畜牧人

標題: 轉載：動物胃腸道黏膜免疫簡述 [打印本頁]
作者: 小馬哥    時間: 2010-6-23 08:04
標題: 轉載：動物胃腸道黏膜免疫簡述
黏膜免疫系統(tǒng)在抵抗感染方面起著極其重要的作用,黏膜抗感染保護性作用的產(chǎn)生依賴于黏膜局部和系統(tǒng)的免疫反應。近年來,黏膜免疫日益引起人們的重視,并被認為處于現(xiàn)代免疫預防的中心地位。

1、黏膜免疫系統(tǒng)

黏膜免疫系統(tǒng)主要指呼吸道、腸道及泌尿生殖道黏膜固有層和上皮細胞下散在的無被膜淋巴組織 (包括腸道黏膜集合淋巴結和呼吸道等黏膜下層的淋巴小結和彌散型淋巴組織,含有豐富的B 細胞、T細胞和巨噬細胞,它們彌散分布在黏膜上皮內(nèi)及黏膜下,或由單個或多個淋巴濾泡聚集成淋巴小結) ,及某些帶有生發(fā)中心的器官化淋巴組織, 如扁桃體、小腸派氏集合淋巴結(Peyer’s patches , PP) 及闌尾等,由腸相關淋巴組織(GALT) 、支氣管相關淋巴組織(BALT) 、黏膜結合淋巴組織、致敏淋巴細胞散布途徑和黏膜免疫效應部分及其他黏膜相關淋巴組織組成的免疫系統(tǒng)。機體超過50 %的淋巴組織和超過80 %的免疫細胞集中于黏膜免疫系統(tǒng)。

2、胃腸道黏膜免疫系統(tǒng)

胃腸道不僅是營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的場所,還是機體內(nèi)最大的細菌和毒素貯庫,正常腸道之所以能將數(shù)量巨大的細菌和毒素等有害物質(zhì)有效局限于胃腸道內(nèi),依賴于腸道免疫系統(tǒng)多方面多層次的免疫防護,即胃腸道免疫。胃腸道免疫是由一個復雜的腸道免疫系統(tǒng)組成,腸道免疫系統(tǒng)的狹義概念是指由有結構的組織黏膜濾泡和彌散淋巴組織構成的腸相關淋巴組織( Gut - associated Lymphoid Tissue ,GALT) ,也叫黏膜免疫系統(tǒng)。

3、胃腸道黏膜免疫系統(tǒng)在系統(tǒng)構成和功能上的特點

誘導位點和效應位點是包括2 個功能的部位。誘導位點為首次接觸抗原并誘導起始反應的位點,主要包括腸道相關淋巴組織( GALT) 和M 細胞等。效應位點主要包括腸道黏膜固有層淋巴細胞、上皮內(nèi)淋巴細胞和一些相關的外分泌腺(如淚腺、唾液腺和乳腺等) 。

4、胃腸道黏膜免疫系統(tǒng)發(fā)揮功能的特點

1) 具有特異的免疫分子介導的免疫反應和黏膜歸巢(mucosal homing) 。

在誘導部位和效應部位間,主要通過淋巴細胞歸巢發(fā)生聯(lián)系。即在一個誘導部位致敏的免疫細胞, 經(jīng)胸導管進入血循環(huán),逐步分化成熟,在特異性歸巢受體(hom - ingreceptor) 的介導下,約80 %的免疫細胞歸巢到抗原致敏部位(即誘導部位的黏膜固有層或上皮內(nèi)) 發(fā)揮效應功能,由此使黏膜免疫相對獨立于系統(tǒng)免疫,表現(xiàn)為局部性。另外,約20 %的免疫細胞進入其他黏膜部位,發(fā)揮效應功能,使不同黏膜部位的免疫反應相關聯(lián)(Brandtzaeg 等,1999) 。因此,有人把從黏膜誘導部位歸巢到效應部位這一功能上相聯(lián)的系統(tǒng)統(tǒng)稱為共同黏膜免疫系統(tǒng)(commonmu - cosalimmunesystem) 。

