獸醫(yī) 臨床中的藥敏試驗(yàn)

jinnyjinny · 發(fā)表于 2008-12-5 19:32:28

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<TD id=content9 vAlign=center>獸 醫(yī) 臨 床 中 的 藥 敏 試 驗(yàn)</TD></TR>
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<DIV align=right>[ 2008-8-18 2:07:00 | By: 滿興柏 ]</DIV></TD></TR></TBODY></TABLE>
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<TD>獸醫(yī)臨床中的藥敏試驗(yàn) 目前由各種細(xì)菌所引起的疾病給畜禽養(yǎng)殖業(yè)帶來嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，阻礙了養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，所以使用抗菌藥預(yù)防和治療細(xì)菌性疾病成了畜禽養(yǎng)殖過程中的一項(xiàng)重要工作。但由于養(yǎng)殖過程中不科學(xué)的、盲目的濫用抗菌藥，細(xì)菌的耐藥性問題正變得越來越突出，不少耐藥菌株可耐受多種抗生素。由此而造成的危害十分嚴(yán)重，它不僅使抗菌藥的療效降低，療程延長(zhǎng)，死亡率升高和治療費(fèi)用增加。這不僅給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失，而且藥菌株可能會(huì)將耐藥性基因由動(dòng)物轉(zhuǎn)移給人類，對(duì)人類健康也造成潛在威脅。因此，臨床上應(yīng)合理應(yīng)用抗菌藥，以避免或減少耐藥性的產(chǎn)生，而合理應(yīng)用抗菌藥控制畜禽疾病的一項(xiàng)重要內(nèi)容就是通過藥敏試驗(yàn)指導(dǎo)臨床用藥，以充分發(fā)揮抗菌藥療效，并盡可能減少其不良影響。 一、什么是藥敏試驗(yàn)？ 抗菌藥物敏感性試驗(yàn)，簡(jiǎn)稱藥敏試驗(yàn)，是指對(duì)敏感性不能預(yù)測(cè)的分離菌株進(jìn)行試驗(yàn)，測(cè)試抗菌藥在體外對(duì)病原微生物有無抑制作用，以指導(dǎo)選擇治療藥物和了解區(qū)域內(nèi)常見病原菌耐藥性變遷，有助于經(jīng)驗(yàn)性治療選藥。藥敏試驗(yàn)是獸醫(yī)臨床工作中的一項(xiàng)基本技能，也是使用抗菌藥物治療前必不可少的一道環(huán)節(jié)。 二、藥敏試驗(yàn)的意義 1、可以相對(duì)快速有效地檢測(cè)病原菌對(duì)各種抗菌藥的敏感性，指導(dǎo)臨床合理用藥。因?yàn)閷?shí)驗(yàn)是在體外對(duì)已經(jīng)分離的細(xì)菌進(jìn)行藥敏，不需要生物載體，不需要實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，操作相對(duì)簡(jiǎn)單，成本相對(duì)降低。是一種既經(jīng)濟(jì)又有效的方法。 2、可以對(duì)流行病學(xué)調(diào)查進(jìn)行監(jiān)控，控制和預(yù)防耐藥菌株的流行。因?yàn)殡S著新型致病菌的不斷出現(xiàn)，各種致病菌對(duì)不同的抗菌藥的敏感性不同，同一細(xì)菌的不同菌株對(duì)不同抗菌藥的敏感性也有差異。進(jìn)行有效的藥敏試驗(yàn)可以及時(shí)掌握各種新型菌種和菌株的耐藥性，對(duì)流行病學(xué)調(diào)查建立監(jiān)控，同時(shí)采取相應(yīng)的措施也就可以控制和預(yù)防耐藥菌株的流行。 3、為臨床用藥提供參考依據(jù)。因?yàn)橐粋€(gè)正確的藥敏試驗(yàn)結(jié)果，可作為臨床獸醫(yī)和畜禽養(yǎng)殖者選用有效抗菌藥的參考。