畜牧人

標(biāo)題: 蛋氨酸螯合鋅對雛雞的營養(yǎng)效果及內(nèi)源鋅排出量的測定 [打印本頁]
作者: lantianshengwu    時(shí)間: 2009-6-29 23:31
標(biāo)題: 蛋氨酸螯合鋅對雛雞的營養(yǎng)效果及內(nèi)源鋅排出量的測定
為研究新型鋅添加劑－蛋氨酸螯合鋅對雛雞的營養(yǎng)效果及探討內(nèi)源鋅排出量的測定方法，進(jìn)行了兩個(gè)試驗(yàn)：試驗(yàn)Ⅰ，用卵黃囊充分吸收后的11日齡濱白雞公雛為試驗(yàn)動(dòng)物，個(gè)體飼養(yǎng)。以玉米－大豆分離蛋白型的半純合日糧為基礎(chǔ)（含鋅23.5mg/kg）。用4重復(fù)的4×4二因子設(shè)計(jì)研究了不同鋅化合物－硫酸鋅（ZnSO4）、蛋氨酸螯合鋅（Ⅱ）內(nèi)絡(luò)鹽（ZnMet2）和絡(luò)陽離子（ZnMet22+）、鋅寶100（Zinpro100）及不同鋅添加水平（0，15，30，60mg/kg）對鋅在雛雞體內(nèi)的沉積利用及對雛雞生長的影響。試驗(yàn)Ⅱ，用Sibbald的雞飼料真代謝能快速測定法（TME法）和數(shù)學(xué)外插法研究12周齡公雞對鋅的吸收和排泄情況。結(jié)果表明：鋅源對雛雞采食量、體增重、增重/耗料、血液和肝臟中鋅濃度、雞體鋅沉積量、食入鋅沉積率無顯著影響（P>0.05），但均表現(xiàn)出ZnMet2和Zinpro100優(yōu)于ZnMet22+和ZnSO4的趨勢。鋅源對脛骨和翼羽中鋅濃度和血清堿性磷酸酶（AKP）活性影響顯著（P<0.05）。如以ZnSO4組試雞的脛骨中鋅濃度為100%，則ZnMet2、ZnMet22+和Zinpro100 三種鋅源組的相對值各為123%、109%和134%。不同鋅源的雛雞體內(nèi)的鋅沉積率與在脛骨中鋅濃度的消長規(guī)律一致。以ZnSO4組雛雞的食入鋅沉積率100%, 則ZnMet2為106%, ZnMet22+組為100%，Zinpro100組為112%。4種鋅化合物的生物利用率按高低排序?yàn)閆inpro100 >ZnMet2> ZnMet22+ >ZnSO4。加與不加鋅對雛雞采食量、體增重有顯著影響（p<0.01）。對于玉米－大豆分離蛋白型半純合日糧外加鋅30mg/kg（總Zn53.5mg/kg）以上可滿足本試驗(yàn)條件下雛雞的正常生長。血液中鋅濃度相對比較穩(wěn)定。翼羽、脛骨、肝臟中鋅濃度，血清AKP活性和雞體沉積量對進(jìn)食鋅量的變化反應(yīng)敏感，呈強(qiáng)正相關(guān)，而食入鋅沉積率卻隨進(jìn)食鋅量的升高而明顯下降（r=-0.65**）。故可用翼羽中鋅濃度作為評價(jià)雛雞鋅營養(yǎng)狀況的活體診斷指標(biāo)，亦可用血清AKP活性作為此項(xiàng)評價(jià)的生化指標(biāo)。本試驗(yàn)測得玉米－大豆分離蛋白半純合型日糧中鋅的真利用率為20.40%。在此基礎(chǔ)上得出的ZnSO4和ZnMet2的鋅真利用率依內(nèi)源鋅排出量參數(shù)的來源不同而不同。用饑餓排空法、同雞自身排空法和無鋅日糧法測得的各內(nèi)源鋅參數(shù)校正時(shí)，分別得到ZnSO4的鋅真利用率依次為26.33%、20.03%和48.84%；ZnMet2為63.33%、37.38%和86.77%。利用數(shù)學(xué)外插法得出ZnSO4的鋅真利用率為37.01%，ZnMet2為99.07%?？梢?，由于內(nèi)源鋅排出量參數(shù)的差異，兩種鋅源的鋅真利用率波動(dòng)很大。因而短期快速的TME法用于微量元素利用率的研究是不可取的。所得數(shù)據(jù)也只能作為參考。但在雞對鋅源的利用方面，蛋氨酸螯合鋅明顯優(yōu)于硫酸鋅這一點(diǎn)是可以肯定的。
　　關(guān)鍵詞 雛雞，鋅，螯合物，蛋氨酸
　　鋅（Zn）是迄今已經(jīng)確認(rèn)的畜禽營養(yǎng)必需的一種重要微量元素。自從1934年Todd首先證明鋅是高等動(dòng)物必需營養(yǎng)元素以來，世界各國學(xué)者對鋅做了大量的研究工作，論證了鋅在動(dòng)物營養(yǎng)中的重要地位，并隨著對鋅的生理功能、營養(yǎng)作用、生化代謝等方面的深入研究，表明鋅是動(dòng)物體內(nèi)功能最多的微量元素。機(jī)體對鋅的吸收和利用受到許多因素的影響，因而研制和開發(fā)具有較高生物學(xué)效價(jià)的鋅添加劑一直受到人們的重視。
本試驗(yàn)選題的依據(jù)是：
　?。?）鋅是動(dòng)物體內(nèi)功能最多的微量元素。它作為多種酶的組成成分或輔助因子，廣泛參與機(jī)體內(nèi)的碳水合物、脂肪、蛋白質(zhì)、核酸等的代謝過程，參與機(jī)體的免疫作用，保護(hù)細(xì)胞膜不受損傷。大量的理論研究和畜牧生產(chǎn)實(shí)踐證明，如果供鋅不足，就會(huì)造成缺鋅癥。日糧中缺鋅，會(huì)造成母畜性欲降低，停止發(fā)情，不育及死胎增加；公畜精子生成障礙。另外，動(dòng)物缺鋅會(huì)造成不同程度的皮膚角化不全癥，并影響氮平衡與硫平衡，豬雞生長緩慢，產(chǎn)蛋雞的產(chǎn)蛋量下降、所產(chǎn)蛋的孵化率降低。鑒于鋅對畜禽具有如此之多的重要作用，就必需保證鋅的有效供給，因此科學(xué)而又經(jīng)濟(jì)地開發(fā)和使用鋅添加劑，對于充分發(fā)揮畜禽的生產(chǎn)潛力是極為必要的。
　　（2）影響動(dòng)物機(jī)體對鋅吸收利用的因素很多，也很復(fù)雜。大量研究資料說明，飼料中蛋白質(zhì)的來源和水平、各種氨基酸、某些有機(jī)酸、維生素、激素、纖維成份、某些礦物元素、螯合劑以及飼料中鋅的來源和水平等都可影響鋅的吸收和利用。Van Campan (1974) 和哈志剛 (1987) 都用同位素示蹤技術(shù)證明，在一定范圍內(nèi)日糧蛋白質(zhì)水平的提高，大鼠、雛雞對鋅的吸收能力增加。Mejborn Heddie (1987) 用小公貂試驗(yàn)也支持了上述論點(diǎn)，并指出肝中鋅濃度不受蛋白質(zhì)水平的影響，只依賴于日糧中鋅水平的高低，而股骨中鋅濃度卻隨日糧中蛋白質(zhì)水平、鋅水平的增加而增加。許多國外學(xué)者用離體腸段灌注法、飼養(yǎng)屠宰試驗(yàn)法研究表明飼糧中添加蛋氨酸、谷氨酸、色氨酸、半胱氨酸、組氨酸均有利于腸粘膜對鋅的吸收。Hill(1986)報(bào)道 飼喂蛋氨酸使羊精子中鋅含量增加。有研究表明，EDTA及其鈉鹽對鋅的吸收有促進(jìn)作用。Vohra和Kratzer (1964) 以火雞為試驗(yàn)動(dòng)物研究了13種有機(jī)螯合劑對鋅吸收利用的影響，指出螯合物的化學(xué)穩(wěn)定常數(shù)在13~17之間，鋅的吸收利用最好。隨著對鋅吸收機(jī)制的深入研究，對于以上現(xiàn)象可解釋為：當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)水平增加或者添加多量氨基酸時(shí)，使得腸道中與鋅結(jié)合的小分子有機(jī)配體（氨基酸、二肽、單肽等）的濃度增大，大大地增加了鋅與之結(jié)合成可吸收態(tài)螯合物的機(jī)會(huì)，從而利于腸粘膜細(xì)胞對鋅的吸收，否則游離態(tài)鋅離子難以通過細(xì)胞膜隨糞排出。那么，蛋氨酸螯合鋅的飼喂效果和吸收利用情況怎樣呢？據(jù)現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道亦有爭議。根據(jù)美國珍寶公司資料介紹，鋅寶（Zinpro）是由蛋氨酸、鋅、硫酸氫根以1：1：1比例生成的具有獨(dú)特化學(xué)結(jié)構(gòu)的有機(jī)物復(fù)合鹽，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式為：

