鴨瘟鴨病毒性肝炎二聯(lián)弱毒疫苗的研究

peteryuanfeng

　　1996-   02-   21收稿。本文為四川省教委資助的重點(diǎn)科研課題的部分內(nèi)容, 在全國家畜傳染病學(xué)分會第六次和獸醫(yī)生物
技術(shù)分會第五次學(xué)術(shù)研討會上被評為優(yōu)秀論文。
四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)　1997年　15　(2) : 263    269, 295
J.  Sichuan A g ric. U n iv.
鴨瘟鴨病毒性肝炎二聯(lián)弱毒疫苗的研究
Îõ二聯(lián)疫苗對雛鴨早期最佳免疫途徑的研究
　　　　　　程安春　汪銘書　崔恒敏　廖德惠　陳孝躍
　　　　　　　　　　(四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院ö雅安市625014)
摘　　　要　本文報(bào)道鴨瘟鴨病毒性肝炎二聯(lián)弱毒疫苗對雛鴨進(jìn)行早期免疫的試驗(yàn)結(jié)果。試驗(yàn)采用不含
鴨瘟和鴨病毒性肝炎母源抗體和含不同滴度母源抗體水平的1日齡的四川麻鴨雛鴨, 用鴨
瘟鴨病毒性肝炎二聯(lián)弱毒疫苗經(jīng)皮下注射、飲水、滴鼻和噴霧進(jìn)行免疫, 探索不同免疫途徑
對鴨瘟和鴨病毒性肝炎的免疫效果及免疫持續(xù)期, 選出最佳免疫途徑。試驗(yàn)結(jié)果表明:  1.
對于沒有母源抗體的1日齡雛鴨, 用鴨瘟鴨病毒性肝炎二聯(lián)弱毒疫苗進(jìn)行免疫的最佳途經(jīng)
是皮下注射和飲水免疫, 其中皮下注射效果比飲水稍好:  ①到3日齡產(chǎn)生對鴨病毒性肝炎
部分免疫力, 4日齡產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)免疫力;  ②皮下注射到3日齡、飲水免疫到4日齡均產(chǎn)生對鴨瘟
的堅(jiān)強(qiáng)免疫力, 保護(hù)期持續(xù)2個月以上。2.  對有母源抗體的雛鴨進(jìn)行免疫的最佳途經(jīng)是飲
水免疫:  ①到3    4日齡產(chǎn)生對鴨病毒性肝炎部分免疫力, 5日齡產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)免疫力;  ②3    4
日齡產(chǎn)生對鴨瘟部分免疫力, 5日齡產(chǎn)生對鴨瘟的堅(jiān)強(qiáng)免疫力, 其免疫持續(xù)期2個月以上。
關(guān)　鍵　詞　鴨瘟鴨病毒性肝炎二聯(lián)苗　雛鴨　早期免疫　效果　鴨病[ 49NA ]
中圖分類號　S855.  3;  S858.  32;  S852.  52
引　言
　　鴨瘟鴨病毒性肝炎是目前危害養(yǎng)鴨業(yè)的
兩個重要的傳染病, 其中鴨病毒性肝炎主要
是危害20日齡以內(nèi)的雛鴨, 特別是3-   10日齡
的雛鴨發(fā)病死亡嚴(yán)重[ 1-   2 ] ,  目前對該病防制
公認(rèn)最為有效的辦法是對種鴨產(chǎn)蛋前進(jìn)行鴨
病毒性肝炎弱毒的免疫而使下一代雛鴨獲得
母源抗體的保護(hù)而免受鴨病毒性肝炎的侵
