對(duì)蛋氨酸羥基類似物的主要作用及其生物學(xué)效價(jià)的探討

apple12151007 · 發(fā)表于 2010-9-8 16:58:26

　　[1]對(duì)蛋氨酸羥基類似物的主要作用

　　及其生物學(xué)效價(jià)的探討

　　陳熠賀建華

　　(湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，長(zhǎng)沙 410128)

　　摘要：蛋氨酸是動(dòng)物的一種重要的必需氨基酸。蛋氨酸羥基類似物可在動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)化為蛋氨酸并發(fā)揮其營(yíng)養(yǎng)作用。此外，它還可用作反芻動(dòng)物的過瘤胃蛋白源和仔豬日糧的酸化劑，能抑菌殺菌、減少熱應(yīng)激，并可減少氮的排泄，保護(hù)環(huán)境。本文重點(diǎn)從蛋氨酸羥基類似物的消化吸收機(jī)制、對(duì)動(dòng)物的主要生物學(xué)作用和生物學(xué)效價(jià)的評(píng)定三個(gè)方面進(jìn)行綜述。
　　關(guān)鍵詞：蛋氨酸;蛋氨酸羥基類似物;酸化劑;過瘤胃蛋白
　　Discussion of The Main Functions
　　and Bioavailibity of MHA
　　CHEN Yi HE Jian-hua
　　(College of Animal Science and Technology,
　　Hunan Agricultural University,Changsha 410128)
　　Abstract: Methionine is an important essential amino acid to animals. MHA can be transformed into methionine to play its nutritional function. In addition, it can be used as the source of undegradable protein to ruminants and a kind of acidifies to piglets. Bacteria can be inhibited or killed, and heat stress can be reduced by MHA. Meanwhile, the excretion of nitrogen can be reduced to show its effect of environment protection. The mechanism of digestion and absorption, the main biological function to animals and the evaluation of bioavailibity of MHA were mainly reviewed in this paper.
　　Key words: Methionine; MHA; Acidify; Undegradable protein
　　蛋氨酸是合成蛋白質(zhì)的一種重要的必需氨基酸，它主要存在于動(dòng)物性蛋白中，在植物性蛋白中含量較少。它在體內(nèi)不能直接合成或合成速度不能滿足動(dòng)物的需要，因此，動(dòng)物對(duì)蛋氨酸的需要只能靠外源補(bǔ)充。蛋氨酸是家禽玉米-豆粕型日糧的第一限制性氨基酸，是以玉米為主要基礎(chǔ)日糧的高產(chǎn)奶牛機(jī)體乳和乳蛋白合成時(shí)的第一限制性氨基酸[1]，還是豬的第二限制性氨基酸。隨著我國(guó)畜牧業(yè)的飛速發(fā)展，蛋白質(zhì)飼料越來越缺乏，蛋氨酸添加劑的生產(chǎn)雖然不斷擴(kuò)大，但還是不能滿足市場(chǎng)需要。目前的蛋氨酸添加劑主要有DL-蛋氨酸(DLM)、蛋氨酸羥基類似物(MHA)等幾類。其中MHA因其良好的過瘤胃作用、酸化作用、抑菌作用等而倍受關(guān)注，近幾年對(duì)它的研究也日益深入。
　　1 蛋氨酸羥基類似物簡(jiǎn)介
　　蛋氨酸羥基類似物又名MHA(Methionine Hydroxy Analogue)、HMB(2-Hydroxy-4-Methylthio Butanoic Acid)，商品名為Alimet，化學(xué)名為2-羥基-4-甲硫基丁酸，含有一個(gè)羥基和一個(gè)羧基。分子式為C5H10O3S，相對(duì)分子質(zhì)量為150.2，化學(xué)結(jié)構(gòu)式為CH3-S-CH2-CH2-CH-COOH