　　目前生產(chǎn)的鋅寶產(chǎn)品有兩種：Zinpro40和Zinpro100。Zinpro40的組成為：Zn4.0％，Met8.0%；Zinpro100中含Zn10.0％。許多國外研究報(bào)道蛋氨酸鋅應(yīng)用在牛、豬、羊、火雞、魚、蝦、貂等方面都取得了較理想的效果，可促進(jìn)畜禽增重、提高飼料效率、改善胴體品質(zhì)（Henry等，1987；Baker，1987；Morris等，1980；雖然動(dòng)物性飼料含有豐富的鋅，但動(dòng)物性飼料在配合飼料中比例呈下降的趨勢，特別在無魚粉日糧和氨基酸添加劑的推廣使用情況下，使鋅的供給問題更加突出。尋找能減少植酸類影響的鋅添加劑也就顯得尤為重要。近年來，日本、德國、臺(tái)灣也有許多類似的報(bào)道，中國劉長久的“動(dòng)物營養(yǎng)液”也強(qiáng)調(diào)了這種復(fù)合物的獨(dú)特作用。然而Ｈill等（1986）用鼠、豬試驗(yàn)卻表明硫酸鋅和蛋氨酸鋅具有相似的生物學(xué)價(jià)值，并用體外離體腸段灌注法依靠同位素技術(shù)證明小鼠腸粘膜細(xì)胞對65ZnCl2、65Zn-14C-Met和65Zn-３H-Lys中65Zn的吸收作用相同。在這種情況下，詳細(xì)研究蛋氨酸螯合鋅對雞營養(yǎng)效果，就可為這類添加劑的推廣應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)，對我國的家禽飼養(yǎng)業(yè)也具有一定的指導(dǎo)意義。
　?。?）本試驗(yàn)?zāi)転檠芯夸\的吸收利用機(jī)制做一些宏觀探索。Cousins (1979) 分析指出，消化中的離子態(tài)鋅幾乎不能透過腸內(nèi)膜細(xì)胞膜，而必須與有機(jī)分子如氨基酸、二肽和類似有機(jī)物形成復(fù)合物才能迅速通過粘膜細(xì)胞膜類脂屏障，許多學(xué)者的研究也支持了這一理論（Berzin，1986）。因此一般資料都強(qiáng)調(diào)蛋氨酸螯合鋅吸收率高的主要原因是蛋氨酸與鋅經(jīng)螯合作用而生成的螯合物具有獨(dú)特的生理作用。由此我們想到，經(jīng)一定方法制備出的、能證明其確為真正螯合物的蛋氨酸螯合鋅產(chǎn)品的吸收利用效果是否能更好呢？基于這種想法，在東北農(nóng)學(xué)院中心試驗(yàn)室滕冰老師的指導(dǎo)下，依配位化學(xué)原理，在一定的pH和溫度條件下制備出了蛋氨酸螯合鋅（Ⅱ）內(nèi)絡(luò)鹽（實(shí)測含鋅18.20%，蛋氨酸82.47%），其結(jié)構(gòu)式為：

