我這有份關(guān)于酶制劑的資料,供大家參考和討論。
飼用復(fù)合酶制劑的功能
1、以蛋白酶、淀粉酶為主,補(bǔ)充內(nèi)源性消化酶不足,適用于小動(dòng)物。
2、以木聚糖酶、果膠酶、甘露聚糖酶為主,消除玉米—豆粕、小麥—豆粕等
類(lèi)型日糧的粘性抗?fàn)I養(yǎng)作用。
3、β-葡聚糖酶為主,輔以木聚糖酶等,消除大麥、黑麥型日糧的粘性抗?fàn)I
養(yǎng)作用。
4、蛋白酶、淀粉酶,木聚糖酶、果膠酶等兼而有之,為通用型飼用酶制劑等。
飼料加酶的必要性
1、常規(guī)飼料組成和結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性
植物細(xì)胞的細(xì)胞壁由纖維素、半纖維素、果膠等成分組成。動(dòng)物無(wú)分解這些成分的酶(單胃)或酶量不足(反芻),只能借助外源性酶才能分解,破壞細(xì)胞壁是有效利用胞內(nèi)成分的前提。另外,動(dòng)物的內(nèi)源性酶也不能完全有效地分解構(gòu)成細(xì)胞膜和各種細(xì)胞器的脂類(lèi)、碳水化合物、蛋白質(zhì)及其化合物。
每種飼料都含有不能被動(dòng)物消化的化學(xué)成分,使能量通過(guò)動(dòng)物消化道后的損
失率高達(dá)20-50%。
2、非常規(guī)飼料的開(kāi)發(fā)
羽毛粉、皮革粉、屠宰下腳料、漁業(yè)副產(chǎn)品等飼料資源的深開(kāi)發(fā)必須應(yīng)用酶
技術(shù)。
3、動(dòng)物的生理病理變化
動(dòng)物因生理缺陷、幼齡發(fā)育不全、病理變化、環(huán)境應(yīng)激等因素的影響使內(nèi)源
性消化酶分泌量或活性下降時(shí),必須補(bǔ)充外源性酶才能保持正常的消化功能。
4、生態(tài)畜牧業(yè)的要求
因動(dòng)物消化力或飼料消化性所限,飼料中的化學(xué)成分因不能被動(dòng)物有效利用
而隨排泄物進(jìn)入環(huán)境,造成環(huán)境污染。使用酶制劑是緩解這一問(wèn)題,促進(jìn)生態(tài)畜牧業(yè)發(fā)展的有效措施之一。
酶制劑的應(yīng)用對(duì)象與時(shí)機(jī)
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幼齡動(dòng)物
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老齡動(dòng)物
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高產(chǎn)動(dòng)物
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患病動(dòng)物
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斷奶動(dòng)物
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高溫季節(jié)
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換料之后
酶制劑分類(lèi)
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一類(lèi)是畜禽消化道可以合成和分泌,但因某種原因需要補(bǔ)充和強(qiáng)化的酶
種,稱(chēng)為消化性酶,如淀粉酶、蛋白酶等。
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一類(lèi)是動(dòng)物通常不能合成與分泌,但飼料中又有其相應(yīng)的底物存在(多為
抗?fàn)I養(yǎng)因子),而需要添加的酶種,稱(chēng)為非消化性酶,如木聚糖酶、果膠酶、甘露聚糖酶、纖維素酶、植酸酶、β-葡聚糖酶等。
酶制劑的生產(chǎn)技術(shù)
類(lèi)似于抗生素的粗生產(chǎn):培養(yǎng)基、產(chǎn)酶微生物、發(fā)酵生產(chǎn)、酶的提取、酶
的保藏、復(fù)合酶的配方技術(shù)
1.發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)含酶微生物---制造菌種(混合)
2.找到菌種最佳生產(chǎn)條件
3.發(fā)酵(固態(tài))
4.向產(chǎn)物中加入載體
培養(yǎng)基
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在培養(yǎng)基中提供適當(dāng)而豐富的營(yíng)養(yǎng)物,是菌體生長(zhǎng)和酶大量產(chǎn)生的重要前提 。
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酶制劑生產(chǎn)中所用原料主要包括碳源 、氮源 、無(wú)機(jī)鹽和誘導(dǎo)物和載體 。
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飼料工業(yè)所用微生物酶大都屬于誘導(dǎo)酶類(lèi),因此向培養(yǎng)基中加入誘導(dǎo)物就會(huì)增加胞外酶的產(chǎn)量 。
產(chǎn)酶微生物
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菌種利用廉價(jià)和簡(jiǎn)單的原料,食性廣,在不需添加誘導(dǎo)劑的條件下容易迅速生長(zhǎng)。
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產(chǎn)生的酶容易分離純化和濃縮,酶活性高,穩(wěn)定性好,活性譜寬 。