　　OH
　　。蛋氨酸羥基類似物在結(jié)構(gòu)上與蛋氨酸不同，其分子中α-氨基被α-羥基取代。液態(tài)蛋氨酸羥基類似物是深褐色黏液，含水量約為12%，有硫化物氣味，易溶于水，相對(duì)密度為1.22-1.23(120℃)，pH值為1-2。它是由65%的單體，20%的二聚體和3%的多聚體組成的混合物[2]。單體可直接被吸收，二聚體和多聚體必須先水解成單體才能被吸收。產(chǎn)品中MHA的含量為88%。
　　一般認(rèn)為MHA通過不耗能的被動(dòng)擴(kuò)散形式被吸收，全部在腸道，主要在十二指腸，也可在大腸被吸收[3]。MHA的吸收速度與L-蛋氨酸在回腸的吸收速度相近。蛋氨酸和液態(tài)羥基蛋氨酸在細(xì)胞刷狀緣膜的吸收是不同的，蛋氨酸是通過依賴于鈉離子的載體而吸收的，液態(tài)羥基蛋氨酸的吸收則是通過依賴于氫離子的非立體專一性的轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)來完成的。
　　MHA需轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)-蛋氨酸之后才能被機(jī)體吸收利用，其轉(zhuǎn)化途徑為：MHA在胰腺酯酶的作用下其多聚體水解為單體，由于濃度差異而產(chǎn)生擴(kuò)散作用，MHA在十二指腸被吸收進(jìn)入血液，在肝臟中在L-2-羥基酸氧化酶和D-2-羥基酸氧化酶的作用下被氧化為α-酮式蛋氨酸，再經(jīng)轉(zhuǎn)氨酶作用生成L-蛋氨酸，然后進(jìn)入蛋白質(zhì)合成和其他與蛋氨酸相關(guān)的代謝途徑，發(fā)揮蛋氨酸的生物學(xué)功能[4](圖1)。Wester等[5]對(duì)羊的研究指出，幾乎所有的組織都能將MHA轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)-蛋氨酸。轉(zhuǎn)化低的(<5%)包括腦、肺表皮和肌肉，以及回腸、盲腸和結(jié)腸。約有30%的L-蛋氨酸是MHA通過消化道其他組織(瘤胃、瓣胃、十二指腸和空腸)的細(xì)胞時(shí)轉(zhuǎn)化而成。約有11%沒被吸收的MHA在小腸轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)-蛋氨酸，其中的一半釋放到血液中，其余部分用于消化道蛋白質(zhì)合成。
　　圖1 MHA轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)-蛋氨酸的途徑
　　2 蛋氨酸羥基類似物對(duì)動(dòng)物的主要作用
　　2.1 發(fā)揮蛋氨酸的生物學(xué)作用
　　2.1.1 營(yíng)養(yǎng)作用
　　蛋氨酸羥基類似物可以在動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)-蛋氨酸，發(fā)揮蛋氨酸的生物學(xué)作用。蛋氨酸在動(dòng)物體內(nèi)可作為必需氨基酸合成機(jī)體蛋白，提高生長(zhǎng)性能;可轉(zhuǎn)化為胱氨酸，發(fā)揮保肝解毒的作用;可為機(jī)體提供活性甲基，參與甲基的轉(zhuǎn)移和腎上腺素、肌酸、膽堿、角質(zhì)素和核酸等的合成;還能提供活性羥基基團(tuán)，補(bǔ)充膽堿或維生素B12的部分作用;它在體內(nèi)代謝生成聚胺，聚胺對(duì)動(dòng)物細(xì)胞增殖具有非常重要的促進(jìn)作用;同時(shí)它還參與精胺、半精胺等和細(xì)胞分裂有關(guān)的化合物的合成。
　　2.1.2 提高機(jī)體免疫力