　　蛋氨酸螯合鋅（Ⅱ）絡(luò)陽離子（液態(tài)，含鋅4.418mg/ml，蛋氨酸10.075mg/ml），其結(jié)構(gòu)式為：

　　動(dòng)物經(jīng)口攝入這些螯合物進(jìn)入胃中，在pH約為2的酸性環(huán)境下能否被分解破壞卻未見報(bào)道。為進(jìn)行初步探討，我們將硫酸鋅與蛋氨酸一起加入飼料中，比較其與單獨(dú)加入飼料的蛋氨酸螯合鋅對雞的營養(yǎng)效果上的差異，可能會(huì)為研究鋅吸收利用的機(jī)制提供一點(diǎn)試驗(yàn)論據(jù)。
在不屠宰動(dòng)物的前提下研究不同鋅化合物的真利用率對實(shí)際飼養(yǎng)業(yè)是極為有利和重要的。為此，試將雞飼料代謝能的快速測定法（即TME法）和數(shù)學(xué)上的外插法用于測定硫酸鋅和蛋氨酸螯合鋅中的鋅真利用率，借此研究這兩種方法在微量元素利用率測定中應(yīng)用的可行性。這兩種方法用于雞飼料代謝能的測定中已被證明是可行的，而用于微量元素利用率的研究中在理論上分析是成立的，實(shí)際應(yīng)用效果如何未見報(bào)道。故本試驗(yàn)在此方面做一些摸索，以便為微量元素利用率的研究尋找新的方法。
本試驗(yàn)研究的主要目的在于：
　?。?）研究不同含鋅化合物（硫酸鋅、鋅寶100、蛋氨酸螯合鋅（Ⅱ）內(nèi)絡(luò)鹽、蛋氨酸螯合鋅（Ⅱ）絡(luò)陽離子）在不同鋅添加水平時(shí)（0,15,30,60mg/kg）在雛雞體內(nèi)的沉積利用情況，比較硫酸鋅和蛋氨酸螯合鋅的生物利用率。
　?。?）試用TME法測定硫酸鋅、蛋氨酸螯合鋅內(nèi)絡(luò)鹽中鋅的利用率，及數(shù)學(xué)外插法測鋅利用率的可行性。
　?。?）研究不同鋅化合物、不同鋅水平對試雞采食量、體增重、增重／耗料的影響。
　　1 材料和方法
　　1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)


　　試驗(yàn)Ⅰ：研究在不同鋅添加水平時(shí)，不同鋅化合物中的鋅在雛雞體內(nèi)的沉積情況。試驗(yàn)采用4重復(fù)的4×4二因子交叉設(shè)計(jì)。見表１。
基礎(chǔ)日糧組成為半純合日糧，除供試鋅源及加鋅水平外，其余組分及營養(yǎng)指標(biāo)保持完全一致。其組成及營養(yǎng)成份見表2。

　　注：1）多種微量元素組成：每kg飼料中加FeSO4·7H2O 0.402g，CuSO4·5H2O 316mg，MnSO4·H2O 217mg，碘劑1.8mg，硒劑1.5mg，200目石粉做載體。2）此表中所有原料組成總和為96.18%，按試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案添加鋅化合物量和補(bǔ)齊蛋氨酸量（使試料中蛋氨酸總水平達(dá)0.51%）后，由二氧化硅加至100%。3）此配方營養(yǎng)水平按中華人民共和國專業(yè)標(biāo)準(zhǔn)—雞的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（1986年版）配制。
試驗(yàn)Ⅱ：借用雞飼料代謝能測定方案中的TME法測定鋅利用率，方案表3中的(14)、(15)；外插法測鋅利用率方案見表3中的（16）、(17)、（18）。

