發(fā)酵豆粕各項(xiàng)指標(biāo)檢測方法與標(biāo)準(zhǔn)
1、水份、粗蛋白、粗脂肪、粗纖維、灰份、鈣和磷的分析方法全部采用國標(biāo)法。
2、總有機(jī)酸測定采用氫氧化鈉滴定的方法和乳酸測定采用氣象色譜。
3、pH的測定采用玻璃電極pHS-3C型pH計(jì)測定。
4、可溶蛋白的測定方法
5、小肽含量的測定
水份的測定
水份測定直接參見國標(biāo)
測定完水分后的樣品需要測定其中的總有機(jī)酸的含量,其數(shù)值為A,并計(jì)算有機(jī)酸的揮發(fā)量。
水份含量的計(jì)算時(shí)應(yīng)當(dāng)扣除這部分有機(jī)酸的揮發(fā)量,否則會出現(xiàn)水分超標(biāo)現(xiàn)象。
總有機(jī)酸檢測
試劑:NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液(鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)定),酚酞指示劑
儀器:磁力攪拌器 離心機(jī)
方法:
(1)取發(fā)酵后鮮樣品15g 置于150ml燒杯中加入溶于100ml去離子水,在磁力攪拌器上浸提30min。
(2)取部分浸提樣離心10min(3000r/min)。
(3)取上清液15ml, 加30ml去離子水稀釋(以消除底色的影響),加酚酞指示劑四滴,用0.1molNaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定,并記錄到終點(diǎn)消耗NaOH體積。(終點(diǎn)到溶液呈現(xiàn)粉紅)
計(jì)算
乳酸(%)=N(NaOH)×V(NaOH) ×0.09008/15×115/15g
N(NaOH):NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度;
V(NaOH) :消耗NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液體積;
0.09008:乳酸的毫克當(dāng)量。
0.1mol氫氧化鈉的配制與標(biāo)定
1、配制:稱取9.6g氫氧化鈉,溶于100ml水中,搖勻,注入聚乙烯容器中,密閉放置至溶液清亮。用塑料管虹吸5ml的上清液,注入2000ml無二氧化碳水中(將去離子水煮沸5分后冷卻),搖勻。
2、標(biāo)定
稱取0.67g于105~110℃烘至恒重的基準(zhǔn)的鄰苯二甲酸氫鉀,準(zhǔn)確至0.0001g,溶于50ml的無二氧化碳水中,加4滴酚酞指示劑(0.1%),用配制好的氫氧化鈉溶液滴定至溶液呈粉紅色,同時(shí)作空白試驗(yàn)。
3、計(jì)算
氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度按下式計(jì)算
c(NaOH)=m/(V1-V2)×0.2042
式中 c(NaOH)——?dú)溲趸c標(biāo)準(zhǔn)溶液之物質(zhì)的量的濃度,mol/l;
V1——滴定用鄰苯二甲酸氫鉀之用量,ml;
V0——空白試驗(yàn)氫氧化鈉溶液之用量,ml;
m——鄰苯二甲氫鉀之質(zhì)量,g;
0.2042——與1.00ml氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)液[c(NaOH)=1.000mol/l]相當(dāng)?shù)囊钥吮硎镜泥彵蕉讱溻浿昧俊?/font>
0.1%酚酞指示劑的配制:稱取1.000克酚酞,溶解與100ml95%的試劑酒精中,混勻即得。
乳酸測定