　　蛋氨酸有提高機(jī)體免疫力的作用，其機(jī)理目前還不很清楚，目前的研究水平大多停留在表觀免疫指標(biāo)的測(cè)定上。一些研究表明日糧中蛋氨酸水平可影響動(dòng)物的體液免疫，主要表現(xiàn)在對(duì)抗體效價(jià)的影響上。據(jù)張英杰等[6]報(bào)道，蛋氨酸水平為0.063%-0.413%時(shí)，隨著日糧蛋氨酸水平的提高，雞血清中的抗體滴度、免疫球蛋白和淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率顯著提高。Tsiagbe[7]研究表明, 日糧中添加0.25%蛋氨酸可顯著提高經(jīng)綿羊紅細(xì)胞腹腔注射后肉仔雞抗綿羊紅細(xì)胞血清抗體效價(jià)和IgG抗體效價(jià)。同時(shí)，日糧蛋氨酸水平對(duì)細(xì)胞免疫也有影響。Soder等[8]研究表明，在奶牛日糧中添加瘤胃保護(hù)蛋氨酸顯著提高了牛血液中T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率。Swain等[9]在含蛋氨酸0.36%的基礎(chǔ)日糧中添加0.15%、0.30%和0.45%的蛋氨酸顯著提高了新城疫疫苗免疫后第21天肉仔雞淋巴細(xì)胞遷移抑制率。發(fā)揮免疫作用的蛋氨酸需由飼料補(bǔ)充，而不能由膽堿和半胱氨酸等代替。
　　2.1.3 降低日糧粗蛋白水平
　　日糧中蛋氨酸水平的高低將影響其他氨基酸的利用及生產(chǎn)性能的發(fā)揮。在保證氨基酸平衡的前提下，提高日糧蛋氨酸水平可降低日糧粗蛋白水平，而不影響生產(chǎn)性能。楊正德等[10]研究表明，低蛋白日糧即使添加蛋氨酸之外的其它必需氨基酸，肉仔雞的增重和飼料轉(zhuǎn)化率仍然顯著低于高蛋白日糧，進(jìn)一步添加蛋氨酸可消除這種差異。據(jù)Jeroch 等[11]報(bào)道，若日糧中總含硫氨基酸滿足需要，18.0%-18.7%的粗蛋白與20.4%-21.5%的粗蛋白在對(duì)肉仔雞生產(chǎn)性能和胴體脂肪沉積方面的效果相當(dāng)。
　　2.1.4 提高生產(chǎn)性能
　　MHA可促進(jìn)肉雞生長(zhǎng)，提高日增重，降低料肉比;可提高蛋雞產(chǎn)蛋高峰期和產(chǎn)蛋周期的產(chǎn)蛋量、蛋重及蛋殼質(zhì)量。在開產(chǎn)蛋雞或產(chǎn)蛋雞日糧中添加大于0.6%的DLM或0.68%的MHA還可酸化尿，并降低鈣引發(fā)的腎損傷，降低尿結(jié)石的發(fā)生率。但過度酸化會(huì)影響鈣代謝從而影響產(chǎn)蛋量、蛋殼質(zhì)量及骨質(zhì)礦物化，引發(fā)代謝性酸中毒;添加瘤胃保護(hù)性蛋氨酸能提高奶牛的干物質(zhì)采食量，促進(jìn)增重，提高乳產(chǎn)量，改善乳成分。Rogers等[12]證實(shí)，飼喂玉米蛋白粉+尿素日糧，添加保護(hù)蛋氨酸能夠提高產(chǎn)奶量和乳蛋白量。據(jù)夏中生等[13]報(bào)道，MHA的添加使奶水牛的產(chǎn)奶量和乳蛋白量分別提高了5.90%、1.55%。這是因?yàn)镸HA是一種過瘤胃蛋氨酸，大部分可避過瘤胃的降解安全到達(dá)小腸，蛋氨酸被小腸吸收后即轉(zhuǎn)化為蛋白質(zhì)以滿足奶水牛泌乳的需要;MHA在豬生產(chǎn)上的研究較少，但部分試驗(yàn)仍證明了其提高生長(zhǎng)性能的作用。浣長(zhǎng)興等[14]研究表明，在對(duì)21頭斷奶仔豬進(jìn)行的為期32天的試驗(yàn)中，添加MHA可提高仔豬日增重8.6%，提高采食量5.5%，降低料肉比3.25%。同時(shí)還能減少仔豬腹瀉次數(shù)和降低單位增中的飼料成本，從而提高養(yǎng)豬生產(chǎn)的經(jīng)濟(jì)效益。
　　2.2 經(jīng)濟(jì)高效的反芻動(dòng)物過瘤胃蛋白源
　　游離氨基酸在瘤胃中會(huì)被微生物降解，發(fā)生脫氨基作用，因此添加結(jié)晶型氨基酸效果不理想。使用保護(hù)性氨基酸或氨基酸類似物，可在一定程度上防止瘤胃微生物的降解，當(dāng)它們到達(dá)小腸時(shí)釋放出來并被機(jī)體吸收和利用。游離氨基酸經(jīng)包被處理后過瘤胃率提高，但使用效果受包被情況及后續(xù)加工工藝的影響大，且成本較高。因而目前傾向于選擇效果好且成本相對(duì)較低的MHA。
　　MHA進(jìn)入體內(nèi)后能被瘤胃微生物降解并轉(zhuǎn)化為蛋氨酸，也能在瘤胃壁被吸收并代謝，此外，MHA還能隨食糜離開瘤胃，并通過瓣胃和小腸被吸收。這三種途徑同時(shí)發(fā)生并相互競(jìng)爭(zhēng)，MHA被每種途徑代謝的程度直接影響其有效性。
　　Koenig[15]研究表明，MHA的過瘤胃率與添加量無關(guān)，添加量25、50g/d時(shí)差異不顯著，平均為41.8%。結(jié)合以前的研究，MHA的過瘤胃率范圍為41%-50%，平均為44.3%。當(dāng)MHA用量高時(shí)，未降解率高，但進(jìn)一步研究表明食糜流通速度是影響過瘤胃率的主要因素。Vazquez等[16]采用連續(xù)培養(yǎng)系統(tǒng)的研究表明，MHA的利用率受食糜流通速度的調(diào)控。食糜流通速度快時(shí)，MHA的利用率高。
