾素誘生劑誘導(dǎo)下產(chǎn)生的,如病毒、細(xì)菌、真菌以及原蟲等,都能誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生干擾素;細(xì)菌的內(nèi)毒素、外毒素、放線菌素D等也能誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生干擾素;人工合成的物質(zhì)如聚次黃嘌呤核苷酸(聚肌苷酸)、聚胞嘧啶核苷酸(聚胞苷酸)、低分子物質(zhì)梯洛龍等也能誘導(dǎo)干擾素的產(chǎn)生。不管是天然的,還是合成的,凡是能誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生干擾素的物質(zhì)統(tǒng)稱為干擾素誘生劑。
　　干擾素的產(chǎn)生受細(xì)胞基因組控制,由于細(xì)胞DNA中干擾素基因抑制物(IFN surpressor)與干擾素基因結(jié)合,抑制復(fù)制酶系統(tǒng),所以一般情況下,干擾素基因處于被抑制狀態(tài)。當(dāng)病毒或其他誘生劑作用于細(xì)胞膜后,使干擾素基因脫抑制,干擾素操縱子開始轉(zhuǎn)錄,合成mRNA,mRNA迅速轉(zhuǎn)移至細(xì)胞質(zhì),在核糖體上轉(zhuǎn)譯成IFN前體,切除信號(hào)肽后,成熟的IFN就分泌到細(xì)胞外。
3　干擾素作用機(jī)理
3·1　抗病毒的作用機(jī)理
　　干擾素具有廣譜的抗病毒作用,但其抗病毒作用并非本身直接滅活病毒,而是抑制病毒的增殖。病毒感染細(xì)胞導(dǎo)致IFN的產(chǎn)生,并隨被感染細(xì)胞死亡、崩解而釋出。IFN分子向附近擴(kuò)散,隨血液循環(huán)至全身。IFN是由宿主細(xì)胞編碼的蛋白質(zhì),因作用于靶細(xì)胞,激活靶細(xì)胞內(nèi)的基因發(fā)揮作用,因而具有廣譜抗病毒作用。當(dāng)IFN進(jìn)入細(xì)胞后,誘導(dǎo)該細(xì)胞轉(zhuǎn)錄出一種AVP-mRNA,然后由它指導(dǎo)合成“翻譯抑制蛋白(TIP)”,TIP結(jié)合于核蛋白體,使病毒的mRNA與宿主細(xì)胞的核蛋白體的結(jié)合受到抑制,因而妨礙了病毒蛋白、病毒核酸以及復(fù)制病毒時(shí)所需酶的合成,從而使病毒的繁殖受到抑制。整個(gè)過程如下:病毒進(jìn)入細(xì)胞→病毒RNA附著于宿主細(xì)胞核糖體→使形成干擾素mRNA的宿主細(xì)胞DNA順反子去抑制→干擾素mRNA刺激干擾素產(chǎn)生→干擾素進(jìn)入細(xì)胞→使形成翻譯抑制蛋白(TIP)mRNA的細(xì)胞DNA順反子去抑制→TIP形成并結(jié)合到核糖體→TIP阻止病毒RNA結(jié)合到核糖體。但干擾素并不影響宿主細(xì)胞本身的mRNA與核蛋白體的結(jié)合,所以不妨礙宿主細(xì)胞的生長(zhǎng),是無毒性的。
3·2　免疫調(diào)節(jié)作用機(jī)理
　　干擾素具有很強(qiáng)的免疫調(diào)節(jié)作用。它可以調(diào)節(jié)T、B淋巴細(xì)胞的免疫功能,小劑量起促進(jìn)作用,大劑量起抑制作用。IFN-γ的免疫調(diào)節(jié)作用比IFN-α和IFN-β強(qiáng)數(shù)百倍。IFN或IFN誘生劑處理后,可引起IFN敏感細(xì)胞表面抗原和某些受體的表達(dá)增加。IFN亦能影響抗原提呈作用,抗原提呈過程與MHC抗原有關(guān),而IFN-γ可誘導(dǎo)MHCⅡ類抗原增加,IFN-α和IFN-β可誘導(dǎo)MHCⅠ類抗原增加。
