畜牧人

標題: 轉(zhuǎn)】忍冬藤作為肉雞飼料添加劑的促生長和免疫作用 [打印本頁]

作者: k8117 時間: 2010-3-14 12:52
標題: 轉(zhuǎn)】忍冬藤作為肉雞飼料添加劑的促生長和免疫作用
將中草藥基地剪枝清理的忍冬藤作為飼料添加劑飼養(yǎng)肉雞,試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)忍冬藤試驗組的肉雞無論是在促進生長、增重、增強免疫力、減少發(fā)病率和死亡率方面,都顯示出很好的功效,試驗組的血液生化指標也都優(yōu)越于對照組,從而為忍冬藤的綜合開發(fā)利用找到了出路,也為養(yǎng)禽業(yè)的中草藥免疫增強劑的開發(fā)和飼養(yǎng)無藥物殘留、無污染、生態(tài)型肉雞探索了一條新的用藥途徑。

一般醫(yī)藥上將金銀花的枝條稱為忍冬藤,也和金銀花一樣,具有清熱解毒、通經(jīng)活絡的作用。對于熱毒血痢、癰腫瘡毒和筋骨疼痛都有很好的療效[1],尤其是中毒性疾病,新鮮的忍冬藤更是一味難得的良藥。但由于藥用知識尚未普及以及其他多種人為的因素,忍冬藤一直沒有被重視利用,2003年非典爆發(fā)流行時金銀花每公斤高達百元以上,而忍冬藤的收購價格和柴火燃料差不多。為了驗證忍冬藤的藥用價值,課題組專門進行了畜禽生產(chǎn)試驗和實驗室動物免疫試驗,現(xiàn)將試驗過程和結(jié)果介紹如下,供同道指教。

1　材料和方法

1.1　藥物和試劑

1.1.1　忍冬藤飼料添加劑的研制新鮮的1年生忍冬藤,剪枝所得,置于80℃烘3ｈ。水分降至10%以下過80目篩備用。

1.1.2　忍冬藤口服液的研制將干燥的忍冬藤粉碎成粗粉末,用水浸泡30ｍｉｎ以后,置于鍋內(nèi)煎3次,合并三次濾液,濃縮成1:1煎劑(按每ｍＬ藥液含1ｇ原藥),分裝于容量瓶中,滅菌備用。

1.1.3　西藥和試劑林可霉素、左旋咪唑、蛋白、阿氏液、生理鹽水和各種試劑。

1.2　試驗動物

1日齡健康海蘭褐商品雞250羽,供試小白鼠50只,每只重25±5ｇ。

1.3　飼　料

飼料為粉料,根據(jù)ＮＲＣ(1994)標準配制?；A日糧組成及所含營養(yǎng)成分如表1所示。預混料為每公斤含:維生素Ａ1000000ＩＵ,維生素Ｄ100000ＩＵ,維生素Ｂ140ｍｇ,維生素Ｂ120.5ｍｇ,維生素Ｂ6100ｍｇ,維生素Ｅ1000ＩＵ,維生素Ｋ100ｍｇ,核黃素300ｍｇ,葉酸30ｍｇ,煙酸2000ｍｇ,泛酸鈣550ｍｇ,生物素3ｍｇ ,Ｚｎ3000ｍｇ,Ｆｅ4000ｍｇ,Ｃｕ400ｍｇ,Ｉ22ｍｇ,Ｓｅ5ｍｇ。

1.4　試驗環(huán)境和管理水平

各組飼養(yǎng)環(huán)境和飼養(yǎng)管理方式一致。常規(guī)免疫為1日齡噴霧;4～5日齡二聯(lián)苗皮下注射;8日齡時用新城疫ＩＶ系苗飲水免疫,試驗前按常規(guī)飼養(yǎng),自由采食,溫度、濕度、飼料和飲水相同。試驗期間各試驗組疾病按常規(guī)治療。 1.5　試驗方法

1.5.1　將健康1日齡海蘭褐商品雞250羽隨機分為5組,每組各50羽,每個組2個重復,每個重復25只雞。分別飼養(yǎng)于5個雞欄中,其中1組為忍冬藤+基礎日糧,2組為0.3%忍冬藤+基礎日糧試驗組,3組為0.5%忍冬藤+基礎日糧,4組為2.5 ｍｇ/ｋｇ的林可霉素+基礎日糧,5組為基礎日糧對照組。試驗期為40ｄ,分為前期(1～3周)和后期(4～6周)。