　　MHA能促進(jìn)脂蛋白和細(xì)菌蛋白的合成，改善纖維消化率，提高瘤胃原蟲數(shù)量, 改變瘤胃揮發(fā)性脂肪酸的發(fā)酵模式，促進(jìn)瘤胃發(fā)酵，是一種效果很好的反芻動(dòng)物蛋氨酸源。它無需特殊的包被和處理就能避免被瘤胃過多地降解，與其他各種過瘤胃蛋氨酸源所提供的蛋氨酸相比，是最經(jīng)濟(jì)的反芻動(dòng)物蛋氨酸源。另外，由于MHA不需要保護(hù)性被膜，因而不會(huì)受到加工的制約。這意味著可對(duì)MHA進(jìn)行高溫蒸汽調(diào)制、混合、膨化或制粒而不破壞其活性。
　　2.3 用作仔豬日糧酸化劑，降低飼料系酸力
　　仔豬消化道功能不完全，胃酸分泌不足，又加上斷奶應(yīng)激，使胃腸道微生物平衡遭到破壞，大腸桿菌迅速繁殖，最終導(dǎo)致仔豬腹瀉，生產(chǎn)性能下降。酸化劑可通過降低胃腸道的pH值，提高消化酶的活性，改變有害菌的適宜生存環(huán)境或直接抑制殺死病原菌，同時(shí)促進(jìn)有益菌的繁殖，減少腹瀉。據(jù)冷向軍等[17]報(bào)道，日糧中添加1.5%的檸檬酸顯著降低了結(jié)腸大腸桿菌數(shù)量(P<0.05)，添加0.25%的復(fù)合酸有降低大腸桿菌數(shù)量、增加乳酸桿菌數(shù)量的趨勢(shì)(P<0.01)。Piva等[18]發(fā)現(xiàn)酸化日糧對(duì)腹瀉的預(yù)防作用與添加抗生素的作用是一致的。與抗生素相比，酸化劑具有安全、不產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)勢(shì)?？股貢?huì)殺死腸道內(nèi)所有的微生物，而酸化劑只是抑制或殺死腸道病原微生物，同時(shí)使有益菌群在腸道中占據(jù)主導(dǎo)地位。
　　MHA的pKa值為3.6，pH值為1-2，其酸的結(jié)構(gòu)與乳酸相似，具有相對(duì)較強(qiáng)的酸性作用。它可以提供H+，從而降低飼料的系酸力，添加得越多，飼料的系酸力下降得越明顯。MHA發(fā)揮酸化劑的功能時(shí)，能緩沖日糧中高堿成分對(duì)胃酸的中和，增強(qiáng)胃腸道的酸性環(huán)境，提高提高胃蛋白酶、十二指腸胰蛋白酶的活性和腸道有益微生物的活性，從而促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)尤其是蛋白質(zhì)的消化吸收，因而可減少仔豬尤其是早期斷奶仔豬的營(yíng)養(yǎng)性腹瀉，促進(jìn)其生長(zhǎng)。但系酸力的改變應(yīng)適宜，當(dāng)系酸力過低而超過仔豬對(duì)酸堿平衡的調(diào)節(jié)能力時(shí)，會(huì)影響仔豬的生理酸堿平衡，導(dǎo)致體內(nèi)酸過多，酸堿失衡，引起機(jī)體酸中毒，影響仔豬生產(chǎn)性能。目前關(guān)于MHA用作仔豬日糧酸化劑的研究較少，具體效果有待進(jìn)一步研究。
　　2.4 抑菌殺菌
　　飼料中添加蛋氨酸可抑制各種霉菌毒素的產(chǎn)生。王冉等[19]認(rèn)為蛋氨酸可與飼料中的霉菌毒素相結(jié)合，使其毒性降低。MHA是一種酸性較強(qiáng)的有機(jī)酸，它可通過直接擴(kuò)散進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，降低細(xì)胞內(nèi)pH，抑制蛋白質(zhì)、脂類、DNA、RNA等大分子細(xì)胞膜的組成成分的代謝，破壞病原菌細(xì)胞膜的完整性，從而起到殺菌作用。Bosi等[20]認(rèn)為對(duì)易于在胃內(nèi)被吸收的酸化劑應(yīng)采取有效方法使其在后段腸道發(fā)揮作用，以有效控制腸道大腸桿菌和其他病原微生物。MHA主要在小腸吸收，也有一部分在大腸吸收，這種吸收方式保證了MHA在腸道內(nèi)能有效地發(fā)揮抑菌和殺菌作用。