2)是IgA、IgB 細胞和記憶性T細胞定位的場所。

3) 所分泌的免疫球蛋白主要是S - IgA。

黏膜免疫主要的作用對象是黏膜表面吸入或食入的大量種類繁多的抗原。既可對大量無害抗原下調(diào)免疫反應或產(chǎn)生耐受,也可對有害抗原或病原體產(chǎn)生高效體液和細胞免疫,進行有效免疫排斥或清除(高杰英,2000) 。以上這些性質(zhì)一方面使宿主不受病原體的傷害, 另一方面使機體對普通的食物抗原和正常微生物產(chǎn)生免疫耐受。

5、胃腸道黏膜免疫系統(tǒng)效應因子

5.1 M細胞

小腸黏膜下的淋巴集結稱為Peyer 氏淋巴結(PeyersPatches ,PP 結) 。胃腸道黏膜免疫系統(tǒng)具有特殊的PP 結。研究表明,PP 結具有明顯的淋巴上皮及上皮下的大量淋巴組織,淋巴組織中有多量的淋巴濾泡,覆蓋濾泡的上皮細胞被稱為M 細胞或濾泡結合上皮(Follice - associatedepithelial ,FAE) 。M細胞頂端胞質(zhì)很薄,其游離面缺少像腸吸收上皮那樣規(guī)則排列的微絨毛,而是以微皺褶和短而小的不規(guī)則微絨毛為特征。M 細胞可通過吸附、胞飲和內(nèi)吞等方式攝取腸腔內(nèi)抗原性異物并轉運抗原,尤其是轉運顆粒性抗原至位于其下方的組織,并以囊泡形式轉運給凹腔內(nèi)的MΦ和樹突狀細胞(DC) , 再由它們將抗原提供給淋巴細胞, 從而誘發(fā)黏膜免疫。M細胞將顆粒和微生物直接轉運至黏膜淋巴濾泡的特殊環(huán)境,似乎是啟動分泌免疫反應的第一步。

5.2上皮細胞間淋巴細胞( intraepitheliallymphocyte ,IEL)

IEL 是存在于小腸黏膜上皮內(nèi)的一類獨特細胞群,通過基底膜沿上皮細胞內(nèi)淋巴細胞( IEC) 側面定位于黏膜上皮細胞間, 由αβ+ T 細胞和γδ+ T 細胞構成。研究表明,IEL 有與細胞毒素T 細胞及NK細胞相似的胞內(nèi)顆粒,如穿孔素、粒酶和絲氨酸酯酶, 具有組成性溶細胞活性,故IEL 的主要功能是細胞殺傷作用。上皮間淋巴細胞具有輔助活性, 可產(chǎn)生Th1 和Th2 功能相關的細胞因子,調(diào)節(jié)其他淋巴細胞和上皮細胞功能;也可分泌淋巴細胞因子,如TNF -α、γ- IFN 和IL - 2 ,因此,在防御腸道病原體入侵方面發(fā)揮重要作用,如殺死細菌;清除被病毒感染的上皮細胞,還能刺激上皮細胞更新,產(chǎn)生對食物抗原的免疫耐受。

5.3 腸上皮細胞

腸上皮細胞間以緊密連接為主, 刷狀緣表面分布致密的堿性磷酸酶與S - IgA 和杯狀上皮細胞分泌的黏液組成動物體與外界的一層屏障, 阻止絕大部分外來致病原侵入。腸上皮細胞可表達主要組織相溶性抗原I、II (major histocompatibiloity complexclassI ,II ;MHC I ,II) 和CD1 發(fā)揮抗原呈遞功能; 它通過產(chǎn)生分泌成分(SC) , 有效轉運S - IgA 從黏膜固有層進入腸腔,參與S - IgA 的分泌,還產(chǎn)生大量黏膜免疫調(diào)節(jié)因子,如IL - 4 和IL - 10 等。

5.4 固有層淋巴細胞(LPL)

