枯草芽孢桿菌對(duì)肥育豬生長性能、肉品質(zhì)和抗氧化能力的影響

畜牧編輯

　　摘要: 本試驗(yàn)旨在研究飼糧中添加枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis，BS）對(duì)肥育豬生長性能、肉品質(zhì)和抗氧化能力的影響。試驗(yàn)選擇120頭平均體重為（62.90±2.37）kg的"杜×長×大"三元雜交肥育豬，隨機(jī)分為3個(gè)組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)8頭豬。對(duì)照組（A組）飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組（B、C組）分別在基礎(chǔ)飼糧中添加100、200 mg/kg BS。預(yù)試期7 d，正試期63 d。結(jié)果表明：1）飼糧中添加BS對(duì)肥育豬末重、平均日采食量、平均日增重和料重比均無顯著影響（P>0.05）；2）飼糧中添加BS對(duì)改善肥育豬肉品質(zhì)無顯著影響（P>0.05）；3）飼糧中添加BS對(duì)肥育豬肌肉中總抗氧化能力、總超氧化物歧化酶和過氧化氫酶活性及丙二醛含量均無顯著影響（P>0.05）；4）與對(duì)照組相比，C組肥育豬血漿中丙二醛含量顯著降低（P < 0.05），血漿中過氧化氫酶活性極顯著提高（P < 0.01）。由此可見，飼糧中添加BS顯著增強(qiáng)了肥育豬血漿抗氧化能力，對(duì)肥育豬生長性能、肉品質(zhì)和肌肉抗氧化能力無顯著影響。

　　關(guān)鍵詞: 肥育豬    枯草芽孢桿菌    生長性能    肉品質(zhì)    抗氧化能力

　　低劑量的抗生素廣泛用于當(dāng)今的畜牧生產(chǎn)?？股赜昧康脑黾雍蜑E用導(dǎo)致了耐藥性和超級(jí)病菌的出現(xiàn)，這已嚴(yán)重威脅到人類健康[1]。因此，人們開始尋求安全、高效的飼用抗生素替代品。近年來，以安全、無殘留、無毒副作用的枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis，BS)為代表的益生菌成為了重點(diǎn)研究對(duì)象之一[2]。有研究證明，BS作為單一制劑或復(fù)合制劑，具有促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收，提高生產(chǎn)性能、飼料報(bào)酬和免疫力的作用，在市場(chǎng)上正得到越來越廣泛的推廣使用[3-5]。目前，BS在豬方面的研究主要集中于改善仔豬的生長性能[6-7]，諸多理化因子的研究也著重于豬生長期的前中期，BS對(duì)生長后期的肥育豬生長性能、理化指標(biāo)影響的研究報(bào)道較少。再者，由于影響肉品質(zhì)的因素較多且各因素之間關(guān)系復(fù)雜，BS對(duì)影響肉品質(zhì)的諸多因素的潛在作用及其機(jī)理尚不清楚，需要進(jìn)一步闡明。因此，本試驗(yàn)擬以生長后期的肥育豬為試驗(yàn)對(duì)象，在基礎(chǔ)飼糧中添加BS，探討B(tài)S對(duì)肥育豬生長性能、肉品質(zhì)和抗氧化能力的影響，為BS在豬生產(chǎn)中應(yīng)用提供理論依據(jù)。

　　1 材料與方法
　　1.1 試驗(yàn)材料

　　試驗(yàn)用BS為上海牧冠企業(yè)有限公司提供的稀釋制劑，活菌數(shù)≥1×109 CFU/g。

　　1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理

　　試驗(yàn)于湖南省某科研豬場(chǎng)進(jìn)行，選取120頭平均體重為(62.90±2.37) kg的“杜×長×大”三元雜交肥育豬，公母各占1/2，隨機(jī)分為3個(gè)組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)8頭豬。對(duì)照組(A組)飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組(B、C組)分別在基礎(chǔ)飼糧中添加100、200 mg/kg BS。預(yù)試期7 d，正試期63 d。試驗(yàn)基礎(chǔ)飼糧參考NRC(2012)豬營養(yǎng)需要配制，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表 1。試驗(yàn)豬按照豬場(chǎng)的常規(guī)免疫程序進(jìn)行疫苗接種，試驗(yàn)期間飼養(yǎng)管理按常規(guī)進(jìn)行，自由采食和飲水，及時(shí)記錄豬的采食量，觀察豬的采食情況及健康狀況。

