求助豬自家抗體血清的制備和使用方法

草哥

本人前陣子場內(nèi)豬發(fā)生了藍(lán)耳病,有些豬耐受過了就成了僵豬,繼續(xù)飼養(yǎng)那些僵豬,已經(jīng)沒什么價值了,想將那些僵豬殺了,來制備豬自家抗體血清,然后再用來治療病豬,可是自已不知道該怎么做,所以想請教在場的高手指點(diǎn),謝謝

lionpig

我講講，參考一下 首先你確證是prrs么？？prrs來說血清當(dāng)然是會有效的，如果不是或者有其他病的繼發(fā)感染，這樣做的風(fēng)險很高。 1.取血，將豬沖洗干凈固定于“X”型的保定架上，仰臥保定，將豬尾一頭墊高，用碘酒清洗左側(cè)胸前口，用酒精脫碘，待酒精揮發(fā)后，用準(zhǔn)備好（指消毒、烘干）的約30cm長，直徑約1cm的空心銅管（一端為尖，一端平，平的一端套硅橡膠管），經(jīng)消毒的胸前口捅入豬的心臟（不要刺太深防止完全穿透心臟），放血。 2.接血，消毒烘干好的容器（如果是離心法收集就用大的離心瓶，如果是自然析出可以用500ml的注射用生理鹽水瓶），將膠管的一頭貼住瓶壁，血順瓶壁留下，裝約400-500ml（離心瓶依照儀器要求）。 3.取血清，離心法：400×4離心機(jī)按一般血液離心要求進(jìn)行即可，自然析出的封好瓶口，冷卻到室溫，放入4度冰箱過夜，異日取出，取血清，另外裝瓶、封口。 4.滅活，56度溫箱中1.5小時（保證全瓶血清維持在56度時間至少1小時），自然冷卻，加入抗生素（一般是雙抗，具體劑量還要看各廠的實際情況），將血清冷凍保存（隨解凍隨用，大約可以保存12周）。 5.血清的無菌檢查，血清通過接種瓊脂平板，溫箱培養(yǎng)看是否有菌落生長，另外（雙抗的量加多少可以通過培養(yǎng)情況來確定） 6.安全性實驗，通過培養(yǎng)無細(xì)菌生長的血清注射小豬約10頭（5日齡-10日齡）（腹腔注射），觀察一周（每日量體溫，觀察是否發(fā)病）如發(fā)病務(wù)必確診發(fā)病原因。

草哥

謝謝樓上的朋友, 你講得很詳細(xì),能否再說明一下,制備后,應(yīng)該怎樣注射在豬身上呢,是不是肌肉注射還是腹腔注射,而且是連續(xù)每天注射還是只注射一次呢?先謝了

吠聲天外

PRRS的血液帶毒期大約30－45天，而正常血清特異性抗體大約是在40-50天時最高。 如果沒有持續(xù)感染，兩個月以后，效價就會降低。那時的使用價值就會大打折扣。除了二樓老師的方法，建議對血清進(jìn)行鈷－60輻照消毒。 使用時，每只豬肌肉注射就可以。一般注射一次就有延緩發(fā)病的效果，間隔5天再注射一次，效果更好一些。 另外，按照我的經(jīng)驗，在4攝氏度的條件下，出的血清量會相對少些，但效價一般不會因冷凍而減少。 以上僅供參考

lionpig

關(guān)于什么時候取血的問題，我個人認(rèn)為在發(fā)病后3-6個月比較合適，雖然這個時候抗體水平不一定最高，但是IgG、IgM之類的中和抗體水平是不低的（prrs有3-6個月的排毒期，這個也是通過部分空群來實現(xiàn)凈化的一個理論基礎(chǔ)），關(guān)于到使用方面我的看法和經(jīng)驗是哺乳、保育豬在滿足操作條件的基礎(chǔ)上還是腹腔注射比較好，至于中豬可以肌肉注射，大豬基本上沒有必要使用，母豬如果已經(jīng)是陽性場的，還是用弱毒苗吧。 至于鈷-60輻照滅菌、應(yīng)用范圍受到很多條件上的限制，在基層很難開展。 個人淺見大家賜教

ren1001

:)3:學(xué)習(xí)了