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產(chǎn)酶微生物應(yīng)具有穩(wěn)定的生理特性,而且不形成有毒或致免疫的代謝物 。
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產(chǎn)酶菌種除公認(rèn)是安全菌株外,都要做毒性實(shí)驗(yàn)。
發(fā)酵生產(chǎn)
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微生物酶的生產(chǎn),目前主要采用液體深層發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種方式 。
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飼料工業(yè)附加值低,飼料用酶無(wú)需精制,因此,采用固態(tài)發(fā)酵更為合適 。
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國(guó)內(nèi)復(fù)合酶制劑的生產(chǎn)一般采用固態(tài)發(fā)酵,液態(tài)發(fā)酵主要用于植酸酶的生產(chǎn)或生產(chǎn)單酶制劑用于復(fù)配合酶制劑。
酶的提取
飼料用酶無(wú)需純酶,且發(fā)酵所用基質(zhì)及菌體在生長(zhǎng)過(guò)程中所產(chǎn)生的氨基酸、維生素、核苷酸、促生長(zhǎng)因子等成分對(duì)畜禽生長(zhǎng)都是有利的,因此飼料用酶無(wú)需精制,只要將發(fā)酵基質(zhì)進(jìn)行濃縮(對(duì)液體發(fā)酵來(lái)講)、干燥獲得粗酶制品即可。
酶的保藏
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要保持酶長(zhǎng)期不失活,關(guān)鍵要控制好水分和溫度兩個(gè)條件 。
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日光照射有時(shí)也引起某些酶的失活,因此酶應(yīng)避免日光直射 。
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一些重金屬離子會(huì)抑制酶的活力,甚至?xí)姑甘Щ睿瑧?yīng)避免與這些物質(zhì)接觸。
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酶的底物和某些物質(zhì)具有保存酶的作用,酶貯存時(shí)應(yīng)添加酶的穩(wěn)定劑或進(jìn)行包被處理,以使酶長(zhǎng)期保存不失活。
復(fù)合酶的配方技術(shù)
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單一酶制劑成分單一,而飼料原料成分復(fù)雜,各地飼料原料、飼養(yǎng)方法、飼養(yǎng)環(huán)境各異,因而使用效果不太理想。
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除了植酸酶還可作用單項(xiàng)酶制劑應(yīng)用外,人們普遍使用含有多種酶類(lèi)的復(fù)合酶制劑 。
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復(fù)合酶制劑是多株菌種協(xié)同發(fā)酵而成 。
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多株菌種協(xié)同發(fā)酵的酶制劑除含酶制劑成分較多外,菌種生長(zhǎng)過(guò)程中還產(chǎn)生一些氨基酸、維生素、促生長(zhǎng)因子、核苷酸等成分。因此使用效果比復(fù)配的酶制劑要好。
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復(fù)合酶制劑的設(shè)計(jì)是根據(jù)各種酶的特性、活性及飼料原料、飼養(yǎng)對(duì)象的不同而設(shè)計(jì)。
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安牠復(fù)合酶制劑所含酶的種類(lèi)不象別的廠家的產(chǎn)品,越多越好,而是根據(jù)飼料原料及飼喂對(duì)象而設(shè)計(jì)。
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安牠復(fù)合酶制劑針對(duì)不同的飼喂對(duì)象、甚至同一飼喂對(duì)象的不同生長(zhǎng)階段,體內(nèi)所需酶類(lèi)不一樣,因此添加的外源酶制劑也不相同,以免造成酶制劑的浪費(fèi)或添加量不足,影響飼養(yǎng)效益。
酶制劑應(yīng)用效果差異的原因
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日糧類(lèi)型的差異
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選用產(chǎn)品品種不黨
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用量不夠
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加工儲(chǔ)藏條件不適
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產(chǎn)品質(zhì)量低劣
復(fù)合酶制劑產(chǎn)品目錄
型號(hào) | 適用對(duì)象 | 型號(hào) | 適用對(duì)象 |