襲[ 1-   5 ]。鴨瘟是嚴(yán)重威脅我國養(yǎng)鴨業(yè)的另一
大傳染病, 自從1956年我國廣東報(bào)道發(fā)生鴨
瘟后, 到現(xiàn)在我國各養(yǎng)鴨地區(qū)基本都有該病
的存在, 易感鴨群一旦發(fā)生, 其傳播迅速, 發(fā)
病率和死亡率都很高, 目前對該病的防制主
要是使用鴨瘟雞胚化弱毒疫苗對鴨進(jìn)行預(yù)防
注射, 其免疫效果很好[ 1-   2 ]。
　　為了適應(yīng)生產(chǎn)上的需要, 我們在對“鴨瘟
鴨病毒性肝炎二聯(lián)弱毒疫苗中兩種弱毒的最
佳配比的篩選”、“二聯(lián)疫苗的安全性和穩(wěn)定
性進(jìn)行了測定”、“篩選了最佳免疫劑量”、“完
成了二聯(lián)苗的免疫原性及免疫期的測定”、
“測定了二聯(lián)苗免疫鴨群后抗體消長的基本
規(guī)律”、“對疫苗的保存條件及保存期進(jìn)行了
測定”等工作的基礎(chǔ)上, 較成功地獲得了“鴨
瘟鴨病毒性肝炎二聯(lián)弱毒疫苗”[ 6-   8 ] ,   實(shí)驗(yàn)
結(jié)果表明, 該苗對種鴨的鴨病毒性肝炎的免
疫期可以達(dá)到5.  5-   6個月, 對鴨瘟的免疫期
可達(dá)到9個月, 在很多規(guī)?；⒓s化飼養(yǎng)場
使用效果很好。然而在我國的廣大農(nóng)村飼養(yǎng)
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的放牧鴨群, 其種鴨沒有進(jìn)行正規(guī)的免疫, 其
子代又常常受到鴨瘟、鴨病毒性肝炎的威脅,
所以我們探討了鴨瘟鴨病毒性肝炎二聯(lián)弱毒
疫苗對含母源抗體和不含母源抗體的雛鴨進(jìn)
行早期免疫的途徑和免疫效果, 現(xiàn)報(bào)道如下。
1 材料與方法
1.  1 實(shí)驗(yàn)材料
1.  1.  1 鴨瘟鴨病毒性肝炎二聯(lián)弱毒疫苗: 四
川農(nóng)業(yè)大學(xué)禽病防治研究中心研制[ 6-   8 ]。
1.  1.  2 不含抗鴨瘟鴨病毒性肝炎母源抗體的
雛鴨: 為1、3、5、7、9日齡四川麻鴨, 臨床健康,
其上一代在產(chǎn)蛋前采血,  檢測 EL ISA  抗體,
選擇結(jié)果為陰性的種鴨, 收集其種蛋孵化。
1.  1.  3 含鴨瘟鴨病毒性肝炎母源抗體的雛
鴨: 為1日齡及其他日齡的幼齡四川麻鴨,  臨
床健康, 其上一代在產(chǎn)蛋前經(jīng)過鴨瘟鴨病毒
性肝炎二聯(lián)弱毒疫苗的免疫, 收集免疫種鴨
后15、45、75、105、135、165、195、270天的種
蛋進(jìn)行孵化, 同時采取收集蛋當(dāng)天種鴨的血
清,   測定其抗DHV  的中和抗體效價和抗
D PV  的 EL ISA  抗體效價, 其結(jié)果為種鴨免
疫后15、45、75、105、135、165、195、270天抗
DHV  的中和效價分別為:   29.  33、29.  79、210.  28、
29.  74、28.  92、26.  18、25.  29、23.  2; 抗D PV  的EL ISA
抗體效價分別為: 770、6553.  6、4505.  6、3276.