固有層細胞位于腸道黏膜固有層,T、B 淋巴細胞均很豐富,腸道黏膜固有層缺乏RAG1 和RAG2表達, 表明此處無T 細胞發(fā)生, 其T 細胞來源于Peyer 氏結。已發(fā)現(xiàn),在腸道黏膜免疫部位的免疫應答以輔助T 細胞(Th2) 型為主,定居在固有層的CD4+ Th2 細胞可分泌多種Th2 型細胞因子,如TGF -β、IL - 4、IL - 5、IL - 6 及IL - 10。Husband 研究了各種Th2 型細胞因子在黏膜免疫中的作用,結果發(fā)現(xiàn),由于IL - 4可激活靜止期B 細胞,故在誘導局部及全身抗體應答中起關鍵作用,而IL - 5 和IL - 6 則主要在黏膜部位發(fā)揮特殊作用。IL - 6 在促進腸道和呼吸道IgA 應答方面起重要作用,這已通過用基因去除技術(Knockout) 滅活IL - 6 基因得到證實。IL -4、IL - 5和IL - 6 可協(xié)同誘導S - IgA +B 細胞分化成為IgA + 漿細胞。因此,固有層是黏膜免疫應答的主要效應場所,漿細胞所分泌的大量IgA 可通過分泌片段的介導進入黏膜表面,中和抗原物質(zhì),起到清除外來抗原保護機體的作用。

5.5 分泌型IgA(S - IgA)

胃腸道免疫系統(tǒng)功能中起中心作用的是由B細胞轉化為漿細胞后產(chǎn)生的IgA。分泌型 IgA(SecretedimmunoglobulinA ,S - IgA) 是黏膜應答過程中的主要效應因子,是阻止病原體入侵黏膜的第一道有效防線。IgA 抗體在黏膜表面非常重要,其在黏膜部位的產(chǎn)量遠遠多于在其他組織。大量IgA 可遏制病原體在黏膜表面的黏附及減少病原體的著生,并在黏膜腔內(nèi)和黏膜下參與行使效應功能。IgA 經(jīng)腸上皮細胞間隙內(nèi)與上皮細胞產(chǎn)生的分泌片段結合,形成分泌型免疫球蛋白(S - IgA) 。S - IgA 釋放入腸腔,既可與相應抗原結合,抑制細菌增殖和中和毒素,保護腸黏膜,又能抵抗蛋白溶解酶作用,從而保護腸黏膜以防被消化。S - IgA 是黏膜組織免疫應答的特征,S - IgA抗體可通過阻礙黏膜與細菌和病毒的接觸從而給黏膜表面提供特殊的免疫屏障。黏膜相關淋巴組織(MALT) 中S - IgA 超過80 %。黏膜免疫系統(tǒng)可通過遠距離位點的黏膜表面誘導抗原特異性S - IgA分泌。S - IgA 還可穿越上皮組織, 在上皮內(nèi)顯示其抗微生物能力。

S - IgA 以單體和二聚體2 種分子形式存在。單體存在于血清中;二聚體由呼吸道和消化道等部位黏膜固有層的漿細胞產(chǎn)生,是有2 個單體經(jīng)1 條J鏈連接構成的二聚體。二聚體以受體介導方式及黏膜上皮或基底膜表達的pIGr 或IgAFc 段結合,介導該結合物的內(nèi)吞, 并轉運至細胞頂膜, 經(jīng)酶解使結合有IgA 的多聚免疫球蛋白受體(pIgR) 胞外區(qū)脫落, 并分泌至黏膜腔。此外,由局部黏膜上皮細胞所合成的分泌成分SC 在IgA 通過黏膜的上皮細胞過程中,分泌成分與之結合形成S - IgA。SC 不僅具有促進上皮細胞積極地從組織中吸收S - IgA ,并將其釋放于胃腸道和呼吸道內(nèi)的作用,同時分泌成分可防止S - IgA 在消化道被蛋白酶降解,同時它的多鏈性、黏膜親和性及抵抗蛋白酶的作用均有助于與病毒和細菌親和,從而使S - IgA 充分發(fā)揮免疫作用。