長(zhǎng)期以來，由于各種致病菌耐藥性的產(chǎn)生使各種常用抗菌藥藥效下降或消失。不能很好的掌握藥物對(duì)細(xì)菌的敏感程度，不但造成藥物浪費(fèi)，而且還延誤病情，給養(yǎng)殖戶造成了很大的經(jīng)濟(jì)損失。近十幾年，在肉雞生產(chǎn)中，為了控制大腸桿菌及某些細(xì)菌感染，一些抗菌藥物的盲目使用，導(dǎo)致耐藥菌株越來越多。根據(jù)已進(jìn)行的大量藥敏試驗(yàn)結(jié)果，大腸桿菌、沙門氏菌對(duì)曾經(jīng)敏感的氨基糖苷類、氟喹諾酮類等，均產(chǎn)生了不同程度的耐藥性，經(jīng)常發(fā)現(xiàn)對(duì)十幾種常用抗菌藥都不敏感的菌株。這是一個(gè)非常危險(xiǎn)的信號(hào)。所以在臨床疾病防治工作中，要取得較好的治療效果，應(yīng)擴(kuò)大常規(guī)抗菌藥種類進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果，選擇敏感藥物，且應(yīng)注意交替用藥，按療程投藥，這樣才能收到較好的治療效果。 三、常用的藥敏試驗(yàn)方法 獸醫(yī)臨床常用的藥敏試驗(yàn)方法主要有兩種，即擴(kuò)散法和稀釋法。其中擴(kuò)散法屬手工測(cè)試方法，通過測(cè)試藥物紙片或者牛津杯在固體培養(yǎng)基上的抑菌圈的大小，判斷細(xì)菌對(duì)該種藥物是否敏感。稀釋法包括試管稀釋法和微量稀釋法，通過測(cè)試細(xì)菌在含不同濃度藥物培養(yǎng)基內(nèi)的生長(zhǎng)情況，判斷其最低抑菌濃度（MIC）。 由于擴(kuò)散法操作簡(jiǎn)單，成本低，已經(jīng)被大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室和基層單位所采用。擴(kuò)散法又包括紙片法、牛津杯法和打孔法，目前牛津杯法和打孔法在獸醫(yī)臨床已較少應(yīng)用。以下簡(jiǎn)單介紹紙片法。 1、藥敏紙片的制作 紙片法中使用的藥敏紙片目前市場(chǎng)上已有較多廠家的產(chǎn)品銷售。但也可根據(jù)需要自制，具體自制的方法如下： 取質(zhì)量較好的定性濾紙，用普通的打孔器打成直徑6mm的圓形小紙片。取圓紙片50片放入清潔干燥的小瓶或小平皿中，以單層牛皮紙?jiān)诨虬＝?jīng)15磅15-20分鐘高壓滅菌后，置于37℃溫箱或烘箱中數(shù)天，使完全干燥。按每張紙片飽和吸水量為0.01ml計(jì)，在上述含有50片紙片的小瓶?jī)?nèi)加入藥液0.5ml，不時(shí)翻動(dòng)，使濾紙片將藥液均勻吸凈，一般浸泡30分鐘即可。同時(shí)在記錄藥物名稱，于37℃溫箱過夜。在溫箱或烘箱中的時(shí)間不宜過長(zhǎng)，以免某些抗生素失效。青霉素、金霉素宜在低溫下真空干燥。干燥后即密封。切勿受潮，置陰暗干燥處或家用冰箱中保存，有效期4-6個(gè)月。 2、藥液的制備 自制藥敏紙片時(shí)還需自行配制抗菌藥液?？咕幍南♂寗┩ǔＳ谜麴s水。一般可按商品藥使用說明書上的配料或飲水濃度，按1g需加多少毫升水或配多少毫克飼料，就相當(dāng)于配制藥液所加蒸餾水的毫升數(shù)。如10g藥物可配50kg飼料，其換算方法為：1g本品加5000ml蒸餾水。此溶液液即為用于做藥敏試驗(yàn)的藥液。 3、試驗(yàn)操作方法 在超凈工作臺(tái)中或酒精燈旁，用無菌棉簽或經(jīng)酒精燈火焰滅菌的接種環(huán)挑取適量細(xì)菌培養(yǎng)物，以劃線方式將菌液均勻涂布到平皿中的固體培養(yǎng)基表面。然后用無菌鑷子將紙片放于固體培養(yǎng)基表面并輕壓，使紙片與培養(yǎng)基表面完全接觸。為了能準(zhǔn)確觀察結(jié)果，要求藥敏紙片均勻分布于培養(yǎng)基上，位置安排適中，防止出現(xiàn)抑制圈重疊。一般各紙片中心相距應(yīng)大于24mm，可在平皿中央貼一片，外周等距離貼5－6片。記住每種藥敏紙片的名稱。