現(xiàn)代生物工程制劑：豬生長(zhǎng)素釋放因子基因質(zhì)粒

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四川農(nóng)業(yè)大學(xué)、東北農(nóng)業(yè)大學(xué)、中國(guó)農(nóng)科院畜牧所都曾做過大量關(guān)于豬生長(zhǎng)激素釋放因子（pGRF）基因質(zhì)粒的研究，本品在廣東、福建規(guī)模豬場(chǎng)試用效果顯著，斷奶至出欄階段增重可以提高7%-10%，料肉比降低0.2-0.3，明顯提高豬抗病能力，是生物技術(shù)給畜牧業(yè)帶來的革命性的產(chǎn)品，大大提高養(yǎng)殖效率。

豬生長(zhǎng)素釋放因子基因質(zhì)粒（安牠靈）

pGRF DNA Porcine Growth Releasing Factor DNA 豬生長(zhǎng)素釋放因子基因質(zhì)粒（獸用） 【藥品名稱】 通用名稱： 豬生長(zhǎng)素釋放因子DNA 商品名稱： 安牠靈注射液 英文名稱： Porcine Growth Releasing Factor DNA 漢語拼音： Zhukangling Zhusheye 【有效成份】 本品主要成份及其化學(xué)名稱：雙鏈環(huán)狀脫氧核糖核酸(DNA) 化學(xué)組成 pGRF DNA由5,195堿基對(duì)組成。其堿基組成如下：

	A	G	C	T
堿基數(shù)目	1234	1344	1459	1158
%	24	26	28	22

質(zhì)粒結(jié)構(gòu) pGRF質(zhì)粒由下列各部分組成

	file:///C:/DOCUME~1/QINSHE~1/LOCALS~1/Temp/msohtml1/01/clip_image001.gif
			file:///C:/DOCUME~1/QINSHE~1/LOCALS~1/Temp/msohtml1/01/clip_image002.gif

載體序列

file:///C:/DOCUME~1/QINSHE~1/LOCALS~1/Temp/msohtml1/01/clip_image003.gifOri pUC19復(fù)制起點(diǎn) KanR 卡那霉素抗性基因

GRF表達(dá)區(qū)

file:///C:/DOCUME~1/QINSHE~1/LOCALS~1/Temp/msohtml1/01/clip_image004.gifPromoter 豬骨骼α-肌動(dòng)蛋白激活子和增強(qiáng)子 pGRF 豬生長(zhǎng)素釋放因子和前導(dǎo)序列cDNA Poly A 聚腺苷酸信號(hào)和3’非翻譯區(qū) 質(zhì)粒內(nèi)切酶圖譜 利用內(nèi)切酶圖譜鑒定pGRF質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)，經(jīng)內(nèi)切酶切斷的pGRF，用瓊脂糖凝膠(1.2 %濃度)電泳顯現(xiàn)片段)。

內(nèi)切酶名稱	內(nèi)切酶位點(diǎn)	片段長(zhǎng)度(bp)
Xho I	3	485, 2652, 2058
Hind III	2	4527, 668