6、動物腸道免疫的影響因素

6.1 細胞因子

細胞因子在細胞生長、分化和凋亡等生理過程及黏膜免疫中淋巴細胞歸巢和急慢性炎癥等病理過程中發(fā)揮重要作用。

1)細胞因子中干擾素- γ( IFN - γ) 和腫瘤壞死因子-α(TNF -α) 對IgA 的分泌有下調(diào)作用, IL - 4、IL - 5、IL - 6 和IL - 10 對IgA 的分泌有增強和誘導作用,分泌這些因子的細胞主要存在于固有層內(nèi),與IgA 漿細胞有著密切的空間關系。近期研究發(fā)現(xiàn),在黏膜組織內(nèi)白細胞介素- 15 ( IL - 15) 是S - IgM +S - IgA - 和S - IgM- S - IgA +B - 1 細胞轉化為IgA細胞的重要因子,IL - 15 同IL - 5 一樣在調(diào)節(jié)B - 1細胞分化成產(chǎn)生IgA 漿細胞過程中起重要作用,它是調(diào)節(jié)IgA 反應的重要細胞因子。最近發(fā)現(xiàn),腹腔CD5 +B 細胞群中含有許多IgA 漿細胞的前體細胞,IL - 5 和IL - 2 可大大增強這種細胞分泌IgA 和IgG的能力。IL - 4 是S - IgA +B 細胞產(chǎn)生的重要因子。資料表明,Th - 2 型細胞因子: IL - 4 , IL - 5 和IL - 6對黏膜IgA 的發(fā)育有調(diào)節(jié)作用,且Th - 2 細胞在小腸黏膜的出現(xiàn)頻率較高,這些細胞因子的mRNA 表達也占優(yōu)勢。

2) 趨化性免疫因子(chemokine) 目前在細胞因子與黏膜免疫的研究中比較集中的對象是與黏膜免疫密切相關的趨化性細胞免疫因子。在黏膜部位產(chǎn)生并發(fā)揮作用的趨化性細胞因子稱為黏膜相關趨化性細胞因子,其與受體在黏膜上皮細胞分化發(fā)育、創(chuàng)傷愈合、黏膜淋巴細胞歸巢并定居于黏膜特定部位、黏膜急性炎癥和HIV 感染等生理病理過程中起重要作用。

6.2 病原菌

許多病原菌在長期進化過程中合成了一種IgA蛋白水解酶,可水解黏膜局部的S - IgA ,從而削弱S - IgA的保護功能,便于細菌入侵和定植。IgA 蛋白水解酶的表達可能是病原菌對抗宿主腸道黏膜免疫反應的重要致病機制。最近研究發(fā)現(xiàn),人體血清和外分泌液中具有這類因子的抑制因子,不但能對抗IgA 蛋白酶的水解作用,還能對抗腸道液體動力系統(tǒng)的干擾,這類抑制因子在感染的恢復期血清中水平最高。研究發(fā)現(xiàn),白色念珠菌、銅綠假單胞菌及某些腸桿菌科細菌能產(chǎn)生可降解IgA 的蛋白酶。

6.3 其他物質(zhì)

血管活性腸肽(VIP) 、P 物質(zhì)(SP) 及生長抑素(SS) 等對S - IgA 合成轉運等都有影響。體外研究表明,SS 可下調(diào)DNA 合成和細胞分裂,抑制Ig(尤其是IgA) 的合成;而SS 受體多位于具有抑制和殺傷作用的T 淋巴細胞上,除了直接作用于淋巴細胞,SS還作用于其他細胞,間接頏頡淋巴細胞的分裂和Ig的合成。VIP 對淋巴細胞的分裂和Ig 的合成有明顯的調(diào)節(jié)作用,而且對IgA 合成的影響大于對IgM 或IgG的影響。VIP 受體主要分布于T 細胞上,VIP 與其受體結合可活化膜的環(huán)腺苷酶系統(tǒng),導致DNA 復制和細胞分裂的抑制。SP 能顯著促進ConA 刺激的PP 淋巴細胞和脾淋巴細胞的DNA 合成,也可促進Ig 合成,其對IgA 合成的影響大于對IgM 的影響,IgG不受影響。

7、胃腸道黏膜免疫營養(yǎng)調(diào)控措施

胃腸道黏膜作為營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的場所,通過營養(yǎng)調(diào)控黏膜免疫功能的發(fā)揮,具有特殊優(yōu)勢。研究集中在以下方面:1) 通過營養(yǎng)調(diào)控促進IgA 的分泌。2) 通過營養(yǎng)調(diào)控維持胃腸道黏膜組織的完整性。相關營養(yǎng)因子有以下幾個:

7.1 氨基酸和短肽

7.1.1 谷氨酰胺(Gln)

