偽狂犬病

魁罡

偽狂犬病(Pseudorabies，PR又名Aujeszky's disease，AD)是由偽狂犬病毒(Pseudorabies Virus，PRV)引起的一種傳染病。該病最早發(fā)現(xiàn)于美國，后來由匈牙利科學(xué)家首先分離出病毒。20世紀(jì)中期，PR在東歐及巴爾干半島的國家流行較廣，60年代之前，豬被感染后其癥狀比較溫和，在養(yǎng)豬業(yè)中未造成重大經(jīng)濟損失。然而在60一70年代，由于強毒株的出現(xiàn)，豬場爆發(fā)Pr的數(shù)量顯著增加，而且各種日齡的豬均可感染，其癥狀明顯加劇。這種變化不僅存在于美國，在西歐各國如德國、法國、意大利、比利時、愛爾蘭等國家也同樣存在。幾年之后，此病相繼傳入新西蘭、日本、我國的臺灣及南美的一些國家和地區(qū)。目前世界上有40多個國家都有本病報道，據(jù)不完全統(tǒng)計，我國已有20多個省、市流行過本病，近幾年P(guān)R在我國許多省(市)種豬場呈爆發(fā)流行趨勢?，F(xiàn)將PR的病原、流行病學(xué)、臨床癥狀、診斷、防治等作一概述。
　　1 病原
　　1.1 病原及其感染特點
　　PRV屬皰診病毒科皰疹病毒甲亞科，暫定水痘病毒屬，病毒粒子呈橢圓或圓形，無囊膜粒子直徑為110-150nm；有囊膜的成熟病毒粒子直徑180nm。囊膜表面有呈放射排列的纖突，長8-1Onm，DNA分子量為87×l06。
　　PRV是皰疹病毒中抵抗力較強的一種。在物體表面和液體中可存活7d。在pH4-9之間保持穩(wěn)定。腐敗條件下，病料中的病毒經(jīng)lld失去感染力。PRV對乙醚、氯仿等脂溶劑，福爾馬林和紫外線照射等敏感。5%石碳酸經(jīng)2min滅活，0.5%-1%氫氧化鈉使其滅活。對熱的抵抗力較強，55-60℃經(jīng)30-50min才能滅活，80℃經(jīng)3min滅活。
　　迄今為止，還沒有發(fā)現(xiàn)抗原性不同的PRV毒株。在病毒與宿主的相互作用中，病毒的糖蛋白起著重要作用，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)在PRV至少有g(shù)Ⅰ、gⅡ、gⅢ、gp50、gp63、gX、gH、gL、gM、gN和gK等11種糖蛋白。
　　1.2 感染特點
　　1.2.1 潛伏感染 被感染豬不表現(xiàn)臨床癥狀，但感染性病毒卻能在豬體內(nèi)長期以潛伏狀態(tài)存在，也分離不到病毒，但用聚合酶探針方法可查出病毒基因組DNA的存在，在外界不良環(huán)境刺激等造成的免疫力減弱時，潛伏狀態(tài)的病毒可轉(zhuǎn)化為具有感染性的病毒。
　　1.2 隱性感染 在豬群使用疫苗接種或自然感染部分少量病毒后，該豬只得到部分免疫，可發(fā)生隱性感染豬和表現(xiàn)為亞臨床癥狀的豬，這種帶毒豬排毒可持續(xù)一年以上。
　　2 流行病學(xué)
　　2.1 易感動物 PRV是感染動物種類多和致病性強的一種病毒。除各種年齡的豬、牛都易感外，在自然條件下使羊、犬、貓、兔、鼠、水貂、狐等動物感染發(fā)病。實驗動物中家兔、豚鼠、小鼠都易感。其中以家兔最敏感。
　　2.2 傳播形式
　　2.2.1 垂直傳播 PRV可通過胎盤而傳遞給子體，而母體免疫球蛋白卻不能，所以對胎兒的感染是致命的。
　　2.2.2 媒體傳播 帶有病毒的空氣飛沫核可隨風(fēng)傳到9km或更遠的地方，使健康豬群受到感染。被污染的飼料、或帶病毒的鼠、羊等動物也可傳播。
　　3 臨床癥狀
　　病豬的臨床癥狀和病程隨年齡不同而有很大差異。哺乳仔豬最為敏感，15日齡以內(nèi)的仔豬常表現(xiàn)為最急性型，病程不超過72h，死亡率100%，主要表現(xiàn)為體溫升高、拉稀、發(fā)抖、運動不協(xié)調(diào)、流涎、頸部肌肉僵硬、四肢劃水樣運動，最后昏迷死亡。育肥豬則大多數(shù)伴有體溫升高，呼吸困難，一般不發(fā)生死亡，耐過后呈長朗隱性感染帶毒或排毒。成年豬常不呈現(xiàn)可見臨床癥狀或僅表現(xiàn)為輕微體溫升高，一般不發(fā)生死亡。母豬妊娠初期，可在感染后的20天左右發(fā)生流產(chǎn)，在妊娠后期，經(jīng)常發(fā)生死胎和木乃伊，或者產(chǎn)出弱胎和死胎。
