維生素C對(duì)蛋雞新城疫免疫性能的影響

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[p=30, 2, center]　[b][size=2]　維生素C對(duì)蛋雞新城疫免疫性能的影響[/size][/b][/p][p=30, 2, center][b]　　孟翠紅 1 樊麗軍2[/b][/p]
　　摘要：本實(shí)驗(yàn)將60只體重相近的49日齡海蘭賀蛋雞隨機(jī)分為A、B、C、D、E組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)3只。 B、C、D、E四組頸部皮下注射Ι系新城疫疫苗進(jìn)行免疫，分別在B、C、D、E日糧中填加0㎎/㎏、200㎎/㎏、400㎎/㎏、800㎎/㎏的維生素C，分四周測(cè)血清中的HI效價(jià)及脾臟、胸腺、法氏囊等臟器指數(shù)。結(jié)果表明：添加維生素C可提高HI效價(jià)，對(duì)新城疫疫苗免疫效果有促進(jìn)作用，其中400/㎏的維生素C效果較好;C、D、E組的脾臟、胸腺、法氏囊等臟器指數(shù)均高于B組，說(shuō)明添加維生素C能促進(jìn)脾臟、胸腺、法氏囊等免疫器官生長(zhǎng)發(fā)育，進(jìn)而影響細(xì)胞免疫和體液免疫性能。
　　關(guān)鍵詞：維生素C;新誠(chéng)疫;蛋雞
　　Effect of Dietary Vitamin C Levels on the Immunity Performance
　　of Newcastle Disease in Egg Chicks
　　A tltal of 60 forty-nine-day-old hailanhe male egg clicks were randomly allocated to five treatments with 12 broilers for each treatment,every treatment had replicates(3 chicks per cage).The A treatment was a blank comparetion,the B、C、D、E treatment were injected with Newcastle Disease’s bacterin in the under of the cervix.The basic diet with vitaminC levels of 200,400,800㎎/㎏ were fed to the C、D、E treatment,measured the serum HI and the spleen ,thymus, brusal’s organs indexs once a week.The result showed that when the experimental diets were fed,the ND bacterin’s immunity effect was improved,and the treatment of being fed with 400㎎/㎏ vitaminC was better than another two.The organs indexs of spleen,thymus,brusal，of the C、D、E treatment were higher than the B treatment,showed than increasing the vitaminC can lead the develop growth of the spleem,thymus, brusal，furthermore effected the cell immunity and body fluid function
　　Key word:VitaminC; Newcastle Disease;hens
　　維生素C是己糖的衍生物，具有酸性，因此也稱L-抗壞血酸，家禽需要維生素C,雞利用維生素C合成類(lèi)固醇激素和氨基酸，進(jìn)行礦物質(zhì)代謝，維持免疫功能。飼料中含有一定量的維生素C，雞的肝和腎也能合成維生素C，因此是否需要給雞的飼料或飲水中添加維生素C，多少年來(lái)一直是一個(gè)有爭(zhēng)議的問(wèn)題，而且試驗(yàn)結(jié)果往往是相互矛盾的，目前尚未將維生素C列入雞的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)和雞的必要維生素[1]。