　　MHA對(duì)霉菌也具有抑制和殺滅作用，在飼料中添加后，可以防止或控制霉菌在飼料中的繁殖，保持飼料的新鮮度，防止微生物對(duì)飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的分解，從而提高飼料的適口性和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率。飼料在加工過程中不可避免地受到外界微生物的污染，添加MHA后，既可以防止霉菌在飼料中的繁殖，同時(shí)MHA又可轉(zhuǎn)化為蛋氨酸增強(qiáng)機(jī)體對(duì)霉菌毒素的分解，從而使生產(chǎn)性能得以充分發(fā)揮。
　　2.5 減少氮的排泄，保護(hù)環(huán)境
　　添加MHA能降低日糧配制時(shí)的粗蛋白質(zhì)含量，降低血漿尿素氮，從而減少氮的浪費(fèi)和排泄。根據(jù)生物化學(xué)原理，機(jī)體所需要的是必需氨基酸碳架，而不一定是其全部。只要有了必需氨基酸的碳架，機(jī)體就可能在轉(zhuǎn)氨酶的作用下，將其轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的L-氨基酸。MHA本身就是蛋氨酸代謝的中間產(chǎn)物，具備蛋氨酸的碳架，在代謝中的作用與蛋氨酸相同。由于MHA沒有氨基，因而在代謝中不會(huì)發(fā)生脫氨基作用，而且它在體內(nèi)代謝形成蛋氨酸時(shí)會(huì)利用血中的游離氨，增加體內(nèi)的氮沉積，從而降低了糞中的氮水平，減少了氮的排泄。同時(shí)，MHA還能降低日糧粗蛋白質(zhì)水平，進(jìn)一步減少了氮的排泄，減輕了對(duì)環(huán)境的污染。Noftsger等[21]研究表明，低蛋白氨基酸平衡的日糧可顯著降低奶牛向環(huán)境排出的氮量。低蛋白、高可消化過瘤胃蛋白、MHA日糧與低蛋白、高可消化過瘤胃蛋白日糧相比，總氮效率(乳中氮含量/采食氮含量)分別為35%和 31.7%，環(huán)境效率(排出氮/乳中氮)分別為1.89和 2.19，差異顯著。
　　2.6 減少熱應(yīng)激
　　在高溫高濕的氣候條件下，由于MHA不含氨基，氮轉(zhuǎn)化成尿酸過程中產(chǎn)生的余熱減少，因而可減緩雞的熱應(yīng)激反應(yīng)，提高采食量和生長(zhǎng)速度。據(jù)Dibner等[22]報(bào)道,雖然熱應(yīng)激狀態(tài)下所有的雞都表現(xiàn)出生產(chǎn)性能下降，但是飼喂DLM的肉雞和飼喂MHA的肉雞相比下降程度更大。MHA與DLM的吸收速度或程度不同，MHA的吸收更迅速、更徹底。體外試驗(yàn)表明，當(dāng)雞處于熱應(yīng)激時(shí)，小腸DLM的轉(zhuǎn)運(yùn)減弱，而MHA的轉(zhuǎn)運(yùn)則加強(qiáng)。這與二者的吸收機(jī)制不同有關(guān)：MHA在整個(gè)消化道經(jīng)不耗能的被動(dòng)擴(kuò)散途徑吸收，而DLM在小腸經(jīng)能量依賴型途徑吸收，DLM只能在小腸、主要是在回腸中被吸收，且熱應(yīng)激條件下，DLM的利用率小于MHA[23]。這就是MHA減緩熱應(yīng)激的機(jī)理。
　　3 蛋氨酸羥基類似物的生物學(xué)效價(jià)
　　自從MHA誕生以來，其生物學(xué)效價(jià)的問題一直是學(xué)術(shù)界爭(zhēng)論的焦點(diǎn)。許多學(xué)者研究了MHA相對(duì)于DLM的生物學(xué)效價(jià)。研究結(jié)果差別較大，從50%到100%，甚至更高。目前對(duì)MHA的生物學(xué)效價(jià)主要存在兩種觀點(diǎn)，一種觀點(diǎn)認(rèn)為65%的DLM與100%的MHA在增重、料重比等方面差異不顯著，從而得出其生物學(xué)效價(jià)為65%;另一種觀點(diǎn)認(rèn)為二者的使用效果無顯著差異，得出MHA的生物學(xué)效價(jià)為100%。造成爭(zhēng)議的主要原因是研究者所采用的測(cè)定方法、試驗(yàn)日糧、試驗(yàn)設(shè)計(jì)和統(tǒng)計(jì)方法等不同。
　　3.1 測(cè)定方法
