畜牧人

標題: 剖析黃芪多糖佐劑 [打印本頁]

作者: 小華佗 時間: 2009-10-13 15:33
標題: 剖析黃芪多糖佐劑
本帖最后由小華佗于 2009-10-13 15:34 編輯

分別將黃芪多糖提取物、白油-吐溫、氫氧化鋁作為佐劑制備金黃色葡萄球菌滅活苗混合免疫家兔和奶牛,觀察家兔免疫前后血清抗體滴度變化以及攻毒后白細胞數(shù)目變化和淋巴細胞百分比變化.對奶牛免疫后測其血清抗體和乳汁中體細胞數(shù)變化,結(jié)果注射疫苗后乳汁中體細胞數(shù)都有所下降黃芪多糖組較其它組下降較快,幅度較大黃芪多糖和抗原混合物免疫動物后未見不良反應,且抗原免疫血清抗體比氫氧化鋁和白油-吐溫佐劑組的抗體滴度增加快,幅度顯著增高且抗體維持一個較高水平,而攻毒后家兔白細胞數(shù)和淋巴細胞數(shù)也較氫氧化鋁和白油-吐溫佐劑組增加較多.因此黃芪多糖是一種有效的佐劑. 為此有以下幾組實驗很好的證明了黃芪多糖作為佐劑的廣泛應用，那么它的作用具體體現(xiàn)在哪里呢？下面我們就綜合上述，來對它來個大“解剖”！
   一、將1日齡健康羅曼雛80只隨機分為4組,每組20只。分別于1日齡皮下注射生理鹽水以及不同劑量的黃芪多糖 ,連續(xù)7d,于7、14、21、28、35、42、49、56日齡采血,檢測AI和ND抗體效價,探討黃芪多糖的免疫佐劑效果。試驗結(jié)果表明,各組黃芪多糖均能提高AI-HI和ND-HI抗體效價,其中中劑量組抗體高峰期持續(xù)時間長,免疫后期有較高延長抗體存在的趨勢,具有較好的免疫輔助效果。二、14日齡雛雞200只,隨機均分為10組,在用新城疫弱毒苗免疫的同時,6個試驗組分別肌肉注射高、低劑量3種修飾的硫酸化黃芪多糖（sAPS)sAPS40、sAPS50和sAPS60,2個多糖對照組注射高、低劑量未修飾的黃芪多糖 (APS),無佐劑對照組注射等量生理鹽水,每天1次,連續(xù)3 d.分別于免疫后7、14、21、28 d翅靜脈采血測定血清抗體效價;于免疫后14、21、28、35 d心臟采血測定T淋巴細胞增殖.結(jié)果表明,3種修飾多糖均能顯著提高血清抗體效價、促進T淋巴細胞增殖,作用強于未修飾多糖,并有一定的量效和時效關(guān)系,高劑量提高血清抗體效價、低劑量促進T淋巴細胞增殖的效果較好,綜合評價以sAPS60最好,可以作為新型免疫增強劑的候選藥。一、黃芪多糖、人參皂甙Rb1對豬口蹄疫疫苗的佐劑效果及相關(guān)機理研究本試驗目的旨在以兩種補氣中藥成分為代表，對中藥成分作為疫苗佐劑機制進行研究。進行本試驗期望得到一種新型的、經(jīng)濟的豬口蹄疫疫苗的佐劑，提高現(xiàn)有疫苗的保護力，降低現(xiàn)有疫苗的副作用，降低豬口蹄疫的發(fā)病率，減少勞動費用，即這種佐劑能刺激機體產(chǎn)生較強的體液免疫和細胞免疫反應，同時，通過對佐劑作用機制的探索，將給新的佐劑開發(fā)提供一些試驗方法，具有良好的研究意義。試驗以常用補氣中藥黃芪和人參的主要有效成分——黃芪多糖和人參皂甙Rb1為代表，首先黃芪多糖和人參皂甙Rb1直接與口蹄疫疫苗混勻，通過肌肉注射免疫小鼠和豬，觀察口蹄疫抗體效價的變化。試驗結(jié)果：小鼠一免15d抗體效價與對照組差異不顯著HAlog2＜7(p＞0.05)，二免后的小鼠抗體效價HAlog＞7與對照組比較差異極顯著(p＜0.01)；黃芪多糖 (0.5mg/只)+疫苗組、黃芪多糖 (0.1mg/只)+疫苗組和人參皂甙Rb1(0.01mg/只)+疫苗組與對照組差異極顯著(p＜0.01)，黃芪多糖 (0.05mg/只)+疫苗組和人參皂甙Rb1(0.002mg/只)+疫苗組與對照組差異顯著(p＜0.05)。