1.6　指標檢測

1.6.1　肉雞成活率檢測在試驗第21ｄ和第40ｄ分別統(tǒng)計各組試驗雞的成活率,檢測不同劑量的忍冬藤飼料添加劑和抗生素對肉雞成活率的影響

成活率=(成活雞數(shù)/試驗雞數(shù))×100%

1.6.2　肉雞增重與飼料轉(zhuǎn)化率試驗第21天,第40天進行稱重,分別計算每只試驗雞重量,統(tǒng)計飼料利用量,檢測和對比忍冬藤飼料添加劑和抗生素對增重和料肉比的影響。

1.6.3　肉雞免疫器官指數(shù)的檢測選擇脾臟、法氏囊和胸腺作為免疫器官,試驗結(jié)束以后,從每個試驗組中隨機抽取5只雞,空腹稱重,屠宰后分離脾臟、法氏囊和胸腺,測定其重量,檢測忍冬藤飼料添加劑和抗生素對肉雞免疫器官指數(shù)(器官重ｇ/活體重ｋｇ)的影響。

1.6.4　肉雞血清生化指標檢測試驗雞40ｄ齡時,分別在每個試驗組中隨機抽取5只,翅靜脈采血2ｍＬ,分離血清-20℃保存待測。檢測忍冬藤飼料添加劑和抗生素對肉雞血清生化指標的影響。谷草轉(zhuǎn)氨、谷丙轉(zhuǎn)氨、球蛋白、總蛋白、尿素氮、甘油三酯、總膽固醇采用ＸＬ-600全自動生化分析儀測定[2]。

1.6.5　忍冬藤飼料添加劑和抗生素對小白鼠巨噬細胞吞噬功能的影響試驗為了驗證忍冬藤飼料添加劑增強免疫系統(tǒng)的功能,按照中草藥藥理研究方法學中的有關規(guī)定,采用小白鼠進行試驗。將30只小白鼠分為三組,每組10只。 組用忍冬藤飼料添加劑按每只2ｇ/2ｍＬ/ｄ劑量灌服;組用西藥左旋咪唑按2ｍｇ/ｍＬ/ｄ劑量灌服;組作為空白對照組灌服等量蒸餾水0.5ｍＬ/ ｄ。連續(xù)給藥一周后,分別給小鼠腹腔注射1%蛋白1ｍＬ;2ｈ后分別注射5%雞紅細胞懸浮液0.5ｍＬ;10ｈ后將小白鼠脫頸椎處死,仰位固定于鼠板,腹腔注射阿氏液2ｍＬ,充分轉(zhuǎn)動固定板,然后抽取腹腔巨噬細胞洗液,離心,去掉上清液,涂片,→固定→染色→晾干→鏡檢。在油鏡下每片計巨噬細胞數(shù)200個,然后按以下公式計算其吞噬指數(shù)與吞噬百分率[2]:

吞噬百分率=吞噬雞紅細胞的巨噬細胞數(shù)/200個巨噬細胞×100%

吞噬指數(shù)=被吞噬的雞紅細胞總數(shù)/200個巨噬細胞

將所觀察到的各組小白鼠的試驗數(shù)據(jù)進行整理、分析和對比。

1.7　藥物對小白鼠脾淋巴細胞玫瑰花結(jié)形成的影響試驗[2]。

淋巴細胞表面具有抗體,可與不同種動物的紅細胞結(jié)合,形成玫瑰花瓣樣的細胞團,稱為玫瑰花結(jié)(ＲＦＣ),而形成率的高低,常可反映機體細胞免疫功能的強弱,故可作為藥物影響免疫功能的指標之一。本試驗取小白鼠20只,隨機分成忍冬藤組和生理鹽水組,每組10只。每鼠腹腔注射5%綿羊紅細胞(ＳＲＢＣ)0.4ｍＬ(約4億個ＳＲＢＣ),1次免疫后,接著按組分別以0.4ｍＬ/20ｇ量給予忍冬藤水煎劑及生理鹽水灌胃,每日1次,連續(xù)4次后,末次給藥后1ｈ處死小白鼠,取出脾臟,按組稱重后剪碎,加入ＰＨ為7.6的Ｇｅｙ'ｓ液2ｍＬ混勻,?磨??碎??后? ?取上層液,以1000ｒｐｍ離心后去上清液,加入Ｇｅｙｓ液2ｍＬ,進行細胞計數(shù),加11%臺盼藍檢查活細胞數(shù)。將脾細胞懸液稀釋成8×106個細胞/ｍＬ,取0.1ｍＬ加入1%ＳＲＢＣ及經(jīng)ＳＲＢＣ吸收過的滅活小牛血清0.1ｍＬ混勻,以1000 ｒpm

離心10min 后放入4 的冰箱2h, 然后每管加入1% 甲苯藍20 L染色,再將細胞懸液滴于血球計數(shù)盤上,蓋上玻片,在高倍鏡下計數(shù)特異玫瑰花結(jié)形成的百分率.