　　測(cè)定MHA生物學(xué)效價(jià)的方法主要有兩種，一種是用線性模型或指數(shù)模型進(jìn)行回歸分析[24]。這種方法需要運(yùn)用純合日糧或半純合日糧設(shè)計(jì)出缺乏蛋氨酸的基礎(chǔ)日糧和幾個(gè)不同的的蛋氨酸添加水平，其結(jié)果很大程度上取決于蛋氨酸的缺乏程度和測(cè)定的性能指標(biāo)不同;另一種是簡(jiǎn)單替代法[24]。這種方法需要配制一種缺乏含硫氨基酸的基礎(chǔ)日糧，在等摩爾基礎(chǔ)上添加不同水平的MHA來替代DLM，比較動(dòng)物生長(zhǎng)性能，評(píng)定MHA的生物學(xué)效價(jià)。該方法比較簡(jiǎn)單，但不能測(cè)出生物學(xué)效價(jià)值，只能得出一個(gè)一般生物當(dāng)量值。
　　3.2 試驗(yàn)日糧
　　動(dòng)物對(duì)限制性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的生長(zhǎng)反應(yīng)遵循報(bào)酬遞減規(guī)律。添加蛋氨酸可改善動(dòng)物的生產(chǎn)性能，但隨著添加量的增加，改善的幅度將逐漸減小，直到蛋氨酸滿足動(dòng)物維持和生產(chǎn)的需要量時(shí)，再添加蛋氨酸不能進(jìn)一步提高動(dòng)物的生產(chǎn)水平。測(cè)定MHA的生物學(xué)效價(jià)時(shí)，試驗(yàn)日糧必須缺乏蛋氨酸，且缺乏的程度越高，可設(shè)計(jì)的添加水平就越多，結(jié)果就越準(zhǔn)確。因此，在試驗(yàn)條件允許的前提下，應(yīng)盡量選擇蛋氨酸缺乏程度高的試驗(yàn)日糧。Summers等[25]研究表明，玉米-豆粕-動(dòng)物膠型日糧和低蛋白豆粕型日糧對(duì)蛋氨酸添加劑比較敏感。低蛋白豆粕型日糧成本較低，操作也較簡(jiǎn)便，最適合用于對(duì)蛋氨酸添加劑進(jìn)行評(píng)價(jià)。
　　理論上講，試驗(yàn)日糧中蛋氨酸含量越低，添加MHA的效果和添加DLM相比就越差，將減小整個(gè)回歸曲線的斜率，使MHA的相對(duì)生物學(xué)效價(jià)降低。Thomas等[26]報(bào)道，用23%的豆粕和21%的花生粕做飼料蛋白源，與只用豆粕做蛋白源的兩種日糧做試驗(yàn)。比較MHA相對(duì)于DLM的生物學(xué)效價(jià)，結(jié)果顯示，豆粕花生粕組MHA 的相對(duì)生物學(xué)效價(jià)是85%(增重)和79%(飼料效率)，豆粕組相應(yīng)為72%和73%。
　　3.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
　　有一部分試驗(yàn)是在基礎(chǔ)日糧中分別添加100份MHA和65份DLM進(jìn)行比較，結(jié)果動(dòng)物生產(chǎn)性能差異不顯著，就認(rèn)為MHA的相對(duì)生物學(xué)效價(jià)是65%[27]。這樣的試驗(yàn)在設(shè)計(jì)上存在缺陷，受部分試驗(yàn)結(jié)果的影響，研究者先入為主地認(rèn)為MHA的生物學(xué)效價(jià)是65%，缺價(jià)乏客觀性。按照科學(xué)的設(shè)計(jì)方法，要測(cè)定MHA的生物學(xué)效價(jià)，首先要配制一個(gè)僅缺乏蛋氨酸的試驗(yàn)日糧，再在等摩爾基礎(chǔ)上添加不同水平的蛋氨酸,這樣才能得出客觀的結(jié)論。
　　3.4 統(tǒng)計(jì)方法
　　方差分析和回歸分析是分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)時(shí)常用的方法。方差分析的靈敏度較差，只適用于定性的、未嚴(yán)格設(shè)計(jì)的試驗(yàn)，其后緊接的多重比較一次只能比較兩個(gè)試驗(yàn)處理，無法看出試驗(yàn)中各處理的總趨勢(shì)。方差分析是采用一種靜態(tài)的觀點(diǎn)來分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)，得出的結(jié)論具有片面性，不適用于按梯度添加方案設(shè)計(jì)的試驗(yàn)?；貧w分析常用于梯度添加試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果中各處理間差異顯著與否視試驗(yàn)條件而定。處理數(shù)越多，處理間差異越小，實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性就越高。
