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揮發(fā)性鹽基氮(VBN)的測定方法
一、 適用范圍
本方法適用于動物性原料新鮮度的檢測。
二、原理
揮發(fā)性鹽基氮是指動物性食品由于酶和細菌的作用,在腐敗過程中,使蛋白質分解而產生氨以及胺類等堿性含氮物質。此類物質具有揮發(fā)性,在堿性溶液中蒸出后,用標準酸溶液滴定計算含量。
三、試劑
1、氧化鎂混懸液(10 g/L):稱取1.0 g氧化鎂,加100 ml蒸餾水,振搖成混懸液。
2、硼酸溶液(20 g/L):稱取20g硼酸,加1000ml蒸餾水,溶解(可加熱)。
3、鹽酸[c(HCl)=0.020 mol/L]的標準溶液:1000ml容量瓶中先加200ml蒸餾水,再加1.67ml濃鹽酸,搖勻定容至刻度,并標定。
4、混合指示劑:甲基紅0.025 g/25mL乙醇溶液;溴甲酚綠0.125 g/25mL乙醇溶液。兩溶液等體積混合,在陰涼處保存期一個月。
5、硼酸吸收液:按1000ml濃度為20g/L的硼酸溶液,加入3ml的混合指示劑的比例混合,現用現配。
四、儀器
半微量定氮儀。
微量滴定管:最小分度0.02 ml。
五、分析步驟
試樣處理:精確稱取試樣(魚粉、肉粉、肉骨粉、羽毛粉稱5克;血球粉、血漿粉稱0.5克)左右,置于250ml具塞錐形瓶中,加100 ml水,(用振蕩器或磁力攪拌器或人工)振搖30分鐘至混勻, 然后靜置浸漬30 min后過濾,如不馬上蒸餾將濾液放置冰箱備用。
蒸餾滴定:將盛有20 ml硼酸吸收液(20 g/L)的錐形瓶置于冷凝管的下端,并使其下端插入吸收液的液面下,準確吸取10.0 ml上述試樣濾液于蒸餾儀反應室內,加少量水沖洗加樣處,再加10 ml氧化鎂混懸液(10 g/L),迅速加塞,并加水封口以防漏氣,通入蒸汽,進行蒸餾,蒸餾吸收液接收到75ml時,將冷凝管的末端離開液面,繼續(xù)蒸餾至吸收液為100ml時,用蒸餾水沖洗冷凝管末端,停止蒸餾,吸收液用鹽酸標準溶液(0.020 mol/L)滴定,終點至灰紅色。同時做試劑空白試驗。
六、計算結果
試樣中揮發(fā)性鹽基氮的含量按式⑴進行計算。
X=(v-v0)*c*14/(m*10/100)*100
式中:X——試樣中揮發(fā)性鹽基氮的含量,單位為毫克每百克(mg/100g)
V——測定用樣液消耗鹽酸標準溶液體積,單位為毫升(ml)
V0——試劑空白消耗鹽酸標準溶液體積,單位為毫升(ml)
C——鹽酸或硫酸標準溶液的實際濃度,單位為摩爾每升(mol/L)
14——與1.00ml鹽酸標準滴定溶液[c(HCI)=1.000 mol/L]標準滴定溶液相當的氮的質量,單位為毫克(mg)
M——試樣質量,單位為克(g)
計算結果保留至小數點后第二位。
七、精密度
在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。
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