貼完紙片的平皿15分鐘后再置于37℃溫箱中培養(yǎng)16－24小時(shí)，觀察記錄結(jié)果。以藥敏紙片周圍沒有肉眼可見生長(zhǎng)物區(qū)域?yàn)橐志?，根?jù)抑菌圈直徑大小判斷細(xì)菌對(duì)抗菌藥的敏感性。 藥敏試驗(yàn)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) 抑菌圈直徑（毫米）敏感性 ＞20極敏感 15-20高敏感 10-14中敏感 ＜10低敏感 0不敏感 實(shí)踐證明，利用自制藥敏紙片進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，可以靈活選藥，與某病菌相關(guān)的藥物均可隨時(shí)制作藥敏紙片用于治療?？稍诒緢?chǎng)藥品范圍內(nèi)或本地區(qū)容易買到的藥品中選出最敏感的藥物。還可在短時(shí)間內(nèi)選擇最佳藥品和最佳劑量，既能縮短病程，又能避免盲目用藥，減少浪費(fèi)。 四、根據(jù)藥敏試驗(yàn)選藥原則 完成藥敏試驗(yàn)后，應(yīng)根據(jù)結(jié)果選擇敏感性較高，同時(shí)價(jià)廉、易得、安全的藥物進(jìn)行治療，以減少耐藥菌株，同時(shí)還應(yīng)注意以下原則： 1、在選擇高敏藥物時(shí)還應(yīng)考慮藥物的吸收途徑。因?yàn)樗幟粼囼?yàn)是藥液直接和細(xì)菌接觸，而在給畜禽用藥時(shí)，必須通過機(jī)體的吸收才能使藥物發(fā)揮療效，所以在給畜禽用藥時(shí)，高敏藥物一定要配合適宜的給藥方法，并予以足夠劑量、足夠療程，才會(huì)取得好的治療效果。 2、藥敏試驗(yàn)結(jié)果僅為臨床選擇高敏藥物的參考。因動(dòng)物機(jī)體及環(huán)境等因素影響，藥物的藥敏試驗(yàn)與臨床治療效果的符合率一般為70－80%，所以也不能過分地依賴藥敏試驗(yàn)。如發(fā)現(xiàn)療效不顯著應(yīng)及時(shí)換藥。 3、藥敏試驗(yàn)確定的首選藥物不是一成不變。隨著藥物使用頻率的增加及新特藥的不斷出現(xiàn)，細(xì)菌對(duì)原先的高敏感藥物可能不再敏感。因此，定期進(jìn)行藥敏試驗(yàn)了解本場(chǎng)細(xì)菌對(duì)抗菌藥的敏感性情況是很有必要的。 4、窄譜抗生素能解決的問題不選廣譜抗生素，一種抗生素可達(dá)到治療作用時(shí)，不要用兩種藥物聯(lián)合應(yīng)用。必須應(yīng)用兩種抗生素時(shí)，應(yīng)選擇聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同作用的藥物。 5、避開已經(jīng)使用過的藥物或其同類藥物，發(fā)病期間已用過的藥物或同類藥物一般不用。 四、影響藥敏試驗(yàn)結(jié)果的因素 在以紙片法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)時(shí)，以下幾方面因素可影響試驗(yàn)的結(jié)果： 1、培養(yǎng)基：首先應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)菌的營(yíng)養(yǎng)需要選擇適宜的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基的成分的不同，不僅影響敏感菌株的生長(zhǎng)繁殖并可影響到抑制圈的直徑。一般細(xì)菌，如大腸桿菌及葡萄球菌可使用普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂；做磺胺類藥物敏感試驗(yàn)時(shí)應(yīng)選用無蛋白胨平板；鏈球菌和巴氏桿菌可用綿羊血瓊脂平板。其次，傾注平板時(shí)，厚度應(yīng)合適（約5-6mm），不可太薄，一般90mm直徑的培養(yǎng)皿，傾注培養(yǎng)基18-20ml為宜。培養(yǎng)基內(nèi)應(yīng)盡量避免有抗菌藥物的拮抗物質(zhì)，如鈣、鎂離子能減低氨基糖苷類的抗菌活性，胸腺嘧啶核苷和對(duì)氨苯甲酸（PABA）能拮抗磺胺藥和TMP的活性。 