生物活性肽對(duì)雞免疫功能的影響

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生物活性肽對(duì)雞免疫功能的影響
    摘要：近年來(lái)，人們對(duì)生物活性肽有了新的認(rèn)識(shí)，生物活性肽不僅能夠促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育，而且對(duì)畜禽的免疫機(jī)能也有一定的影響，其對(duì)畜禽免疫機(jī)能的影響越來(lái)越受到人們的重視.活性肽分布廣泛，動(dòng)物的乳汁、胸腺、脾臟、胰腺等均含有豐富的活性肽。本文僅就從胸腺提取的胸腺肽和從脾臟提取的脾臟活性肽對(duì)雞的免疫機(jī)能的影響作一綜述。
    關(guān)鍵詞：生物活性肽；胸腺肽；脾臟活性肽；免疫機(jī)能；雞
    生物活性肽（Bioactive Peptide，BAP）是一類分子量較小，在構(gòu)象上較松散，具有特殊生物活性的肽類物質(zhì)?；钚噪姆植紡V泛，例如動(dòng)物的乳汁、胸腺、脾臟、胰腺等均含有豐富的活性肽。
    許多研究表明，乳中含有大量自然存在的生物活性肽[1]如胰島素樣生長(zhǎng)因子（IGFs）、表皮生長(zhǎng)因子（EGF）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（TGF）和胰島素，IGFs是一類刺激生長(zhǎng)發(fā)育和細(xì)胞分化的調(diào)節(jié)因子，包括IGFΙ和IGFⅡ。EGF是一種強(qiáng)有力的細(xì)胞分裂促進(jìn)因子，能促進(jìn)多種類型的細(xì)胞分裂和增殖。TGF包括TGFα和TGFβ兩種，TGFα對(duì)皮膚厚度、胃腸道細(xì)胞、血管、免疫和內(nèi)分泌系統(tǒng)均有明顯的影響，TGFβ對(duì)細(xì)胞的增殖、發(fā)育和轉(zhuǎn)化都有一定的調(diào)節(jié)作用。胰島素主要是促進(jìn)糖原蛋白和脂肪合成，可促進(jìn)多種類型細(xì)胞的有絲分裂，并與血小板源生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子協(xié)同作用。同時(shí)也有研究表明，從動(dòng)物脾臟提取的脾臟活性肽和從胸腺提取的胸腺肽都具有促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)、調(diào)節(jié)動(dòng)物免疫機(jī)能的作用。
    但是，因由于Dogman的蛋白質(zhì)必須被消化成游離氨基酸（FAA）才能被吸收的觀點(diǎn)[2]，肽的研究一直處于停滯狀態(tài),直到80年代，肽的觀點(diǎn)才開(kāi)始為人們所接受和重視。Dogman的這一學(xué)說(shuō)也限制了活性肽作為添加劑在畜牧業(yè)上的應(yīng)用。新近的研究表明，小肽能夠被完整地吸收而進(jìn)入血液循環(huán)。小肽的吸收機(jī)制與游離氨基酸不同，而且具有轉(zhuǎn)運(yùn)快、耗能低和不易飽和的特點(diǎn)。機(jī)體存在獨(dú)立于氨基酸的肽的轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)。但是目前對(duì)生物活性肽的研究和其在動(dòng)物飼養(yǎng)實(shí)踐中的應(yīng)用還有很大距離，對(duì)動(dòng)物免疫機(jī)能的影響如何、在體內(nèi)吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)的確切機(jī)制如何等，這些問(wèn)題還需我們做大量的工作。盡管如此，肽的研究及應(yīng)用依然具有廣闊的前景，下面僅就胸腺肽及脾臟活性肽對(duì)雞免疫機(jī)能的影響加以討論。
   
1 胸腺肽對(duì)雞的免疫機(jī)能的影響
    胸腺是家禽體內(nèi)最早形成的淋巴器官，胸腺組織結(jié)構(gòu)在尚未完全形成前,個(gè)別淋巴細(xì)胞已具備一定程度的免疫活性，并行使一定的免疫功能，而胸腺組織的完全發(fā)育，則為淋巴細(xì)胞行使其免疫功能提供了較充分的組織基礎(chǔ)[3]。
