從《飼料添加劑木聚糖酶活力的測定》申報稿的編撰者來看,除尤特爾一家來自實際發(fā)酵生產(chǎn)廠家,其余無一例外代表了飼料酶銷售從業(yè)者。來自國內(nèi)微生物酶研究行業(yè)領(lǐng)域具有廣泛代表性的人士一個沒有。盡管編撰者宣稱該標(biāo)準(zhǔn)申報稿是分析了近300個含有木聚糖酶的飼料酶樣品而制定。給人的印象顯得空洞無力,可以稱之為--行業(yè)的自娛自樂!并不為過。
木聚糖結(jié)構(gòu)形式的復(fù)雜性導(dǎo)致了微生物木聚糖酶生成基因的分子進化途徑的多樣性。不同的產(chǎn)酶工程菌在發(fā)酵時同時產(chǎn)生幾種木聚糖酶是常有的事(一些微生物可同時產(chǎn)生幾種內(nèi)切木聚糖酶,一部分屬于F10族,另一部分可能屬于G11族),隸屬F10族和G11族木聚糖酶產(chǎn)生的高分子量木聚糖酶和低分子量木聚糖酶的作用底物方式、作用效率截然不同。作用方式的迥然差異,使得酶活檢測結(jié)果不好比較。對應(yīng)用于飼料的木聚糖酶國家有沒有限制在哪一類木聚糖酶呢?如果沒有,以不變的標(biāo)準(zhǔn)衡量F10族和G11族的木聚糖酶酶活是否是合適的呢?---很顯然,是不合適的。
酶制劑檢測方法是按下面原則建立---“酶反應(yīng)動力學(xué)是通過建立濃度與反應(yīng)速度的關(guān)系,以酶的濃度來反映酶促反應(yīng)速度,即酶活力的大小。(當(dāng)飽和的底物濃度遠大于Km時,酶促反應(yīng)速度與酶的總濃度具有線性關(guān)系,此時的酶活正比于酶濃度而與底物無關(guān))”。在不同溫度、pH值下檢測,原始酶液的濃度并沒有發(fā)生變化,變化的是酶促反應(yīng)速度和失活速度(通過測定底物的消耗量或產(chǎn)物生成量來反映)
酶反應(yīng)初速度的大小是指在反應(yīng)時間為零時的酶反應(yīng)速度,由于酶促反應(yīng)速度由底物或產(chǎn)物變化量反映,所以實際上,在時間為零的初速度是不能測定的,要接近這個值,因此規(guī)定酶反應(yīng)初速度是:在整個恒溫反應(yīng)時間里,底物消耗量在5%以內(nèi),或產(chǎn)物形成量占總產(chǎn)物量的15%以下時的速度。
從這個觀點出發(fā),只有酶反應(yīng)條件滿足于最適溫度、最適pH條件下,酶促反應(yīng)速度達到最大,才容易接近酶反應(yīng)初速度真實值,底物消耗量在5%以內(nèi),或產(chǎn)物形成量占總產(chǎn)物量的15%以下。太低的反應(yīng)溫度,使得酶檢測的準(zhǔn)確度,可靠性受到質(zhì)疑。
如果假定應(yīng)用于飼料的飼料酶,應(yīng)該在動物體溫下,檢測酶促反應(yīng)大小的觀點是對的,那么動物消化道的pH范圍從2~6,pH5.5的條件只是一個點而已,酶催化的pH位點范圍很大,某一pH位點的檢測值能反映胃腸道里真實的酶促反應(yīng)大小嗎?顯然是不行的。同時商品木聚糖酶相當(dāng)于水解木聚糖的復(fù)合酶。每一種產(chǎn)酶工程菌的催化最適條件--反映的是其包含的幾種內(nèi)切、外切、脫枝酶在該條件下,用還原法檢測,具有最大催化底物效率的條件。偏離了最適條件,對內(nèi)切酶是合適的,但對外切酶、脫枝酶可能就不合適了。偏離最適條件下的檢測結(jié)果,對生產(chǎn)的指導(dǎo)意義何在?
既然無法據(jù)此作出酶活與催化轉(zhuǎn)化營養(yǎng)素量的關(guān)系,那又何必畫蛇添足,多此一舉,非要把測定溫度規(guī)定死在37℃?不同來源的酶最適反應(yīng)溫度不同,最適pH不同,酶活檢測,目的更多的是為企業(yè)核算生產(chǎn)和采購成本提供依據(jù)。
由此,不得而知,這個《飼料添加劑木聚糖酶活力的測定》也就是以片面代替全部,以自己想法建立市場準(zhǔn)則。
[ 本帖最后由 等離子 于 2008-6-13 11:52 編輯 ] |
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