3·3　抗腫瘤作用機(jī)理
　　干擾素抗腫瘤作用以IFN-γ為最強(qiáng),其機(jī)理可能有以下幾種:①有些腫瘤的發(fā)生與病毒有關(guān),這些病毒的核酸往往需要整合到細(xì)胞的DNA中去,形成病毒基因,這些基因持續(xù)存在是腫瘤的發(fā)生原因之一。IFN抑制病毒繁殖,從而抑制腫瘤的形成與生長(zhǎng);②抑制腫瘤細(xì)胞分裂。IFN作用于細(xì)胞膜,刺激腺苷酸環(huán)化酶,使cAMP增加,抑制DNA的合成及細(xì)胞分裂,故有抗腫瘤作用;③調(diào)動(dòng)機(jī)體免疫系統(tǒng),提高機(jī)體抗腫瘤免疫力。IFN能增強(qiáng)巨噬細(xì)胞及NK細(xì)胞的殺傷性,增加細(xì)胞表面抗原和受體的表達(dá),抑制B細(xì)胞的功能,從而降低腫瘤細(xì)胞表面封閉抗體的水平。
4　獸用干擾素在畜牧業(yè)中的應(yīng)用及研究進(jìn)展
4·1　在治療畜禽疾病上的應(yīng)用
4·1·1　豬白細(xì)胞干擾素　豬白細(xì)胞干擾素是一種非特異性廣譜抗病毒生物制劑,在獸醫(yī)臨床上用于治療豬流行性腹瀉、豬輪狀病毒性腹瀉、溫和性豬瘟和牛病毒性腹瀉等疾病,效果較理想。劉萬鈞等(1998)〔4〕用Vero傳代細(xì)胞對(duì)豬流行性腹瀉病毒(PEDV)進(jìn)行干擾試驗(yàn),證明豬白細(xì)胞干擾素能有效地抑制PEDV的繁殖活性,在IFN劑量為100U/ml時(shí)可明顯抑制, 1000U/ml可顯著抑制,2500U/ml幾乎可完全抑制。
4·1·2　抗新城疫病毒(NDV)　王玉東等(2003)〔5〕報(bào)道,某場(chǎng)有3棟雞舍前后發(fā)生新城疫,在相同飼養(yǎng)條件下,采取下述試驗(yàn)和對(duì)照治療方法:1棟雞舍使用干擾素、抗生素
和多維素治療,干擾素每次1~2倍量,每天1次,連續(xù)3天;另1棟雞舍緊急以二倍量Clone-30疫苗滴鼻點(diǎn)眼免疫,同時(shí)使用抗生素和多維素治療;第3棟雞舍用抗病毒藥和抗生素及多維素治療5天。結(jié)果,第1棟雞舍第6天停止死亡,死亡率為5·5%;第2棟雞舍第7天停止死亡,死亡率為6·2%;第3棟雞舍到第8天時(shí)基本停止死亡,死亡率為10·3%。
4·1·3　抗傳染性法氏囊病病毒(IBDV)　李風(fēng)華等(2004)〔6〕報(bào)道,某養(yǎng)雞戶飼養(yǎng)肉雞3065只,26日齡發(fā)生IBD,發(fā)病率60%,曾用囊病康、黃氏靈等中藥治療,效果不明顯,死亡率達(dá)12%,后來用干擾素注射,第2天死亡率降到2%,第3天停止死亡,治愈率98%。發(fā)生IBD后使用IFN的時(shí)間越早,效果越好;Mo等(2001)〔7〕報(bào)道,采用100LD50IBDV的超強(qiáng)毒株HK46感染38日齡的SPF雞8h后,再用0·2mg rGGIFN-α肌肉注射或分別用0·1mgrGGIFN-α進(jìn)行肌肉注射和口服治療, 7天后,使用rGGIFN-α的雞可成活30%~50%,而未使用干擾素的雞群僅能成活10%。
4·1·4　抗禽流感病毒(AIV)　夏春等(2001)〔8〕克隆和鑒定了我國(guó)三黃雞干擾素基因,并用QIAexpressIV原核表達(dá)系在M15工程菌中表達(dá)了N′端含6個(gè)組氨酸(6-His)的融合蛋白。在雞胚實(shí)驗(yàn)系中6His-rGGIFN-α抗禽流感病毒效果好。給予10000IU和100000IU 6His-rGGIFN-α組攻毒后48h仍無雞胚死亡。72h內(nèi)對(duì)照組雞胚全部死亡,而100000IU單位組和500IU組的雞胚死亡率為30%,與5000IU組和10000IU組差異明顯(P<0·05)。在1日齡雛雞實(shí)驗(yàn)系中6His-rGGIFN-α有較強(qiáng)抗禽流感病毒效果。各濃度6His-rGGIFN-α處理1日齡雛雞后,用AIV強(qiáng)毒攻擊后24h,僅10000IU組死亡1只,72h后,僅500IU組死亡1只,120h后給予6His-rGGIFN-α實(shí)驗(yàn)組均無死亡;而PBS對(duì)照組累積死亡率為40%。