8、2662.  4、1638.  4、1126.  4、70.  4。
1.  1.  4  鴨肝炎病毒 (DHV ) 強(qiáng)毒:   為美國
A TCC 強(qiáng)毒, I 型DHV , 為鴨胚尿囊液, 對10
日齡鴨胚的LD 50 為10-   7.  8ö0.  2mL , 對1日齡
雛鴨的LD 50 =  5×10-   5.  7ö0.  2mL , -   20℃保
存?zhèn)溆谩?br /> 1.  1.  5 鴨瘟強(qiáng)毒: AV 1221 株, 購于中國獸醫(yī)監(jiān)
察所, 用前經(jīng)易感鴨連傳5代,  取攻毒死亡鴨
腦組織, 對成年鴨的最小致死量=  10-   8ömL。
1.  2 實(shí)驗(yàn)方法
1.  2.  1 不含母源抗體的雛鴨的免疫: 每批試
驗(yàn)用雛鴨440只, 隨機(jī)分為5組, 每組88只, 1-
4組為實(shí)驗(yàn)組, 5組為對照組, 進(jìn)行如下試驗(yàn):
①1組為用疫苗飲水, 由于飲水要浪費(fèi)一部分
疫苗, 所以在飲水中按照每只雛鴨加入2個免
疫劑量, 用滅菌蒸餾水稀釋成5m l, 雛鴨在飲
水前先斷水4小時, 保證雛鴨在30分鐘內(nèi)將水
飲完; ②2組為用疫苗皮下注射, 每只雛鴨1個
免疫劑量; ③3組為用疫苗滴鼻, 每只雛鴨1個
免疫劑量; ④4組為用疫苗噴霧免疫, 在進(jìn)行
噴霧免疫時, 用5kgömL  的壓縮空氣通過噴
頭將疫苗霧化, 每分鐘噴出疫苗的液體的量
約10mL , 90% 的霧滴顆粒達(dá)1-   10Λm , 由于
考慮到噴霧免疫要浪費(fèi)疫苗,  所以在計(jì)算疫
苗的量時是按照每只雛鴨2個免疫劑量給的。
以上各組鴨均在消毒好以后各相互隔離的圈
舍內(nèi)飼養(yǎng)。
1.  2.  2 含母源抗體的雛鴨的免疫: 使用的免
疫方法及免疫分組同1.  2.  1,  對照組使用的
是不含母源抗體的雛鴨。各組鴨均在消毒好
以后相互隔離的圈舍內(nèi)飼養(yǎng)。
1.  2.  3 不含母源抗體雛鴨免疫產(chǎn)生期及免疫
持續(xù)期的測定
1.  2.  3.  1 抗鴨病毒性肝炎免疫產(chǎn)生期的測
定: 各組在1日齡免疫二聯(lián)疫苗后, 于3、4、5、
6、7日齡每組取10只攻擊1萬倍LD 50 的DHV
的A TCC 強(qiáng)毒, 隔離飼養(yǎng)觀察20天。
1.  2.  3.  2 抗鴨瘟免疫產(chǎn)生期及持續(xù)期的測
定: 各年齡組鴨在免疫二聯(lián)疫苗后, 于3、4、5、
6、7、30、60和90日齡每組取10只攻擊1萬倍
最小致死量的D PV  強(qiáng)毒,  隔離飼養(yǎng)觀察20
天。
1.  2.  4 含母源抗體雛鴨免疫產(chǎn)生期及免疫持
續(xù)期的測定
1.  2.  4.  1 抗鴨病毒性肝炎免疫產(chǎn)生期的測
定: 各組在1日齡免疫二聯(lián)疫苗后, 于3、4、5、
6、7日齡每組取10只攻擊1萬倍LD 50 的DHV
的A TCC 強(qiáng)毒, 隔離飼養(yǎng)觀察20天。
1.  2.  4.  2 抗鴨瘟免疫產(chǎn)生期及持續(xù)期的測
定: 各年齡組鴨在免疫二聯(lián)疫苗后, 于3、4、5、
6、7、30、60和90日齡每組取10只攻擊1萬倍
最小致死量的D PV  強(qiáng)毒,  隔離飼養(yǎng)觀察20
天。
2 結(jié)果
2.  1 不含母源抗體雛鴨免疫產(chǎn)生期及免疫持
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續(xù)期的測定
　表1 不含母源抗體雛鴨二聯(lián)苗不同途徑
　　　免疫后抗DV H 免疫力產(chǎn)生時間
　　　　　　免疫后不同日齡攻擊1萬倍
　　　　　　　LD 50 的DHV  強(qiáng)毒結(jié)果
組　別　
　　　 3日齡 4日齡 5日齡 6日齡 7日齡
飲　　水 8ö10　10ö10　10ö10 10ö10 10ö10
皮下注射 9ö10　10ö10　10ö10 10ö10 10ö10
滴　　鼻
噴　　霧
空白對照
4ö10
3ö10
0ö10
　
6 ö10
5 ö10
1 ö10
　
7 ö10
7 ö10
2 ö10
8 ö10
7 ö10
2 ö10
9 ö10
8 ö10
4 ö10
　　注: 分母為攻毒的雛鴨數(shù), 分子為存活雛
鴨數(shù)。
2.  1.  1 對鴨病毒性肝炎免疫產(chǎn)生期的測定:
應(yīng)用二聯(lián)苗免疫1日齡雛鴨后,  其免疫力產(chǎn)
生時間的結(jié)果見表1。
2.  1.  1 對鴨瘟免疫產(chǎn)生期的測定: 應(yīng)用二聯(lián)
苗免疫1日齡雛鴨后,  其免疫力產(chǎn)生時間的
結(jié)果見表2。
2.  2 含母源抗體雛鴨免疫產(chǎn)生期及免疫持續(xù)
期的測定
2.  2.  1 抗鴨病毒性肝炎免疫產(chǎn)生期的測定:
應(yīng)用二聯(lián)苗免疫種鴨后15、45、75、105、135、
165、195、270天收集的種蛋孵出的1日齡雛
鴨用二聯(lián)苗進(jìn)行免疫后: ①抗鴨病毒性肝炎
免疫力產(chǎn)生的時間; ②抗鴨瘟免疫力產(chǎn)生的
時間及免疫力持續(xù)的時間; 結(jié)果見表3、表4、
表5和表6。
3 討論
3.   1 在本系列研究的第五部分中“規(guī)模化養(yǎng)
鴨中對種鴨鴨瘟鴨病毒性肝炎免疫程序的研
究”的結(jié)果和結(jié)論中可以知道,   應(yīng)用鴨瘟鴨
病毒性肝炎二聯(lián)疫苗對有相應(yīng)母源抗體的雛
鴨進(jìn)行免疫時,   其首次最佳免疫時間為28