2、細(xì)菌接種量：細(xì)菌接種量應(yīng)恒定，如太多，抑菌圈變小，能產(chǎn)酶的菌株更可破壞藥物的抗菌活性。 3、藥物濃度：藥物的濃度和總量直接影響抑菌試驗(yàn)的結(jié)果，需精確配制。商品藥應(yīng)嚴(yán)格按照其推薦治療量配制。 4、培養(yǎng)時(shí)間：一般細(xì)菌培養(yǎng)溫度和時(shí)間為37℃ 12-24小時(shí)，有些抗菌藥擴(kuò)散慢如多粘菌素，可將已放好藥敏紙片的培養(yǎng)基先置4℃冰箱內(nèi)2-4小時(shí)，使抗菌藥預(yù)擴(kuò)散，然后再放37℃溫箱中培養(yǎng)，可以推遲細(xì)菌的生長(zhǎng)，而得到較明顯的抑菌圈。 五、藥敏試驗(yàn)存在的問題 當(dāng)前進(jìn)行藥敏試驗(yàn)仍然存在一些問題，主要包括以下幾方面： 1、方法學(xué)不統(tǒng)一，沒有標(biāo)準(zhǔn)化。 2、市場(chǎng)提供的藥敏試驗(yàn)的培養(yǎng)基、藥敏紙片等缺乏嚴(yán)格質(zhì)控，質(zhì)量難以保證。所以還是建議按要求自制藥敏紙片。 獸醫(yī)臨床中的藥敏試驗(yàn) 獸醫(yī)臨床中的藥敏試驗(yàn) 目前由各種細(xì)菌所引起的疾病給畜禽養(yǎng)殖業(yè)帶來嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，阻礙了養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，所以使用抗菌藥預(yù)防和治療細(xì)菌性疾病成了畜禽養(yǎng)殖過程中的一項(xiàng)重要工作。但由于養(yǎng)殖過程中不科學(xué)的、盲目的濫用抗菌藥，細(xì)菌的耐藥性問題正變得越來越突出，不少耐藥菌株可耐受多種抗生素。由此而造成的危害十分嚴(yán)重，它不僅使抗菌藥的療效降低，療程延長(zhǎng)，死亡率升高和治療費(fèi)用增加。這不僅給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失，而且耐藥菌株可能會(huì)將耐藥性基因由動(dòng)物轉(zhuǎn)移給人類，對(duì)人類健康也造成潛在威脅。因此，臨床上應(yīng)合理應(yīng)用抗菌藥，以避免或減少耐藥性的產(chǎn)生，而合理應(yīng)用抗菌藥控制畜禽疾病的一項(xiàng)重要內(nèi)容就是通過藥敏試驗(yàn)指導(dǎo)臨床用藥，以充分發(fā)揮抗菌藥療效，并盡可能減少其不良影響。 一、什么是藥敏試驗(yàn)？ 抗菌藥物敏感性試驗(yàn)（antimicrobial susceptibility test，AST），簡(jiǎn)稱藥敏試驗(yàn)，是指對(duì)敏感性不能預(yù)測(cè)的分離菌株進(jìn)行試驗(yàn)，測(cè)試抗菌藥在體外對(duì)病原微生物有無抑制作用，以指導(dǎo)選擇治療藥物和了解區(qū)域內(nèi)常見病原菌耐藥性變遷，有助于經(jīng)驗(yàn)性治療選藥。藥敏試驗(yàn)是獸醫(yī)臨床工作中的一項(xiàng)基本技能，也是使用抗菌藥物治療前必不可少的一道環(huán)節(jié)。 二、藥敏試驗(yàn)的意義 1、可以相對(duì)快速有效地檢測(cè)病原菌對(duì)各種抗菌藥的敏感性，指導(dǎo)臨床合理用藥。因?yàn)閷?shí)驗(yàn)是在體外對(duì)已經(jīng)分離的細(xì)菌進(jìn)行藥敏，不需要生物載體，不需要實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，操作相對(duì)簡(jiǎn)單，成本相對(duì)降低。是一種既經(jīng)濟(jì)又有效的方法。 2、可以對(duì)流行病學(xué)調(diào)查進(jìn)行監(jiān)控，控制和預(yù)防耐藥菌株的流行。