　　

　　1.3 生長性能測(cè)定

　　正試期內(nèi)，以重復(fù)為單位分別記錄試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)體重，用于計(jì)算平均末重和平均日增重(ADG)。記錄每天飼糧投喂量，每周統(tǒng)計(jì)1次采食量和余料量，根據(jù)每周采食量和飼喂時(shí)間計(jì)算平均日采食量(ADFI)，然后根據(jù)ADG和ADFI計(jì)算料重比(F/G)。

　　1.4 肉品質(zhì)測(cè)定

　　試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每組隨機(jī)選取6頭平均體重相近的豬(公母各占1/2，每個(gè)重復(fù)至少選取1頭)，共18頭豬進(jìn)行屠宰。宰前禁食24 h，自由飲水。采用常規(guī)屠宰技術(shù)進(jìn)行屠宰，宰后0.5 h內(nèi)各取左側(cè)胴體背最長肌中段肉樣，檢測(cè)pH、滴水損失和肉色[亮度(L*)、紅度(a*)和黃度(b*)值]等指標(biāo)，測(cè)定方法按照NY/T 821—2004[8]實(shí)行；剪切力采用改進(jìn)方法，用嫩度計(jì)C-LM3分別于宰后24 h(冰箱4 ℃保存)進(jìn)行生鮮肉剪切力測(cè)定；粗蛋白質(zhì)(凱氏定氮法)、肌內(nèi)脂肪(索氏提取法)和水分等含量按常規(guī)方法測(cè)定；背膘厚、眼肌面積按NY/T 825—2004技術(shù)規(guī)程操作測(cè)定。

　　1.5 抗氧化指標(biāo)測(cè)定

　　試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，以重復(fù)為單位隨機(jī)選取2頭平均體重接近的豬(公母各占1/2)，耳靜脈采血于肝素抗凝管中，3 000 r/min離心10 min分離血漿，-20 ℃冰箱保存。采用試劑盒測(cè)定血漿與肌肉中丙二醛(MDA)含量、總抗氧化能力(T-AOC)以及總超氧化物歧化酶(T-SOD)和過氧化氫酶(CAT)活性。肌肉抗氧化能力測(cè)定前，先將肉樣和預(yù)冷的生理鹽水按1 : 9(g : mL)在冰浴條件下用勻漿機(jī)制備成10%的組織勻漿，取上清液用于測(cè)定。所用試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

　　1.6 數(shù)據(jù)處理

　　采用SAS 9.2統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)并以Duncan氏法進(jìn)行多重比較，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，用P< 0.05表示差異顯著，P < 0.01表示差異極顯著。

　　2 結(jié)果
　　2.1 BS對(duì)肥育豬生長性能的影響

　　由表 2可知，飼糧中添加BS對(duì)肥育豬末重、ADFI、ADG和F/G均無顯著影響(P>0.05)。

　　2.2 BS對(duì)肥育豬肉品質(zhì)的影響

　　由表 3可知，飼糧中添加BS對(duì)改善肥育豬肉品質(zhì)無顯著影響(P>0.05)。

　　2.3 BS對(duì)肥育豬背最長肌抗氧化能力的影響

　　由表 4可知，飼糧中添加BS對(duì)肥育豬背最長肌中T-AOC、T-SOD和CAT活性和MDA含量均無顯著影響(P>0.05)。

　　2.4 BS對(duì)肥育豬血漿中抗氧化能力的影響

　　由表 5可知，與對(duì)照組(A組)相比，C組肥育豬血漿MDA含量顯著降低(P < 0.05)，血漿CAT活性極顯著提高(P < 0.01)；各組間T-AOC、T-SOD活性均無顯著差異(P>0.05)。