　　在認(rèn)為MHA的生物學(xué)效價(jià)與DLM無顯著差異的試驗(yàn)中，研究者僅采用方差分析對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，差異不顯著，就認(rèn)為二者效價(jià)沒有差異。而在認(rèn)為MHA效價(jià)較低的研究中，研究者除采用方差分析對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理外，還采用了回歸分析來處理數(shù)據(jù)?；貧w模型的選擇影響對(duì)MHA生物學(xué)效價(jià)的評(píng)定。據(jù)王冉等[28]報(bào)道，采用線性回歸分析DLM和MHA的生物學(xué)效價(jià)時(shí)，結(jié)果分別為100%和96%。同一試驗(yàn)采用非線性(指數(shù))回歸分析，結(jié)果分別為100%和58%。
　　此外，動(dòng)物的年齡、生長(zhǎng)階段、生理狀況，蛋氨酸添加劑的物理狀態(tài)、添加形式，飼料的能量水平等對(duì)MHA生物學(xué)效價(jià)的評(píng)定都有影響。
　　4 小結(jié)
　　蛋氨酸對(duì)動(dòng)物的生長(zhǎng)、繁殖和生產(chǎn)等有重要作用，是一種重要的必需氨基酸。MHA在動(dòng)物體內(nèi)可轉(zhuǎn)化為蛋氨酸并發(fā)揮其營(yíng)養(yǎng)作用，可提高動(dòng)物免疫力、降低日糧粗蛋白水平、提高生產(chǎn)性能。此外，它還能抑菌殺菌、減少熱應(yīng)激，并可用作反芻動(dòng)物的過瘤胃蛋白和仔豬日糧的酸化劑。同時(shí)，添加MHA可以減少氮的排泄，保護(hù)環(huán)境。目前，對(duì)雞和牛的日糧中添加MHA的研究較多，對(duì)豬的研究較少。此外，MHA在不同動(dòng)物不同階段的適宜添加量仍不清楚，在早期斷奶仔豬中的應(yīng)用效果也有待進(jìn)一步驗(yàn)證，并且許多研究都還未從分子水平闡明其作用機(jī)制，這些都是以后研究的重點(diǎn)。
　　參考文獻(xiàn):
　　[1] Rulquin H,et al.Milk production and composition as a function of postrum inal lysine and methionine supply:a nutrient-response approach[J].Livest Prod Sci,1993,37:69-90.
　　[2] Lawso C Q,Ivey F J.Hydrolysis of 2-hydroxy-4-(methylthio)-butanoic acid dimmer in two model systems[J].Poultey Sci,1986,65:1749-1753.
　　[3] Dibner J J,Knight C D,Swick R A.Absorption of 14C-2-hydroxy-4-(methylthio)-butanoic acid (Alimet) from the hindgut of the broiler chick[J].Poultry Sci,1988,67:1314-1321.
　　[4] Dibner J J,Knight C D. Conversion of 2-hydroxy-4-(methylthio)butanoic acid to L-methionine in the chick:A stereospecific pathway[J].J Nutr,1984,114:1716-1723.
　　[5] Wester T J,Vazquez-Anon M,Parker D,Dibner J,Calder A G, Lobley G E.Synthesis of methionine(Met) from 2-hydroxy-4-methylthio butanoic acid (MHA) in growing lambs[J].J Anim Sci,2000,78:269.
　　[6] 張英杰,劉月琴.家禽飼養(yǎng)手冊(cè)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2001.
　　[7] Tsiagbe V K.Enhanced immune responses of broiler chicks fed methionine supplemented diets[J].Poutry Sci,1987,58:1147-1154.