因?yàn)殡S著新型致病菌的不斷出現(xiàn)，各種致病菌對(duì)不同的抗菌藥的敏感性不同，同一細(xì)菌的不同菌株對(duì)不同抗菌藥的敏感性也有差異。進(jìn)行有效的藥敏試驗(yàn)可以及時(shí)掌握各種新型菌種和菌株的耐藥性，對(duì)流行病學(xué)調(diào)查建立監(jiān)控，同時(shí)采取相應(yīng)的措施也就可以控制和預(yù)防耐藥菌株的流行。 3、為臨床用藥提供參考依據(jù)。因?yàn)橐粋€(gè)正確的藥敏試驗(yàn)結(jié)果，可作為臨床獸醫(yī)和畜禽養(yǎng)殖者選用有效抗菌藥的參考。長(zhǎng)期以來，由于各種致病菌耐藥性的產(chǎn)生使各種常用抗菌藥藥效下降或消失。不能很好的掌握藥物對(duì)細(xì)菌的敏感程度，不但造成藥物浪費(fèi)，而且還延誤病情，給養(yǎng)殖戶造成了很大的經(jīng)濟(jì)損失。近十幾年，在肉雞生產(chǎn)中，為了控制大腸桿菌及某些細(xì)菌感染，一些抗菌藥物的盲目使用，導(dǎo)致耐藥菌株越來越多。根據(jù)已進(jìn)行的大量藥敏試驗(yàn)結(jié)果，大腸桿菌、沙門氏菌對(duì)曾經(jīng)敏感的氨基糖苷類、氟喹諾酮類等，均產(chǎn)生了不同程度的耐藥性，經(jīng)常發(fā)現(xiàn)對(duì)十幾種常用抗菌藥都不敏感的菌株。這是一個(gè)非常危險(xiǎn)的信號(hào)。所以在臨床疾病防治工作中，要取得較好的治療效果，應(yīng)擴(kuò)大常規(guī)抗菌藥種類進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果，選擇敏感藥物，且應(yīng)注意交替用藥，按療程投藥，這樣才能收到較好的治療效果。 三、常用的藥敏試驗(yàn)方法 獸醫(yī)臨床常用的藥敏試驗(yàn)方法主要有兩種，即擴(kuò)散法和稀釋法。其中擴(kuò)散法屬手工測(cè)試方法，通過測(cè)試藥物紙片或者牛津杯在固體培養(yǎng)基上的抑菌圈的大小，判斷細(xì)菌對(duì)該種藥物是否敏感。稀釋法包括試管稀釋法和微量稀釋法，通過測(cè)試細(xì)菌在含不同濃度藥物培養(yǎng)基內(nèi)的生長(zhǎng)情況，判斷其最低抑菌濃度（MIC）。 由于擴(kuò)散法操作簡(jiǎn)單，成本低，已經(jīng)被大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室和基層單位所采用。擴(kuò)散法又包括紙片法、牛津杯法和打孔法，目前牛津杯法和打孔法在獸醫(yī)臨床已較少應(yīng)用。以下簡(jiǎn)單介紹紙片法。 1、藥敏紙片的制作 紙片法中使用的藥敏紙片目前市場(chǎng)上已有較多廠家的產(chǎn)品銷售。但也可根據(jù)需要自制，具體自制的方法如下： 取質(zhì)量較好的定性濾紙，用普通的打孔器打成直徑6mm的圓形小紙片。取圓紙片50片放入清潔干燥的小瓶或小平皿中，以單層牛皮紙?jiān)诨虬＝?jīng)15磅15-20分鐘高壓滅菌后，置于37℃溫箱或烘箱中數(shù)天，使完全干燥。按每張紙片飽和吸水量為0.01ml計(jì)，在上述含有50片紙片的小瓶?jī)?nèi)加入藥液0.5ml，不時(shí)翻動(dòng)，使濾紙片將藥液均勻吸凈，一般浸泡30分鐘即可。同時(shí)在記錄藥物名稱，于37℃溫箱過夜。在溫箱或烘箱中的時(shí)間不宜過長(zhǎng)，以免某些抗生素失效。青霉素、金霉素宜在低溫下真空干燥。干燥后即密封。切勿受潮，置陰暗干燥處或家用冰箱中保存，有效期4-6個(gè)月。 2、藥液的制備 自制藥敏紙片時(shí)還需自行配制抗菌藥液?？咕幍南♂寗┩ǔＳ谜麴s水。一般可按商品藥使用說明書上的配料或飲水濃度，按1g需加多少毫升水或配多少毫克飼料，就相當(dāng)于配制藥液所加蒸餾水的毫升數(shù)。如10g藥物可配50kg飼料，其換算方法為：1g本品加5000ml蒸餾水。此溶液液即為用于做藥敏試驗(yàn)的藥液。 3、試驗(yàn)操作方法 在超凈工作臺(tái)中或酒精燈旁，用無菌棉簽或經(jīng)酒精燈火焰滅菌的接種環(huán)挑取適量細(xì)菌培養(yǎng)物，以劃線方式將菌液均勻涂布到平皿中的固體培養(yǎng)基表面。