　　注：每處理均為4重復(fù)
　　試驗(yàn)程序?yàn)椋侯A(yù)試期3天?饑餓32小時(shí)?強(qiáng)飼試驗(yàn)料（壓錠1次經(jīng)口投入）?收集32小時(shí)排泄物?繼續(xù)收集表3中處理（14）、（15）的32小時(shí)內(nèi)源排泄物?恢復(fù)期。
1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及飼養(yǎng)管理
　　試Ⅰ：于1991年7月８日從哈爾濱原種雞場購入1日齡濱白4×2系公雛200只，每20只為1群在1育雛籠（自行安裝，籠底鋪有電熱網(wǎng)）中按常規(guī)要求育雛，日糧與試驗(yàn)期所用的基礎(chǔ)日糧相同，外加鋅40mg/kg（以ZnSO4·H2O形式）。待10日齡時(shí)（卵黃已基本吸收完全），于7月17日晚24:00時(shí)斷料，供水，18日早6:00時(shí)稱重，挑選健康狀況良好的雞，每4只為1處理，保持各處理組之間雞體重的一致性，進(jìn)入試驗(yàn)期。并挑選與試雞相近體重范圍的10只雛雞，按樣品采集制備法處理，做為試驗(yàn)零對照用。
　　試驗(yàn)Ⅰ每一處理4只雞，均單籠飼養(yǎng)，自由采食，采取少量多餐的方法避免剩料，自由飲用無離子水。試驗(yàn)從11日齡至24日齡，至31日晚10:00時(shí)撤料，供水，次日早6:00時(shí)稱每只雞末重，記錄采食量，試Ⅰ現(xiàn)場試驗(yàn)結(jié)束。
　　試Ⅱ：將試Ⅰ所剩公雛按常規(guī)飼養(yǎng)至12周齡時(shí)，挑選40只健康公雞施行肛門縫帶孔的塑料瓶蓋，恢復(fù)期6天，預(yù)試期3天，然后進(jìn)入正試期，按試驗(yàn)Ⅱ的設(shè)計(jì)程序進(jìn)行試驗(yàn)。試雞單籠飼養(yǎng)，每一處理4只雞，用塑料杯自由飲用無離子水。將塑料瓶擰在肛門處的瓶蓋上來收集排泄物。強(qiáng)飼的方法是：將試料壓成直徑φ＝12mm，長30~40mm 的園柱形飼料錠，按設(shè)計(jì)方案中的喂料量準(zhǔn)確稱量，1次經(jīng)口投入。
　　1.3 樣品的采集和制備
　　1.3.1 試Ⅰ樣品的采集、制備
血樣的制備：試驗(yàn)結(jié)束之日稱完試雞空腹重后，頸靜脈放血，用5ml離心管接取血液4ml左右，離心制得血清保存于-4°C左右的冰箱中，備測AKP活性。剩余血放入已知重量的50ml三角瓶，稱量，待消化測鋅用。
肝樣的制備：試雞放血后開膛，取出肝臟，去除膽囊，稱重，放入50ml三角瓶中備消化測鋅。
脛骨樣的制備：左右側(cè)脛骨取出后稱重，放入三角瓶中于105°C烘箱中烘至恒重，稱絕干脛骨重，備消化測鋅用。
　　翼羽樣的制備：取翼羽2克左右，用洗衣粉去污，并依次用自來水、蒸餾水和無離子水沖洗，于65°C烘箱中驅(qū)水，然后室溫放置回潮，稱風(fēng)干羽毛重，放三角瓶中備消化測鋅。
　　雞空體樣的制備：取完上述所需樣品后，清除消化道內(nèi)容物，將雞體放入編好號的塑料袋中稱重，于-20°C冰箱中保存?；一瘯r(shí)，將雞體取出解凍，放入磁碗中于110°C烘箱中24小時(shí)，然后剪碎于茂福爐中300°C條件下炭化，待冒完煙后將爐溫調(diào)至550°C灰化三小時(shí)，取出冷卻，稱取灰化物重量，研碎進(jìn)篩，用樣品瓶保存樣品，供取樣消化。
　　血液、肝、脛骨、翼羽均采用濕消化法，雞空體樣則采用燒灰干消化法。（血液、羽毛、雞空體灰為取樣消化測定，肝、脛骨為全樣消化。）
　　1.3.2 試Ⅱ樣品的采集、制備
　　排泄物收集于不銹鋼盒中，將不銹鋼盒于130°C烘箱中半小時(shí)（滅菌），然后轉(zhuǎn)入65°C烘干，取出室溫放置回潮48小時(shí)以后用電子稱稱風(fēng)干排泄物重，然后粉碎、裝瓶，取樣干消化法測鋅。
　　1.4 儀器及測定項(xiàng)目
　　1.4.1 儀器
　　試Ⅰ樣品經(jīng)濕消化或灰化溶解后，用島津AA-650原子吸收分光光度計(jì)測鋅。血清堿性磷酸酶活性用β-甘油磷酸法借助721分光光度計(jì)來測定。試Ⅱ樣品經(jīng)灰化并溶解后用Pekin—Elmer Iep－6500型等離子發(fā)射光譜儀測鋅。
　　1.4.2 測定項(xiàng)目
　　　　試雞始重、末重、采食量；飼料、血液、肝、脛骨、翼羽、雞空體灰中鋅濃度；血清堿性磷酸酶活性；風(fēng)干排泄物中鋅濃度
　　1.4.3 計(jì)算方法
　?。?）增重／耗料＝體增重（g）／耗料量（g）
　　（2）食入總鋅量（mg）=飼料中鋅濃度（mg／g）×采食量（g）
　?。?）鋅沉積量（mg）＝［肝Zn(mg)＋脛骨Zn(mg)＋翼羽Zn(mg)+血Zn(mg)＋雞空體中Zn(mg)］－［基礎(chǔ)　?。皩φ针u的肝＋脛骨＋血＋空體中Zn(mg)］
　?。?）食入鋅沉積率（％）＝鋅沉積量（mg）／食入總鋅量（mg）×100
　?。?）鋅的表觀利用量（mg）＝食入鋅量（mg）－排出鋅量（mg）
　?。?）鋅的真利用量（mg）＝食入鋅量（mg）－排出鋅量（mg）＋內(nèi)源鋅量（mg）
　?。?）鋅的表觀利用率（％）＝鋅的表觀利用量（mg）／食入總鋅量（mg）×100
　?。?）鋅的真利用率（％）＝鋅的真利用量（mg）／食入總鋅量（mg）×100
　?。?）TME法測鋅利用率，即采用強(qiáng)飼方法準(zhǔn)確喂給試雞一定量的含鋅日糧，完全收集其32小時(shí)排泄物，　　　通過測排泄物中含鋅量，據(jù)代謝平衡理論可算知鋅的利用率。其計(jì)算方法為公式5、6、7、8。

　　OD1－OD２　 Ｖ1×Ｐ1
　　（10）血清堿性磷酸酶活性單位／100ml血清（鮑氏單位）＝ 　　　 ×　　　 ×10OD V2
　　其中：OD1－欲測血清溶液的光密度；OD２－無機(jī)磷溶液的光密度；OD－磷標(biāo)準(zhǔn)液的光密度；V1－常數(shù)0.15ml，吸取磷標(biāo)準(zhǔn)液的體積；P1－0.1，１ml磷標(biāo)準(zhǔn)液相當(dāng)于0.1ml的無機(jī)磷；V２－0.15ml，吸取待測血清樣品的體積。
　　1.5 統(tǒng)計(jì)分析方法
　　　試驗(yàn)Ⅰ采用二因子方差分析并多重比較；試驗(yàn)Ⅱ采用單因子方差分析或T檢驗(yàn)。全部數(shù)據(jù)用PC－1500型袖珍計(jì)算機(jī)和IBM－PC電子計(jì)算機(jī)處理。
　　2 試驗(yàn)結(jié)果
　　2.1 不同鋅化合物及不同鋅添加水平的效應(yīng)
　　2.1.1 生長性能
　　不同鋅化合物對試雞的采食量、增重、增重／耗料無顯著影響。見表5。