4·1·5　治療馬立克氏病(MD)　李風(fēng)華等(2004)〔6〕報(bào)道,某戶飼養(yǎng)海蘭白蛋雞1·8萬只,126日齡發(fā)現(xiàn)部分雞精神萎靡,冠有些萎縮,發(fā)白,部分雞瘦弱,呈現(xiàn)劈叉狀,解剖見坐骨神經(jīng)腫脹,為正常2倍左右,發(fā)黃,死亡率增加,臨床診斷為MD,用IFN按500只/瓶加白細(xì)胞介素-2(500只/瓶)肌肉注射,3天后雞群狀態(tài)好轉(zhuǎn),康復(fù)較好。
4·1·6　抗弓形蟲　弓形蟲是世界范圍內(nèi)分布的人畜共患寄生原蟲,其免疫機(jī)理以細(xì)胞介導(dǎo)免疫為主。IFN-γ是細(xì)胞介導(dǎo)免疫的重要免疫分子,不論是外源性IFN-γ,還是內(nèi)源性的IFN-γ,都表現(xiàn)了強(qiáng)大的抗蟲效應(yīng)〔9〕。諸多試驗(yàn)證實(shí),外源性的IFN-γ具有強(qiáng)大的抗感染效應(yīng),內(nèi)源
性的IFN-γ在阻止弓形蟲增殖、促使休眠狀態(tài)弓形蟲包囊形成、防止包囊的活化突破等方面具有重要的作用。
4·2　干擾素基因工程研究進(jìn)展
　　2001年江國(guó)托等依據(jù)雞IFN的發(fā)表序列,通過RT-PCR從感染雞新城疫病毒的免疫雞脾淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)物及絲裂源刺激的雞脾淋巴細(xì)胞中獲得IFN cDNA。在pUC18質(zhì)粒上進(jìn)行分子克隆化之后,應(yīng)用克隆化IFN基因構(gòu)建原核表達(dá)質(zhì)粒pBV200-IFN,在大腸桿菌中表達(dá),獲得具有生物學(xué)活性的基因工程IFN〔6〕,在治療禽流感(AI)、雞新城疫(ND)、傳染性法氏囊病(IBD)、馬立克病(MD)、傳染性支氣管炎(IB)及傳染性喉炎(ILT)、雞痘(FP)等病毒病效果顯著,展現(xiàn)出了廣闊的應(yīng)用前景。萬建青等(2002)〔10〕研究并應(yīng)用豬重組干擾素γ(rPoIFNγ)預(yù)防和治療病毒性疫病,并克隆了大白豬PoIFNγcDNA、構(gòu)建了畢赤酵母(因其具有原核表達(dá)系易發(fā)酵的優(yōu)點(diǎn),又具有安全、能正確加工等特點(diǎn),廣泛用于人類重組蛋白的生產(chǎn))表達(dá)rPoIFNγ系統(tǒng);并且對(duì)表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行了Westernblot分析及進(jìn)行了rPoIFNγ抑制PRRSV增殖的實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明,用rPoIFNγ處理豬肺巨噬細(xì)胞系Marc-145后,經(jīng)細(xì)胞病變抑制法(CPE50)測(cè)定,rPoIFNγ可以抵抗藍(lán)耳病病毒(PRRSV)感染。即酵母表達(dá)的rPoIFNγ是有應(yīng)用價(jià)值的抗病毒生物工程制劑。汪明等(2000)〔11〕克隆和測(cè)序了肉雞IFN-α基因并在大腸桿菌中進(jìn)行了表達(dá),此項(xiàng)研究為重組干擾素用作新型廣譜抗病毒生物制劑和免疫增強(qiáng)劑的開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。程堅(jiān)等(2000)〔12〕克隆和鑒定了雞IFNγ基因,并構(gòu)建了共表達(dá)H9亞型禽流感病毒血凝素基因和雞IFNγ基因的重組雞痘病毒。