2　結(jié)果與分析

2.1　數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析方法

根據(jù)各組試驗雞的存活數(shù)量統(tǒng)計結(jié)果計算成活率,從表2可以看出,忍冬藤飼料添加劑組和添加抗生素組對肉雞成活率(%)的影響差異不顯著(Ｐ>0.05)。

2.3　不同劑量的忍冬藤飼料添加劑與抗生素對與飼料轉(zhuǎn)肉雞增重化率的影響

0.05);對于40日齡重,各試驗組均與對照組差異">從表3可以看出,對于21日齡重,忍冬藤飼料添加劑和抗菌素試驗組與空白對照組之間差異不顯著(Ｐ>0.05);對于40日齡重,各試驗組均與對照組差異顯著(Ｐ<0.05),但各試驗組之間差異不顯著(Ｐ>0.05)。前期料肉比,各試驗組均比對照組差異顯著(Ｐ<0.05),但各試驗之間差異不顯著(Ｐ>0.05)。0.05);但試驗3組和4組與對照組間差異顯著(Ｐ后期料肉比,對照組與試驗組之間差異不顯著(Ｐ>0.05);但試驗3組和4組與對照組間差異顯著(Ｐ<0.05),由此可見,后期的料肉比以添加0.5%忍冬藤效果最好。免疫器官指數(shù)的影響從表4可見,與對照組相比,忍冬藤飼料添加劑組和抗生素組都能增加法氏囊指數(shù),但差異不顯著(Ｐ>0.05),其中以試驗3組和試驗40.05);對于胸腺指數(shù),除試驗3組以外各試驗組與對照組差異不顯著(">組提高最多;添加忍冬藤飼料添加劑與抗生素之后,各試驗組的脾臟指數(shù)與對照組差異不顯著(Ｐ>0.05);對于胸腺指數(shù),除試驗3組以外各試驗組與對照組差異不顯著( <SPAN title="ＰＰ<0.05)。由此分析,添加忍冬藤和林可霉素有增加肉雞免疫器官指數(shù)的作用,其中添加0.5%忍冬藤效果最好。

2.5　藥物對小白鼠巨噬細胞吞噬功能的影響

試驗結(jié)果表明:忍冬藤能增強免疫系統(tǒng)的功能,其小白鼠巨噬細胞的吞噬指數(shù)(1.4582±0.062)、吞噬百分率(64.2±3.75)都顯著的高于左旋咪唑組(0.9295±0.024、45.3 ±0.03)、空白對照組(0.8711±0.019、31.3±4.71);(Ｐ<0.01);而左旋咪唑組與空白對照組之間的差異不顯著(Ｐ>0.01)。

2.6　藥物對小鼠脾淋巴細胞玫瑰花結(jié)形成的影響

試驗結(jié)果表明忍冬藤試驗組的特異玫瑰花結(jié)形成率32.2±4.28顯著地高于生理鹽水對照組(7.5±1.28)。

2.7　不同劑量的忍冬藤飼料添加劑與抗生素對肉雞血清生化指標的影響

0.05),但與對照組比較,隨著忍冬藤飼料添加劑劑量增高,">從表5可見,與對照組比較,忍冬藤飼料添加劑與抗生素對各試驗組血清谷草轉(zhuǎn)氨活性并無顯著影響(Ｐ>0.05),但與對照組比較,隨著忍冬藤飼料添加劑劑量增高,各試驗組血清谷草轉(zhuǎn)氨活性也隨之增加,其中以試驗5組活性最高,與對照組相比,差異顯著。<SPAN title="然而,添加忍冬藤后,各試驗組血清尿素氮含量卻隨銀忍冬藤水平提高而減少,其中試驗5組的尿素氮水平顯著低于對照組,差異顯著(Ｐ然而,添加忍冬藤后,各試驗組血清尿素氮含量卻隨銀忍冬藤水平提高而減少,其中試驗5組的尿素氮水平顯著低于對照組,差異顯著(Ｐ<0.05)。

