維生素對(duì)動(dòng)物基因表達(dá)影響的研究進(jìn)展

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[p=30, 2, center][size=2]　　[b]維生素對(duì)動(dòng)物基因表達(dá)影響的研究進(jìn)展[/b][/size][/p][p=30, 2, center][b]　　曹德瑞1，鄒曉庭2[/b][/p][p=30, 2, center][b]　　(1.浙江大學(xué)飼料科學(xué)研究所碩士研究生 2.浙江大學(xué)飼料科學(xué)研究所教授，碩士生導(dǎo)師)[/b][/p]

　[b]　摘要[/b]:本文綜述了維生素對(duì)相關(guān)基因表達(dá)的調(diào)控及主要機(jī)制,介紹維生素A,C,D,E等對(duì)部分基因表達(dá)的主要影響。
　　[b]關(guān)鍵詞[/b]：維生素;基因表達(dá);調(diào)控
　　Recent Advances in the Effects of Vitamins on Gene Expressions
　　Abstract：This article reviewed effects of vitamins on gene expressions and possible mechanism,and introduces effects of vitamin A, vitamin C, vitamin D,and vitamin E on genes expression .
　　Key words:vitamins; gene expression; manipulation
　　各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)作為外部因子與基因表達(dá)相互作用, 它們的關(guān)系表現(xiàn)在兩個(gè)方面: 一方面養(yǎng)分的攝入量影響基因表達(dá); 另一方面基因表達(dá)的結(jié)果影響?zhàn)B分的代謝途徑和代謝效率, 并決定動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)需要量。隨著分子生物學(xué)理論和技術(shù)的快速發(fā)展, 維生素調(diào)控基因表達(dá)的方式、途徑、機(jī)制得以不斷揭示,其重要性得到了重視。
　　1　維生素調(diào)控和影響基因表達(dá)的主要方式
　　1. 1　維生素作為酶的輔助因子參與基因表達(dá)
　　作為酶的輔助因子參與基因表達(dá)的維生素中最典型的例子莫過于生物素, 生物素直接參與葡糖異生作用的重要代謝過程,脂肪酸合成和氨基酸分解代謝。它是作為輔基參與四種羧化酶的催化,即丙酮羧化酶、已酰輔酶A、丙酰輔酶A和β-甲基巴豆酰輔酶A。在哺乳動(dòng)物中生物素僅來源于飲食,日糧中的蛋白結(jié)合生物素被腸粘膜中的生物素酶分開。Maeda等(1996)試驗(yàn)報(bào)道,大鼠生物素缺乏組中氨基酸轉(zhuǎn)氨甲酰酶(OTC)的活力明顯低于生物素充足組, 前者肝臟中OTC基因表達(dá)比后者低40%。這些數(shù)據(jù)表明生物素缺乏導(dǎo)致了OTC活力和OTCmRNA數(shù)量減少。
　　1.2 維生素作為一系列蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄因子的一部分，影響多種基因的表達(dá)
　　維生素可作為蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄因子的一部分，對(duì)基因的表達(dá)產(chǎn)生影響，這里以維生素A的氧化代謝產(chǎn)物視黃酸為例子。視黃酸受體是與視黃酸特異結(jié)合的核內(nèi)受體,屬于類固醇激素核受體超家族成員,位于細(xì)胞核基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控區(qū),目前已知的受其調(diào)控的基因超過50種,其中很重要的是生長(zhǎng)激素和生長(zhǎng)因子(包括IGFs),視黃酸與視黃酸受體結(jié)合后通過啟動(dòng)和調(diào)節(jié)這些基因的轉(zhuǎn)錄來影響細(xì)胞的生長(zhǎng)分化。
　　1.3 維生素作為DNA結(jié)合蛋白在許多蛋白的基因水平上起作用
　　維生素可通過DNA結(jié)合蛋白在許多蛋白的基因水平上起作用，典型的例子是維生素D。維生素D 在核里與受體蛋白(VDR)結(jié)合,維生素D受體蛋白由大約100個(gè)氨基酸和2個(gè)鋅指構(gòu)成。至今已證實(shí)維生素D受體蛋白存在于34 種不同的細(xì)胞中,并很有可能是正常細(xì)胞核的組成部分。這是因?yàn)槊恳粋€(gè)細(xì)胞都需要通過Ca2+的轉(zhuǎn)運(yùn)來調(diào)節(jié)其新陳代謝,而鈣結(jié)合蛋白的合成就需要維生素D的參與, 其他如骨鈣素、降血糖素、Ⅰ型膠原蛋白、白細(xì)胞介素Ⅰ等基因的轉(zhuǎn)錄都受到維生素D的調(diào)控。
　　2　部分維生素對(duì)基因表達(dá)的主要影響
　　2.1 維生素A