30日齡, 對于1-   30日齡階段的雛鴨鴨瘟和鴨
病毒性肝炎的防制主要是依靠母源抗體和環(huán)
境的隔離、消毒來實(shí)現(xiàn)的。然而,  對于廣大農(nóng)
村的散養(yǎng)的放牧鴨群來說,   有很多種鴨是沒
有進(jìn)行有計(jì)劃、按程序進(jìn)行免疫接種的,   這
些種鴨的機(jī)體內(nèi)有些是曾經(jīng)感染過鴨瘟或
　　　　　　表2 不含母源抗體雛鴨二聯(lián)苗不同途徑免疫抗D P 免疫力產(chǎn)生時間
　組　　別　
免疫后不同日齡攻擊1萬倍最小致死量的D PV  強(qiáng)毒結(jié)果
3日齡   4日齡   5日齡   6日齡   7日齡  30日齡  60日齡  90日齡
飲　　水       9ö10       10ö10       10ö10       10ö10       10ö10       10ö10       10ö10         6ö10
皮下注射      10ö10       10ö10       10ö10       10ö10       10ö10       10ö10       10ö10         7ö10
滴　　鼻       1ö10         3ö10         3ö10         4ö10         4ö10         3ö10         1ö10         0ö10
噴　　霧       1ö10         1ö10         2ö10         2ö10         3ö10         2ö10         0ö10         0ö10
空白對照       0ö10         0ö10         0ö10         0ö10         0ö10         0ö10         0ö10         0ö10
　　注: 分母為攻毒的雛鴨數(shù), 分子為存活雛鴨數(shù)。
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表3　1日齡雛鴨飲水免疫后攻擊1萬倍LD 50 的DHV  和1萬倍最小致死量D PV  的結(jié)果
　　　　　　　　　　　　攻擊不同病毒毒株后鴨存活數(shù)(攻毒鴨為10只)
　　　　
時間(天) 　 15　　　45　　　75　　　105　　 135　　 165　　 195　　 270　　對照
病毒毒株
DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV   DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV
攻毒日齡
3日齡  8      8      7      7      7      7      8      8      8      8      9      8      9      8      9      8      0      0
4日齡  10    9      9      9      8      8      9      9      9      9      10    9      10    9      10    9      0      0
5日齡  10    10    10    10    10    10    10    10    10    10    10    10    10    10    10    10    0      0
6日齡  10    10    10    10    10    10    10    10    10    10    10    10    10    10    10    10    1      0
7日齡  10    10    10    10    10    10    10    10    10    10    10    10    10    10    10    10    3      0
30日齡  2      10    2      10    2      10    2      10    2      10    2      10    2      10    2      10    2      0
60日齡  2      9      2      8      2      8      2      8      2      9      2      9      2      9      2      9      2      0
90日齡  2      5      2      4      2      3      2      4      2      5      2      5      2      5      2      5      2      0
　　注:“-   ”表示未作。
表4　1日齡雛鴨皮下免疫后攻擊1萬倍LD 50 的DHV  和1萬倍最小致死量D PV  的結(jié)果
　　　　　　　　　　　　攻擊不同病毒毒株后鴨存活數(shù)(攻毒鴨為10只)
　　　　
時間(天) 　 15　　　45　　　75　　　105　　 135　　 165　　 195　　 270　　對照
病毒毒株
DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV
攻毒日齡
3日齡  2      0      0      0      0      0      0      0      2      0      2      0      4      0      6      1      0      0