　　4 診斷
　　4.1 病毒分離和鑒定 采取腦組織、扁桃體，用PBS制成10%懸液或鼻咽洗液接種豬、牛腎細胞或雞胚成纖維細胞，于18-96h出現(xiàn)病變，有病變的細胞用H·E染色，鏡檢可看到嗜酸性核內(nèi)包涵體。
　　4.2 兔體接種試驗 上述懸液經(jīng)2000r/min離心1Omin，取上清液1~2ml經(jīng)腹側(cè)皮下或肌肉接種家兔，通常在36-48h后注射部位出現(xiàn)劇癢，病兔啃咬注射部位皮膚，皮膚脫毛、破皮和出血，繼之四肢麻痹，體溫下降，臥地不起，最后角弓反張，抽搐死亡。
　　4.3 血清學(xué)診斷
　　4.3.1 中和試驗(NT) NT有較高靈敏度，是一種常用的診斷方法。將標(biāo)準(zhǔn)病毒株與連續(xù)倍比稀釋的等量血清混勻后，37℃中和lh，接種在96孔微量培養(yǎng)板上的單層豬腎繼代細胞(PK-l5)或雞胚成纖維細胞，置37℃，5%CO2培養(yǎng)觀察CPE，以能完全中和試驗病毒的血清最高稀釋度的倒數(shù)為該血清的中和效價，中和效價大于或等于1:2的判為陽性。
　　4.3.2 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA) 程由銓等應(yīng)用單克隆抗體介導(dǎo)的固相微球直接ELISA檢測感染，小白鼠額下腺、耳下腺混合物、肝、脾、肺、腎等材料，PRV的陽性檢出率為98%。黃駿明等用過氧化物酶標(biāo)記的葡萄球菌蛋白A建立的Dot-ELISA對豬血清PRV抗體具有特異強、靈敏度高的優(yōu)點，與血清中和試驗比較，Dot-ELISA陽性檢出率為28.19%(53/188)、NT陽性檢出率為20.74%(39/188)。
　　4.3.3 免疫熒光抗體試驗(FA) 程由銓等[10]建立了檢測病料組織中PRV間接熒光抗體試驗，并和病毒分離(VI)作了比較，對肺和扁桃體中PRV抗原檢出率分別為FA86%和92%，V194%和88%。黃駿明等建立了直接FA技術(shù)檢測PRV，對病豬活體取鼻咽試子涂片，對病死豬取扁桃體、三叉神經(jīng)節(jié)、腦、脊髓和鼻粘膜涂片，檢出率高達95%以上。
　　4.3.4 核酸探針檢測技術(shù) 郭萬栓等用斑點雜交法應(yīng)用32P標(biāo)記PRV全基因組DNA和重組質(zhì)粒作探針檢測細胞培養(yǎng)物中的PRV一DNA，均能檢測lOpg的PRV一DNA，且有較高特異性。魏偉等用光敏生物素標(biāo)記PRV特異性糖蛋白GP50克隆重組顆粒PUP作為探針，檢測實驗感染乳豬15頭份，證明通過PCR和分子克隆技術(shù)制備的PRV特異性糖蛋白基因片段的光敏生物探針，能有效地用于檢測偽狂犬病。
　　4.3.5 PCR技術(shù) 冉多良等，石建平等，周復(fù)春等，冉智光等先后應(yīng)用PCR技術(shù)對PRV進行基因擴增，均獲得了特異敏感的結(jié)果。
　　5 防治
　　目前尚無治療PR的有效藥物。對PRV控制除常規(guī)隔離、消毒、控制人員流動以外，疫苗接種是防止PR發(fā)生流行的重要措施。Lens[3]報道用DNA重組技術(shù)研制的低毒力PR疫苗進行田間免疫，安全有效，應(yīng)用該疫苗接種的豬再發(fā)生接獨感染。目前國內(nèi)主要應(yīng)用滅活苗和弱毒苗預(yù)防PR，具有良好的免疫效果。滅活苗和弱毒苗只能降低接種豬的發(fā)病率和死亡率，但不能阻止帶毒豬排毒。PR一旦傳入豬場就很難根除，在發(fā)生過PR的豬場，停止使用疫苗后又會引起本病的發(fā)生。因此，在疫區(qū)進行疫苗接種外，非疫區(qū)應(yīng)加強對引進豬的檢疫，隔離飼養(yǎng)，搞好圈舍衛(wèi)生，從而控制該病的發(fā)生和傳播