　　維生素A的氧化代謝產(chǎn)物視黃醛與細(xì)胞核的視黃酸受體結(jié)合可以調(diào)節(jié)特異基因的表達(dá)。視黃酸受體分為3種，它們都有相同的基本結(jié)構(gòu),3種受體蛋白都有A～F6個(gè)不同的模式結(jié)構(gòu)區(qū)域,其中C 區(qū)主要參與DNA順序的識(shí)別,為DNA結(jié)合域;E區(qū)為配體結(jié)合區(qū); A/B區(qū)為不依賴配體的細(xì)胞、組織特異性的轉(zhuǎn)錄激活自調(diào)節(jié)功能區(qū)。此外,在細(xì)胞漿內(nèi)還存在視黃酸結(jié)合蛋白(CRABP),它穿梭于細(xì)胞漿和細(xì)胞核之間,將視黃酸從細(xì)胞漿運(yùn)輸?shù)胶藘?nèi)染色體上的受體部位,然后釋放出來回到胞漿。視黃酸與視黃酸受體結(jié)合后以二聚體的形式與某些特異性DNA序列結(jié)合, 進(jìn)而調(diào)節(jié)鄰近基因的表達(dá)。與受體結(jié)合的靶序列被稱為視黃酸效應(yīng)元件(RARE),它一般存在于靶基因的啟動(dòng)子及調(diào)控順序部分。視黃酸作為一系列蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄因子的一部分,對(duì)多種基因的表達(dá)有影響。視黃酸與視黃酸受體結(jié)合后通過啟動(dòng)和調(diào)節(jié)基因的轉(zhuǎn)錄來影響細(xì)胞的生長(zhǎng)分化。視黃酸可通過對(duì)視黃酸受體的調(diào)節(jié)增強(qiáng)免疫細(xì)胞功能(楊毅等,2000;王衛(wèi)平等,1998)。視黃酸受體作為核內(nèi)受體具有與染色體DNA結(jié)合和調(diào)控基因表達(dá)的功能,當(dāng)視黃酸受體結(jié)合了視黃酸而被活化后可對(duì)一系列受其調(diào)控的基因產(chǎn)生“扳機(jī)”效應(yīng)。同源異性盒基因(Hox基因)屬于發(fā)育基因,是一大類從時(shí)間和空間上對(duì)生物體的生長(zhǎng)、發(fā)育進(jìn)行協(xié)調(diào)和控制的調(diào)控基因。視黃酸可通過調(diào)控Hox基因的表達(dá)來影響胚胎發(fā)育(劉恭平和朱清華,2000;樊建設(shè)等, 1999)。Fu等的報(bào)道表明,維生素A可以對(duì)IGF系統(tǒng)產(chǎn)生影響，飼喂缺乏維生素A的飼糧一段時(shí)間，1日齡的日本公鵪鶉與對(duì)照組相比,血清中IGF-ImRNA的水平下降了22%，同時(shí),睪丸、肺、肝臟和心臟中的IGF-ImRNA水平也下降了21%～52%。
　　2.2 維生素D
　　維生素D是通過DNA結(jié)合蛋白在許多蛋白的基因水平上對(duì)基因表達(dá)進(jìn)行調(diào)節(jié)的。1,25(OH)2D3是維生素D的活性形式,是固醇類激素,其生物學(xué)活性主要受胞內(nèi)特定受體介導(dǎo)。維生素D對(duì)相關(guān)基因的調(diào)控表現(xiàn)在(1)維生素D對(duì)骨代謝具有調(diào)控作用。1,25(OH)2D3通過作用于靶細(xì)胞核內(nèi)高度特異性的維生素D受體蛋白而調(diào)節(jié)血鈣和骨鈣化。維生素D受體蛋白是已知調(diào)節(jié)骨鈣素(OC)的基因, 1,25(OH)2D3 介導(dǎo)的骨鈣素轉(zhuǎn)化和表達(dá)是通過維生素D受體蛋白上的DNA結(jié)合區(qū)和靶基因啟動(dòng)子附近的反應(yīng)元件,即維生素D反應(yīng)元件(VDRE)相互作用,從而改變局部的超螺旋狀態(tài)而調(diào)節(jié)基因的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的(Staal等, 1996)。(2)高水平的1,25(OH)2D3可以抑制甲狀旁腺素的基因轉(zhuǎn)錄。1,25(OH)2D3可使原代培養(yǎng)牛甲狀旁腺主細(xì)胞甲狀旁腺素mRNA水平和甲狀旁腺素分泌顯著降低。在大鼠造骨細(xì)胞中,1,25(OH)2D3可以通過抑制P2增強(qiáng)子的活性,降低甲狀旁腺素受體(PTHR)基因表達(dá)成mRNA的水平(Amizuka等,1999)。
　　2.3 維生素E
　　維生素E又稱生育酚,是動(dòng)物必須從食物中攝取的微量營(yíng)養(yǎng)素之一,具有重要的生物學(xué)功能。α- 生育酚是維生素E的主要活性形式,在鼠肝臟中α-生育酚轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(α-tocopherol transfer protein,α-TTP)基因的表達(dá)不受日糧維生素E的影響,但日糧中蛋白質(zhì)不足會(huì)影響該基因的表達(dá)(Shaw和Huang,1998)。維生素E可以通過抑制自由基的形成,抑制核酸內(nèi)切酶的活化,加快受損DNA的清除等一系列途徑減輕自由基對(duì)細(xì)胞膜中多不飽和脂肪酸，膜的富含巰基的蛋白質(zhì)成分以及細(xì)胞骨架與核酸的損傷(于芳，2002)。維生素E對(duì)部分基因的調(diào)控表現(xiàn)在：(1)在日糧中添加維生素E可以降低活性氧水平以及活性氧誘發(fā)的DNA損傷。α-生育酚能抑制CD36基因mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)，降低動(dòng)脈平滑肌脂蛋白氧化，減少泡狀細(xì)胞形成，具有抗動(dòng)脈硬化作用(Ricciarelli等,2000)。(2)維生素E能清除細(xì)胞內(nèi)·NO和·OH，從而阻止它們對(duì)堿基的破壞。(3)維生素E可以通過減輕金屬離子對(duì)DNA的加合作用從而抑制染色體的改變,鉻可以引起DNA單鏈斷裂和DNA加合,維生素E可以抑制鉻所造成的DNA損傷。維生素E可以誘發(fā)角質(zhì)細(xì)胞中熱蛋白基因HSP70的表達(dá)，這表明維生素E對(duì)于鉻引起的基因毒性具有保護(hù)作用,當(dāng)鐵離子存在時(shí),維生素E可以減少H2O2誘發(fā)的DNA的加合作用。(4) 維生素E具有抑制c-Myc基因的表達(dá),誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡，抑制白血病細(xì)胞的增殖等功能(張敬等,2001)。
　　2.4 維生素C