　　注：橫行比較，同行未標(biāo)角碼者、有相同角碼者為差異不顯著。
　　2.1.2 血液及組織中鋅濃度
　　不同鋅化合物在不同鋅添加水平時(shí)與組織中鋅濃度的關(guān)系見表7。隨日糧中鋅添加水平的增高，組織中鋅濃度均呈上升的趨勢。肝、脛骨、翼羽中鋅濃度在4個(gè)鋅添加水平間均達(dá)顯著水平。血液中鋅濃度在添加0mg/kg和15mg/kg鋅組顯著低于添加30和60mg/kg鋅組（p<0.01）。見表8。
　　在同一鋅添加水平時(shí)，不同鋅化合物對血液、肝中的鋅濃度無顯著影響，對脛骨、翼羽中鋅濃度有顯著影響。ZnSO4·7H2O組和ZnMet22+組間，ZnMet2組和Zinpro100組間無顯著差異，但ZnMet2組和Zinpro100組顯著高于ZnSO4·7H2O組和ZnMet22+組，3個(gè)鋅添加水平時(shí)的綜合結(jié)果見表9。
　　2.1.3 鋅沉積總量和食入鋅沉積率
　　不同鋅化合物對食入鋅量、鋅沉積量、食入鋅沉積率無顯著影響，但ZnSO4·7H2O組試雞的體鋅沉積量、食入鋅沉積率均低于其它各螯合鋅組，見表10。
　　不同鋅化合物在不同鋅添加水平時(shí)的鋅沉積量及食入鋅沉積率有顯著影響。隨日糧中鋅添加水平的增加，機(jī)體鋅沉積量顯著升高，而食入鋅沉積率卻隨雛雞采食鋅水平的升高而顯著下降。見表11。
表7 在不同鋅添加水平時(shí)各鋅源
與組織中鋅濃度、整體鋅沉積量、食入鋅沉積率、AKP活性 ±SE N = 4

　2.2 試Ⅱ代謝試驗(yàn)結(jié)果
　　2.2.1 TME法測定硫酸鋅和蛋氨酸螯合鋅（Ⅱ）內(nèi)絡(luò)鹽中鋅的利用率
　　由表14可見，在食入同樣鋅水平的情況下，12周齡公雞排出總鋅量差異較大，從而導(dǎo)致鋅的表觀利用率相差懸殊，甚至出現(xiàn)負(fù)值。鋅的真利用率受內(nèi)源鋅測定收集方法的影響很大，以饑餓排空法和無鋅日糧法所測得的內(nèi)源鋅排出量來計(jì)算出的各鋅源中鋅真利用率在雞個(gè)體間差異極大。而用各試雞的自身內(nèi)源鋅排出量來校正（本試驗(yàn)稱此種收集內(nèi)源鋅方法為同雞自身排空法）時(shí)，所得鋅的真利用率在試雞個(gè)體間的差異仍較大，并無改善。

　　2.2.2 外插法在測定不同鋅源中鋅利用率上的應(yīng)用
　　表14 TME法測硫酸鋅和蛋氨酸螯合鋅（Ⅱ）內(nèi)絡(luò)鹽中鋅的利用率以及測定內(nèi)源鋅排出量的方法不同對鋅真利用率的影響 ±SE N=7

　　注：1) 基礎(chǔ)日糧中鋅的真利用率為20.04%；2) 強(qiáng)飼料中總鋅水平為71.1mg/kg?；A(chǔ)日糧中鋅占總鋅量的比例為33.052%，外加鋅占總鋅量的比例為66.948%。