4日齡  3      0      1      0      1      0      1      0      4      0      4      0      6      0      6      2      0      0
5日齡  5      0      1      0      1      0      1      0      5      0      6      0      7      0      8      3      0      0
6日齡  6      0      3      0      2      0      3      0      6      0      7      0      7      0      9      4      1      0
7日齡  7      0      4      0      3      0      4      0      7      0      8      0      9      0      10    4      3      0
30日齡  2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      2      2      0
60日齡  2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0
90日齡  2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0
　　注:“-   ”表示未作。
鴨病毒性肝炎而含有相應(yīng)的抗體, 有些是沒有曾
經(jīng)感染過鴨瘟或鴨病毒性肝炎而不含有相應(yīng)的
抗體, 孵坊所購買到的種蛋以及廣大飼養(yǎng)戶所購
買到的雛鴨所含抗鴨瘟或鴨病毒性肝炎母源抗
體是或有或無或高低參差不齊, 對于這樣的需要
進(jìn)行放牧的雛鴨群體要想采用主要是依靠母源
抗體和環(huán)境的隔離、消毒來實(shí)現(xiàn)對鴨瘟和鴨病毒
性肝炎的防制, 其難度是很大的, 且?guī)缀跏遣豢?br /> 能的。所以本研究就是要針對這種情況, 探討應(yīng)
用鴨瘟鴨病毒性肝炎二聯(lián)苗來雛鴨進(jìn)行早期免
疫的有效的最佳途經(jīng)。
3.  2 從表1可知, 對于沒有母源抗體的雛鴨, 飲水
免疫和皮下注射對鴨病毒性肝炎的免疫效果沒
有顯著的差異, 為最佳免疫途徑, 3日齡時, 在皮
下注射組的免疫保護(hù)率為90% (9ö10) ,  比飲水
免疫組的保護(hù)率80% (8ö10) 要高一些,  但到
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表5　1日齡雛鴨滴鼻免疫后攻擊1萬倍LD 50 的DHV  和1萬倍最小致死量D PV  的結(jié)果
　　　　　　　　　　　　攻擊不同病毒毒株后鴨存活數(shù)(攻毒鴨為10只)
　　　　
時間(天) 　 15　　　45　　　75　　　105　　 135　　 165　　 195　　 270　　對照
病毒毒株
DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV
攻毒日齡
3日齡  2      0      0      0      0      0      0      0      2      0      2      1      4      1      6      2      0      0
4日齡  3      1      1      1      1      0      1      1      4      1      4      1      6      2      7      3      0      0
5日齡  5      1      1      1      1      0      1      1      5      1      6      2      7      2      8      4      0      0
6日齡  6      1      3      1      2      0      3      1      6      2      7      4      8      4      10    4      1      0
7日齡  7      2      4      2      3      0      4      2      7      3      8      4      9      5      10    6      3      0
30日齡  2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      3      2      0
60日齡  2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0
90日齡  2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0
　　注:“2”表示未作。
表6　1日齡雛鴨噴霧免疫后攻擊1萬倍LD 50 的DHV  和1萬倍最小致死量D PV  的結(jié)果
　　　　　　　　　　　　攻擊不同病毒毒株后鴨存活數(shù)(攻毒鴨為10只)
　　　　
時間(天) 　 15　　　45　　　75　　　105　　 135　　 165　　 195　　 270　　對照
病毒毒株
DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV    DHV    D PV
攻毒日齡