經(jīng)過免疫的豬一免后抗體效價都沒有達到保護免疫效價(HAlog2＜7)，二免15d抗體效價遠遠高于一免的抗體效價(HAlog2＞7)，二免30d抗體效價比二免15d有些下降，但是高于只經(jīng)過一免的抗體效價(HAlog2＞7)?？傊S芪多糖和人參皂甙Rb1均能提高小鼠和豬只的口蹄疫抗體效價，并且隨著兩種成分濃度的增加對抗體效價的影響也隨之增強。隨后進行大鼠腸黏膜微血管內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)。通過對內(nèi)皮細胞第Ⅷ因子相關(guān)抗原和硝酸銀鑒定，證明培養(yǎng)的微血管內(nèi)皮細胞第Ⅷ因子相關(guān)抗原染色為陽性，AgNO3染色后，黑色的硝酸銀顆粒沉積在血管內(nèi)皮細胞邊緣即細胞間隙中，呈棕黃色，細胞間以鋸齒狀結(jié)構(gòu)連接，體現(xiàn)血管內(nèi)皮細胞呈現(xiàn)典型的多邊形。最后黃芪多糖、人參皂甙Rb1和口蹄疫疫苗同時作用細胞，繼續(xù)培養(yǎng)一段時間觀察內(nèi)皮細胞NO、IL-6和TNF-α分泌量的變化。試驗結(jié)果：口蹄疫疫苗(0.1μL/mL)單獨作用于腸黏膜微血管內(nèi)皮細胞，微血管內(nèi)皮細胞分泌的NO、IL-6和TNF-α極顯著的高于對照組(p＜0.01)；黃芪多糖 (450μg/mL)和人參皂甙Rb1(40μg/mL)分別與口蹄疫疫苗(0.1μL/mL)聯(lián)合作用細胞，微血管內(nèi)皮細胞分泌NO、IL-6和TNF-α比單獨疫苗作用減少，比對照組分泌量高(p＜0.05或p＜0.01)。結(jié)果表明：黃芪多糖和人參皂甙Rb1均能起到疫苗佐劑的作用，提高口蹄疫疫苗的抗體效價和保護微血管內(nèi)皮細胞免受損傷的作用。
   二、黃芪多糖佐劑及其在I型鴨疫里氏桿菌滅活疫苗中的應用本發(fā)明涉及一種疫苗免疫佐劑和疫苗，具體地說是一種黃芪多糖佐劑及其在I型鴨疫里氏桿菌滅活疫苗中的應用。該疫苗佐劑為黃芪多糖溶液，黃芪多糖溶液濃度為30mg/ml。本發(fā)明I型鴨疫里氏桿菌黃芪多糖滅活疫苗，它由作為疫苗的鴨疫里氏桿菌RA-1滅活菌液和作為佐劑的黃芪多糖溶液混合而成。本發(fā)明提高了傳統(tǒng)滅活苗的免疫效果，有效地防控鴨傳染性漿膜炎，也為新型免疫佐劑的研究提供依據(jù)。本發(fā)明疫苗具有良好的安全性和免疫原性，能有效預防鴨傳染性漿膜炎的發(fā)生。
   三、黃芪多糖佐劑.........（待續(xù)）

作者: xunliliu 時間: 2009-10-13 15:42
怎么待續(xù)啊？樓主還真會吊味口哦！

作者: ytythb 時間: 2009-10-14 09:07
做個標記先，期待樓主待續(xù)

作者: 小華佗 時間: 2009-11-4 11:08
本帖最后由小華佗于 2009-11-3 15:09 編輯

回復 2# xunliliu
有上就有下不要著急！呵呵

[ts]小華佗于 2009-11-3 15:10 補充以下內(nèi)容[/ts]

回復 3# ytythb
標記不錯對我很有提醒的作用！在此謝謝誒！

作者: flyfish01 時間: 2009-11-4 11:13
熱烈期待待續(xù)的內(nèi)容啊，修好吧黃氏多糖在水產(chǎn)中的應用也加入到其中來

作者: 小華佗 時間: 2009-11-4 13:08
回復 5# flyfish01
希望得到指點

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