    胸腺除了提供T淋巴細(xì)胞發(fā)育所需的微環(huán)境外，還分泌胸腺肽，影響T細(xì)胞的分化和成熟[4]。早在1966年，就有人發(fā)現(xiàn)胸腺具有免疫功能，以后大量研究表明胸腺因子、胸腺素等能提高畜禽機(jī)體的免疫反應(yīng)，增強(qiáng)淋巴細(xì)胞分化過(guò)程,快速誘導(dǎo)分化抗原在淋巴細(xì)胞表面上表達(dá),通過(guò)研究胸腺制劑對(duì)MD的免疫增強(qiáng)作用的試驗(yàn),表明胸腺制劑對(duì)雛雞有明顯的免疫增強(qiáng)效果,其結(jié)果優(yōu)于單獨(dú)應(yīng)用MD疫苗,是能提高雞馬立克氏免疫力的比較理想的免疫劑[5]。
    禽類的淋巴結(jié)發(fā)育不良，其T淋巴細(xì)胞來(lái)自胸腺。T淋巴細(xì)胞的功能是通過(guò)生物活性分子如巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子和淋巴細(xì)胞毒素而表現(xiàn)出細(xì)胞免疫現(xiàn)象,在腫瘤免疫上認(rèn)為T淋巴細(xì)胞占有重要作用。酸性-α-醋酸奈酯酶（ANAE）染色法是一種簡(jiǎn)便易行的T淋巴細(xì)胞組織化學(xué)標(biāo)記法。ANAE陽(yáng)性細(xì)胞代表靜止、成熟的T淋巴細(xì)胞，通過(guò)向試驗(yàn)組雞中加入胸腺制劑，T淋巴細(xì)胞活性明顯升高，表明胸腺制劑能有效地促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的誘導(dǎo)，協(xié)同免疫刺激作用。Murthy[6]也認(rèn)為胸腺肽可提高外周血T淋巴細(xì)胞百分率。

Pridbailo[7]報(bào)道，胸腺制劑給雞注射或氣霧，可促進(jìn)雞的生長(zhǎng)。有實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在雛雞日糧中添加一定量的胸腺肽(適宜添加量為1.328～2.684mg/只·天)可調(diào)節(jié)雞的內(nèi)分泌活動(dòng)，提高其機(jī)體免疫功能，促進(jìn)其生長(zhǎng)發(fā)育[8]。關(guān)于胸腺肽促進(jìn)動(dòng)物增重可能源于以下兩個(gè)方面:①胸腺肽可提高動(dòng)物機(jī)體的免疫功能，利于維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定；②胸腺肽調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)分泌系統(tǒng)的功能，從而促進(jìn)增重,可使血漿中GH、T3、T4水平升高，而有報(bào)導(dǎo)，GH、T3、T4可使血液中T淋巴細(xì)胞總數(shù)增加。有研究報(bào)導(dǎo),給雛雞注射胸腺肽，對(duì)γ-Ig有明顯增加作用[9]。也有研究報(bào)道，給雛雞注射胸腺肽，T淋巴細(xì)胞E花環(huán)形成實(shí)驗(yàn)差異顯著，白細(xì)胞總數(shù)增加顯著，γ-Ig差異顯著，法氏囊比重差異顯著[10]。這表明，胸腺肽能夠增強(qiáng)雛雞的免疫機(jī)能。
    現(xiàn)已人工合成了TP-5（胸腺肽活性片段）。TP-5(Thymopeptin)是胸腺生成素Ⅱ第32～36位的氨基酸片段。其氨基酸序列為H·Arg·Lys·Asp·Val·Tyr·OH,該五肽仍保留母肽的生物活性，能選擇性誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞系統(tǒng)早期分化，使類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者E玫瑰花形成細(xì)胞數(shù)恢復(fù)正常。巨噬細(xì)胞既是免疫效應(yīng)細(xì)胞又是免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞,其吞噬功能常作為藥物影響特異性和非特異性免疫的一個(gè)重要指標(biāo),在最適濃度下，TP-5使Et-RFC%提高了79%，Ea-RFC%提高了19%[11]。