試驗1組和試驗2組的甘油三酯含量略有提高,但差異不顯著(Ｐ>0.05)。

<SPAN title="對于血清中總膽固醇的含量,與對照組比較,各試驗組呈現(xiàn)出隨著忍冬藤水平的提高而下降的趨勢,其中試驗3組顯著低于對照組差異顯著(Ｐ對于血清中總膽固醇的含量,與對照組比較,各試驗組呈現(xiàn)出隨著忍冬藤水平的提高而下降的趨勢,其中試驗3組顯著低于對照組差異顯著(Ｐ<0.05),說明添加0.5 %忍冬藤能明顯降低肉雞血清中總膽固醇的含量。

由于血清甘油三酯和血清膽固醇是反映機體血脂水平的兩個常用指標,故從降低肉雞血脂水平的角度來看,日糧中以添加0.5%忍冬藤效果最佳。

2.8　不同劑量的忍冬藤飼料添加劑與抗生素對肉雞血清免疫指標的影響

0.05),但試驗1和試驗2組的血清總蛋白顯著高于試驗組5(對照組),">試驗結(jié)果從表6可見,添加忍冬藤后,各試驗組的血清總蛋白差異不顯著(Ｐ>0.05),但試驗1和試驗2組的血清總蛋白顯著高于試驗組5(對照組),差異顯著(Ｐ<0.05);對于血清蛋白指標,各試驗組之間差異不顯著(Ｐ>0.05);對于血清蛋白指標,試驗1組和試驗2組顯著高于試驗組5(對照組),差異顯著(Ｐ<0.05),但試驗3組、試驗2組和試驗3組的血清球蛋白指標與對照5組差異不顯著(Ｐ>0.05)。

3　討　論

3.1　忍冬藤的藥理作用及其利用價值

忍冬藤是金銀花的藤莖,與金銀花一樣,是重要的藥用植物,具有很高的藥用價值,其功效為清熱解毒、抗菌消炎、通經(jīng)活絡。其藥理作用主要為消炎作用,并對多種致病性細菌有抑制作用,主要有效成分為忍冬、木犀草素、黃酮類和生物堿等,所含的木犀草素稀釋為1:350000時,在體外仍能抑制葡萄球菌及枯草桿菌的生長。民間廣泛地將忍冬藤用于治療熱毒血痢、癰腫瘡毒和筋骨疼痛,尤其是中毒性疾病如毒菇中毒、農(nóng)藥和重金屬中毒,新鮮的忍冬藤更效果更佳[4]。所以在人醫(yī)疾病方面,忍冬藤應用較為廣泛,而在畜牧生產(chǎn)中,忍冬藤較少利用,從試?驗可見忍冬藤具有廣闊的開發(fā)前景。

3.2　忍冬藤飼料添加劑的作用原理

3.2.1　忍冬藤飼料添加劑能提高肉雞成活率、飼料轉(zhuǎn)化率與肉雞增重從試驗表明,不同水平的忍冬藤飼料添加劑均能提高肉雞成活率、飼料轉(zhuǎn)化率與肉雞增重,忍冬藤飼料添加劑的促生長作用可能與忍冬藤飼中含有許多功能成分有關,如忍冬、木犀草素、黃酮類、生物堿、多糖、酚類及氨基酸、微量元素以及其他未知的促生長因子等有關。研究表明:忍冬藤中黃酮類、內(nèi)酯類具有提高機體體液免疫和細胞免疫功能的作用;忍冬藤中氨基酸含量十分豐富,故忍冬藤的促生長作用可能與其提高動物的免疫功能、抗菌消炎和提供一定的必需氨基酸有關[5]。

3.2.2　忍冬藤飼料添加劑能提高肉雞免疫器官指數(shù)

胸腺、法氏囊及脾臟是禽類的主要免疫器官,是免疫細胞形成和分化、產(chǎn)生抗體的主要場所,所以,胸腺、法氏囊及脾臟的重量可用于評價雛雞的免疫狀態(tài)。免疫器官的發(fā)育狀況直接影響機體免疫應答水平和抵抗外來微生物的感染和侵入的能力,其絕對重量和相對重量增加,說明機體的細胞免疫和體液免疫機能增強。本試驗表明:忍冬藤飼料添加劑能促進肉雞免疫器官的生長發(fā)育,可作為一種抗原物質(zhì),促進免疫器官發(fā)育、肉雞整體免疫機能加強、抵抗各種病原微生物感染的能力和抵抗各種應激的能力得到提高,與肉雞生長變化速度一致[6]。

