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標(biāo)題: 豬藍(lán)耳病的最新研究進(jìn)展及其啟示 [打印本頁]

作者: wjunfeng1982    時(shí)間: 2011-1-12 16:12
標(biāo)題: 豬藍(lán)耳病的最新研究進(jìn)展及其啟示
作者:朱漢守

美國明尼蘇達(dá)大學(xué)



一、典型藍(lán)耳病的臨床表現(xiàn)

在早期,典型的藍(lán)耳病表現(xiàn)如下癥狀:母豬厭食、早產(chǎn)(一般是預(yù)產(chǎn)期前2~7天早產(chǎn)),產(chǎn)生大量的弱仔和木乃伊,弱仔豬基本上很難飼養(yǎng)成活,這是藍(lán)耳病區(qū)別于其它導(dǎo)致流產(chǎn)的豬病的特點(diǎn)。母豬主要是妊娠后期流產(chǎn),一般是一過性流產(chǎn),4~8周恢復(fù)正常。
未流產(chǎn)母豬所產(chǎn)下的小豬,或流產(chǎn)、早產(chǎn)存活下來的小豬,這些豬斷奶進(jìn)入保育舍以后,主要的癥狀就是腹式呼吸且被毛雜亂,間質(zhì)肺炎相當(dāng)明顯(正常豬肺很軟,用手一按會(huì)塌陷,而且要很慢才能起的來,而患藍(lán)耳病豬只的肺很硬,肺間質(zhì)中充滿了各種細(xì)胞),但由于毒株的不同間質(zhì)肺炎嚴(yán)重程度的差異較大。
二、非典型藍(lán)耳病的特征
1997年以后,藍(lán)耳?。≒RRS)發(fā)生的特征及臨床癥狀就和以往的典型藍(lán)耳病很不一樣了。
母豬妊娠早期開始出現(xiàn)流產(chǎn),然后到中期和晚期流產(chǎn),流產(chǎn)會(huì)反復(fù),幾乎整個(gè)妊娠期都存在高的流產(chǎn)率,但幾乎沒有木乃伊和死胎,同時(shí),發(fā)病時(shí)母豬的死亡率更高,可能超過5%。
三、藍(lán)耳病病毒粒子
藍(lán)耳病病毒有6個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白,即GP3(分子量45KD)、GP4(分子量31KD)、GP2(分子量29KD)、GP5(分子量25KD)、M(分子量19KD)、N蛋白(分子量15KD)。只有病毒膜上的蛋白才有免疫原性,產(chǎn)生的抗體才能將病毒中和,即只有GP3、GP4、GP5蛋白產(chǎn)生的抗體才能夠中和病毒,換句話說,疫苗里要有這幾種蛋白才能有效抵抗藍(lán)耳病。
如果用活的病毒,包括使用全病毒做出來的疫苗感染豬群后,大部分豬產(chǎn)生的抗體,是由N蛋白產(chǎn)生的,用ELISA測抗體可知。也就是說,大多數(shù)時(shí)候ELISA檢測的結(jié)果同保護(hù)力沒有關(guān)系。
四、病毒序列分析
最常用的分析方法是用ORF5(5號(hào)開放閱讀框)基因的PCR產(chǎn)物直接測序,但是病毒序列的相似性不能說明它們之間是否具有交叉保護(hù)。 ORF5序列在豬場的運(yùn)用:鑒別藍(lán)耳病的爆發(fā)是由原毒株引起還是變異株引起;豬場是單一感染還是幾種PRRSV毒株同時(shí)存在;追溯新毒株的來源;監(jiān)控場內(nèi)和場間特定毒株的傳播;鑒別疫苗毒和野毒。
以前測序需要測整個(gè)ORF5,而現(xiàn)在毒株的多樣性分析只看ORF5的受體部分,看這一部分的差異是否造成免疫力等方面的區(qū)別。依據(jù)ORF5的受體識(shí)別區(qū)進(jìn)行分類,同一類的毒株可能具有交叉保護(hù),而與其它類之間就沒有交叉保護(hù)。
五、藍(lán)耳病的主要生物安全措施及控制策略
PRRSV的分類和它的免疫原性迄今為止都沒有準(zhǔn)確的方法,到現(xiàn)在為止,實(shí)際上就沒法分類。但是,豬場實(shí)踐中卻有很多實(shí)際有效的方法取得了巨大的成功。