　　注: 1) 基礎(chǔ)日糧中鋅的真利用率為20.04%；2) 強(qiáng)飼料中總鋅水平為71.1mg/kg?；A(chǔ)日糧中鋅占總鋅量的比例為33.052%, 外加鋅占總鋅的比例為66.948%。
　　據(jù)表15和圖１可看出，試雞在食入總鋅量比較接近的情況下，排出總鋅量個(gè)體差異較大，依外插法得知ZnSO4的鋅真利用率為37.01％，ZnMet2的鋅真利用率為99.07％。
　　3 討論
　　3.1 生長性能
　　飼喂不同鋅化合物，對濱白雞公雛在11~24日齡期間內(nèi)的采食量、體增重和增重／耗料無顯著影響。但硫酸鋅組試雞的采食量和體增重均比其它各組低，蛋氨酸螯合鋅內(nèi)絡(luò)鹽組試雞的體增重比硫酸鋅組高5.66%，絡(luò)陽離子組比硫酸鋅組高6.99%，Zinpro100組比硫酸鋅組高8.97％。而且硫酸鋅組雞的飼料效率（增重／耗料）也均比其它3組低，以Zinpro100組最高。Hill等（1986）報(bào)道硫酸鋅與蛋氨酸鋅對豬鼠的生長影響無顯著差異。然而Kincaid (1985)、Greene (1987) 和Waiber (1974) 分別用豬、牛、火雞試驗(yàn)，結(jié)果表明蛋氨酸螯合鋅的增重效果和飼料效率都要比硫酸鋅好。關(guān)于蛋氨酸螯合鋅對雛雞生長的影響，未見前人公開報(bào)道，本試驗(yàn)表明3種形式的蛋氨酸螯合鋅添加于飼糧中，雛雞的生長性能均表現(xiàn)出比硫酸鋅組高的趨勢，但統(tǒng)計(jì)差異不顯著。Waiber (1974) 的以火雞試驗(yàn)表明蛋氨酸螯合鋅顯著好于硫酸鋅。
　　日糧中鋅添加水平對雛雞生長性能的效應(yīng)，除添加0mg/kg鋅組試雞的末重、體增重和采食量顯著低于其它組外，添加15、30、60mg/kg鋅各組間無顯著差異，增重／耗料是添加0mg/kg鋅組低于添加30和60mg/kg鋅組，但差異不顯著。說明基礎(chǔ)日糧（含鋅23.5mg/kg）的低鋅水平對飼料利用和生長有阻礙作用。楊琳（1987）試驗(yàn)指出0~45日齡濱白雛雞體增重受飼糧鋅水平的影響，與本試驗(yàn)結(jié)果一致。本試驗(yàn)表明，對于玉米－大豆分離蛋白型半純合基礎(chǔ)日糧鋅添加水平為15mg/kg時(shí)即可滿足雛雞為防止出現(xiàn)臨床缺鋅癥狀的需要，鋅添加水平為30mg/kg（總鋅53.5mg/kg）以上就可達(dá)到本試驗(yàn)條件下的正常生長。而楊琳（1987）、O'Dell等（1985）、Roberson和Schaible (1985)報(bào)導(dǎo)飼喂雞大豆蛋白型日糧時(shí)，雞對鋅的總需要量為30~40mg/kg即可達(dá)到最大生長，比本試驗(yàn)建議值稍低，原因是他們使用純合日糧，不含干擾鋅利用的植酸鹽、纖維類因素，本試驗(yàn)采用的是半純合日糧含少量干擾因素會(huì)影響鋅的利用率，從而導(dǎo)致雛雞對鋅的需要量增高。
值得注意的是，本試驗(yàn)從側(cè)面也支持了眾多學(xué)者已經(jīng)證明的采用植物性飼糧時(shí)雞對鋅的需要量增加。單安山（1988）建議采用玉米－豆餅型飼糧時(shí)，要使蛋雞雛發(fā)揮最大生長性能，鋅的需要量是70mg/kg（即外加鋅40mg/kg）。Tortuero和Brennes (1976)、Roberson (1985)、Vohra和Kratzer (1976) 等均指出采用玉米－豆餅型全植物性飼料時(shí)動(dòng)物對鋅的需要量較高，Tortuero等認(rèn)為要使雞只發(fā)揮最大生長性能，雞對日糧中鋅需要量大于80mg/kg。顯然這些建議值均高于NRC標(biāo)準(zhǔn)和中國專業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。
　　3.2 血液及組織中鋅濃度
　　3.2.1 添加鋅水平的影響
　　鋅在血液和組織器官中的代謝動(dòng)力學(xué)曲線表明，不同組織器官中鋅的代謝強(qiáng)度是不同的，有的很快（比如血漿、肝臟、胰臟），有的很慢（比如肌肉），因而它們受飼糧中鋅水平的影響也就差異很大。代謝快的組織受飼糧中鋅水平的影響就比較明顯，代謝慢的組織就不明顯。從沉積效應(yīng)來看，代謝快的組織中沉積鋅量較少，代謝慢的組織沉積鋅相對就較多，這反映了不同組織器官對鋅的貯存和利用特點(diǎn)以及機(jī)體對吸收鋅再分配的調(diào)節(jié)機(jī)制。在鋅營養(yǎng)的早期研究中，人們以生長指標(biāo)判斷利用的標(biāo)準(zhǔn)。前人大量研究表明，肝臟、脛骨、腎臟中鋅含量能很好地反映飼糧中鋅水平的高低。從本試驗(yàn)結(jié)果可以看出，隨日糧中鋅水平的升高，組織中（血液、肝臟、脛骨、翼羽）鋅濃度均有不同程度的升高。據(jù)表８的顯著性分析，血液中鋅濃度受日糧鋅水平影響的變化幅度較小，說明血液中鋅濃度在較長期的飼養(yǎng)過程中相對比較穩(wěn)定，對日糧中鋅水平變化的反應(yīng)就不太敏感，而脛骨、翼羽、肝臟中鋅濃度隨日糧鋅水平的變化而變化的幅度較大，最能敏感地反映進(jìn)食鋅水平的高低。利用一元線性回歸分析，得到肝臟、絕干脛骨、風(fēng)干翼羽、血中鋅濃度（Y：μg／g組織）與進(jìn)食鋅量（X：μg）之間的關(guān)系為：