3日齡  1      0      0      0      0      0      0      0      1      0      2      0      4      1      5      2      0      0
4日齡  2      0      1      0      1      0      1      0      1      0      3      1      6      2      6      3      0      0
5日齡  2      0      1      0      1      0      1      0      4      1      5      2      7      3      8      4      0      0
6日齡  5      1      3      0      2      0      3      1      5      2      7      3      7      4      9      4      1      0
7日齡  6      1      3      1      2      0      3      1      5      2      7      3      9      4      10    5      3      0
30日齡  2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      2      2      0
60日齡  2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0
90日齡  2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0      2      0
　　注:“-   ”表示未作。
4日齡時兩組都是100% (10ö10) 能抵抗1萬倍
LD 50 的DHV  強(qiáng)毒的攻擊,  其結(jié)果與徐克勤等
(1990) [ 9 ]、P.  R. w oo lc-  ock (1991) [ 10 ]、程安
春等(1993) [ 3 ] 應(yīng)用鴨病毒性肝炎弱毒疫苗的單
苗對雛鴨進(jìn)行免疫的試驗(yàn)結(jié)果相似, 其中本試驗(yàn)
雛鴨產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)免疫力的時間比徐克勤等報(bào)道的
時間要早一天, 這可能與疫苗毒株的特性、試驗(yàn)
鴨的品種有關(guān), 另外從徐克勤等的報(bào)道中, 看不
出試驗(yàn)雛鴨是否含有母源抗體。與皮下注射和飲
水相比, 本試驗(yàn)中滴鼻和噴霧免疫效果是最差
的,   到5日齡時, 保護(hù)率分別為60% (6ö10) 和
50% (5ö10) , 由于鴨病毒性肝炎隨著雛鴨年齡
的增長, 其易感性降低, 所以考察30日齡以后鴨
病毒性肝炎的保護(hù)率已經(jīng)沒有實(shí)際意義, 在表中
這部分工作就沒有作。
3.  3 從表2可知, 對于沒有母源抗體的雛鴨, 施行
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皮下注射途徑和飲水免疫途徑免疫雛鴨后3日
齡, 分別有100% (10ö10) 和90% (9ö10) 的雛鴨
能夠抵抗1萬倍最小致死量的D PV  強(qiáng)毒的攻擊,
4日齡時這兩種途徑免疫的雛鴨的保護(hù)率均為
100% ,  30和60日齡時保護(hù)率仍為100% ,  到90
日齡時免疫保護(hù)率分別為70% (7ö10) 和60%
(5ö10) , 表明沒有母源抗體的雛鴨經(jīng)皮下注射二
聯(lián)苗后其對鴨瘟的免疫期可達(dá)2個月以上,  是免
疫的最佳途徑; 而經(jīng)滴鼻和噴霧進(jìn)行免疫的雛
鴨, 其免疫效果最差, 在檢測的整個階段, 其最高
保護(hù)率分別為40% (4ö10) 和30% (3ö10) ; 以上
試驗(yàn)結(jié)果與范存軍等( 1990) [ 11 ]、譚詩文等
( 1989, 1990) [ 12, 13 ] 應(yīng)用鴨瘟弱毒疫苗單苗早期
免疫雛鴨的結(jié)果相似。
3.  4 對于含有抗鴨瘟和鴨病毒性肝炎母源抗體
的雛鴨, 對鴨瘟鴨病毒性肝炎二聯(lián)弱毒疫苗進(jìn)入
體內(nèi)是要產(chǎn)生影響的, 如何選擇最佳免疫途徑,
使這種影響降到最低呢? 由表3到表6可知,  抗鴨
病毒性肝炎母源抗體水平越高, 免疫效果越差,
當(dāng)種鴨血清中抗DHV  的中和效價為210.  28 (二聯(lián)
苗免疫鴨后75天收集的種蛋孵出的1日齡雛鴨)
時,  1日齡雛鴨經(jīng)飲水、皮下注射、滴鼻和噴霧途
徑免疫, 到3日齡時,  除了飲水免疫組保護(hù)率為
70% (7ö10) , 其他各組均為0; 當(dāng)種鴨血清中抗
DHV  的中和效價為23.  2 (二聯(lián)苗免疫鴨后270天
收集的種蛋孵出的1日齡雛鴨) 時,  1日齡雛鴨經(jīng)
飲水、皮下注射、滴鼻和噴霧途徑免疫, 到3日齡
時,  各組保護(hù)率分別為80% (8ö10)、60% (6ö
10 )、50% (5ö10) 和40% (4ö10) ;   母源抗體對
二聯(lián)苗飲水免疫雛鴨產(chǎn)生的對鴨病毒性肝炎的
免疫效力影響最小, 影響最大的依次是皮下注
射、滴鼻和噴霧。有母源抗體的雛鴨飲水免疫產(chǎn)
生的對鴨病毒性肝炎的免疫力與沒有母源抗體
的雛鴨經(jīng)皮下注射及飲水免疫產(chǎn)生的對鴨病毒
性肝炎的免疫效力相近, 差異不顯著(P >  0.