谷氨酰胺是腸黏膜上皮細胞和淋巴細胞的主要燃料,同時又是細胞增殖分化所需的氮源,在促進受損腸道修復及維持正常局部免疫功能中發(fā)揮重要作用。機體本身只能在肝臟和骨骼肌中合成極少量的谷氨酰胺,正常情況下谷氨酰胺主要從腸道或循環(huán)中攝取。研究表明,在斷奶仔豬日糧中添加谷氨酰胺可防止空腸絨毛萎縮,緩解小腸結構的改變,減少腸道的通透性和腸道細菌及內(nèi)毒素移位,并且能促進隱窩細胞增生和腸腔內(nèi)黏液凝滯體分泌,維持小腸結構完整。谷氨酰胺缺乏能明顯降低腸腔中S -IgA 的含量,與腸黏膜內(nèi)可分泌S - IgA 的漿細胞數(shù)量減少有關。Bruke 等研究了接受全腸外營養(yǎng)(TotalParenteral Nutrition ,TPN) 動物腸道免疫功能的變化發(fā)現(xiàn),沒有加入Gln 的動物,膽汁中S - IgA 的分泌下降50 % ,細菌大量黏附于黏膜表明,腸系膜淋巴結中有明顯的細菌移位;而在全腸外營養(yǎng)物中加入谷氨酰胺的動物,膽汁中S - IgA 水平與正常動物比較無差別,腸黏膜漿細胞計數(shù)也證實,谷氨酰胺能阻止產(chǎn)生S - IgA 細胞的減少。

Alverdy 等(1992) 隨后的結果又證實, 未加入G1n 的TPN 組動物膽汁中S - IgA 明顯下降, IgA 陽性的漿細胞也明顯減少,另外,CD4 + 和CD8 + 的淋巴細胞也急劇下降,而在TPN 液中加入谷氨酰胺的動物B、T 細胞均與正常動物無差別。

7.1.2 精氨酸

精氨酸能促進黏膜上皮生長分化,使腸黏膜結構明顯改善,維護腸黏膜屏障。精氨酸可促進細胞毒性T 淋巴細胞活化; 也可促進NKC 活化和表達IL - 2受體。它還可促進下丘腦釋放生長激素,生長激素對腸黏膜有營養(yǎng)作用,可減少腸黏膜萎縮,加速受損腸黏膜的修復,維持腸黏膜結構和功能,增強機體局部和全身免疫力。精氨酸通過降低內(nèi)毒素減輕對腸壁的作用,減少腸黏膜屏障緊密連接破壞和降低通透性,減少腸黏膜屏障損害,同時也減少內(nèi)毒素對機體免疫功能的損害,這可能與精氨酸通過增強吞噬細胞活性,增加了對內(nèi)毒素的清除有關。

7.1.3 蘇氨酸

蘇氨酸作為黏液蛋白的一種組分,可抵抗病菌和病毒入侵,而腸道表面糖蛋白的連續(xù)性分泌則要消耗游離氨基酸,因此,飼料中有必要添加蘇氨酸。

7.1.4 酪蛋白磷酸肽(Cpps)

Otani 等(2000) 發(fā)現(xiàn),Cpps 具有促進斷奶仔豬黏膜免疫的作用。其機制是Cpps 一方面和靜止B 細胞結合使其被激活,另一方面和Th2 結合,促進IL -5 和IL - 6 的分泌,而活化的B 細胞在增殖和分化IgA 漿細胞過程中IL - 5 和IL - 6 起著重要作用,Cpps 通過和Th2 細胞結合促進IL - 5 和IL - 6 分泌進而促進IgA 生成。

7.2 益生素

益生素可使雛雞盲腸扁桃體黏膜皺壁增多,微絨毛密集及長度增大,分泌性蛋白顆粒增加,增強腸黏膜組織對物質(zhì)的吸收能力,從而促進腸吸收細胞及淋巴細胞的分化和增殖,局部黏膜免疫機能得以提高。楊玉榮(2003) 用1 日齡雛雞服用益生素后, 其局部黏膜免疫組織—哈德爾腺、盲腸扁桃體和十二指腸PP 結的IgA、IgM 及IgG生成細胞和T 細胞數(shù)量分別于7～10 d 和4～10 d 不同程度地高于未服用益生素的對照雛雞。試驗表明,益生素可激發(fā)雛雞局部黏膜組織的體液和細胞免疫功能。

