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標(biāo)題: 蒙脫石對(duì)金黃色葡萄球菌吸附作用的研究 [打印本頁(yè)]
作者: 845186640 時(shí)間: 2017-4-19 17:03
標(biāo)題: 蒙脫石對(duì)金黃色葡萄球菌吸附作用的研究
蒙脫石(MMT)又叫膨潤(rùn)土,是一種礦物藥。據(jù)記載我國(guó)蒙脫石的藥用已有悠久歷史,唐代醫(yī)學(xué)名著《本草拾遺》中的干土即為蒙脫石。除傳統(tǒng)的礦物藥之外,粘土礦物的藥用價(jià)值研究已成為該領(lǐng)域之熱點(diǎn)。國(guó)內(nèi)的蒙脫石資源豐富,自20世紀(jì)80年代開始被歐美國(guó)家制做藥用賦形劑,并分別納入美國(guó)、歐洲和英國(guó)藥典。法國(guó)IPSEN制藥公司生產(chǎn)的西藥西密達(dá)(Smeeta)是近年來(lái)應(yīng)用于治療消化系統(tǒng)疾病的藥用。本品系由氧化硅及氧化鋁組成的不溶性層狀硅酸鹽固體物質(zhì),由于其特殊的內(nèi)部結(jié)構(gòu),帶有不飽和的負(fù)電荷及具強(qiáng)烈的陽(yáng)離子產(chǎn)換能力,對(duì)進(jìn)入人體的病毒細(xì)菌有絕對(duì)的吸附固定作用。臨床上用作治療腹瀉和消化潰瘍的藥物。天然蒙脫石比表面積較小,影響了它的吸附性能,蒙脫石是層狀硅鹽,其單元層間距大約1nm。在蒙脫石層間插入有機(jī)修飾劑,能改性成有機(jī)蒙脫石(納米蒙脫石),使蒙脫石比表面積大幅提高,吸附能力顯著增強(qiáng);利用納米蒙脫石的無(wú)毒性、高比表面積、高吸附性等特性,研究其對(duì)細(xì)菌、病毒以及毒素等的吸附性,為進(jìn)一步開發(fā)新藥提供理論依據(jù),為此我們將聚乙二醇插入蒙脫石的片層間,制備出納米蒙脫石,并對(duì)金黃色葡萄球菌的吸附效果進(jìn)行了探討。
1、材料與方法:
1.1、材料:菌珠:金黃色葡萄球菌(ATCC25923)、肉湯培養(yǎng)基,PH7.0~7.2,121℃滅菌15 min。
菌液的配制:將金黃色葡萄球菌培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,取少許,用滅菌生理鹽水配成菌液,濃度為0.5×105cfu/ml。試劑:蒙脫石購(gòu)于佛山南海市非金屬開發(fā)公司:不同分子量聚乙二醇購(gòu)于天津市科歐化學(xué)試劑開發(fā)中心。
1.2、方法
1.2.1 制備納米蒙脫石 參照盧其明【2】實(shí)驗(yàn)方法,分別取不同相對(duì)分子質(zhì)量的PEG1.00g于200ml燒杯中,加100ml蒸溜水,放在電磁攪拌器上攪拌至完全溶解。加入膨潤(rùn)土5.00g,再于電磁攪拌器上攪拌1h,離心分離(4500r/min,2 h).將沉淀轉(zhuǎn)入蒸發(fā)皿,于65℃真空干燥6h,研磨至200目,再于65℃真空干燥2 h,密封保存。
1.2.2 抑菌實(shí)驗(yàn) 在接種了金黃色葡萄球菌的平板培養(yǎng)基,點(diǎn)樣PGE400、PEG6000和蒙脫石的粉末;在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,觀察細(xì)菌生長(zhǎng)情況。
1.2.3 細(xì)菌吸附作用的檢測(cè) 取4個(gè)三解燒瓶,1、2、3號(hào)瓶分別加入0.02g PEG400/蒙脫石、PEG6000/蒙脫石插層復(fù)合物,和蒙脫石,4號(hào)瓶為空白對(duì)照,各燒瓶分別吸5 ml菌液振搖20 min,靜置6 h,各吸上清液100ml,分別按稀釋平板計(jì)數(shù),重復(fù)2次。據(jù)此計(jì)算和比較各瓶中細(xì)菌的濃度。按下式計(jì)算三者對(duì)金黃色葡萄球菌的吸咐率;吸咐率=(1-試驗(yàn)管上清液中細(xì)菌濃度/空白對(duì)照管上清液中細(xì)菌濃度×100%。
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