　　血液：Y=21.88+4.42×10-4X (r=0.36* RSD=±10.85 N=52)
　　肝臟：Y=10.88+1.47×10-3X (r=0.61 * * RSD=±13.17 N=52)
　　絕干脛骨：Y=65.08+3.91×10-3X (r=0.63 * * RSD=±29.38 N=52)
　　風(fēng)干翼羽： Y=37.44+3.95×10-3X (r=0.76 * * RSD=±25.12 N=52)
　　說明組織中鋅濃度與進(jìn)食鋅量間的相關(guān)性極強(qiáng)，為強(qiáng)正相關(guān)。而且從回歸方程式的斜率來比較，各組織中鋅濃度對進(jìn)食鋅量變化的敏感強(qiáng)度依次為：翼羽>脛骨>肝臟>血液。翼羽和脛骨中鋅濃度最能反映進(jìn)食鋅量的變化，這與表８的分析結(jié)果是一致的。Eltohamy (1979) 報(bào)道白來航公雞在0~50日齡階段，肝、胰、腎中鋅濃度與飼糧鋅水平呈正相關(guān)。Dewar等 (1984) 報(bào)道8~21日齡期間的肉雞和火雞，其肝臟、脫脂脛骨、血漿中鋅濃度隨飼糧鋅水平的升高而顯著升高。王引 (1987) 亦得出同樣結(jié)論。周明（1987）試驗(yàn)證明血清鋅水平可作為雞體鋅營養(yǎng)狀態(tài)的標(biāo)識。Bettger等(1981)亦提出相似論點(diǎn)。本試驗(yàn)表明翼羽鋅濃度與飼糧鋅水平的相關(guān)性很高，只要注意翼羽取樣部位和清潔處理，可以用翼羽鋅濃度　　作為評價(jià)雞體鋅營養(yǎng)狀況的活體診斷指標(biāo)。
　　3.2.2 添加不同鋅化合物的效應(yīng)
　　本試驗(yàn)中，不同鋅化合物對脛骨和翼羽中鋅濃度有顯著影響。若以ZnSO4組試雞的脛骨鋅濃度為100％，則ZnMet2為123％，ZnMet22+為109％，Zinpro100為134％。以脛骨中鋅濃度為標(biāo)準(zhǔn)，得到4種鋅化合物的生物利用效率依次為Zinpro100>ZnMet2> ZnMet22+>ZnSO4，以翼羽中鋅濃度為標(biāo)準(zhǔn)也有同樣的規(guī)律，說明4種鋅化合物中鋅在雞體內(nèi)的利用率是不同的，這從組織鋅濃度指標(biāo)也證實(shí)了前面所述生長性狀的結(jié)果。Горобец (1986) 以肉仔雞肝臟、脛骨、翼羽中鋅濃度為指標(biāo)，均表明氨基酸鋅螯合物的利用率好于硫酸鋅。Henry和Ammerman (1989) 以肉仔雞脛骨和腎中錳濃度為判斷指標(biāo)時(shí)，也指出蛋氨酸錳中錳的利用率高于硫酸錳。Hill等 (1986) 以生長指標(biāo)表明蛋氨酸鋅和硫酸鋅對豬具有相似的生物學(xué)價(jià)值?？赡苁且陨L性能作為判斷鋅利用率的指標(biāo)會(huì)降低檢驗(yàn)的靈敏度所致。
　　本試驗(yàn)證明，可用翼羽、脛骨中鋅濃度作為評價(jià)雛雞鋅營養(yǎng)狀況的敏感指標(biāo)。但Mills (1987) 認(rèn)為用常規(guī)分析組織中鋅濃度的方法難以判定雞早期鋅缺乏，目前認(rèn)為判定鋅營養(yǎng)狀況的敏感指標(biāo)是機(jī)體中金屬硫因的含量，有關(guān)金屬硫因含量這一生化指標(biāo)能否作為判斷鋅營養(yǎng)狀況的靈敏指標(biāo)尚需進(jìn)一步研究。
　　3.2.3 鋅沉積量和食入鋅沉積率
　　隨雛雞采食鋅水平的增加，雛雞體內(nèi)鋅沉積量顯著升高，而食入鋅沉積率卻隨日糧鋅水平的升高而顯著下降 (P<0.01)。據(jù)一元線性回歸分析，鋅沉積量(Y：μg)和食入鋅沉積率（Y：％）與食入鋅總量（Ｘ：μg）的關(guān)系為：
　　鋅沉積量： Y=1961.27+0.08X (r=0.53* * N=52)
　　食入鋅沉積率：Y=33.78-6.93×10-4X (r=-0.65* * N=52)
　　它們之間的關(guān)系見圖2和圖3。
　　微量元素的這種沉積量隨飼糧中鋅水平的升高而增加，而沉積率卻隨日糧鋅水平的升高而降低的規(guī)律，已被眾多學(xué)者研究所證實(shí)，已經(jīng)得到定論。鋅的沉積量和食入鋅沉積率2項(xiàng)指標(biāo)在4種鋅化合物間差異不顯著。但從總體平均數(shù)來看，以ZnSO4組食入鋅沉積率為100％時(shí)，ZnMet2為106％，ZnMet22+為100％，Zinpro100為112％。與以脛骨和翼羽中鋅濃度為判斷指標(biāo)時(shí)所得到的4種鋅化合物的利用效率一致，即Zinpro100>ZnMet2>ZnMet22+>ZnSO4，直接地表明了脛骨和翼羽中鋅濃度可以代表雞整體中鋅的沉積利用情況。