然后用無菌鑷子將紙片放于固體培養(yǎng)基表面并輕壓，使紙片與培養(yǎng)基表面完全接觸。為了能準(zhǔn)確觀察結(jié)果，要求藥敏紙片均勻分布于培養(yǎng)基上，位置安排適中，防止出現(xiàn)抑制圈重疊。一般各紙片中心相距應(yīng)大于24mm，可在平皿中央貼一片，外周等距離貼5－6片。記住每種藥敏紙片的名稱。貼完紙片的平皿15分鐘后再置于37℃溫箱中培養(yǎng)16－24小時(shí)，觀察記錄結(jié)果。以藥敏紙片周圍沒有肉眼可見生長(zhǎng)物區(qū)域?yàn)橐志Γ鶕?jù)抑菌圈直徑大小判斷細(xì)菌對(duì)抗菌藥的敏感性。 藥敏試驗(yàn)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) 抑菌圈直徑（毫米）敏感性 ＞20極敏感 15-20高敏感 10-14中敏感 ＜10低敏感 0不敏感 實(shí)踐證明，利用自制藥敏紙片進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，可以靈活選藥，與某病菌相關(guān)的藥物均可隨時(shí)制作藥敏紙片用于治療?？稍诒緢?chǎng)藥品范圍內(nèi)或本地區(qū)容易買到的藥品中選出最敏感的藥物。還可在短時(shí)間內(nèi)選擇最佳藥品和最佳劑量，既能縮短病程，又能避免盲目用藥，減少浪費(fèi)。 四、根據(jù)藥敏試驗(yàn)選藥原則 完成藥敏試驗(yàn)后，應(yīng)根據(jù)結(jié)果選擇敏感性較高，同時(shí)價(jià)廉、易得、安全的藥物進(jìn)行治療，以減少耐藥菌株，同時(shí)還應(yīng)注意以下原則： 1、在選擇高敏藥物時(shí)還應(yīng)考慮藥物的吸收途徑。因?yàn)樗幟粼囼?yàn)是藥液直接和細(xì)菌接觸，而在給畜禽用藥時(shí)，必須通過機(jī)體的吸收才能使藥物發(fā)揮療效，所以在給畜禽用藥時(shí)，高敏藥物一定要配合適宜的給藥方法，并予以足夠劑量、足夠療程，才會(huì)取得好的治療效果。 2、藥敏試驗(yàn)結(jié)果僅為臨床選擇高敏藥物的參考。因動(dòng)物機(jī)體及環(huán)境等因素影響，藥物的藥敏試驗(yàn)與臨床治療效果的符合率一般為70－80%，所以也不能過分地依賴藥敏試驗(yàn)。如發(fā)現(xiàn)療效不顯著應(yīng)及時(shí)換藥。 3、藥敏試驗(yàn)確定的首選藥物不是一成不變。隨著藥物使用頻率的增加及新特藥的不斷出現(xiàn)，細(xì)菌對(duì)原先的高敏感藥物可能不再敏感。因此，定期進(jìn)行藥敏試驗(yàn)了解本場(chǎng)細(xì)菌對(duì)抗菌藥的敏感性情況是很有必要的。 4、窄譜抗生素能解決的問題不選廣譜抗生素，一種抗生素可達(dá)到治療作用時(shí)，不要用兩種藥物聯(lián)合應(yīng)用。必須應(yīng)用兩種抗生素時(shí)，應(yīng)選擇聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同作用的藥物。 5、避開已經(jīng)使用過的藥物或其同類藥物，發(fā)病期間已用過的藥物或同類藥物一般不用。 四、影響藥敏試驗(yàn)結(jié)果的因素 在以紙片法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)時(shí)，以下幾方面因素可影響試驗(yàn)的結(jié)果： 1、培養(yǎng)基：首先應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)菌的營(yíng)養(yǎng)需要選擇適宜的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基的成分的不同，不僅影響敏感菌株的生長(zhǎng)繁殖并可影響到抑制圈的直徑。