5　前景與展望
　　干擾素是細(xì)胞因子的一種。近年來,隨著對(duì)細(xì)胞因子研究的不斷深入和分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,大量的細(xì)胞因子得以克隆,許多細(xì)胞因子基因工程藥物面市,給治療畜禽疾病提供了新的手段,同時(shí)創(chuàng)造了巨大的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。分子生物學(xué)的迅速發(fā)展,使干擾素的研究日益深入,特別是PCR技術(shù)的廣泛應(yīng)用,極大地推動(dòng)了獸用干擾素基因的研究。干擾素的進(jìn)一步研究對(duì)加強(qiáng)我國(guó)畜禽傳染病防控的技術(shù),推動(dòng)畜牧業(yè)發(fā)展有極大的作用,對(duì)構(gòu)建動(dòng)物干擾素基因重組疫苗,提高其免疫效力、降低病毒載體毒性等方面有著重要的意義。
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作者: futingbin    時(shí)間: 2008-11-16 12:13
標(biāo)題: 試述干擾素的主要作用
　　干擾素的問世及對(duì)它不斷的深人研究，給病毒病和癌腫的治療前景帶來了新的希望。
　　干擾素有著明顯的生物學(xué)特點(diǎn)，即每種動(dòng)物細(xì)胞產(chǎn)生的干擾素，只能阻止同種屬或非常接近的種屬動(dòng)物細(xì)胞，而不能阻止其他動(dòng)物細(xì)胞感染病毒，所以說，干擾素具有嚴(yán)格的動(dòng)物種屬特異性。如羊產(chǎn)生的干擾素只對(duì)羊有效，馬產(chǎn)生的干擾素只對(duì)馬屬動(dòng)物有效，而對(duì)其它動(dòng)物則不產(chǎn)生反應(yīng)。但它對(duì)病毒復(fù)制的抑制作用是沒有選擇性的，即一種干擾素對(duì)同種和異種病毒的感染繁殖均可發(fā)揮干擾作用，也就是說，干擾素對(duì)病毒的作用是非特異的。這種作用對(duì)生物制品來說，可以說是獨(dú)一無二的，如豬瘟病毒產(chǎn)生的干擾素，除抑制豬瘟病毒外，對(duì)豬的其他病毒感染同樣具有抑制作用。除此之外，干擾素對(duì)癌腫等也有一定作用。現(xiàn)將其作用對(duì)象試述如下。
1對(duì)病毒的干擾作用
　　目前已知約有200多種病毒與動(dòng)物傳染病有關(guān)，但到現(xiàn)今為止，仍有不少病毒性傳染病尚無疫苗可供使用，至于治療更無理想藥物，但通過病毒感染動(dòng)物模型看出，干擾素卻是一種天然產(chǎn)生的強(qiáng)有力的抗病毒蛋白質(zhì)，它能阻止各種不同的DNA和RNA病毒對(duì)細(xì)胞的感染，而且已經(jīng)得到肯定的效果。