　　維生素C可以影響阿樸蛋白A-Ⅰ基因的表達(dá)。Ikeda(1996)實(shí)驗(yàn)表明，維生素C缺乏組血清阿樸蛋白A-Ⅰ濃度降低,肝臟中阿樸蛋白A-ⅠmRNA水平在維生素C缺乏組比正常組降低了40%。由于實(shí)驗(yàn)中對(duì)維生素C缺乏組與維生素C充足組比較,肝臟阿樸蛋白A-Ⅰ基因的轉(zhuǎn)錄速率無明顯別,說明維生素C是在轉(zhuǎn)錄后影響阿樸蛋白A-Ⅰ基因的表達(dá)。由于肝臟阿樸蛋白A-ⅠmRNA與肝臟維生素C濃度間的緊密關(guān)系顯示維生素C可促使肝臟阿樸蛋白A-ⅠmRNA的穩(wěn)定。關(guān)于維生素C缺乏調(diào)節(jié)肝臟阿樸蛋白A-Ⅰ合成的機(jī)理依然不清楚。但不管其機(jī)理如何,實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證明了維生素C 確實(shí)能影響肝臟阿樸蛋白A-ⅠmRNA的水平,而且是在轉(zhuǎn)錄后水平起作用。
　　2.5其他維生素
　　維生素K族化合物是2-甲基-1,4- 萘醌的系列衍生物,包括維生素K1維生素K2和維生素K3。維生素K對(duì)部分基因的調(diào)控表現(xiàn)在：(1)維生素K在體內(nèi)可以以輔酶的形式發(fā)揮作用，來完成對(duì)凝血因子的調(diào)控。維生素K輔酶活性形式是氫醌(KH2),反應(yīng)時(shí)被分子氧氧化為環(huán)氧化合物(KO)提供能量,使底物蛋白谷氨酸殘基的γ位結(jié)合CO2變成γ-羧化谷氨酸,KO形式的維生素K在二硫醇依賴性還原酶的作用下,重新轉(zhuǎn)變?yōu)镵H2形式,構(gòu)成體內(nèi)”維生素K2循環(huán)”。肝源性凝血因子Ⅱ,Ⅻ,Ⅳ,Ⅹ及凝血抑制因子蛋白C,X,Z等在肝臟翻譯合成后并不具備活性,在谷氨酸羧化酶與維生素K的協(xié)同作用下，結(jié)構(gòu)中的谷氨酸殘基被修飾為γ-羧化谷氨酸殘基，凝血因子等蛋白被激活γ-羧化谷氨酸殘基與Ca2+結(jié)合后!引起Ca2+蛋白質(zhì),磷脂三者間相互作用,激發(fā)凝血反應(yīng)。(2)維生素K對(duì)維生素K依賴性骨蛋白具有調(diào)控作用。維生素K依賴性骨蛋白之一的骨鈣素的合成受維生素D 與維生素K 的共同調(diào)節(jié),維生素K參與蛋白質(zhì)的翻譯后羧化修飾過程(趙新華，1998)。
　　3.其他維生素
　　多種維生素對(duì)基因的表達(dá)都有影響,而且有些直接參與基因表達(dá)的調(diào)節(jié)。
　　下表匯總了部分維生素對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控作用。
　　維生素對(duì)基因表達(dá)的作用：[table=98%]
[tr][td=1,1,219][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]維生素[/size][/font][/p][/td][td=1,1,184][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]基因[/size][/font][/p][/td][td=1,1,253][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]作用效果及位點(diǎn)[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,219][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]VA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,184][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]VA[/size][/font][font=宋體][size=10.5pt]受體及其他蛋白[/size][/font][/p][/td][td=1,1,253][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]促進(jìn)轉(zhuǎn)錄[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,219][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]VB6[/size][/font][/p][/td][td=1,1,184][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]類固醇受體[/size][/font][/p][/td][td=1,1,253][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]促進(jìn)轉(zhuǎn)錄[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,219][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]VC[/size][/font][/p][/td][td=1,1,184][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]原膠原蛋白[/size][/font][/p][/td][td=1,1,253][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]促進(jìn)轉(zhuǎn)錄與翻譯[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,219][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]VK[/size][/font][/p][/td][td=1,1,184][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]凝血酶原[/size][/font][/p][/td][td=1,1,253][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]促進(jìn)轉(zhuǎn)錄后谷氨酸殘基羧化[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,219][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]葉酸[/size][/font][/p][/td][td=1,1,184][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]DNA,RNA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,253][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]促進(jìn)嘌呤和嘧啶合成[/size][/font][font=宋體][size=10.5pt][/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,219][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]VB1[/size][/font][/p][/td][td=1,1,184][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]所有基因[/size][/font][/p][/td][td=1,1,253][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]作為TPP的組成部分，[/size][/font][font=宋體][size=10.5pt]參與生物能代謝[/size][/font][font=宋體][size=10.5pt][/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,219][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]VB2[/size][/font][/p][/td][td=1,1,184][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]所有基因[/size][/font][/p][/td][td=1,1,253][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]作為FAD的組成部分，參與ATP合成[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,219][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]VB2[/size][/font][/p][/td][td=1,1,184][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]所有基因[/size][/font][/p][/td][td=1,1,253][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]促進(jìn)嘌呤和嘧啶合成[/size][/font][font=宋體][size=10.5pt][/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,219][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]煙酸[/size][/font][/p][/td][td=1,1,184][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]所有基因[/size][/font][/p][/td][td=1,1,253][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]作為NAD的組成部分，參與ATP合成[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,219][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]VB6[/size][/font][/p][/td][td=1,1,184][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]所有基因[/size][/font][/p][/td][td=1,1,253][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]促進(jìn)嘌呤和嘧啶合成[/size][/font][font=宋體][size=10.5pt][/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,219][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]VD[/size][/font][/p][/td][td=1,1,184][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]鈣結(jié)合蛋白[/size][/font][/p][/td][td=1,1,253][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]促進(jìn)轉(zhuǎn)錄[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,219][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]VE[/size][/font][/p][/td][td=1,1,184][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]所有基因[/size][/font][/p][/td][td=1,1,253][p=30, 2, left][font=宋體][size=10.5pt]保護(hù)DNA，防止自由基破壞[/size][/font][/p][/td][/tr]