提示TP-5對(duì)T淋巴細(xì)胞有明顯選擇性，這與TP-5通過(guò)誘導(dǎo)不同功能的T淋巴細(xì)胞成熟而發(fā)揮其細(xì)胞免疫功能的結(jié)論相符。自Siegel[12]等人提出“紅細(xì)胞免疫系統(tǒng)”這一概念后，紅細(xì)胞在免疫系統(tǒng)中的作用越來(lái)越受到人們的重視。紅細(xì)胞在清除免疫復(fù)合物及致病病原中起著重要作用，能激活白細(xì)胞的免疫功能，使B淋巴細(xì)胞生長(zhǎng)因子和免疫球蛋白增多。TP-5使判斷紅細(xì)胞免疫功能的兩項(xiàng)指標(biāo)均處于較高狀態(tài)，說(shuō)明紅細(xì)胞免疫系統(tǒng)被激活。免疫系統(tǒng)的各種細(xì)胞能夠相互激活和制約，維持一個(gè)最佳狀態(tài)，TP-5作為一種具有激素活性的物質(zhì)，對(duì)免疫系統(tǒng)乃至整個(gè)機(jī)體的影響是復(fù)雜的。


從60年代開(kāi)始,已先后有許多學(xué)者開(kāi)始分離提純胸腺肽。到目前為止，已報(bào)道的胸腺肽有二十幾種。胸腺肽作為一種免疫因子已應(yīng)用于醫(yī)學(xué)臨床，在抗感染、免疫缺乏癥的治療上獲得可喜成果[4]。
   
2 脾臟活性肽對(duì)雞免疫機(jī)能的影響
    脾臟轉(zhuǎn)移因子也稱脾臟活性肽(STF)是一種可透析的白細(xì)胞浸出物，是T淋巴細(xì)胞釋放的一種能轉(zhuǎn)移致敏信息的物質(zhì)，它能夠特異地將供體的細(xì)胞免疫功能轉(zhuǎn)移給受體,從而增強(qiáng)受體的免疫功能。轉(zhuǎn)移因子的名稱也由此而來(lái)。目前,對(duì)其作用機(jī)制仍然不夠了解，對(duì)其結(jié)構(gòu)也未完全弄清，只知道它是一種既含氨基酸、活性肽，又含核苷酸的可透析的小分子物質(zhì)。脾臟轉(zhuǎn)移因子最早發(fā)現(xiàn)于20世紀(jì)50年代，后來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者都對(duì)脾臟轉(zhuǎn)移因子進(jìn)行了大量的研究，受試驗(yàn)對(duì)象包括人體以及豬、牛、羊、兔和雞等動(dòng)物。在獸醫(yī)臨床實(shí)驗(yàn)性治療中TF對(duì)病毒性傳染病、真菌感染病、免疫缺陷等病的輔助治療，療效較顯著。
     脾臟轉(zhuǎn)移因子可增強(qiáng)粵黃雞免疫機(jī)能[13]。動(dòng)物機(jī)體的特異性免疫包括細(xì)胞免疫和體液免疫，細(xì)胞免疫主要通過(guò)T淋巴細(xì)胞而實(shí)現(xiàn)，體液免疫主要通過(guò)B淋巴細(xì)胞而實(shí)現(xiàn)，并且有賴于T淋巴細(xì)胞的參與。胸腺與法氏囊是禽類的中樞免疫器官，來(lái)自骨髓的淋巴干細(xì)胞，分別在胸腺與法氏囊分化，發(fā)育成T、B淋巴細(xì)胞，在抗原信息的刺激下，T、B淋巴細(xì)胞被激活，轉(zhuǎn)變成淋巴細(xì)胞并遷移到外周淋巴器官（脾臟、淋巴結(jié)），經(jīng)多次分裂增殖后，轉(zhuǎn)變?yōu)槊庖呋钚粤馨图?xì)胞，從而發(fā)揮其免疫功能。因此，抗原信息的刺激與動(dòng)物機(jī)體免疫功能的發(fā)揮有著直接的聯(lián)系。給粵黃雞注射一定濃度的STF能提高雞外周血液中的T淋巴細(xì)胞百分率，這表明轉(zhuǎn)移因子作為免疫信息的載體，具有增強(qiáng)受體免疫機(jī)能的作用。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，在注射STF后，粵黃雞血液中ND抗體滴度升高，說(shuō)明STF在提高受體的細(xì)胞免疫功能的同時(shí)，還能使受體的體液免疫功能得到加強(qiáng)。目前認(rèn)為，轉(zhuǎn)移因子主要是通過(guò)T淋巴細(xì)胞調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫機(jī)能，而B淋巴細(xì)胞在實(shí)現(xiàn)體液免疫機(jī)能的同時(shí)，也有T淋巴細(xì)胞的參與，因此，STF增強(qiáng)受體體液免疫機(jī)能的機(jī)制可能與此有關(guān)。
    脾臟轉(zhuǎn)移因子對(duì)粵黃雞的生長(zhǎng)發(fā)育有促進(jìn)作用[14]。動(dòng)物機(jī)體的正常發(fā)育一般由T4、T3和GH協(xié)同調(diào)控而完成。GH促進(jìn)組織生長(zhǎng)，T4、T3主要促進(jìn)器官、組織的分化，而且GH的促生長(zhǎng)作用,需要有適量的T4、T3的存在。給雞注射STF后，8周齡時(shí)血液T4、GH水平顯著高于對(duì)照組.因此,脾臟轉(zhuǎn)移因子促進(jìn)粵黃雞生長(zhǎng)發(fā)育的內(nèi)在機(jī)制與血液T4、GH水平的升高有關(guān).由于動(dòng)物體內(nèi)的T3一部分由甲狀腺直接分泌，另一部分來(lái)源于T4。T4被血液帶至全身各組織器官后，在組織內(nèi)5′-脫碘酶的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)?/font>T3，并且在局部發(fā)揮生理作用，而且T3的半衰期（1～3d）比（6～7d）短，并且主要在組織內(nèi)由T4轉(zhuǎn)變而來(lái)，因此，試驗(yàn)中未觀察到血液T3水平出現(xiàn)顯著差異[14]。
     雞脾臟轉(zhuǎn)移因子可增強(qiáng)雛雞的免疫機(jī)能[15]。接受經(jīng)口服或注射STF的3日齡雛雞，外周血液ANAE＋-T淋巴細(xì)胞百分率呈逐漸上升趨勢(shì)，至12日齡時(shí)，陽(yáng)性T淋巴細(xì)胞百分率顯著高于對(duì)照組。這表明STF激活了與細(xì)胞免疫功能有關(guān)的T淋巴細(xì)胞，即由STF介導(dǎo)的雛雞細(xì)胞免疫功能明顯加強(qiáng)。一般轉(zhuǎn)移因子的作用是把免疫力轉(zhuǎn)移給明顯缺乏反應(yīng)性的組織和器官，誘發(fā)特異性淋巴細(xì)胞增殖，改變T淋巴細(xì)胞的活性，調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫，加強(qiáng)機(jī)體的免疫機(jī)能。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)，口服和注射兩種途徑均有激發(fā)雛雞細(xì)胞免疫的效果，而且注射STF對(duì)細(xì)胞免疫功能的影響更明顯。受STF的影響，免疫器官脾及法氏囊相對(duì)濕重增加[12]，由此看來(lái)，STF對(duì)免疫器官（包括中樞和外周免疫器官）的影響，也是增強(qiáng)免疫機(jī)能的一個(gè)重要方面。
    有研究表明：雞STF對(duì)活疫苗和油乳劑滅活苗，不論是首免還是二次免疫，均具有協(xié)同作用。它不僅能促進(jìn)雞淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化，提高機(jī)體的細(xì)胞免疫水平，還能夠顯著地提高免疫接種雞的體液免疫應(yīng)答能力,產(chǎn)生較高滴度的抗體，并延長(zhǎng)抗體高峰期，使之維持較長(zhǎng)的時(shí)間，從而增強(qiáng)疫苗的免疫效果,提高機(jī)體免疫力和抗病能力。同時(shí)，疫苗與STF的聯(lián)合應(yīng)用，能保證接種后及時(shí)產(chǎn)生足夠的保護(hù)抗體及細(xì)胞免疫能力，有效避免因單純應(yīng)用疫苗而造成的免疫失敗問(wèn)題具有重要意義。從此意義上說(shuō)，STF是一種優(yōu)秀的免疫增強(qiáng)劑[16]。
    綜上所述，從動(dòng)物胸腺和脾臟提取的胸腺肽和脾臟活性肽均具有促進(jìn)淋巴干細(xì)胞向T淋巴細(xì)胞分化和刺激T淋巴細(xì)胞增殖的作用,它們不僅能促進(jìn)雞的生長(zhǎng)，而且對(duì)其免疫機(jī)能也有明顯的促進(jìn)作用。由于胸腺肽和脾臟活性肽均來(lái)源于動(dòng)物體,不存在殘留問(wèn)題，對(duì)動(dòng)物無(wú)過(guò)敏及誘變反應(yīng),如能在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步研究其對(duì)家禽免疫機(jī)能的調(diào)節(jié)機(jī)制，將有可能研制出高效、安全、無(wú)殘留的新型免疫增強(qiáng)劑，這對(duì)畜禽業(yè)將有重大意義。