1.后備母豬的檢疫及適應(yīng)性飼養(yǎng)
后備母豬隔離、檢疫和馴化等是相當(dāng)有用的方法,其要點(diǎn)是時(shí)間要長,共約90天。前30天是隔離檢疫期,在這期間采血、打疫苗,看看有沒有明顯的癥狀表現(xiàn)出來,30天后人工接種病毒,大部分是自家母豬場里采集到的病毒,理論上馴化40天以后不再散毒,但是一般是60天,然后再進(jìn)入母豬群配種。為了這樣做,母豬場里需要專門建造后備母豬隔離舍。

2.運(yùn)豬車的清潔
試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),光用高壓水槍沖洗、熏蒸的效果都非常不理想,而用合適的消毒藥、8小時(shí)干燥等措施的效果較好。

3.保育舍的清潔策略
撤去風(fēng)扇、料槽、墊料和保溫?zé)舻?,預(yù)先沖洗30分鐘,用清潔劑清洗,高壓沖洗,用合適濃度的消毒劑消毒,使豬舍干燥并檢查,再準(zhǔn)備料槽、墊料和保溫?zé)舻?,轉(zhuǎn)入豬群前6~12小時(shí)控制溫度在適合的范圍。
要想控制好PRRS,除了必要的生物安全措施還需要血清學(xué)檢測;陽性場后備母豬的培育、隔離以及馴化(人工感染);加強(qiáng)產(chǎn)仔舍管理盡可能得到陰性斷奶仔豬;穩(wěn)定母豬群及降低保育豬群飼養(yǎng)密度;場內(nèi)凈化,清群及監(jiān)測等策略。

六、PRRSV感染的血清學(xué)診斷
ELISA在很多地區(qū)是標(biāo)準(zhǔn)的檢測方法,但是,相比其它很多病毒,PRRSV有很多不同的地方。

ELISA檢測呈陽性最多能說明被病毒感染,并不意味著會(huì)出現(xiàn)臨床問題,也不能說明具有保護(hù)性,這和其它的病毒情況不一樣。

ELISA檢測呈陰性說明以下幾個(gè)可能性:豬群未感染;豬群剛感染但血清還沒有陽轉(zhuǎn);豬群以前感染過但現(xiàn)在血清呈陰性(藍(lán)耳病一次感染后大約4個(gè)月左右轉(zhuǎn)陰,這在母豬群最典型);豬群中的感染被清除且血清呈陰性;試驗(yàn)敏感性低。
通過使用PCR(測抗原)、ELISA(測抗體)等方法在3周齡、6周齡、10周齡、14周齡、18周齡、22周齡時(shí)序列測樣,就知道自己的豬群是在什么時(shí)候感染的病毒。
七、公豬群的PRRSV檢測
公豬感染PRRSV以后,血清里很快就有病毒,而精液中則稍晚,因此,采集血液進(jìn)行血清PCR檢測比精液檢測更敏感。
公豬檢測有兩個(gè)方法:一是做配對(duì)ELISA,做2次,間隔1個(gè)月,如果第2次檢測發(fā)現(xiàn)抗體上升,說明有病毒感染;二是做PCR,間隔1個(gè)月采血1次,每次都要將血樣留下一部分,下次檢測時(shí)要加上前1次的一起檢測,以免誤差。
可能有這樣的情況發(fā)生,每隔一段時(shí)間采同一頭公豬的血樣,連續(xù)4個(gè)月抗體都在下降,但是到第5個(gè)月卻又上升了,這種情況很可能是由于新的感染。
八、當(dāng)前PRRS控制中的難題
現(xiàn)在PRRS的控制還是有很多的問題,其中最大的問題是PRRSV有很多種亞型,而且到底怎么分型還不能準(zhǔn)確知道,亞型之間的免疫原性也很差,相互沒有交叉的保護(hù);第二,病毒多次感染以后就可能導(dǎo)致基因變異,在豬場產(chǎn)生產(chǎn)生新的病毒;第三,疫苗的免疫應(yīng)答不好,弱毒苗沒有加強(qiáng)免疫的應(yīng)答;第四,可通過精液傳播。
九、PRRS爆發(fā)時(shí)的管理指導(dǎo)
藍(lán)耳病爆發(fā)時(shí)要注意以下幾點(diǎn):