乳酸菌的某些菌株,如鼠李糖乳桿菌(ATCC -53103) 、植物乳桿菌(VTT) 、乳酸球菌(ARH74) 及雙歧桿菌動物亞種是腫瘤壞死因子(TNF - α) 和IL - 6強有力的誘導劑,有些能刺激IL - 10 產(chǎn)生,以增強免疫。乳酸菌能刺激機體產(chǎn)S - IgA 的細胞增殖,從而使S - IgA 水平上升,促使系統(tǒng)對輪狀病毒產(chǎn)生免疫應答,中和毒素,緩解輪狀病毒引起的腹瀉、急性腸胃炎、厭食、遺傳性過敏皮膚炎和Crohn’s 等病的癥狀。乳酸菌和雙歧桿菌等益生菌分泌的最廣泛和最重要的免疫物質(zhì)是S - IgA。試驗證明,給1 日齡雛雞飼喂乳桿菌,在早期可顯著提高雞消化道S -IgA 抗體滴度。隨著日齡增加,試驗組和對照組間S - IgA滴度趨于一致。

7.3 微量元素

缺鋅可引起腸道黏液分泌細胞的超微結構損害。細胞有絲分裂、黏液蛋白合成和分泌受到嚴重抑制;黏液層厚度改變;黏液蛋白質(zhì)成分降低;黏液稠度降低;腸道黏液動力系統(tǒng)對病原微生物的清潔作用和交聯(lián)作用削弱;黏膜表面黏液屏障結構及其微生態(tài)環(huán)境改變,病原微生物易于在黏膜定植且穿透黏液層,直接接觸腸黏膜而誘發(fā)感染。王子旭(2003) 研究了日糧中不同鋅和硒水平互作下肉雞腸黏膜結構及黏膜免疫相關細胞的形態(tài)、結構、數(shù)量和分布的變化,并探討日糧中不同鋅硒配比對雞腸道消化吸收和免疫屏障功能的影響。結果表明,飼料中加入常鋅50 mg/ kg 和常硒0. 15 mg/ kg 是維護正常的雞腸道的消化吸收和屏障功能的最佳劑量,而飼料中鋅和硒缺乏或過高對肉雞腸道消化吸收和屏障功能有不同程度的損傷作用。硒和鋅二者間可相互影響,常鋅(或常硒) 可緩解因飼料硒(或鋅) 缺乏或過高中毒對肉雞黏膜結構和腸相關淋巴組織的損傷;而當硒和鋅均為缺乏量或中毒量時,二者可相互加強其毒害作用,使腸道消化吸收和黏膜屏障功能的損傷加重。

7.4 其他

短鏈脂肪酸(SCFAs) 可促進小腸黏膜細胞增生,維護腸黏膜形態(tài)。尤其是乙酸鹽可擴張腸道血管,增加腸道血流,可能有助于腸黏膜形態(tài)的維持;核苷酸能加速腸細胞的分化、生長與修復;左旋肉堿可通過提高腸黏膜細胞分解氧自由基的能力,降低氧自由基在組織中的濃度,減少細胞膜的脂質(zhì)過氧化反應,實現(xiàn)對腸黏膜組織正常結構和生理功能的保護作用;發(fā)酵纖維素和功能型寡糖可刺激黏膜生長,加強消化和黏膜免疫。

8、小結

胃腸道黏膜作用的發(fā)揮受眾多因素影響,其多種免疫成分之間相輔相成各有側重,以S - IgA 為主的體液免疫和以一系列淋巴細胞作用的細胞免疫,共同抵御外界抗原,保障機體活動正常進行。隨著現(xiàn)代微生態(tài)動物營養(yǎng)、分子營養(yǎng)和細胞因子等理論的完善, 動物胃腸道微生態(tài)的調(diào)控與腸道免疫相關研究將更加深入。
作者: HUANGMEIKEJI    時間: 2010-6-23 08:43
這是很好的資料,相信在研究調(diào)節(jié)機體免疫功能性用藥是很有幫助的!
除了腸胃,還有脾臟等,都是機體最大的免疫器官!
作者: 付強    時間: 2010-6-23 08:43
好資料，收藏了
作者: 向你學習    時間: 2010-6-23 08:44
這方面沒有接觸過，謝謝提供學習機會。
作者: zhaoyuyong    時間: 2010-6-23 08:44
黏膜免疫系統(tǒng)很是值得關注
作者: swordman33    時間: 2010-6-23 11:11
深奧，看不懂
作者: redtears13    時間: 2010-6-23 14:59
我們也在學啊
的確很關鍵也很重要



歡迎光臨 畜牧人 (http://ffers.com.cn/) Powered by Discuz! X3.5