　　干擾素對(duì)病毒作用的原理現(xiàn)在認(rèn)為，干擾素不象抗體可以直接滅活病毒，對(duì)病毒粒子本身沒有作用，既不能直接阻止病毒對(duì)寄生細(xì)胞的吸附和侵人，也不能阻斷新合成病毒的釋放，而是作用于寄生細(xì)胞，阻止病毒在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，起間接的抗病毒作用。即當(dāng)一種病毒侵人一個(gè)健康細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞核首先被病毒占領(lǐng)，此時(shí)，細(xì)胞就不再產(chǎn)生細(xì)胞和抗體其他部分賴以生存的蛋白質(zhì)，而開始復(fù)制病毒，最后由于這些細(xì)胞充滿了復(fù)制的病毒，以致使細(xì)胞破裂死亡，同時(shí)向周圍釋放和擴(kuò)散復(fù)制的病毒，襲擊周圍健康細(xì)胞，并由于這個(gè)過程的不斷重復(fù)，而使感染繼續(xù)擴(kuò)大。但是，最初被感染的細(xì)胞由于受病毒核酸的刺激，有的則誘發(fā)合成干擾素分子。據(jù)證實(shí)，合成干擾素分子的遺傳信息存在于寄生細(xì)胞，而不存在于感染的病毒中。合成的干擾素立即穿過細(xì)胞膜，向周圍細(xì)胞擴(kuò)散，并隨血液循環(huán)全身。干擾素被其他細(xì)胞吸收后，便被帶至細(xì)胞核內(nèi)，誘出mRNA，由于產(chǎn)生了mRNA，細(xì)胞的代謝發(fā)生改變，該細(xì)胞便譯制產(chǎn)生抗病毒蛋白質(zhì)即干擾素。也有人認(rèn)為產(chǎn)生的是轉(zhuǎn)譯蛋白質(zhì)?？共《镜鞍踪|(zhì)不損害細(xì)胞機(jī)能，而是抑制病毒DNA聚合酶或RNA聚合酶，由此影響病毒結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)和酶類的合成，使病毒的復(fù)制受到抑制，間接起到抗病毒作用。從而增加了組織細(xì)胞的非特異性免疫功能，保護(hù)未被感染細(xì)胞免受病毒的攻擊，使人侵的病毒無法在新的細(xì)胞中繁殖，因此，感染的惡性循環(huán)也就中斷了。如果機(jī)體細(xì)胞無病毒感染時(shí)，干擾素在細(xì)胞中的產(chǎn)生則受到抑制。
　　應(yīng)該提及的是，干擾素具有產(chǎn)生快的特性，但也具有在機(jī)體內(nèi)停留時(shí)間短，從血液中消失快的特點(diǎn)，從而給臨床應(yīng)用干擾素帶來一定困難。
2對(duì)癌腫的治療作用
　　干擾素對(duì)癌腫的作用機(jī)理目前雖還不十分清楚，但通過實(shí)驗(yàn)研究和臨床觀察，都一再證明干擾素對(duì)動(dòng)物自發(fā)的、移植的及由其他一些原因引起的癌腫，均有一定療效。至于對(duì)癌腫的發(fā)病原因，目前基本上有兩種看法:一是懷疑有些癌腫由病毒引起;另一種認(rèn)為它的發(fā)病原因是非病毒性的，包括有毒的化學(xué)物質(zhì)，輻射或遺傳信息錯(cuò)亂等。干擾素對(duì)由病毒引起的癌腫具有療效，認(rèn)為是由于病毒在靶細(xì)胞內(nèi)誘生干擾素，抑制癌細(xì)胞形成的結(jié)果?，F(xiàn)在需要解決的是，為什么干擾素對(duì)由非病毒性原因引起的癌腫也有療效，并能阻止其轉(zhuǎn)移的問題。對(duì)此目前認(rèn)為，這是因?yàn)楦蓴_素作用于細(xì)胞膜，刺激腺昔酸環(huán)化酶，促使環(huán)磷酸腺曹含量增加，抑制細(xì)胞DNA的合成及細(xì)胞分裂所致，而且干擾素的抗細(xì)胞分裂作用，隨細(xì)胞分裂的增加而加強(qiáng)，此外，干擾素還具有動(dòng)員和增強(qiáng)機(jī)體防御系統(tǒng)的作用，促使巨噬細(xì)胞和專門殺傷異物的K細(xì)胞去殺傷癌細(xì)胞，存而引起治療作用。