　　[8] Soder K J,Holden L A.Lymphocyte proliferation response of lactating dairy cows fed varying concentrations of rumen-protected methionine[J].J Dairy Sci, 1999,2:1935-1942.
　　[9] Swain B K,Johri T S.Effect of supplemental methionine,choline and their combinations on the performance and immune response of broiler[J].British Poultry Sci,2000,41:83-88.
　　[10] 楊正德,陶玉順,羅愛平.低蛋白質(zhì)飼料添加蛋氨酸對(duì)促進(jìn)肉仔雞生長(zhǎng)和抑制腹腔脂肪的效果[J].飼料研究,1996(9):2-3.
　　[11] Jeroch, H., S. Dänicke,S. and J. Brufau, 1995. The influence of enzyme preparations on the nutritional value of cereals for poultry: a review. J. Anim. Feed Sci., 4: 263-285.
　　[12] Rogers J A, Perice-Sandner S B, Papas A M,et al.Production response of dairy cows fed various amounts of rumen-protected methionione and lysine[J].J Dairy Sci, 1989,72:1800-1817.
　　[13] 夏中生,李致寶等.半胱胺、有機(jī)鉻和蛋氨酸羥基類似物對(duì)水牛泌乳性能及血清生理生化指標(biāo)的影響[J].畜牧與獸醫(yī),2005,37:4-8.
　　[14] 浣長(zhǎng)興,戴求仲.日糧添加“Alimet”飼喂乳豬的效果[J].獸藥與飼料添加劑,1999(4)：9-10.
　　[15] Koenig K M.Rumen degradation and availability of various amounts of liquid methionine hydroxy analog in lactating dairy cows[J].J Dairy Sci,2002, 85:930-938.
　　[16] Vazquez Anon M,et al.Effects of Alimet on nut rient digestibility, bacterial protein synthesis,and ruminal disappearance during continuous culture[J].J Dairy Sci,2001,84:159-166.
　　[17] 冷向軍,王康寧,楊鳳,端木道,周安過.酸化劑對(duì)早期斷奶仔豬胃酸分泌、消化酶活性和腸道微生物的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2002,14(4):44-48.
　　[18] Piva A,Casadei G,Biagi G.An organic acid blend can modulate swine intestinal fermentation and reduce microbial proteolysis[J].Canadian J Anim Sci. 2002,82(4):527-532.
　　[19] 王冉,周巖民.動(dòng)物蛋氨酸研究進(jìn)展[J].糧食與飼料工業(yè),1999(4):27-30.
　　[20] Bosi P,Jung J,Han K.Effect of dietary buffering characteristics and protected of unprotected acid on piglet growth,digestibility and characteristics of gut content[J].Asian-Australian J Anim Sci,1999,12(7):1104-1110.
　　[21] Noftsger S,St-Pierre N R.Supplementation of methionine and selection of highly digestible rumen undegradable protein to improve nitrogen efficiency for milk production[J].J Dairy Sci,2003,86(3):958-970.
　　[22] Dibner J J,Atwell C A,Ivey F J.Effect of heat stress on 2-hydroxy-4-(methylthio)-butanoi-cacid and DL-methionine absorption measured in vitro[J],Poultry Sci,1992,71:1900-1910.
　　[23] Dibner J J,Ivey F J.Capacity in the liver of the broiler chick for conversion of supplemental methionine activity to L-methionine[J].Poultry Sci,1992,71:700-708.
　　[24] 劉永剛.液體蛋氨酸羥基類似物的生物學(xué)效價(jià)[J].中國(guó)飼料,2003(9):31-33.
　　[25] Summers J D,Blackman S,Leeson S.A simplified diets for assaying methionine activity[J], Poultry Sci,1988,67:88-95.
　　[26] Thomas O P,Tamplin C,Crissey S D,et al.An evaluation of methionine hydroxy analog free acid using a nonlinear(exponetial)bioassay[J].Poultry Sci,1991,70:605-610.
　　[27] 安永義,伏桂華,何春枝.蛋氨酸添加劑對(duì)肉用仔雞生產(chǎn)性能的影響[J].中國(guó)飼料，2001,19:20-21.
　　[28] 王冉,周巖民.動(dòng)物蛋氨酸研究進(jìn)展[J].糧食與飼料工業(yè),1999(4):27-30.
　　附：
　　作者簡(jiǎn)介：陳熠(1984- )，男，漢族，湖南人，碩士生，研究方向：動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)。