1.確保所有的母豬盡快感染(人工感染),千萬不要再隔離,否則1年都結(jié)束不了。
(1)條件
后備豬是自己場生產(chǎn)的這種情況,如果這些豬在保育舍里已經(jīng)感染過PRRSV,就沒有必要做人工感染;如果后備豬在保育舍沒感染過或剛從外面引進(jìn)的陰性后備母豬,就須做人工的血清感染。
(2)病毒接種液的制備
收集疑似藍(lán)耳病豬如流產(chǎn)母豬、弱仔等的血清,混合起來,感染陰性的小豬,再從陰性的小豬身上采集病毒血清。
(3)效果評(píng)價(jià)
接種血清3周以后,ELISA檢測100%呈陽性,這就說明接種的血清里含有足夠量的病毒,接種有效果。出問題的場其原因主要是:接種血清里病毒量不足;其它病原污染;錯(cuò)誤的免疫方法;錯(cuò)誤的病毒測定方法。

2.不要返飼母豬的胎衣等病料,因?yàn)槔锩娴牟《玖亢苌?,基本上沒什么作用。

3.禁止24小時(shí)以外的交叉代養(yǎng),尤其不要在產(chǎn)房之間代養(yǎng)小豬,要避免仔豬在產(chǎn)仔舍之間的移動(dòng)。

4.PRRS爆發(fā)期間,要多淘、快淘病仔和弱仔豬.

5.轉(zhuǎn)入保育舍前淘汰體重過輕的斷奶仔豬,保育舍嚴(yán)格的全進(jìn)全出措施,防止繼發(fā)感染等。
十、藍(lán)耳病的凈化
對(duì)于母豬舍、保育舍、育肥舍分開的豬場,其凈化起來就比較容易。通過血清學(xué)調(diào)查了解豬場病毒感染情況,找到陰性豬來源,并檢查生物安全。一次購入2個(gè)月用的后備母豬,同時(shí)接種本場血清,然后封群,停止引進(jìn)陰性后備豬6個(gè)月(藍(lán)耳病的散毒期約是40多天,再長也就是80多天,而凈化則需要2倍的時(shí)間,一般是200d)。6個(gè)月封群快結(jié)束時(shí),清空保育舍仔豬。這樣的豬場就凈化了藍(lán)耳病。(詳見《今日養(yǎng)豬業(yè)》2009年第3期)
十一、PRRSV疫苗的新進(jìn)展
美國在PRRS疫苗方面有一些新的嘗試,其中一個(gè)就是做區(qū)域性的自家的亞單位疫苗,從豬場或某一地區(qū)的病毒分離出來,并選擇特定的毒株進(jìn)行培養(yǎng),用特定的方法只把病毒膜蛋白提取出來,做成亞單位疫苗。
美國農(nóng)業(yè)部調(diào)查顯示,藍(lán)耳病弱毒苗的用量在美國已大大的降低了?,F(xiàn)在看來,藍(lán)耳病的基因測序?qū)ΡWo(hù)力沒有什么指導(dǎo)意義。至于疫苗是否有效,沒有統(tǒng)一的經(jīng)驗(yàn),最好的判斷方法是測試,測試疫苗是否有效的方法如下:
已經(jīng)感染過藍(lán)耳病即將淘汰的母豬,采血測抗體,然后注射疫苗,4周后再采血測抗體,如果抗體變化很小或不變,就說明母豬的抗體能夠中和疫苗的病毒,則認(rèn)為弱毒苗有效;如果抗體上升了,就說明原來母豬有的抗體對(duì)疫苗病毒是沒用的,疫苗還能產(chǎn)生新的抗體。

作者: hujinshui    時(shí)間: 2011-1-12 17:06
沒見到確有效的疫苗




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