3對(duì)免疫活性細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)
　　近年來，已發(fā)現(xiàn)干擾素對(duì)免疫活性細(xì)胞具有一系列的調(diào)節(jié)作用。它可調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的免疫功能，小劑量起促進(jìn)作用，大劑量起抑制作用。實(shí)驗(yàn)證明，T淋巴細(xì)胞，B淋巴細(xì)胞均能產(chǎn)生干擾素，而干擾素也能對(duì)T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞起作用。在體液免疫中，高濃度的干擾素可抑制B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體，低濃度的干擾素反而有刺激增強(qiáng)抗體產(chǎn)生的作用。對(duì)細(xì)胞免疫，高濃度的干擾素能增強(qiáng)T淋巴細(xì)胞表現(xiàn)抗原的作用，抑制T淋巴細(xì)胞的增殖，抑制遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)，延長(zhǎng)對(duì)皮膚和器官移植的排斥反應(yīng)，低濃度的干擾素反可起促進(jìn)作用。
作者: futingbin    時(shí)間: 2008-11-16 12:15
標(biāo)題: 國(guó)內(nèi)動(dòng)物干擾素的研究進(jìn)展
　　干擾素(IFN) 是一類具有廣泛生物學(xué)活性的蛋白質(zhì), 具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能、抗病毒、抗腫瘤等多種作用, 是機(jī)體防御系統(tǒng)的重要組成部分。IFN 的抗病毒活性是通過宿主細(xì)胞而間接完成的, 并具有嚴(yán)格的種屬特異性及選擇性。
　　當(dāng)前家禽腫瘤和病毒感染引起的雞馬立克病、新城疫、傳染性法氏囊病、傳染性支氣管炎、傳染性喉氣管炎、腦脊髓炎、流感等給養(yǎng)禽業(yè)帶來了每年數(shù)十億元的經(jīng)濟(jì)損失, 是當(dāng)前養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展的大敵。如何有效治療家禽腫瘤和病毒感染性疾病一直是困擾禽病防治的重大難題之一。干擾素為這些疾病的防治提供了新的手段。
　　在雞干擾素的研究方面, 近年來, 研究人員采用 PCR 技術(shù)先后成功報(bào)道了絲羽烏骨雞 IFN、惠陽(yáng)胡須雞 IFN- α、雞 γ- 干擾素、石岐雜雞 α、γ- 干擾素, 鴨Ⅰ、Ⅱ干擾素等基因的克隆和序列分析, 克隆得到的雞 IFN- α、γ基因的開放閱讀框架 ORF 分別由約 579 個(gè)和 492個(gè)核苷酸組成; 同時(shí)對(duì)禽類 IFN基因的同源性進(jìn)行了分析, 確定了一些新的亞型。序列比對(duì)發(fā)現(xiàn), 不同品種雞的同類 IFN 核苷酸同源性在 90%以上, 與相應(yīng)的鴨 IFN 同源性在 70%左右, 提示同種不同品系禽類之間 IFN 基因序列變異不大。
　　豬干擾素是研究最早的動(dòng)物干擾素之一, 近年來, 對(duì)豬干擾素的誘導(dǎo)條件和理化活性有了進(jìn)一步的研究, 同時(shí)對(duì)豬白細(xì)胞干擾素進(jìn)行了大量的臨床試驗(yàn)。研究表明, 它對(duì)豬的許多病毒性傳染病如流行性腹瀉、豬瘟、傳染性胃腸炎等, 以及對(duì)牛病毒性腹瀉、小鵝瘟、羔羊腹瀉等都具有不錯(cuò)的療效, 試驗(yàn)證實(shí)豬干擾素與牛羊等動(dòng)物之間存在交叉活性。最近幾年, 豬干