file:///C:/DOCUME~1/QINSHE~1/LOCALS~1/Temp/msohtml1/01/clip_image006.gif 由左至右：第1和第27行：標(biāo)記DNA (1 kb + Ladder,Invitrogen Inc.) 第2至6行：完整質(zhì)粒 第7至26行：質(zhì)粒的內(nèi)切酶圖譜 【性狀】 本品溶于生理鹽水或鹽水加佐劑，呈無色透明液體。 【藥理作用】 該質(zhì)粒為表達(dá)生長(zhǎng)素釋放因子pGRF的載體。經(jīng)肌肉注射后，目的基因pGRF具有在肌肉細(xì)胞內(nèi)特異表達(dá)豬GRF蛋白的功能，刺激腦垂體產(chǎn)生內(nèi)源性的生長(zhǎng)激素(GH)，再促進(jìn)類胰島素生長(zhǎng)因子(IGF-1)分泌，通過促進(jìn)仔豬小腸絨毛的發(fā)育，最終促進(jìn)豬的生長(zhǎng)和降低料重比,提高豬的生產(chǎn)性能。同時(shí)，還具有增強(qiáng)豬體的免疫力以及緩解細(xì)菌性引起的高熱肺炎癥的功效。 【毒理作用】 本品無致突變作用；在亞急性毒性評(píng)價(jià)中，對(duì)豬單次肌肉注射5倍正常劑量的pGRF DNA，連續(xù)135天觀察和檢測(cè)，受試豬無任何不良的生理生化反應(yīng)；其血液學(xué)指標(biāo)、血液生化指標(biāo)和器官系數(shù)等檢測(cè)結(jié)果正常；病理組織學(xué)檢查未表現(xiàn)出劑量反應(yīng)關(guān)系，也不發(fā)生隨試驗(yàn)期延長(zhǎng)而加重的變化，因此，對(duì)豬的亞急性毒性較小，試驗(yàn)使用的劑量安全性較高。出欄時(shí)的殘留水平至少比先前建立的“安全口服劑量(20mg/kg)”還低6250萬倍。 由農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心主持完成了急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)、小鼠骨髓微核試驗(yàn)、精子畸形試驗(yàn)、Ames試驗(yàn)、90天喂養(yǎng)(亞急性毒性)試驗(yàn)及傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)，結(jié)果表明肌肉注射豬生長(zhǎng)素釋放因子(pGRF) DNA生成豬肉食用性是安全的。 綜上所述，可以認(rèn)為pGRF質(zhì)粒對(duì)豬、人及環(huán)境都是安全的。 【藥代動(dòng)力學(xué)】 本品注射入肌肉后，進(jìn)入到注射部位的肌肉細(xì)胞，但不會(huì)整合到寄主細(xì)胞的基因組中，以非組合的形式存在并表達(dá)。藥效在注射后可持續(xù)至35天；在豬只出欄前，絕大部分質(zhì)粒被降解消失, 注射部位的質(zhì)粒殘留低于注射量的0.0003%。在注射后7日內(nèi),雖然有極少量漂散到心肝脾腎等內(nèi)臟器官和血液中，但在血漿中DNA酶作用下很快全部被降解清除掉,各個(gè)臟器和血液內(nèi)檢測(cè)不出殘留。 注射后35天，受試豬血液中GRF、GH和IGF-1含量水平得到提高，但都在正常生理范圍內(nèi)。在出欄階段(注射后135天)，受試組與對(duì)照組已完全沒有差異。 【功能與主治】 提高生產(chǎn)性能，促進(jìn)生長(zhǎng)；降低料重比，提高飼料利用率；縮短生長(zhǎng)周期，提早出欄以及不會(huì)降低豬肉品質(zhì)；增強(qiáng)仔豬機(jī)體免疫力，提高仔豬對(duì)高溫的耐受性，緩解細(xì)菌引起的高熱肺炎，減少仔豬死亡率。 【用法用量】 肌肉注射。在仔豬35-40日齡時(shí)，一次性(臀部)肌肉注射2ml(含4.5mg)。 【不良反應(yīng)】 注射本品無任何不良反應(yīng)。 【停藥期】 考慮到質(zhì)粒的殘留,豬出欄前一個(gè)月停止用藥。由于大中豬的注射增重效果不明顯,建議只對(duì)35-40日齡的仔豬使用。因此,實(shí)際使用中不存在停藥期問題。 【注意事項(xiàng)】 1 注射前針頭消毒。 2 每注射10頭，要更換針頭。建議使用16g規(guī)格的針頭。 3 插入(臀部)肌肉后，輕輕注射，并輕柔注射部位；盡量避免pGRF注射液回流溢出體外。 4 輕搖混勻pGRF注射液并待其溫度為室溫時(shí)使用。 【藥物相互作用】 未發(fā)現(xiàn)本品與其它任何藥物發(fā)生相互作用，造成藥效減低或其它毒副作用。 【藥物過量】 不建議過量使用，但使用過量也不會(huì)出現(xiàn)任何不良癥狀。 【規(guī)格】 4.5mg /2ml (支) 【貯藏】 4℃，避光密封保存。 【包裝】 50ml/瓶(25頭份/瓶)，20瓶/盒，6盒/箱 【有效期】 二年 【批準(zhǔn)證書】中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)生物安全證書(生產(chǎn)應(yīng)用)-農(nóng)基安證字(2003)第008號(hào) 【生產(chǎn)企業(yè)】 企業(yè)名稱：香港格蘭柏生化科技有限公司 地 址：香港新界沙田生物科技路2號(hào)

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樓主：不好意思，我來給你潑潑涼水了！ 之前，我做論文的時(shí)候就有實(shí)驗(yàn)室的哥們做的是pGRF，且不說其效果不確切，光注射質(zhì)粒造成的豬只體內(nèi)轉(zhuǎn)座子片斷的存在極易產(chǎn)生局部遺傳基因的改變。 豬肉是吃的，不是做試驗(yàn)的，這樣的豬肉基因安全上存在一定的隱患。 我就不明白了，明明可以表達(dá)成蛋白質(zhì)，干嗎不生產(chǎn)pGRF蛋白，卻一定要注射什么鬼質(zhì)粒。 希望樓主慎重推廣