一般細(xì)菌，如大腸桿菌及葡萄球菌可使用普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂；做磺胺類藥物敏感試驗(yàn)時(shí)應(yīng)選用無蛋白胨平板；鏈球菌和巴氏桿菌可用綿羊血瓊脂平板。其次，傾注平板時(shí)，厚度應(yīng)合適（約5-6mm），不可太薄，一般90mm直徑的培養(yǎng)皿，傾注培養(yǎng)基18-20ml為宜。培養(yǎng)基內(nèi)應(yīng)盡量避免有抗菌藥物的拮抗物質(zhì)，如鈣、鎂離子能減低氨基糖苷類的抗菌活性，胸腺嘧啶核苷和對(duì)氨苯甲酸（PABA）能拮抗磺胺藥和TMP的活性。 2、細(xì)菌接種量：細(xì)菌接種量應(yīng)恒定，如太多，抑菌圈變小，能產(chǎn)酶的菌株更可破壞藥物的抗菌活性。 3、藥物濃度：藥物的濃度和總量直接影響抑菌試驗(yàn)的結(jié)果，需精確配制。商品藥應(yīng)嚴(yán)格按照其推薦治療量配制。 4、培養(yǎng)時(shí)間：一般細(xì)菌培養(yǎng)溫度和時(shí)間為37℃ 12-24小時(shí)，有些抗菌藥擴(kuò)散慢如多粘菌素，可將已放好藥敏紙片的培養(yǎng)基先置4℃冰箱內(nèi)2-4小時(shí)，使抗菌藥預(yù)擴(kuò)散，然后再放37℃溫箱中培養(yǎng)，可以推遲細(xì)菌的生長(zhǎng)，而得到較明顯的抑菌圈。 五、藥敏試驗(yàn)存在的問題 當(dāng)前進(jìn)行藥敏試驗(yàn)仍然存在一些問題，主要包括以下幾方面： 1、方法學(xué)不統(tǒng)一，沒有標(biāo)準(zhǔn)化。 2、市場(chǎng)提供的藥敏試驗(yàn)的培養(yǎng)基、藥敏紙片等缺乏嚴(yán)格質(zhì)控，質(zhì)量難以保證。所以還是建議按要求自制藥敏紙片。 3、因需要先進(jìn)行細(xì)菌的分離培養(yǎng)，所以藥敏試驗(yàn)報(bào)告出結(jié)果時(shí)間長(zhǎng)，檢驗(yàn)與臨床缺乏溝通，對(duì)于基層獸醫(yī)站或養(yǎng)殖場(chǎng)，藥敏結(jié)果不能滿足臨床治療要求，容易延誤治療時(shí)機(jī)。但根據(jù)有關(guān)報(bào)道，也可進(jìn)行簡(jiǎn)易的藥敏試驗(yàn)，方法如下：無菌取病死畜禽的部分肝、脾等組織，按1：5加生理鹽水研磨制成懸液，靜置5分鐘，用無菌吸管吸懸液，加兩滴于營(yíng)養(yǎng)瓊脂板上，涂布均勻，5分鐘后貼上藥敏試紙，培養(yǎng)、觀察抑菌圈大小。 4、對(duì)于部分營(yíng)養(yǎng)需求較高的細(xì)菌或微生物，如鏈球菌和支原體，臨床上較難培養(yǎng)，限制了藥敏試驗(yàn)的應(yīng)用。 5、部分養(yǎng)殖場(chǎng)或基層獸醫(yī)站缺乏做細(xì)菌分離培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)的意識(shí)。絕大多數(shù)養(yǎng)殖者或技術(shù)人員是在沒有明確微生物學(xué)診斷的情況下使用抗菌藥物，養(yǎng)殖場(chǎng)規(guī)模越小，細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)做的越少，有的養(yǎng)殖場(chǎng)輪翻使用多種抗菌藥物而不做細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)，致使療效不佳，治療時(shí)機(jī)延誤和藥品的浪費(fèi)。一些病例用藥前不做藥敏試驗(yàn)，而是在大量使用多種抗菌藥物療效不明顯時(shí)才想起做細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)，而此時(shí)細(xì)菌已對(duì)多種抗菌藥產(chǎn)生耐藥性。 </TD></TR></TBODY></TABLE>

獸 醫(yī) 臨 床 中 的 藥 敏 試 驗(yàn)

評(píng)分

獸醫(yī) 臨床中的藥敏試驗(yàn)