101A | 小麥代玉米豬通用 | 301A | 肉雞專(zhuān)用 |
101B | 小麥代玉米禽通用 | 301B | 蛋雞專(zhuān)用 |
102A | 玉米豆粕豬通用型 | 301C | 肉鴨專(zhuān)用 |
102B | 玉米豆粕禽通用型 | 301D | 蛋鴨專(zhuān)用 |
103A | 稻谷麩皮豬通用型 | 401A | 常規(guī)水產(chǎn)專(zhuān)用 |
103B | 稻谷麩皮禽通用型 | 401B | 特種水產(chǎn)專(zhuān)用 |
201A | 乳、仔豬專(zhuān)用 | 501A | 幼齡反芻動(dòng)物用 |
201B | 生長(zhǎng)肥育豬專(zhuān)用 | 501B | 成年反芻動(dòng)物用 |
如何選擇和鑒別飼用酶制劑
還原糖法是測(cè)定了一個(gè)酶單位對(duì)特定底物的“剪斷”次數(shù),而不關(guān)心是在何處
剪斷的,這種方法簡(jiǎn)便實(shí)用,比較準(zhǔn)確而且可重復(fù)性較高
粘度法是測(cè)定酶對(duì)底物中間部位的剪斷次數(shù),相對(duì)地更接近底物在體內(nèi)的作
用方式,但比較費(fèi)時(shí)而且也復(fù)雜一些
底物染色法是對(duì)底物進(jìn)行人工著色,然后測(cè)定酶對(duì)顏色的降解程度,是一種
比較新的方法,目前還沒(méi)有被廣泛采用。國(guó)際上大多數(shù)生產(chǎn)商用還原糖法測(cè)定活性。
酶單位的定義為:在一分鐘內(nèi)產(chǎn)生一微摩爾還原糖所需的酶量。但各生產(chǎn)商
對(duì)測(cè)定條件的設(shè)定不同,如:溫度、pH、底物及底物的濃度等
1.溫度對(duì)酶活性的影響
測(cè)定溫度一般為30-55
°C,動(dòng)物體內(nèi)的溫度在40度左右,兩種b-葡聚糖
酶的活性在30 °C下測(cè)定時(shí)很接近,但在40
°C下,其差異變大,隨著溫度的升高,差異會(huì)更大,在選擇酶制劑時(shí),只知道一個(gè)溫度下測(cè)得的活性結(jié)果是不完全的
2.pH值對(duì)酶活性的影響
典型木聚糖酶及b-葡聚糖酶活性測(cè)定的pH為4.8-5.5;消化道內(nèi)pH: 胃為2
-2.5,十二指腸為6-6.2,小腸末為6.8-7.0,在pH為5時(shí),兩種葡聚糖酶的活性相近,但高于5或小于5時(shí),其差異非常大,只展示在pH為5時(shí)的測(cè)定結(jié)果是不夠的
木聚糖和b-葡聚糖的抗?fàn)I養(yǎng)作用在小腸后段,這段的pH大于6,因此、活
性應(yīng)在接近或大于6時(shí)測(cè)定,但在實(shí)際測(cè)定中,多數(shù)方法所設(shè)定的pH都低于這一數(shù)值
需要強(qiáng)調(diào)的是體外酶活性的測(cè)定應(yīng)在底物發(fā)生抗?fàn)I養(yǎng)作用所存在的pH下進(jìn)
行,否則得到的結(jié)果會(huì)產(chǎn)生誤導(dǎo)作用
3.底物對(duì)酶活性的影響
(1)酶對(duì)底物的選擇是非常專(zhuān)一的,在測(cè)定中底物的類(lèi)型和濃度是非常重要的,
從邏輯上講,如果動(dòng)物飼喂的基礎(chǔ)日糧以小麥或玉米為主,測(cè)定木聚糖酶的活性應(yīng)該分別用小麥或玉米木聚糖為底物
不同底物對(duì)三種木聚糖酶活性的影響
酶的活性 (U/mg) | ||
燕麥木聚糖底物 | 樺木木聚糖底物 | |
酶 A 酶 B 酶 C | 5570 1960 650 | 616 921 3022 |
使用燕麥木聚糖底物時(shí),三種酶的活性為A、B、C,把底物換成用樺木木聚糖時(shí)其順序則完全相反,而且底物不同酶的活性也不同
(2)底物濃度與酶的作用和降解底物的能力有關(guān)
兩種木聚糖酶在底物濃度超過(guò)5.0毫克/毫升,活性一致;當(dāng)?shù)陀?/strong>3.5毫克/
毫升時(shí),其表現(xiàn)明顯不同;當(dāng)降低到2.5毫克/毫升時(shí),酶B的活性非常低,已無(wú)法與底物作用;而酶A在底物濃度為1.0毫克/毫升時(shí)的活性依然相對(duì)強(qiáng)大
這一特性用km表示:km是酶在達(dá)到最大活性50%時(shí)的底物濃度,顯然理
想的酶應(yīng)具有較低的km,因?yàn)樵趧?dòng)物消化道內(nèi)底物的濃度一般為1-2毫克/毫升。
用每單位酶活的價(jià)格來(lái)判斷酶制劑的價(jià)值是常用的方法,因?yàn)樵趯?shí)驗(yàn)室里用
最佳的條件給酶排序是可能的,但這并不能說(shuō)明問(wèn)題
在pH為5和溫度為30°C的測(cè)定條件下,兩種產(chǎn)品每單位酶活的相對(duì)成本幾
乎一致,但當(dāng)把溫度提高到60°C時(shí),酶A每單位活性的價(jià)格降低到只有酶B價(jià)格的25%,而把測(cè)定的pH提高到7時(shí),每單位的酶活價(jià)格比則完全相反
結(jié)論
比較酶制劑的活性時(shí),所用的測(cè)定條件應(yīng)盡量與酶在體內(nèi)與底物作用時(shí)的條件相一致或相近。
即使在最適合的測(cè)定條件下,仍有一些因素是不可排除的,例如:酶必須通
過(guò)酸性的上消化道,然后在動(dòng)物小腸內(nèi)的特殊條件下保持其活性并能與底物作用,而且能夠抵抗其它抗?fàn)I養(yǎng)因素的存在
簡(jiǎn)單地說(shuō),評(píng)價(jià)飼用酶唯一有效的方法是將它添加到適合的飼料中來(lái)飼喂目
標(biāo)動(dòng)物,以目標(biāo)動(dòng)物的生長(zhǎng)表現(xiàn)來(lái)確定酶制劑的好壞
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