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由農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心主持完成了急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)、小鼠骨髓微核試驗(yàn)、精子畸形試驗(yàn)、Ames試驗(yàn)、90天喂養(yǎng)(亞急性毒性)試驗(yàn)及傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)，結(jié)果表明肌肉注射豬生長(zhǎng)素釋放因子(pGRF) DNA生成豬肉食用性是安全的。 這個(gè)是忽悠，這些片面性的試驗(yàn)不能保證DNA生成食品的安全性，基因突變是概率事件，不能用簡(jiǎn)單的幾次試驗(yàn)來確信??！:5s:

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搞成GRF蛋白就成激素了，殘留更厲害，還不方便使用，持續(xù)期較短，如果你沒有進(jìn)行深入了解，請(qǐng)謹(jǐn)慎發(fā)言，沒有研究就沒有發(fā)言權(quán)。社會(huì)在進(jìn)步，科技在發(fā)展，當(dāng)初酶的使用不適也經(jīng)歷了從認(rèn)識(shí)到普及的過程嗎，任何新事物總要時(shí)間和實(shí)踐來檢驗(yàn)。目前農(nóng)業(yè)部已經(jīng)給產(chǎn)品發(fā)了“轉(zhuǎn)基因安全證書”，安全性是沒有問題的，不要談轉(zhuǎn)基因就談虎色變，就像當(dāng)初教會(huì)抵制“日心說”一樣。相信生物技術(shù)會(huì)給我們帶來更美好的生活和更高效的資源利用！ [ 本帖最后由 iamtao216 于 2008-4-11 14:10 編輯 ]