稱取樣品10g與50ml的燒杯中,移取30ml去離子水,在磁力攪拌器上攪拌30min,在3000r/min離心10min,取上清液利用氣相色譜或液相色譜測定乳酸含量。
pH的測定
稱取樣品10g與50ml的燒杯中,移取15ml去離子水,攪拌30min,用 pHS-3C型pH計(jì)測定溶液的pH值。
或者用精密pH試紙測試。
可溶性蛋白的測定
根據(jù)AOCSBa11-65測定蛋白質(zhì)溶解指數(shù)的方法
稱取20g樣品于300ml的勻漿杯中、量取50ml 37+1℃的去離子水于勻漿杯中,將勻漿杯放在37℃的水浴中,浸泡攪拌5min,在內(nèi)切式組織勻漿機(jī)上勻漿10min,從勻漿杯中取出漿液移入600ml燒杯中,待漿液分層后,移出40ml上清液注入50ml離心管中,并在2700r/min的轉(zhuǎn)速下離心10min,移取15ml上清液于凱氏燒瓶中,測定上清液中蛋白質(zhì)含量和樣品總蛋白含量,計(jì)算溶解可溶性蛋白質(zhì)的數(shù)量。
小肽含量測定方法
三氯乙酸(TCA)法
三氯乙酸法的原理是利用大分子的蛋白質(zhì)在TCA溶液中沉淀,除去酸不溶蛋白質(zhì),然后測定酸溶蛋白含量。國外大量資料表明在蛋白質(zhì)酶水解的研究中測定水解度,通常在酶解液中加入TCA溶液,是為水解的大分子蛋白質(zhì)沉淀,而與小分子的酸溶蛋白成分,即肽類和FAA離開,測定酸溶蛋白占總蛋白的含量,求得水解度,即酸溶蛋白占總蛋白的百分比。
粗蛋白≥50%
小肽(1000d以下)≥10%
乳酸≥3.5%
水分≤10%
鈣 0.5-0.54%
總磷≥0.74%
/gm益生菌≥20億/克
蛋白酶≥150
粗脂肪≤5.0%
粗纖維≤3.0%
無氮浸出物≤28%
粗灰分≤6.0%
豬消化能(kcal/kg)3980
豬代謝能(kcal/kg)3600
豬凈能(kcal/kg)2320
禽代謝能(kcal/kg)2570
魚消化能(kcal/kg)3200
奶牛凈能(kcal/kg)1090
項(xiàng)目
含量
天門冬氨酸Asp 5.42%
賴氨酸Lys 3.03%
蛋氨酸Met 0.65%
蘇氨酸Thr 2.05%
精氨酸Arg 3.50%
甘氨酸Gly 2.25%
絲氨酸Ser 2.43%
異亮氨酸Ile 2.21%
苯丙氨酸Phe 2.37%
纈氨酸Val 2.36%
組氨酸His 1.24%
谷氨酸Glu 9.84%
丙氨酸Ala 2.30%
脯氨酸Pro 2.04%
色氨酸Trp 0.50%
亮氨酸Leu 3.76%
發(fā)酵豆粕與普通豆粕、膨化豆粕比較 項(xiàng)目/種類 | 豆粕 | 膨化大豆 | 發(fā)酵豆粕 | 工藝 | 壓榨/浸提 | 熱加工 | 發(fā)酵、酶解 | 粗蛋白% | 44 | 36 | 50 | 粗纖維% | 6-7 | 5 | 5 | 粗灰分% | 6.5 | 5 | 6 | 酸堿度 | 7.0 | 7.0 | 4.0-4.8 | 細(xì)胞壁破裂 | 沒有破壁 | 部分破壁 | 100%破壁 | 小分子蛋白含量% | 11.0 | 9.0 | 22 | 胰蛋白酶抑制劑 | 5-10mg/Kg | 5-20mg/Kg | 1mg/Kg | 脲酶mg/Kg | 0.4 | / | <0.02 | 棉子糖水蘇四糖 | 12-15 | 9-12 | <0.05 | 大豆球蛋白ppm | 高 | 高 | <10 | 半球蛋白ppm | 高 | 高 | <1 | 外源凝集素ppm | 100-300 | 100-300 | <1 | 氣味 | 豆腥味 | 豆腥味 | 發(fā)酵香味 | 顆粒度 | 大顆粒 | 大顆粒 | 細(xì)粉 | 流散性 | 中等 | 不好 | 佳 |
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