　　3 討論
　　3.1 BS對(duì)肥育豬生長性能的影響

　　諸多研究表明，BS對(duì)提高仔豬生長性能、降低腹瀉率具有明顯作用。魏立民等[9]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加0.2% BS能顯著提高斷奶仔豬末重、ADG和ADFI，但對(duì)F/G無顯著影響。Maneewan等[11]研究表明，BS能顯著提高斷奶仔豬ADG，降低F/G和腹瀉率。本課題組前期研究顯示，本試驗(yàn)產(chǎn)品可通過促進(jìn)飼糧養(yǎng)分的消化吸收，改善產(chǎn)蛋雞的生產(chǎn)性能[11]。而本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧中添加BS對(duì)肥育豬末重、ADFI、ADG和F/G均無顯著影響，此結(jié)果與李敏華[12]和Upadhaya等[13]報(bào)道基本一致。究其原因，一方面可能與試驗(yàn)動(dòng)物使用BS的不同生長階段有關(guān)。據(jù)報(bào)道，BS能顯著影響6周齡以內(nèi)仔豬的生長性能，但對(duì)生長后期7~16周齡豬的生長性能無顯著影響[13-14]；另一方面可能與飼糧成分、BS種類及其添加量等因素有關(guān)。

　　3.2 BS對(duì)肥育豬肉品質(zhì)的影響

　　豬肉品質(zhì)涵蓋了肌肉pH、肉色、系水力、滴水損失、大理石紋、剪切力(嫩度)和肌內(nèi)脂肪含量等諸多因素。根據(jù)豬宰后45 min、宰后24 h測(cè)定的背最長肌的pH、肉色和系水力等結(jié)果，判定其肉品質(zhì)優(yōu)劣。肌肉pH反映了宰后一定時(shí)間內(nèi)肌肉的酸堿度[15]。豬宰后45 min和宰后24 h背最長肌的pH分別低于5.9和5.5的可判定為PSE肉。本試驗(yàn)3個(gè)組背最長肌的pH45 min和pH24 h均在正常范圍內(nèi)。滴水損失反映了肌肉一定時(shí)間內(nèi)保持其內(nèi)含水的能力，本試驗(yàn)3個(gè)組肉的保水力均屬良好，差異不顯著。肉色反映了肌肉橫截面顏色的鮮亮程度，包括L*、a*和b* 3個(gè)數(shù)值，其中L*值主要受肌肉表面滲出水分的影響，影響肌肉的潤澤度；a*值是反映肌肉內(nèi)肌紅蛋白的數(shù)量，影響肌肉顏色的深淺[16]。瘦肉型豬宰后45 min正常肉色的L*值低于50，宰后24 h的L*值可略大于50。本試驗(yàn)研究結(jié)果顯示，3個(gè)組L*值均屬正常，沒有顯著差異。對(duì)比宰后24 h的a*值，試驗(yàn)組a*值比對(duì)照組a*值有一定程度的提高。其原因可能是a*值與肌肉的氧化水平有關(guān)，綜合肌肉抗氧化結(jié)果分析，BS通過增強(qiáng)機(jī)體抗氧化酶的活性[17]，降低肌肉中脂質(zhì)氧化產(chǎn)物MDA的含量，減少了MDA對(duì)肌肉含磷脂細(xì)胞膜的損傷，延緩了肌肉中肌紅蛋白轉(zhuǎn)變?yōu)楦哞F血紅蛋白、肉色變暗的速度[18]。剪切力是評(píng)定肌肉嫩度的客觀指標(biāo)[19]，剪切力越大，肉質(zhì)越老化，口感就越差，反之則肉質(zhì)越嫩，口感越好[20]。而肌內(nèi)脂肪反映了肌肉橫截面可見脂肪與結(jié)締組織的分布情況，與肉嫩度呈強(qiáng)正相關(guān)。隨著肌內(nèi)脂肪的含量增加，肌肉的嫩度也得到相應(yīng)的改善。宋淑珍等[21]研究表明，在飼糧中添加BS，可顯著降低羊肉的剪切力和失水率。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧中添加BS有降低豬肉剪切力的趨勢(shì)，對(duì)改善肥育豬肉嫩度有一定程度的作用。肌內(nèi)脂肪的含量以飼糧中添加100 mg/kg BS為最高，相應(yīng)地剪切力為最低。