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豬生長(zhǎng)激素釋放因子基因質(zhì)粒(安牠靈)推廣中客戶關(guān)心問題解答 北京誠(chéng)益農(nóng)生物技術(shù)有限公司 新技術(shù)產(chǎn)品部 1. 安牠靈的產(chǎn)品性質(zhì)、安全性？ 本產(chǎn)品由于其化學(xué)成分是核酸，是豬體內(nèi)所本身所具有的物質(zhì)，對(duì)豬的健康沒有任何危害，對(duì)畜產(chǎn)品安全和人類健康也沒有任何負(fù)面影響，也不會(huì)對(duì)環(huán)境生物安全有任何潛在隱患，是根本不同于“瘦肉精”類的綠色、安全、無公害產(chǎn)品，是生物技術(shù)對(duì)養(yǎng)豬業(yè)、對(duì)農(nóng)民、對(duì)消費(fèi)者帶來的福音。作為嚴(yán)格管制的農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品，2000年1月向中國(guó)政府提出申請(qǐng)，2001年7月就被農(nóng)業(yè)部“基因安全委員會(huì)”審批并發(fā)放中試批文。本產(chǎn)品的安全性是100%的。 通過“三致”檢測(cè)實(shí)驗(yàn)表明，本品無致畸、致癌、致突變作用；在亞急性毒性評(píng)價(jià)中，對(duì)豬單次肌肉注射5倍正常劑量的pGRF DNA，連續(xù)135天觀察和檢測(cè)，受試豬無任何不良的生理生化反應(yīng)；其血液學(xué)指標(biāo)、血液生化指標(biāo)和器官系數(shù)等檢測(cè)結(jié)果正常；病理組織學(xué)檢查未表現(xiàn)出劑量反應(yīng)關(guān)系，也不發(fā)生隨試驗(yàn)期延長(zhǎng)而加重的變化，因此，對(duì)豬的亞急性毒性較小，試驗(yàn)使用的劑量安全性較高。出欄時(shí)的殘留水平至少比先前建立的“安全口服劑量(20mg/kg)”還低6250萬倍。 由農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心主持完成了急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)、小鼠骨髓微核試驗(yàn)、精子畸形試驗(yàn)、Ames試驗(yàn)、90天喂養(yǎng)(亞急性毒性)試驗(yàn)及傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)，結(jié)果表明肌肉注射豬生長(zhǎng)素釋放因子(pGRF) DNA生成豬肉食用性是安全的。 綜上所述，可以認(rèn)為pGRF質(zhì)粒對(duì)豬、人及環(huán)境都是安全的。 2. 安牠靈在實(shí)際生產(chǎn)中的效果？ 經(jīng)華南農(nóng)業(yè)大學(xué)、四川農(nóng)業(yè)大學(xué)及廣東、河北、浙江、福建等地各大豬場(chǎng)等先后對(duì)本產(chǎn)品在養(yǎng)豬生產(chǎn)上的使用效果做的長(zhǎng)期、大量的精確測(cè)定表明，本產(chǎn)品的作用效果主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面： 加快商品豬生長(zhǎng)速度。綜合使用結(jié)果表明本產(chǎn)品可提高生長(zhǎng)育肥豬增重7%～10%，或提前豬90千克出欄時(shí)間7～15天，節(jié)省飼料40～50千克/頭，加快豬群周轉(zhuǎn)，提高出欄率，每頭豬可增加效益70～120元，投入產(chǎn)出比1:2.0～4.0。 改善商品豬胴體品質(zhì)。本產(chǎn)品對(duì)商品豬胴體品質(zhì)有明顯的改善作用，可使瘦肉率提高3%～6%，眼肌面積提高10%～14%，三點(diǎn)背膘厚降低5%～8%，并增加肌間脂肪，改善肉質(zhì)風(fēng)味，使豬肉品質(zhì)提高一個(gè)等級(jí)。 另通過生產(chǎn)實(shí)踐發(fā)現(xiàn)，本產(chǎn)品還可以增強(qiáng)仔豬機(jī)體免疫力，提高仔豬對(duì)高溫的耐受性，緩解細(xì)菌引起的高熱肺炎，降低仔豬死亡率。 3. 安牠靈的注射是否會(huì)影響豬場(chǎng)免疫程序？是否影響其它疫苗的效果？ 經(jīng)華南農(nóng)業(yè)大學(xué)、廣東東進(jìn)農(nóng)牧集團(tuán)惠東豬場(chǎng)試驗(yàn)和使用結(jié)果，注射本產(chǎn)品可以促進(jìn)仔豬的細(xì)胞免疫，增加淋巴細(xì)胞的含量，增強(qiáng)白細(xì)胞的吞噬作用，提高機(jī)體抗病能力；另和豬瘟疫苗、偽狂犬疫苗、PRRS疫苗等豬場(chǎng)常用苗同時(shí)注射，能增強(qiáng)疫苗效價(jià)，提高抗體滴度。因此注射本產(chǎn)品不會(huì)對(duì)其他疫苗效果造成不良影響，不會(huì)影響豬場(chǎng)正常免疫程序。 4. 安牠靈注射后有無不良反應(yīng)？ 經(jīng)大量推廣實(shí)踐證明，本產(chǎn)品注射后無過敏、應(yīng)激等不良反應(yīng)。 5. 是否會(huì)對(duì)肉質(zhì)產(chǎn)生影響？對(duì)豬生長(zhǎng)發(fā)育產(chǎn)生影響？ 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)關(guān)于pGRF基因質(zhì)粒對(duì)商品豬肉質(zhì)性狀的影響研究結(jié)果表明，注射本產(chǎn)品均可降低背膘厚，增大眼肌面積。且其肉色和大理石紋評(píng)分均在3～4分的正常范圍內(nèi)。45min pH值均高于5.8，24h pH值均低于6.0，都在正常范圍內(nèi)。滴水損失值也正常。這表明，商品豬注射本產(chǎn)品對(duì)胴體品質(zhì)有提高，能提高豬肉等級(jí)，但對(duì)肉質(zhì)無不良影響。 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)研究表明，商品豬注射本產(chǎn)品后心、肺、腎、肝、脾等內(nèi)臟器官生長(zhǎng)發(fā)育正常，無不良影響。 6. 安牠靈注射后對(duì)豬群管理和飼料有什么特殊要求？ 商品豬注射本產(chǎn)品后要加強(qiáng)豬群健康監(jiān)測(cè)，保證豬群健康，這也是保證產(chǎn)品效果的基礎(chǔ)；飼喂采取自由采食、保證清潔飲水；飼料養(yǎng)分全價(jià)、平衡；如可稍提高蛋白比例(1%～2%)，并適量提高賴氨酸比例，這樣可以保證機(jī)體蛋白合成效率，則能更好發(fā)揮產(chǎn)品效果。其他飼養(yǎng)管理程序按豬場(chǎng)原有程序進(jìn)行，無特殊要求。 7. 注射日齡，中大豬注射有沒有效果？ 本產(chǎn)品非激素類產(chǎn)品，完全按照動(dòng)物生理特點(diǎn)發(fā)揮效果，因此注射－轉(zhuǎn)化－表達(dá)－發(fā)揮效果有一個(gè)較長(zhǎng)的過程。通過生產(chǎn)實(shí)踐證明，商品豬35日齡、50日齡、65日齡、80日齡注射本產(chǎn)品后，生產(chǎn)效果呈階梯狀下降，35日齡注射效果最佳。因此建議在仔豬階段注射，在中大豬階段使用本產(chǎn)品投入產(chǎn)出比較小。 [ 本帖最后由 iamtao216 于 2008-4-19 15:17 編輯 ]

iamtao216

這么好的東西就沒人關(guān)注？在原料、飼養(yǎng)成本高漲的情況下，應(yīng)該進(jìn)行一些變革。