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飼用小肽的檢測方法

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樓主
發(fā)表于 2007-6-22 10:48:24 | 只看該作者 回帖獎(jiǎng)勵(lì) |倒序?yàn)g覽 |閱讀模式
飼用小肽的檢測方法,希望大家提出報(bào)告意見

9-2-雙縮脲顯色法測定總肽含量.rar

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沙發(fā)
發(fā)表于 2007-6-23 11:33:29 | 只看該作者
這個(gè)方法檢測的是總肽的含量,對(duì)小肽的檢測夠如果能檢測到小肽的分子量的分布意義就大了!因?yàn)殡?、小肽、功能小肽?duì)動(dòng)物的作用差別巨大,不過這個(gè)方法簡單容易操作,對(duì)用戶來說是有一定的意義的!:hehes:
板凳
發(fā)表于 2007-6-24 06:14:10 | 只看該作者
這種檢驗(yàn)的方法可能誤差大一些,最好還是用氣相色譜檢驗(yàn)
地毯
發(fā)表于 2007-6-24 08:01:47 | 只看該作者
學(xué)習(xí)中!             
5
發(fā)表于 2007-6-24 11:11:06 | 只看該作者
用氣相色譜檢測,首先要能從樣品中提取分離到單體,并找到其標(biāo)樣,才能檢測其含量。否則也沒有意義
6
發(fā)表于 2007-6-30 16:06:20 | 只看該作者
很好的資料啊!

[ 本帖最后由 天使的笑 于 2007-7-5 08:22 編輯 ]
7
發(fā)表于 2007-7-13 08:23:34 | 只看該作者
樓主的資料很不錯(cuò)
我個(gè)人感覺小肽的檢測還是要綜合考慮
最好通過層析柱(分子篩)過濾的方式來,安分子量的大小,來檢測
但沒有看到企業(yè)這樣做的
本人在做發(fā)酵豆粕

[ 本帖最后由 西北牧羊人 于 2007-7-13 08:25 編輯 ]
8
發(fā)表于 2007-8-24 11:02:03 | 只看該作者
為什么我下不了啊?
9
發(fā)表于 2007-8-24 11:15:05 | 只看該作者
這樣做有點(diǎn)復(fù)雜,可按以下方法:
     發(fā)酵大豆蛋白中小肽的測定
1、原理:
利用三氯醋酸作蛋白質(zhì)沉淀劑,將發(fā)酵大豆蛋白中的蛋白質(zhì)和肽鏈較長的肽沉淀,并將其中的短鏈小肽用酸溶解出來,經(jīng)過濾、離心、消化、蒸餾,測定其蛋白質(zhì)含量,并以其占樣品粗蛋白質(zhì)的百分?jǐn)?shù)來表示含量。本方法是參照中華人民共和國輕工行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)大豆肽粉標(biāo)準(zhǔn)(QB/ T 2653 -2004)基礎(chǔ)上修訂而來。
2、試劑及儀器:
1)100ml燒杯;
2)10ml,50ml移液管;
3)干過濾裝置;
4)半微量法或全量法粗蛋白質(zhì)測定的試劑和裝置;
5)15%三氯醋酸溶液;
6)4000 轉(zhuǎn)/ 分鐘的離心機(jī)。
3、方法:
準(zhǔn)確稱取樣品6克于100 ml燒杯中,準(zhǔn)確加入15 %三氯乙酸溶液50 毫升,混合均勻,靜置5 分鐘,以中速定性濾紙干過濾,棄去少許初始濾液,將濾液轉(zhuǎn)移至離心管,在4000 轉(zhuǎn)/ 分鐘下離心10 分鐘,準(zhǔn)確移取其上清液10ml于消化管中,按半微量法(消化后定容至100ml,準(zhǔn)確移取其中10ml進(jìn)行蒸餾)或全量法粗蛋白質(zhì)測定方法測定其粗蛋白質(zhì)含量。同時(shí)做空白試驗(yàn)、測定樣品的粗蛋白質(zhì)的含量。
4、結(jié)果與計(jì)算:
小 肽%(半微量法)=(V1-V0)×C×6.25×0.014×10×5÷m×100%÷cp×100%
小 肽%(全量法)=(V1-V0)×C×6.25×0.014×5÷m×100%÷cp×100%
            式中:
V1--餾出液消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液的體積,ml;
V0--空白試驗(yàn)消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液的體積,ml;
C--鹽酸的摩爾濃度,mol/l;
6.25×0.014--蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)換系數(shù);
m--稱取樣品質(zhì)量,g;
cp—樣品的粗蛋白質(zhì)含量,%。
重復(fù)性:   A)、每個(gè)試樣的兩個(gè)平行樣間允許相對(duì)偏差為其算術(shù)平均值的10%,以其算術(shù)平均值上報(bào)結(jié)果;              
C)、所得的結(jié)果是指小肽占粗蛋白質(zhì)的百分含量。
因其中含有無機(jī)氮,測得結(jié)果應(yīng)減去無機(jī)氮,見非蛋白氮的測定。
10
發(fā)表于 2007-8-24 14:00:06 | 只看該作者
小肽就是一個(gè)集合體。用定N辦法,或比色辦法,首先要提取分離,保證檢測對(duì)象只是小肽!

小肽的重要問題:一是樣品究竟含多少真小肽?二是小肽的主要組分是?肽,即肽鏈長短。

把這兩個(gè)問題都能解決的檢測方法,才算有用的好方法!
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