　　背膘厚、眼肌面積與瘦肉率具有較大的遺傳相關(guān)性，背膘越薄，眼肌面積越大，其瘦肉率越高。徐丹等[22]研究發(fā)現(xiàn)，BS與中藥復(fù)合提取物聯(lián)用可降低肥育豬背膘厚度，有增加瘦肉率、眼肌面積的趨勢(shì)。本試驗(yàn)結(jié)果與此類似，在飼糧中添加BS有降低肥育豬背膘厚度、增加眼肌面積的趨勢(shì)。本試驗(yàn)飼糧中添加100 mg/kg BS對(duì)改善肥育豬肉品質(zhì)的效果略優(yōu)于添加200 mg/kg BS，其原因可能是本試驗(yàn)豬為生長后期的肥育豬，200 mg/kg BS在體內(nèi)發(fā)揮作用時(shí)，自身的生長和代謝會(huì)消耗腸道內(nèi)的部分營養(yǎng)物質(zhì)，從而導(dǎo)致腸道進(jìn)入體內(nèi)的能量降低，因此造成生長性能或一些表觀指標(biāo)低于添加100 mg/kg BS[23]。其真正影響原因、使用添加量、作用效果及依據(jù)，有待進(jìn)一步探討和研究。

　　3.3 BS對(duì)肥育豬抗氧化能力的影響

　　動(dòng)物屠宰后，其肉中的氧化反應(yīng)仍在進(jìn)行，肉中富含的不飽和脂肪酸經(jīng)自由基反應(yīng)最終可形成脂質(zhì)氧化產(chǎn)物MDA[24]，此產(chǎn)物被認(rèn)為是導(dǎo)致肉品質(zhì)下降的重要因素[25]。因此，肌肉中MDA的含量是評(píng)價(jià)肉類食品在貯藏過程中氧化變質(zhì)程度和安全性的重要指標(biāo)，在西方國家已普遍應(yīng)用。此外研究還證實(shí)：肌肉中T-SOD活性越高，MDA含量越低，其系水力越高、肉色越鮮艷，肉質(zhì)越嫩[26]，主要原因是T-SOD具有阻止肌肉脂質(zhì)氧化反應(yīng)和清除超氧陰離子自由基的能力。同時(shí)，T-AOC也是動(dòng)物體內(nèi)非常重要的一種抗氧化酶，可反映酶和非酶的抗氧化防衛(wèi)系統(tǒng)能力。因此，可根據(jù)肌肉中T-SOD活性、T-AOC和MDA含量等指標(biāo)評(píng)價(jià)商品肉的抗氧化能力。目前關(guān)于BS對(duì)肥育豬肌肉抗氧化能力的影響研究報(bào)道甚少。呼紅梅等[27]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加0.5%益生菌(芽孢桿菌和酵母菌)可顯著提高杜長大商品豬肌肉中超氧化物歧化酶(SOD)和GSH-Px活性，降低MDA含量。此結(jié)果與本試驗(yàn)研究結(jié)果不同，本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，飼糧中添加BS對(duì)肥育豬肌肉中T-AOC、T-SOD和CAT活性以及MDA含量影響差異不顯著。導(dǎo)致的原因可能與動(dòng)物品種、年齡或BS的品種、添加量及肌肉的處理方法、測(cè)定時(shí)間等因素有關(guān)，具體原因還需進(jìn)一步研究探討。

　　另外，飼糧中添加BS還可通過提高體內(nèi)某些抗氧化酶的活性而增強(qiáng)機(jī)體抗氧化功能[17]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼糧中添加200 mg/kg BS使得肥育豬血漿中CAT活性極顯著提高，血漿中MDA含量顯著降低。這與前人得出的BS提高斷奶仔豬[9]和商品豬[27]抗氧化功能的結(jié)果類似。其原因一方面可能是芽孢桿菌在腸道中能產(chǎn)生具有清除自由基功能的多糖，還可直接或間接誘導(dǎo)T-SOD和CAT合成，加速清除MDA等過氧化物[28]；另一方面可能是BS通過提高核因子E2相關(guān)因子、血紅素加氧酶1等抗氧化基因表達(dá)而提高體內(nèi)抗氧化活性，進(jìn)而發(fā)揮抗氧化作用[29]。因此，在飼糧中添加BS可提高肥育豬血漿抗氧化能力，改善機(jī)體的健康狀況。

　　4 結(jié)論

　?、?飼糧中添加BS對(duì)肥育豬生長性能、肉品質(zhì)和肌肉抗氧化能力無顯著影響。

　?、?飼糧中添加200 mg/kg BS能增強(qiáng)肥育豬血漿抗氧化能力。

　　參考文獻(xiàn)：略
　　作者：朱瑾, 匡佑華 , 陳繼發(fā) , 曲湘勇 , 賀長青, 郭松長 , 今林寬和 周學(xué)彬
　　來源：動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào)