豬胃腸道微生態(tài)平衡的調控技術研究進展

li6680 · 發(fā)表于 2008-1-4 09:32:01

豬胃腸道微生態(tài)平衡的調控技術研究進展

動物的消化道內存在數目龐大、種類繁多的微生物，這些微生物與其宿主在長期的進化過程中保持著良好的平衡，構成一個統(tǒng)一的整體。正常情況下，這一生態(tài)系統(tǒng)中的微生物區(qū)系會隨外界環(huán)境和動物食物的變化而在一定的生理范圍內變動，但如果波動超過正常生理范圍，就會引起病理過程，即所謂的生態(tài)失調（Dysbiosis）（李德發(fā)，2003）。腸道微生態(tài)平衡的打破往往導致腸道病原菌大量增殖，造成腸壁損傷，引起腹瀉甚至誘發(fā)全身敗血癥，嚴重危及動物的健康。因此，腸道內微生物穩(wěn)定的存在是協(xié)助動物免受感染，特別是胃腸道感染，保持動物健康生長所必需的（Fuller，1989）。有鑒于此，本文著重于對豬消化道內微生物群落的建立、平衡、失調及調控技術等幾個方面進展作一綜述，并對需要進一步研究解決的問題進行了探討。 1 豬腸道菌群的建立和演替 初生仔豬的胃腸道是無菌的，從分娩到體外環(huán)境的幾個小時之內，一個龐大的微生物群落迅速在胃腸道中形成。通常在仔豬出生后24h左右，空腸、回腸、盲腸和直腸內就分別出現(xiàn)并定居了雙歧桿菌、大腸桿菌、乳酸桿菌、消化球菌、腸球菌、小梭菌、擬桿菌、真細菌和酵母菌，到8～22d時，雙歧桿菌、擬桿菌、乳酸桿菌、大腸桿菌和消化球菌成為優(yōu)勢菌。細菌在腸道的定植順序依次是需氧菌、兼性厭氧菌和專性厭氧菌，其原因主要在于需氧菌和兼性厭氧菌能夠消耗周圍環(huán)境中的氧氣，為專性厭氧菌的生存和定植提供條件（Ducluzeau，1985）。細菌在消化道內的定植和演替與仔豬消化道的構造及生理功能有關（李德發(fā)，2003）。初生仔豬胃酸分泌不足而使胃內pH值偏高，這使一些細菌能夠通過胃而快速定植于腸道的不同部位。哺乳階段，胃內產生的乳酸使pH值下降，此時只有耐酸菌（大腸桿菌和專性厭氧菌）才能在腸道近端定植（Ducluzeau，1985）。此外，影響固有細菌群落定植以及多樣性的因素還包括食糜流通速度、pH值、溫度、氧化還原電位、滲透壓、內分泌、酶的活性、厭氧環(huán)境和食糜干物質含量等多種因素。一般，食糜在某一部位（胃、盲腸）停留時間越長，流通速度越慢，則在該部位將產生一個數量更大、種類更多的細菌群落（Robinson，1981）。不過，與食糜在某一部位流通速度加快相適應的是，該部位細菌的生長速度也加快（小腸），那些能粘附在腸壁上的細菌將有一個明顯的定植優(yōu)勢（Varel，1987）。 2 仔豬胃腸道微生物群落的生理作用以及影響微生物群落穩(wěn)定性的因素 2.1 仔豬胃腸道微生物群落的生理作用 2.1.1 營養(yǎng)作用豬盲腸中的微生物菌群包括雙歧桿菌、乳桿菌、真桿菌和大腸桿菌等，能夠分解纖維素，合成多種蛋白質、氨基酸與維生素供宿主動物利用（Fuller，1989）。此外，腸道微生物還可以明顯促進亞油酸的吸收，促進膽固醇向類固醇的轉變及膽汁酸脫飽和、脫羥基等正常生理代謝過程，同時還參與一些藥物或毒物在體內的代謝（Torrallardona，1997）。 2.1.2 抗病作用胃腸道正常微生物的抗病作用主要包括：①競爭性排斥：使用無菌或抗生素處理的試驗動物所做的試驗證明，胃腸道的正常菌群可以競爭性地排斥外來致病菌在腸道的定植（Heugten，1996）。有關其詳細作用機理，目前人們普遍接受的解釋是，胃腸道已經存在的微生物和侵入的病原菌競爭腸粘膜上的粘附位點是這種作用發(fā)生的主要原因（Hentges，1992）。據報道，用乳酸桿菌接種處理仔豬后，與對照組相比，處理組仔豬腸組織勻漿液中的大腸桿菌數目顯著減少，而乳酸桿菌則明顯增加（Conway，1987）。究其原因就在于，乳酸桿菌是仔豬腸道的正常定植菌群，其在腸粘膜細胞上的定植有效抑制了病原菌的粘附（Conway，1987）；②產生抗菌物質如細菌素、有機酸及過氧化氫等：有些胃腸道正常的微生物能分泌一類選擇性作用于細菌靶細胞的抗菌物質——細菌素，它們大多屬于多肽類且具有水溶性，并在較低濃度時就有活性，在腸道中具有抑制有害菌生長繁殖的作用，對沙門氏菌、志賀氏菌、葡萄球菌、變態(tài)菌、假單胞菌和大腸埃希氏菌屬（E.coli）都具有很好的效果（Juven，1991）。據研究，乳酸桿菌活菌的抑菌作用主要是通過乳酸桿菌所產生的細菌素，而不是通過降低病原菌在腸粘膜上的粘附實現(xiàn)的（Havenaar，1993）。其次，胃腸道嚴格或者兼性厭氧菌所產生的非解離態(tài)的有機酸（乳酸）能夠降低腸道pH值，對某些病原菌（如大腸埃希氏菌）的生長具有抑制作用，因而也具有一定的抗菌效果（Stavric，1995）。第三，在某些情況下，一些乳酸菌能產生一定量的過氧化氫，既可以直接抑制許多病原菌，特別是某些革蘭氏陽性菌的生長；同時，產生的過氧化氫還可以通過激活腸道內乳過氧化物酶—硫氰酸鹽系統(tǒng)，發(fā)揮抑菌作用（Reiter，1991）。其作用機理是乳過氧化物酶和過氧化氫結合，然后將硫氰酸鹽氧化成氧化性中間產物，這種物質能抑制微生物的生長，在低pH值條件下還具有殺菌作用（Ewing，1994）。 2.1.3 抗腸毒素作用某些病原菌如大腸埃希氏菌屬中的許多菌株致病時，分泌的腸毒素會與腸粘膜上的受體結合，不僅妨礙正常微生物與受體的結合，還會導致體液的丟失，但這種腸毒素可以被胃腸道正常微生物如保加利亞乳桿菌所中和（Fuller，1992a，b）。其次，胃腸道內的雙歧桿菌能使過度增殖的革蘭氏陰性菌，特別是腸桿菌科和梭形芽孢桿菌數目降低到正常水平，從而減少內毒素的釋放量，降低由此所引發(fā)的敗血癥風險（Jeppsson，2000）。第三，胃腸道微生物在代謝過程中所產生的胺和氨等有害物質，會對宿主動物產生不利影響，特別是對消化道壁有很大的刺激作用和毒性（如胺），這可能也是導致斷奶仔豬下痢的重要原因（Fuller，1989）。而研究發(fā)現(xiàn)，應用乳酸桿菌降低胃腸道中胺的產生，對于減輕胃腸道有毒物質產生而言，具有良好的作用（Porter，1989）。 2.1.4 免疫作用胃腸道內的某些微生物能改善機體免疫功能，提高抗感染能力（Jeppsson，2000）。據研究，胃腸道中的雙歧桿菌對巨噬細胞有明顯的激活作用，其在腸道的定植在一定程度上相當于自然自動免疫，可以誘發(fā)機體的特異反應（Pollman，1992）。乳酸菌對于仔豬免疫能力的發(fā)育可能具有良好的作用，對于斷奶仔豬為抵御外來抗原引起的炎癥反應也是如此（Miller，1985）。據報道，口服或者腹腔注射乳酸桿菌能明顯提高仔豬巨噬細胞和淋巴細胞的活性，引起白細胞數和血清總蛋白（主要是球蛋白）濃度的提高，增加小腸與結腸粘膜表面抗體的生成，從而有效提高機體的抵抗能力（Perdigon，1992）。研究表明，乳酸菌等胃腸道正常微生物能刺激機體免疫增強的原因主要在于，它們所具有的磷脂壁酸和細胞壁蛋白質等抗原與病原菌相同，能夠有效刺激機體產生抗體，這些抗體再與病原菌產生交叉免疫反應，以抵御病原菌的感染（Ewing，1994）。 2.1.5 屏障作用胃腸道內的某些內源微生物，主要是革蘭氏陽性桿菌和球菌能夠與腸粘膜密切結合，在腸粘膜的某些部位形成一層膜菌群，構成一個生物學屏障，從而有效阻止致病菌的定植和入侵（即抗細菌移位），保護動物機體免受感染（Conway，1994）。 2.1.6 抗腫瘤作用在胃腸道內的某些微生物可以產生致癌因子，而另外一些微生物具有清除這些因子的能力。例如腸道中的雙歧桿菌不僅具有降解致癌因子抑制腫瘤發(fā)生的能力，而且還對已經形成的腫瘤具有抑制作用（譚支良，2003）。 2.2 影響微生物群落穩(wěn)定性的因素 2.2.1 疾病在健康豬整個胃腸道內，乳酸菌、乳桿菌、雙歧桿菌等是主要微生物，而鏈球菌、腸桿菌、消化鏈球菌和韋榮氏菌的數量極少或不存在，擬桿球菌屬細菌只在大腸中極少量的存在，梭菌、葡萄球菌、酵母菌和霉菌基本上沒有分離到（高巍，2001）。用人工誘導仔豬下痢的試驗結果也表明，下痢可以明顯改變粘附于仔豬結腸粘膜上皮和結腸內容物中不同種類細菌的相對比例，這說明在影響微生物群落穩(wěn)定性的因素中，疾病是一個很值得關注的方面（Robinson，1984）。 2.2.2 斷奶早期斷奶仔豬因胃腸道發(fā)育尚不健全，難以適應斷奶后包括環(huán)境、飼料和心理等方面的巨大變化，導致胃腸道原來穩(wěn)定的微生物區(qū)系間的平衡被打破，引起仔豬嚴重腹瀉，死亡率上升，極大的威脅著斷奶仔豬健康快速的生長（Jonsson，1992）。據研究，與哺乳仔豬相比，斷奶仔豬小腸中溶血性大腸桿菌和輪狀病毒數量會明顯增加，包括大腸埃希氏菌在內的多種病原菌如沙門氏菌、彎曲桿菌、產氣莢膜梭狀芽孢桿菌等，以及隱胞屬原蟲和輪狀病毒、傳染性胃腸炎病毒、豬腺病毒和冠狀病毒等多種因素都會致病，嚴重威脅仔豬健康（Jonsson，1992）。 2.2.3 日糧胃腸道微生物群落的穩(wěn)定性除了受胃腸道內的生態(tài)環(huán)境（包括氧化還原能力、養(yǎng)分可利用性、pH值以及微生物種群之間相互影響等）和外界環(huán)境條件（如溫度和濕度，可以通過影響過路菌和固有菌的滋生而擾亂胃腸道固有的微生物群落）影響外，日糧成分如纖維含量也是一個不可忽視的重要因素。據報道，改變日糧中的纖維數量可以調控胃腸道微生物群落結構，如高纖維日糧能夠顯著增加動物胃腸道中的纖維分解菌數目（Moore，1987）。日糧中的纖維按照可溶性纖維與不可溶性纖維來劃分，它們在消化的過程中產生不同的結果（Mao，1996）。其中，前者主要存在于谷類包括小麥、大麥和黑麥中，能夠抵抗腸道中的微生物酵解，可以像海綿一樣吸納水分，在增加糞便體積和預防便秘中具有良好的作用（Blot，1993）。后者因為會被結腸菌群酵解，而不能吸收水分和增加糞便重量（Stephen，1990），但由于結腸能夠與可溶性纖維酵解產物特別是短鏈脂肪酸之間相互作用，通過添加不同種類及比例的纖維來改善機體的健康狀況可以產生良好的效果，已引起人們的日益重視（Gibson，1998）。 3 胃腸道微生物平衡的調控技術 3.1 抗生素抗生素可以通過抑制或殺滅病原微生物、抑制胃腸道中有害微生物區(qū)系的生長，維持腸道微生物特別是有益微生物區(qū)系之間的平衡，從而減少腹瀉對仔豬造成的不良影響。許多研究表明，合理使用抗生素能夠明顯促進豬的生長、增加飼料報酬，提高繁殖性能，減少發(fā)病率和死亡率，對豬的胴體品質改善也有不錯的效果（Saisbury，1993）。就抗生素的作用機理而言，其對胃腸道微生物區(qū)系平衡的調控作用是抗生素改善豬生產性能的一個重要原因（De Cupere，1992）。不過，值得注意的是，盡管抗生素的應用給畜牧生產者帶來了巨大的經濟效益，但是因抗生素應用所帶來的兩個重要問題——病原菌的抗藥性和抗生素在動物體內及動物產品中的殘留問題也愈來愈引起消費者的關注和憂慮（楊鳳，2001）。雖然目前還沒有直接的證據證明上述兩個問題的存在，但事實上，現(xiàn)在已經有很多國家限制和禁止抗生素在飼料中的使用（如青霉素），對尚在使用的，特別是人畜共用抗生素，對其使用品種、應用對象、使用劑量、停藥期以及畜產品中最大允許殘留量標準等均制定了嚴格的法律條文，以盡量減少其負面影響對人造成的危害。由此可見，尋找理想的抗生素替代物已成為當務之急。不過由于相關替代產品的研究尚未成熟，效果還不夠穩(wěn)定，因此今后一段相當長的時間內，抗生素在飼料添加劑中仍將占據十分重要的地位。 3.2 益生素益生素主要通過以下幾方面來實現(xiàn)其對動物生長的調控作用：①產生抑菌物質：例如乳酸桿菌（主要是其代謝產物）能夠產生細菌素、類細菌素，對革蘭氏陽、陰性菌、酵母及真菌均有不同程度的抑制作用，不足之處是一般僅對本屬或屬較近的細菌才有明顯抑制作用，因此不同的細菌素其抑制菌譜是不同的（姚建國，2000）；②粘附在胃腸道粘膜上皮細胞上，占據了上皮細胞的粘附位點，形成了一套保護性生物膜，從而在動物發(fā)生疾病或創(chuàng)傷后，腸道上皮通透性提高時，有效減少了病原菌的定位轉移、日糧和粘膜抗原經腸道的轉移，避免了局部炎癥或者是自身免疫感染性疾病的發(fā)生，從而促進腸道的修復（Sogaard，1990）；③提高機體的免疫機能。據研究，口服給仔豬益生素如嗜熱雙歧桿菌能顯著增加空腸中段和回腸固有層中含IgA的細胞數目（Fuller，1989），通過腹腔注射雙歧桿菌和乳桿菌可以有效提高機體巨噬細胞和自然殺傷細胞的活力（葉成遠，1999）；④與病原菌競爭營養(yǎng)物質：病原菌多數是需氧菌，而益生素中的芽孢桿菌屬菌種也是需氧菌，它們能消耗掉腸道中的氧氣，使病原菌在腸道的生長繁殖受到抑制；此外，由于益生素在腸道菌群中一般是優(yōu)勢菌，數量上占絕對優(yōu)勢，其對腸道營養(yǎng)物質如氨基酸、維生素、礦物質等的消耗，也在很大程度上抑制了病原菌的生長（Fuller，1989）；⑤研究表明，益生素也可以合成大量維生素（B族維生素）及某些特殊物質如植酸梅等提高機體對養(yǎng)分的利用（Maxwell，1995）。作為益生素產品應具有如下特點：①活菌制劑的組成微生物必須是動物胃腸道內的正常微生物，且對動物無害；②能克服胃酸和膽鹽等條件存活；③具有適宜的粘附或定植因子；④具有產生有機酸或其它代謝物抑制病原微生物致病的能力；⑤在加工條件下仍能保持穩(wěn)定和生物活性；⑥能耐受較長時間儲藏而不致于失活（Fuller，1989）。同時具備上述條件的微生物并不多，主要包括乳酸桿菌、芽孢桿菌、擬桿菌、雙歧桿菌、鏈球菌、酵母屬以及片球菌等共50多個種，其中在生產實踐中使用最多的是乳酸桿菌、芽孢桿菌、雙歧桿菌、鏈球菌和酵母菌（田允波，1998）。益生素產品在治療仔豬腹瀉性疾病過程中表現(xiàn)出良好的效果。Pollman（1986）發(fā)現(xiàn)，活菌制劑處理能明顯提高斷奶仔豬日增重，降低其死亡率，改善豬的生產性能。據報道，仔豬從出生后1～2d開始直接飼喂活菌制劑，可顯著降低斷奶仔豬腹瀉的發(fā)生率，存活率提高4％～5％（Pollman，1992）。曹國文（1997）用無毒芽孢桿菌治療仔豬黃痢和白痢，均取得了明顯療效，前者的治愈率分別達96％和94％，后者分別為97％和94％。朱萬寶（1999）用包含臘樣芽孢桿菌、糞鏈球菌等4種微生物的活菌制劑在治療仔豬腹瀉時，也取得了相似效果。不過有關益生素的應用效果的報道目前很不一致。Nousiainen（1993）總結了國外26個使用乳酸菌益生素產品的研究報告，其中有16個試驗的豬生產性能得到了改善，而有9個試驗的生長性能與飼料轉化效率都有所下降，還有8個是僅在豬的飼料轉化率方面得到了提高，不過可以肯定的是，益生素在仔豬上的應用效果明顯比大豬好，這一點與國內的試驗報道一致（顧宏偉，1993）。由于益生素產品種類繁多，質量良莠不齊，各個實驗室和養(yǎng)殖場的條件不一樣等在很大程度上影響了益生素作用效果的穩(wěn)定性。一般影響益生素作用效果的因素主要包括營養(yǎng)及健康狀況、環(huán)境應激、動物種類、品種及年齡、益生素的活力和穩(wěn)定性、益生素的動物特異性、飼喂方式、抗生素及日糧其它成分和動物胃腸道的微生物組成等幾種主要因素（李德發(fā)，2003）。到目前為止，對益生素的研究絕大多數還停留在使用效果水平上，對其作用機理的研究還很不夠。今后在益生素的基礎理論研究方面，特別是動物營養(yǎng)物質代謝和微生物代謝規(guī)律上看，以下兩個方面的深入是很有必要的：①專門化和序列化菌種的研制生產，如專門應用于仔豬黃白痢和早期斷奶仔豬腹瀉方面的益生素產品；②機理的研究。對腸道微生物菌群的定性、定量和定位是開發(fā)和研制益生素的重要條件，這對新的針對性更好的菌種的尋找是十分有益的。今后隨著人們對環(huán)境保護愈來愈重視，動物糞便污染在畜牧業(yè)集中的地區(qū)已經成為一種公害，研制與開發(fā)可以減少臭氣和糞便排放的益生素，減輕畜牧業(yè)的發(fā)展對環(huán)境造成的壓力已經是勢在必行。由此可見，作為一種天然綠色添加劑，益生素沒有抗生素的副作用，今后在畜牧業(yè)上的應用必將更加廣泛。 3.3 益生元狹義的益生元主要是指寡糖類產品，包括果寡糖（FOS）、甘露寡糖（MOS）和異麥芽糖（MO）等，通常在生產中使用較多的是前兩種。其中，MOS是從啤酒酵母中分離得到的，由2～10個單糖組成，具有許多重要的生理功能。MOS一般和沙門氏桿菌、大腸桿菌等有害微生物細胞壁中的外源凝集素結合，減少微生物與寄主細胞壁結合的機會，防止有害微生物群落的形成。研究表明，以MOS為主的低聚糖的作用機制在于它能干擾腸道病原體的繁殖，為細胞提供豐富的甘露糖源，避免了細菌與腸壁的親和；同時MOS不能被病原菌利用，但是卻可以激活有益菌，促進腸道微生物群落向更加有益的細菌和類型轉變（韓仁歸，2000）。據研究，日糧中添加MOS能夠顯著改善仔豬特別是體重較輕仔豬的生產性能，日增重可增加13％，腹瀉率顯著降低，飼料報酬明顯改善，效果優(yōu)于Yucca extract（絲蘭提取物）、β－葡聚糖和有機酸制劑等（Ko，1999a）。不僅如此，MOS對仔豬的免疫功能也有一定的影響。據報道，日糧中添加MOS能夠明顯增強仔豬免疫球蛋白的活性、增加小腸B淋巴細胞數和免疫球蛋白含量，同時MOS還可以促進和增加初期免疫反應，提高腸管淋巴球的反應能力，增加腸管內白血球的巨噬細胞作用，這與小鼠中的結果類似（Spring，1998）。 FOS是一種非消化性寡糖，在小腸中有選擇性吸收能力，可以破壞有害微生物，增加小腸中有益菌的密度，在大腸中對揮發(fā)性脂肪酸的產生也有一定效果（Spencer，1997）。據研究，日糧中應用0.1％的FOS能夠促進仔豬腸道發(fā)育，增加腸絨毛的高度，提高氮消化率（Russell，1998a,b）。不過Jin（1994）發(fā)現(xiàn)，在日糧中添加0.3%的FOS雖可改善育肥豬的日增重和料肉比，但這種效應在肥育期末逐漸減弱消失。 3.4 酸化劑斷奶仔豬胃酸分泌不足，導致胃白酶活性降低，蛋白質消化率下降，同時高pH值也為有害菌在胃腸道內的繁殖創(chuàng)造了良好的條件，致使仔豬消化功能發(fā)生障礙，體質變差，最終引起腹瀉。為克服這種不利影響，人們在生產中普遍使用了酸化劑，以增加消化道酸度，刺激胃消化酶活性，提高飼料的消化率，表現(xiàn)出良好的效果（Bolduan，1998）。酸化劑的促生長機理主要在于：①降低飼料和胃中的pH值，促進無活性胃蛋白酶原轉化為有活性的胃蛋白酶。同時減慢胃的排空，增加蛋白質在胃內的消化時間（Krause，1994）；②抑制胃和小腸內大腸桿菌等有害微生物的繁殖，減少其與機體爭奪營養(yǎng)或其它消化性疾病的發(fā)生（Ravindran，1993）。目前，生產中的常用酸化劑主要包括單一酸化劑、以磷酸為基礎的復合酸化劑和以乳酸為基礎的復合酸化劑3種。單一酸化劑中延胡索酸和檸檬酸有正效果，磷酸效果不佳，鹽酸和硫酸基本無效；復合酸化劑中以乳酸為基礎的復合酸要顯著優(yōu)于以磷酸為基礎的復合酸（楊風，2001）。 3.5 其它日糧組成、飼喂方式等對仔豬胃腸道的微生物區(qū)系也會產生一定影響。研究發(fā)現(xiàn)，高蛋白水平日糧會加劇腸道消化產物蛋白質的腐敗分解，導致病原微生物的繁殖，引發(fā)嚴重腹瀉（董國忠，1996）。而飼喂發(fā)酵碳水化合物可以顯著增加腸道中乳酸桿菌和雙歧桿菌的數量，纖維素含量增加則能降低回腸沙門氏菌數目（Howard，1993）。不過有關日糧營養(yǎng)水平、日糧結構、其它添加劑應用時，豬胃腸道微生物群落的變化情況，目前還缺乏系統(tǒng)深入的研究。 4 結語胃腸道微生物與宿主（豬）之間的平衡有效地保證了豬健康快速的生長態(tài)勢。在今后的研究中，應繼續(xù)加強有關微生物調控的基礎理論研究，深入探討胃腸道微生物群落調控的機理和各種調控因子之間的協(xié)同作用，特別是對微生物與胃腸道粘膜發(fā)育、營養(yǎng)代謝以及免疫之間的關系。這對于采取得力措施開發(fā)理想的微生態(tài)制劑，對豬胃腸道微生物群落進行有效調控，維持動物健康，進一步降低產品成本和提高畜產品質量，不失為一種行之有效的好辦法。

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梁師傅 · 發(fā)表于 2008-1-4 23:21:32

好文章....MOS.不知道那里有的買?

zjhkc · 發(fā)表于 2008-1-5 09:19:43

好文章,這對于采取得力措施開發(fā)理想的微生態(tài)制劑，對豬胃腸道微生物群落進行有效調控，維持動物健康，進一步降低產品成本和提高畜產品質量，不失為一種行之有效的好辦法。

牧童 · 發(fā)表于 2008-1-5 15:58:35

又出膏藥了還是頂一把. 其實不僅這一篇文章本論壇很多文章都是有參考價值的. 尤其是許多在雜志發(fā)表過的文章都是經過專家審閱過的至少沒有明顯的胡說所以我們讀后都該給個回貼以表示感謝然而咱這個論壇的規(guī)定就復雜了非要你打字寫不可還不可以只說好貼,頂一類的簡單文字難啊這些繁瑣的規(guī)矩不一定有利有弊網站的發(fā)展一年來沒有這么多的規(guī)矩網站發(fā)展有了這些規(guī)矩后的效果呢? 建議有心的幫主去研究一下例如注冊人數增長曲線發(fā)貼量增長曲線轉貼資料增長曲線回貼和灌水貼增長曲線精華貼增長曲線 ............................ 不知道有沒有這類幫主???????????????/