3.2.3　忍冬藤飼料添加劑能提高實驗動物小白鼠的免疫效果

忍冬藤飼料添加劑的免疫效果可從小白鼠巨噬細胞吞噬作用和小白鼠脾淋巴細胞玫瑰花結(jié)形成的結(jié)果體現(xiàn)出來。左旋咪唑是獸醫(yī)臨床上常用的抗蠕蟲藥,也是一種常用的免疫調(diào)節(jié)劑,它能使機體免疫功能低下者恢復正常,并能增強正常機體細胞免疫和體液免疫功能。其作用機理是所含的咪唑基團可誘導機體產(chǎn)生各種淋巴因子,促進Ｔ淋巴細胞的成熟;其代謝產(chǎn)物ＯＭＰＩ有清除自由基的功能,可保護細胞免受氧化自由基的損傷,并可使受抑制的吞噬細胞和淋巴細胞功能恢復正常,從而增強機體免疫功能。動物機體內(nèi)巨噬細胞具有強大的吞噬作用,是機體防御功能的重要組成部分,具有消除病原體,消除異物,消除體內(nèi)衰老死亡細胞以及吞噬處理抗原作用。忍冬藤組的試驗結(jié)果指標顯著高于空白對照組.甚至高于西藥左旋咪唑組;與空白對照組相比,巨噬細胞吞噬百分率、吞噬指數(shù)均差異原著.由此證明,忍冬藤本身就是一種免疫活性物質(zhì).能提高免疫原性能,而藥理研究也已證明忍冬藤和金銀花均能促進網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng),增強細胞吞噬力,還能提高淋

巴細胞功能,使細胞內(nèi)含量增加,溶血素和溶血空斑值升高,從而增強機體的免疫功能[7].

3.2.4　忍冬藤飼料添加劑能提高肉雞肝臟合成蛋白的能力

谷草轉(zhuǎn)氨和谷丙轉(zhuǎn)氨的活性是反映肝臟和心臟功能的重要指標。本試驗中試驗雞隨著忍冬藤飼料添加劑水平的提高。說明忍冬藤飼料添加劑能提高肉雞肝臟合成蛋白的能力以及肝臟的正常功能,使機體內(nèi)非必需氨基酸的轉(zhuǎn)化和生成增加,促進了蛋白質(zhì)的沉積[8]。

3.2.5　忍冬藤飼料添加劑有降低肉雞血脂的作用

試驗表明忍冬藤飼料添加劑有降低肉雞血脂的作用。血清甘油三酯和膽固醇是反映機體血脂水平的兩個常用指標。而高膽固醇血癥是人和動物血管粥樣硬化和冠心病的重要因素之一。忍冬藤飼料添加劑的降低肉雞血脂的作用在試驗中充分體現(xiàn),由此間接為降低人體膽固醇試驗研究提供了實例。

4　結(jié)　論

從以上可見忍冬藤作為飼料添加劑具有促進肉雞生長增重、提高肉雞肝臟合成蛋白的能力、降低肉雞血脂水平和提高肉雞提高各種免疫能力的作用,而以添加0.5%忍冬藤效果最好。由此可見,如果根據(jù)《保健食品功能學評價程序和檢驗方法》規(guī)定的評價標準,忍冬藤飼料添加劑作為一種促進肉雞生長增重、降低動物血脂作用的飼料添加劑具有廣闊的開發(fā)前景。雖然忍冬藤作為飼料添加劑還存在著劑型過于簡單粗糙、用量偏大、用法較為麻煩等不足之處,但它畢竟是一種天然的植物性制劑,而且對于中草藥植物園基地來講更符合廢棄物綜合利用的循環(huán)經(jīng)濟模式,在當今人們呼喚回歸大自然、追求綠色食品的新潮流下,忍冬藤若能進一步提純和完善,運用于多種形式的畜禽水產(chǎn)養(yǎng)殖,必將顯示出更高的經(jīng)濟效益和社會效益。

作者: 孟俊英 時間: 2010-3-14 13:28
不過忍冬的種植面積有限，還是因地制宜的好。山東、河南、湖北三省較多，多為家庭養(yǎng)殖，并且作為中草藥，忍冬藤的用量也不低，所以作為飼料添加劑的前景不明朗。

作者: k8117 時間: 2010-3-14 16:46
回復 2# 孟俊英

加量大了，可以頂飼料

歡迎光臨畜牧人 (http://ffers.com.cn/)