05)。
　　有母源抗體的雛鴨對二聯(lián)苗進(jìn)入鴨體后產(chǎn)
生對鴨瘟的免疫力是有影響的: ①其中影響最大
的是經(jīng)皮下注射試驗(yàn)組, 在種鴨免疫二聯(lián)苗后的
15-   195天內(nèi)(血清中抗D PV  的EL ISA 抗體滴
度平均范圍為770    6553.  6) , 收集的種蛋孵出
的雛鴨皮下接種二聯(lián)苗后, 任何一個日齡(3    90
日齡) 都不能抵抗1萬倍最小致死量的D PV  強(qiáng)毒
的攻擊,  與對照組一樣, 其死亡率均為100% , 只
有當(dāng)種鴨血清的EL ISA  抗體滴度降到70.  4 (平
均) 時才開始出現(xiàn)免疫保護(hù), 且到30日齡時免疫
保護(hù)率僅為20% , 60日齡時保護(hù)率即消失; ②對
滴鼻和噴霧免疫試驗(yàn)組的影響比皮下注射組稍
微要小一些, 但正如表5和表6所示, 其免疫保護(hù)
率極低, 在生產(chǎn)中是不能應(yīng)用的; ③母源抗體影
響最小的是飲水免疫組,  當(dāng)種鴨血清中抗D PV
的EL ISA  抗體滴度在74.  4    6553.  6的范圍內(nèi)
時, 應(yīng)用二聯(lián)疫苗對1日齡雛鴨進(jìn)行飲水免疫時,
3日齡即有70k  80% 能夠抵抗1萬倍最小致死量
D PV  強(qiáng)毒攻擊的能力, 到4日齡時抵抗力均達(dá)
100% , 且到30日力保護(hù)均為100% , 60日齡仍有
80     90% 的保護(hù)率, 此一結(jié)果與文獻(xiàn)[ 10 ]、
[ 11 ]、[ 12 ]等應(yīng)用鴨瘟弱毒疫苗單苗對有母源抗
體的雛鴨進(jìn)行免疫的結(jié)果相似, 是對有母源抗體
的1日齡雛鴨進(jìn)行二聯(lián)疫苗的最佳免疫途徑; 同
時, 從表2和表3可以看出, 二聯(lián)苗飲水免疫對無
母源抗體的雛鴨的免疫效果比有母源抗體的雛
鴨的免疫效果要好一些, 但兩者的差異不顯著(P
>  0.  05)。
4 小結(jié)
4.  1　對于沒有母源抗體的1日齡雛鴨, 用鴨瘟鴨
病毒性肝炎二聯(lián)弱毒疫苗進(jìn)行免疫的最佳途經(jīng)
是皮下注射和飲水免疫, 其中皮下注射效果比飲
水稍好:  ①到3日齡產(chǎn)生對鴨病毒性肝炎部分免
疫力,  4日齡產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)免疫力; ②皮下注射到3日
齡、飲水免疫到4日齡均產(chǎn)生對鴨瘟的堅(jiān)強(qiáng)免疫
力,  保護(hù)期持續(xù)2個月以上。
4.  2　對于含有母源抗體的1日齡雛鴨, 對用鴨瘟
鴨病毒性肝炎二聯(lián)弱毒疫苗進(jìn)行免疫, 其效果要
受影響, 母源抗體的水平越高其影響就越大, 其
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中受影響最大的是皮下注射途徑。對有母源抗體
的1日齡雛鴨進(jìn)行免疫的最佳途經(jīng)是飲水免疫:
①到3    4日齡產(chǎn)生對鴨病毒性肝炎部分免疫力,
5日齡產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)免疫力; ②3    4日齡產(chǎn)生對鴨瘟
部分免疫力, 5日齡產(chǎn)生對鴨瘟的堅(jiān)強(qiáng)免疫力,
其免疫持續(xù)期2個月以上, 保護(hù)率達(dá)100%。在生
產(chǎn)中可使用飲水免疫的方法, 方便、省力, 效果
好。
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346
STUDY O N B IVAL ENT ATTENUATED  VACC INES AGA INST D P AND D VH
Î.  THE STUD IES O N THE EARLY  STAGE
IMM UN IZAT IO N O F THE VACC INE
Cheng A nchun　W ang M ing shu　Cu i H engm in   et   al
　　　　　　　 (Co llege of A n im al Science and T echno logy,  Sichuan
　　　　　　　A g ricu ltu ral U n iversityöYaan,  Sichuan,  Ch ina 625014)
　　Abstract　In 　th is　p ap er　the　stud ies　on 　the　early　stage　imm un ization　of
the b ivalen t　attenuated　vaccines again st D uck P lague  (D P)  and D uck　V iral　H ep atitis
(下轉(zhuǎn)295頁)
962
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5 黃國振.   對影響梅花在北京越冬馴化的若　　7 (1) :  39
干生理生化因素的研究.   園藝學(xué)報(bào),  1980;
STUDY O N ECO TY PES O F PRUNUS M UM E SIEB.  ET ZUCC.