擾素 α、β、γ基因的分子克隆與序列分析獲得成功。
由于中草藥誘生干擾素具有廣譜、高效、無毒性、作用時(shí)間長(zhǎng)、價(jià)格便宜、易操作等特點(diǎn), 因此, 誘生干擾素中草藥對(duì)防治畜禽疾病有著獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)和廣闊的前景。中藥抗病毒合劑由黃芪、板藍(lán)根、大青葉、連翹、佩蘭、射干、柴胡、地榆、槐花等 10 余種藥材組成, 甘草
甜素、小柴胡湯、人參湯、八味地黃丸、十全大補(bǔ)湯、知柏地黃丸、桃紅四物湯、大黃、牡丹皮湯、玉屏風(fēng)散、銀耳多糖、茯苓多糖、刺五加多糖、人參多糖等在人醫(yī)上廣泛使用的抗病毒藥物, 均可以作為誘生劑誘生干擾素。這些中草藥可以作為添加劑增強(qiáng)動(dòng)物體內(nèi)干擾素的表達(dá), 從而提升動(dòng)物對(duì)疾病的抵抗能力。
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　?。坜D(zhuǎn)］甘肅省動(dòng)物檢疫總站 粱斌
作者: futingbin    時(shí)間: 2008-11-16 12:19
標(biāo)題: 干擾素控制禽類疾病效果好
　　干擾素作用機(jī)理
　　病毒感染細(xì)胞導(dǎo)致干擾素的產(chǎn)生，并隨被感染細(xì)胞死亡、崩解而釋出。干擾素分子向附近擴(kuò)散，隨血液循環(huán)至全身。干擾素對(duì)病毒繁殖的抑制具有廣譜性，可抑制病毒的繁殖，但不能直接滅活病毒，而是通過誘導(dǎo)細(xì)胞合成抗病毒蛋白體（AVP）發(fā)揮效應(yīng)。
　　抗病毒作用干擾素作用于動(dòng)物機(jī)體內(nèi)的干擾素受體，經(jīng)信號(hào)傳導(dǎo)等一系列的生物化學(xué)過程，啟動(dòng)基因合成抗病毒蛋白。該蛋白能阻斷病毒mRNA與宿主細(xì)胞核糖體之間相互結(jié)合，抑制病毒多肽鏈的合成，即阻斷病毒的繁殖，起到抗病毒的作用。同時(shí)，還能抑制病毒DNA和RNA的合成。病毒本身沒有獨(dú)立的生物霉系統(tǒng)和合成蛋白質(zhì)的場(chǎng)所（沒有核糖體），所以只有進(jìn)入機(jī)體細(xì)胞內(nèi)，依靠動(dòng)物機(jī)體細(xì)胞的霉系統(tǒng)和核糖體，才能生長(zhǎng)與繁殖。如果動(dòng)物機(jī)體內(nèi)正常細(xì)胞經(jīng)干擾素作用后產(chǎn)生抗病毒蛋白，病毒就不可能在動(dòng)物機(jī)體內(nèi)生長(zhǎng)與繁殖，使其失去生存空間。
　　免疫調(diào)節(jié)作用首先干擾素能增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞（NK細(xì)胞）和殺傷細(xì)胞（K細(xì)胞）的殺傷活性，從而起到調(diào)節(jié)免疫監(jiān)視的功能。這種殺傷的調(diào)節(jié)具有種屬特意性，即禽用干擾素只能增強(qiáng)禽類NK細(xì)胞的殺傷性。其次干擾素在低濃度時(shí)可明顯促進(jìn)B細(xì)胞分泌IgG抗體的功能，增強(qiáng)組織相容抗原和外周血單核細(xì)胞表面FC受體的表達(dá)，抑制淋巴細(xì)胞的增殖，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的細(xì)胞毒活性，調(diào)節(jié)免疫自身穩(wěn)定功能等。