　　3.2.4 血液生化指標(biāo)－血清堿性磷酸酶 (AKP) 活性血清AKP活性隨食入鋅量升高而顯著增加，AKP活性 (Y：鮑氏單位) 和食入總鋅量（Ｘ：μg）的回歸關(guān)系為：Ｙ＝5.92+4.18×10-4X (r=0.76** RSD=±3.75 N=36)，而組織中鋅濃度（Ｙ：μg／g組織）和AKP活性（Ｘ：鮑氏單位）的回歸關(guān)系為：
　　血液：Y=18.70+0.74X (r=0.41* RSD=±9.19 N=36)
　　肝臟：Y=2.07+2.49X (r=0.59* * RSD=±14.53 N=36)
　　絕干脛骨：Y=35.81+6.99X (r=0.69* * RSD=±13.34 N=36)
　　風(fēng)干翼羽： Y=21.61+6.24X (r=0.68* * RSD=±19.56 N=36)
　　據(jù)此看出血清AKP活性和食入鋅量、組織鋅濃度之間存在著顯著的正相關(guān)。試雞食入總鋅量發(fā)生變化時(shí)，血清AKP活性就隨之發(fā)生變化，血液、肝臟、脛骨、翼羽中鋅濃度也隨之而變，從直線方程的斜率來看，依AKP活性的變化組織中鋅濃度發(fā)生相應(yīng)變化的敏感器官依次為脛骨>翼羽>肝臟>血液。即脛骨、翼羽中鋅濃度同血清AKP活性相關(guān)最強(qiáng)。從而進(jìn)一步證明了前述的脛骨、翼羽中鋅濃度為判斷鋅營養(yǎng)狀況的敏感指標(biāo)的論述。而且從相關(guān)性看出，可以采用血清AKP活性作為評價(jià)雛雞鋅營養(yǎng)狀況的活體生化指標(biāo)。單安山（1988）試驗(yàn)也表明，血清AKP活性在蛋雞的各個(gè)發(fā)育時(shí)期都隨飼糧鋅水平的升高而顯著增加，而且與肝臟、脛骨、胰臟中鋅濃度的升高具有一致性。Berzin（1986）以肉仔雞試驗(yàn)表明血清AKP活性與肝臟中鋅濃度（r=0.87, P<0.05）和脛骨中鋅濃度（r=0.72, P<0.05）之間呈顯著的直線正相關(guān)。本試驗(yàn)中血清AKP活性與肝臟、脛骨、 翼羽中鋅濃度的相關(guān)性也都極顯著，因此可以選擇血清AKP活性作為檢測雞體鋅營養(yǎng)狀況的活體生化指標(biāo)。
　　不同鋅化合物對血清AKP活性的影響差異顯著。ZnMet2和Zinpro100組顯著高于ZnSO4 組，也就是試雞即使攝入相同水平的4種鋅化合物，血清中AKP的活性卻不同。以血清中AKP活性為判據(jù)，得到四種鋅化合物的利用效率高低順序與以脛骨和翼羽中鋅濃度為標(biāo)準(zhǔn)而得到的4種鋅化合物的利用效率一致。Горобец（1986）也證明飼喂氨基酸螯合鋅的肉仔雞血清中AKP活性顯著高于硫酸鋅組。前人眾多體外模擬試驗(yàn)和飼養(yǎng)屠宰試驗(yàn)證明日糧中添加蛋氨酸、半胱氨酸等氨基酸和蛋白質(zhì)有利于動(dòng)物腸粘膜對鋅的吸收，可為上述結(jié)果作出理論解釋。
　　3.2.5 TME 法測定硫酸鋅和蛋氨酸螯合鋅內(nèi)絡(luò)鹽中鋅利用率的研究
　　本試驗(yàn)是選用體重比較接近、健康的12周齡公雞作為試驗(yàn)動(dòng)物，采用試料壓錠后1次強(qiáng)飼。試雞進(jìn)食料量無個(gè)體間差異，但風(fēng)干排泄物含鋅和排泄物總鋅量在試雞個(gè)體間的差異卻很大，從而導(dǎo)致每種鋅化合物在雞個(gè)體間的表觀利用率相差懸殊。ZnSO4組鋅的表觀利用率在-81.85％~47.82％之間，ZnMet2組在-43.52％~79.40％之間變動(dòng)。造成這種情況的主要原因就是內(nèi)源鋅排出量的個(gè)體差異較大所致。為考察試雞個(gè)體間內(nèi)源鋅排出量的差異，收集完試雞的排泄物后，接著收集各試雞自身的內(nèi)源排泄物，用此同雞自身內(nèi)源鋅量來計(jì)算鋅的真利用率，結(jié)果ZnSO4中鋅真利用率為20.03％，ZnMet2為37.38％，所計(jì)算出的鋅真利用率在雞個(gè)體間差異仍然很大。而用饑餓排空法和無鋅日糧法所測的內(nèi)源鋅量來計(jì)算出的鋅真利用率相應(yīng)為ZnSO4 26.33％，ZnMet2 63.33％和ZnSO4 48.84％，ZnMet2為86.77％，也不能改善這種情況，并且3種測定內(nèi)源鋅參數(shù)的方法間的鋅真利用率波動(dòng)也較大?？梢?，測定鋅真利用率時(shí)，因所用內(nèi)源鋅參數(shù)不同，會(huì)導(dǎo)致測算值相差甚遠(yuǎn)。由此可知，短期快速的TME法用于研究微量元素等物質(zhì)的代謝平衡試驗(yàn)具有很大局限性，楊琳 (1987) 也指出了這點(diǎn)。
　　3.2.6 數(shù)學(xué)外插法用于測定鋅利用率的探討數(shù)學(xué)外插法用于雞飼料代謝能的測定已被證明是可行的。而此法用于測定微量元素利用率，本試驗(yàn)證明有很大局限性。因?yàn)榧词褂脧?qiáng)飼法使雞進(jìn)食鋅量一致，排泄物中排出總鋅量卻不規(guī)律，本試驗(yàn)外插得ZnSO4的鋅真利用率為37.01％，ZnMet2為99.07％。這種用鋅源梯度水平不同按數(shù)學(xué)外插法測算出的鋅真利用率，同TME 法一樣，受內(nèi)源鋅排出量等參數(shù)的影響而變異較大，所得數(shù)據(jù)也只能作為參考。
　　4 結(jié)論
　　（1）隨雛雞采食鋅量的增加，雛雞體內(nèi)鋅沉積量顯著增大，而食入鋅沉積率卻明顯降低。
　　（2）日糧中鋅水平對雛雞采食量、體增重有顯著影響。對于玉米－大豆分離蛋白型半純合日糧（含鋅23.5mg/kg）外加鋅30mg/kg (總Zn53.5mg/kg ) 以上可滿足雛雞在本試驗(yàn)條件下的正常生長。
　　（3）血液、肝臟、脛骨、翼羽中鋅濃度，血清堿性磷酸酶活性均隨采食鋅量的升高而增加，并呈強(qiáng)正相關(guān)。因此，在育雛期，只要慎重處理、嚴(yán)格控制污染，可以用翼羽中鋅濃度作為評價(jià)雛雞鋅營養(yǎng)狀況的活體檢測指標(biāo)，也可用血清堿性磷酸酶活性作為此項(xiàng)評價(jià)的生化指標(biāo)。
　?。?）硫酸鋅、蛋氨酸螯合鋅（Ⅱ）內(nèi)絡(luò)鹽和絡(luò)陽離子、Zinpro100添加于飼糧中，未導(dǎo)致雛雞生長、血液和肝中鋅濃度、鋅沉積量、食入鋅沉積率的顯著差異，但所有這些指標(biāo)均表現(xiàn)出ZnMet2 和Zinpro100優(yōu)于ZnMet22+和ZnSO4 的趨勢。以脛骨和翼羽中鋅濃度、食入鋅沉積率為判斷指標(biāo)時(shí)，則4種鋅化合物的利用效率高低順序依次為Zinpro100> ZnMet2>ZnMet22+>ZnSO4。
　?。?）本試驗(yàn)測得玉米－大豆分離蛋白型半純合日糧中鋅的真利用率為20.40％。
　?。?）TME法和數(shù)學(xué)外插法用于微量元素鋅的代謝試驗(yàn)具有很大局限性。主要是內(nèi)源鋅排出量參數(shù)的測定方法不同，會(huì)導(dǎo)致鋅真利用率的測算值相差甚遠(yuǎn)，本試驗(yàn)用此兩種方法所測得各鋅源中鋅真利用率的數(shù)據(jù)也只能作為參考。短期快速的TME法用于元素利用率的研究是不可取的。但在雞對鋅源的利用方面，蛋氨酸螯合鋅明顯優(yōu)于硫酸鋅這一點(diǎn)是可以肯定的。
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作者: 韓友文    時(shí)間: 2009-7-5 13:48
說明是那年作的試驗(yàn)？誰作的？

夠得上古董了吧。
作者: xishanzhongke    時(shí)間: 2009-7-5 15:10
樓主可以將出處標(biāo)識一下



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