É 型鴨肝炎病毒變異株的鑒定

peteryuanfeng

表1　人工致病試驗
代次 毒株
日齡
1
7
初代
C1
0ö5
-
E3
0ö5
-
二代
C1
1ö10
-
E3
6ö10
-
三代
C1
-
1ö10
E3
-
5ö5
四代
C1
-
4ö10
E3
-
10ö10
　　結(jié)果指死亡鴨只數(shù)ö接種鴨只數(shù)　“2”指未測
2.  2 　PCR  和 R T 2PCR  如圖 1 所示, 對照組D PV
M LV  被擴增出長約421 bp 的條帶, 而待檢樣品E8
的PCR 結(jié)果呈陰性(圖1)。從待檢樣品中, 未擴增出
禽流感病毒的N P 基因(圖略)。
圖1　從待檢樣品中擴增D PV UL 6 基因的結(jié)果
1:  陰性對照;  2:  E8;  3:  D PV M LV ;  4:  DNA m arker
2.  3　電鏡觀察　負染樣本中存在大小較一致的病毒
顆粒, 直徑約為20～ 30 nm , 一個視野中, 見多個病毒
顆粒聚集成團(圖略)。
2.  4　交叉中和試驗　表2 和表3 為兩個批次的中和
試驗結(jié)果。如表所示,DHV É 型抗血清能部分中和待
檢毒株HB 1 的28 代和63 代雞胚化弱毒, 但待檢毒株
的抗血清對DHV É 型弱毒沒有中和作用。兩次制備
的DHV É 型和待檢病毒的抗血清效價高低略有不
同。兩次試驗中, 待檢毒株和DHV É 型的相關(guān)系數(shù)分
別為37.  4% 和63%。
表2　待檢病毒28 代雞胚適應(yīng)毒與D HVÉ 型弱毒
之間的交叉中和試驗         (log10)
病毒
抗血清
C80
E28
C80
2.  29
0.  43
E28
1.  26
1.  69
表3　待檢病毒63 代雞胚適應(yīng)毒與D HVÉ 型弱毒
之間的交叉中和試驗         (log10)
病毒
抗血清
C80
E63
C80
1.  77
0.  95
E63
1.  56
2.  11
3　討論
DHV  的鑒定主要依靠分離病毒時胚胎的病變和
人工致病試驗[ 3 ]。在繁殖病毒的最初幾代, 雞胚死亡