　　抗腫瘤作用干擾素可抑制細(xì)胞分裂，對(duì)正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞均有明顯的抑制作用，對(duì)迅速分裂細(xì)胞的抑制作用尤為明顯。干擾素通過抑制腫瘤病毒的增殖、腫瘤細(xì)胞的增生，改變腫瘤細(xì)胞表面性能，誘發(fā)新的抗原，從而易被免疫細(xì)胞識(shí)別并加以排斥，通過免疫調(diào)節(jié)作用，可增強(qiáng)機(jī)體抗腫瘤能力，如激活巨噬細(xì)胞，增強(qiáng)NK細(xì)胞功能等。
　　干擾素的臨床應(yīng)用
　　疫苗免疫失敗后的臨床補(bǔ)救治療。當(dāng)錯(cuò)誤使用毒力較強(qiáng)的疫苗免疫，或免疫時(shí)未察覺雞群有潛在性疾病感染等情況時(shí)，導(dǎo)致疫苗免疫后雞群出現(xiàn)病癥，此時(shí)可使用干擾素進(jìn)行緊急補(bǔ)救治療，減少損失。
　　家禽各種病毒性疾病，如雞新城疫、禽流感、傳染性支氣管炎等的預(yù)防和治療。即當(dāng)發(fā)生上述疾病時(shí)，在使用其他抗病毒的同時(shí)配合使用干擾素，可提高療效，加速康復(fù)。
　　家禽免疫抑制性疾病，如傳染性法氏囊病、馬立克氏病、淋巴白血病等的預(yù)防和治療。
　　提升免疫效果：滅活疫苗＋干擾素免疫提升最佳組合方案。干擾素同活疫苗同時(shí)使用會(huì)干擾疫苗的免疫效果，但是同滅活疫苗一起使用時(shí)，通過其能促進(jìn)B細(xì)胞分泌IgG抗體，增強(qiáng)組織相容抗原和外周血單核細(xì)胞表面FC受體的表達(dá)等功能，提升免疫效果。
　　使用干擾素注意事項(xiàng)
　　由于干擾素能抑制病毒的復(fù)制與繁殖，因此使用干擾素后，96小時(shí)之內(nèi)不要給雞群接種弱毒活疫苗，以免影響免疫效果。滅活疫苗可與干擾素同時(shí)使用，但不要混合注射。
　　無其他配伍禁忌，可同其他藥物同時(shí)使用。飲水給藥時(shí)，水溫不能超過30℃。
　　稀釋干擾素要用滅菌的注射用水或生理鹽水，不要使用酸堿性溶液和葡萄糖鹽水作稀釋劑，否則減效或失效。啟用后在規(guī)定時(shí)間內(nèi)一次用完，以免失效。解凍融化后不要再進(jìn)行冰凍，可放于4℃冰箱中保存，3天內(nèi)使用完。
作者: 華夏風(fēng)云    時(shí)間: 2008-11-16 13:17
好東西，贊一個(gè)。
作者: dongbaihua2000    時(shí)間: 2008-12-20 08:29
收集的很全面。目前在病毒性疾病的治療方面，干擾素起到的作用只能是微乎其微！
作者: trykid    時(shí)間: 2008-12-30 16:20
辛苦了，收集了那么多的資料！
作者: xumurenlq    時(shí)間: 2008-12-30 20:17
分享了！
實(shí)際上，現(xiàn)在這些獸藥廠家生產(chǎn)的干擾素效果不是特別明顯！
作者: 樓蘭牧馬人    時(shí)間: 2008-12-31 18:02
華北地區(qū)有一過GMP車間，1200平米車間，粉散劑，口服液，消毒劑等7條線，現(xiàn)尋求有志在獸藥行業(yè)發(fā)展的朋友合作，合作方式靈活，歡迎有銷售網(wǎng)絡(luò)并希望開創(chuàng)自己空間的朋友聯(lián)系。ＱＱ943224121



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