[/table]
　　4 結(jié)語
　　多種維生素對(duì)多種(成千上萬) 基因的表達(dá)都有影響, 因此這方面的研究范圍十分廣闊。作者認(rèn)為在以后一段時(shí)間內(nèi)對(duì)于維生素影響基因表達(dá)的研究可能會(huì)集中在以下3 個(gè)方面:(1)維生素影響基因表達(dá)進(jìn)而影響動(dòng)物生理活動(dòng)的機(jī)制, 其中包括其缺乏癥和中毒癥的具體分子機(jī)制; (2)維生素影響基因表達(dá)進(jìn)而影響動(dòng)物生產(chǎn)水平(如: 瘦肉率、乳脂率、產(chǎn)蛋率、日增重、受胎率、產(chǎn)仔率等) 的具體分子機(jī)制; (3)一種或幾種維生素和其它營(yíng)養(yǎng)素(如: 其它維生素、蛋白質(zhì)和氨基酸、碳水化合物、脂肪酸、微量元素等) 在影響基因表達(dá)過程中的相互作用關(guān)系的具體分子機(jī)制。
　　參考文獻(xiàn)：
　　樊建設(shè).維生素A和同源框基因與胚胎發(fā)育[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)分冊(cè),1999,22(6):302～305.
　　劉恭平,朱清華.維生素A對(duì)小鼠胚胎Hox3.5基因表達(dá)的影響[J].衛(wèi)生研究,2000,29(3):164～165.
　　趙新華，維生素K與骨代謝[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)衛(wèi)生學(xué)分冊(cè)，1998，25(6)：363～367.
　　王衛(wèi)平,楊毅,蘇貽新.人外周血淋巴細(xì)胞視黃酸受體基因的表達(dá)與調(diào)控[J].營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),1998, 20(3):276～279.
　　楊毅,王衛(wèi)平,蘇貽新.視黃酸對(duì)人臍血淋巴細(xì)胞生長(zhǎng)因子基因的調(diào)節(jié)[J].營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2000, 22(2):124～126.
　　于芳.維生素E,維生素C與基因的穩(wěn)定性[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)衛(wèi)生學(xué)分冊(cè)，2002，29(3)：141～145.
　　張敬,張軍,趙燕等.硒和維生素E對(duì)白血病細(xì)胞凋亡及c-Myc基因表達(dá)的影響[J].營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2001,23(4):324～326.
　　Amizuka N,Kwan M Y,Goltzman D,et al.Vitamin D3 differentially regulates parathyroid hormone parathyroid hormone-related peptide receptor expression in bone and cartilage[J].J Clinical Investigation,1999,103(3):373～381.
　　Ikeda S,et al.[J].J Nutr.1996,126:2505～2511.
　　Maeda Y,et al.[J].J Nutr.1996,126:61～66.
　　Ricciarelli R,Zingg Jean-Marc,Azzi Angelo.Vitamin E Reduces the Uptake of Oxidized LDL by Inhibiting CD36 Scavenger Receptor Expression in Cultured Aortic Smooth Muscle Cell[J].Circulation,2000,102:82～87.
　　Shaw Huey-Mei,Ching-jang Huang.Liver a-Tocopherol Transfer Protein and Its mRNA Are Differentially Altered by Dietary Vitamin E Deficiency and Protein Insufficiency in Rats[J].J Nutr,1998,128:2348～2354.
　　Staal A,Wijnen V A J,Desai R K,et al.Antagonistic effects of transforming growth factor- beta on vitamin D3 enhancement of osteocalcin and osteopontin transcription: reduced interactions of vitamin D receptor/retinoid X receptor complexes with vitamin E response elements[J].Endocrinology,1996,137:2001～2011.
　　Zhengwei Fu,Tadashi Nogachi,Hisanori Kato,et al.Vitamin A deficiency reduces Insulin -like growth factor(IGF-1)gene expression and increase IGF-1 receptor and insulin receptor gene expression in lissuas of Japanese quail[J].J Nutr,2001,131:1189～1194.

pgj0901

講得有道理

enwen

非常感謝！寫的很好。

jefflelele

謝謝分享!