IN SICHUAN　PRO V INCE
　　　　　　　 Zhang Xudong　 Gou J ianying
　　　　　　　　 (Co llege of Fo restry and Ho rticaltu re,  Sichuan
　　　　　　　A g ricu ltu ral U n iversityöYaan,  Sichuan,  Ch ina 625014)
　　Abstract　In  th is p ap er ob servation s have been m ade on  the w ilting  tim e　and
the d issection  structu re of  the leaves of P. m um e Sieb.  var m um e　and　P. m um e var.
p allescen s F ranch.  T he resu lts ind icated that bo th of them  had adap ted them selves to  their e2
co log ical environm en ts  in  the  d issection 　structu re 　and 　the 　w ilting  characteristics of
leaves.   Fu rtherm o re  in troduction exp erim en ts　ind icated　that  they w ere  tw o  k ind s of hu2
m id ity eco typ es.
　　KEY WORD S　M UM EPLAN T;  P. M UM E S IEB. VA R M UM E;  P. M UM E VA R  PALL ESCEN S FRAN CH;
ECO T YPE;   IN TRODU CT ION.  　　　　　　　　　　　　
　 □
(上接269頁)
(DV H ) is  repo rted.   Sichuan  flaxen  duck ling s w ithou t m aternal　an tibody　and　w ith m a2
ternal an tibody w ere u sed in  the exp erim en t.   T he duck ing s have been　imm un ized by d iffer2
en t  rou tes  (Subcu taneou s, in d rink ing w ater, no se d ripp ing and  sp raying).   T he  resu lts ind i2
cated:  1.   T he　best　imm un ization　rou tes　on　duck ing s　w ithou t m aternal an tibody are
subcu taneou s and  in  d rink ing w ater  (Subcu taneou s  in jection  is  sligh tly  better  than  that  in
d rink ing w ater) , ①all 4-   day o ld  imm un ized duck l-    ing s imm un ized by  subcu taneou s in jec2
tion and in d rink ing w ater cou ld resist　the challenge of 10-   thou sand LD 50viru len t DHV ; 　
②all  4 -   day  o ld  imm un ized 　duck ling s  imm un ized  by  subcu taneou s  in jection  and 　in 　
d rink ing　w ater　cou ld　resist　the challenge of 10-   thou sand M. L. D.   viru len t D PV ,  and
2 m on th s later,  the p ro tection  rate w as 100%.   2.  T he best imm un ization  rou tes on duck ing s
w ith m aternal an tibody  is that  in d rink ing w ater,  ①all 5-   day o ld  imm un ized duck ling s im 2
m un ized  by  that  in  d rink ing w ater cou ld  resist  the  challenge of  10-   thou sand LD 50 viru len t
DHV ;  ② all 4-   day o ld  imm un ized duck ling s imm un ized by　subcu taneou s　in jection　and
　in  d rink ing w ater cou ld  resist  the challenge of  10-   thou sand M. L. D.  viru len t D PV ,   the
imm un ity p eriod  lasted fo r at  least 2 m on th s.
　　KEY WORD S
　TH E B IVAL EN T A T T ENUA T ED VA CC IN ES A GA IN ST D P AND DV H;  DU CKL IN GS;
EA RL Y STA GE  IMM UN IZA T ION ;  EFFECT;  DU CK D ISEA SE.