雞自身雖然能合成維生素C，但在某些生長(zhǎng)、生產(chǎn)階段和高產(chǎn)品種條件下不能滿足其生長(zhǎng)和生產(chǎn)的需要，在雞日糧中添加一定量的維生素C是有必要的。維生素C作為一種抗氧化劑，第一，自由基常常攻擊生物膜的多鏈不飽和酸，引發(fā)一系列自由基連鎖反應(yīng)，使生物膜的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變，但正常機(jī)體內(nèi)的抗氧化防御系統(tǒng)在不同環(huán)節(jié)上阻斷自由基反應(yīng)。維生素c和自由基發(fā)生反應(yīng)，減少自由基濃度從而避免細(xì)胞膜的破壞，維生素c保護(hù)免疫系統(tǒng)淋巴細(xì)胞，使得免疫細(xì)胞及時(shí)產(chǎn)生免疫反應(yīng)，避免反應(yīng)推遲，減少雞的急性死亡[2]:第二，維生素C可限制機(jī)體在熱應(yīng)激時(shí)腎上腺類(lèi)固醇的過(guò)量分泌，抑制環(huán)腺甘酸含量的增加，保護(hù)免疫功能，降低不良免疫反應(yīng)，一種解釋?zhuān)簾釕?yīng)激改變了內(nèi)分泌機(jī)能的正常狀態(tài)，使甲狀腺功能異常，促甲狀腺素分泌量改變，血漿中促腎上腺皮質(zhì)激素顯著增加，另有一種解釋?zhuān)簾釕?yīng)激使甲狀腺素利用受阻，使機(jī)體對(duì)甲狀腺素的產(chǎn)生造成反饋抑制作用所致[3]。第三，維生素c 參與皮質(zhì)激素-類(lèi)固醇激素的合成，類(lèi)固醇激素的功能是體內(nèi)能量以維持生命功能，最主要的是維持體溫[4]。維生素c是血液中最有用的抗氧化劑，是細(xì)胞外液抗氧化系統(tǒng)的第一道防線，對(duì)血漿中正在進(jìn)行的脂質(zhì)過(guò)氧化作用有阻斷作用。維生素c作為自由基清除劑可以很快的與超氧陰離子自由基和過(guò)氧化氫反應(yīng)，更快的與羥氧化基反應(yīng)形成抗壞血酸自由基，他可以清除單線態(tài)氧，從而保護(hù)集體免受內(nèi)源性氧自由基的損害[5]。
　　雞新城疫(Newcastle Disease)是危害養(yǎng)雞業(yè)的主要雞病之一。新城疫(ND)，又稱亞洲雞瘟，偽雞瘟等，是一種急性、高度接觸性傳染病。典型新城疫特征為發(fā)病急，呼吸困難，頭冠紫黑，下痢，泄殖腔出血、壞死，腺胃乳頭、腺胃和肌胃交界處以及十二指腸出血，慢性病例常有呼吸道癥狀或神經(jīng)癥狀。 國(guó)際獸疫局( OIE) 將其列為 A 類(lèi)疫病, 我國(guó)其列為一類(lèi)動(dòng)物疫病。它在世界范圍內(nèi)出現(xiàn)了幾次大流行, 造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。雖然雞新城疫病毒僅有一個(gè)血清型, 但不同毒株生物學(xué)特性和毒力相差很大。世界各國(guó)對(duì)ND 的研究已有 60 多年的歷史, 廣泛使用各種疫苗進(jìn)行免疫也有 30 多年的歷史。我國(guó)1935年發(fā)現(xiàn)雞新城疫, 現(xiàn)在全國(guó)范圍內(nèi)普遍存在, 并且是我國(guó)養(yǎng)雞業(yè)危害最大、經(jīng)濟(jì)損失最重的禽病之一。雖然已投入了大量的人力、物力來(lái)研究雞新城疫各方面的問(wèn)題, 并采取了普遍預(yù)防接種和其他綜合性防制措施, 取得了明顯的經(jīng)濟(jì)效益, 已大大減少該病所造成損失, 但是雞新城疫仍然是我國(guó)家禽的頭號(hào)疫病( 在我們西部邊疆民族地區(qū)更是如此)[7] 。
　　本試驗(yàn)一是為了驗(yàn)證維生素C是否能增強(qiáng)雞新城疫免疫性能，探求添加多少維生素C，免疫效果較好。二是通過(guò)增加不同量的維生素C情況下測(cè)定新城疫抗體效價(jià)以及脾臟、胸腺、法氏囊等臟器指數(shù)的變化，進(jìn)一步探討維生素C對(duì)雞免疫器官及對(duì)免疫應(yīng)答的影響。本次實(shí)驗(yàn)主要目的在于研究 vc對(duì)蛋雞新城疫抗體效價(jià)的影響，以便vc在蛋雞飼養(yǎng)中的應(yīng)用提供依據(jù)。
　　1材料與方法
　　1.1材料
　　1.1.1試驗(yàn)動(dòng)物及飼料：
　　60只49日齡海蘭賀蛋雞，購(gòu)于太古縣某雞場(chǎng),飼料由正大提供
　　1.1.2試驗(yàn)疫苗：
　　雞新城疫Ι系苗，雞新城疫Ⅳ系疫苗，由黑龍江省生物制品廠生產(chǎn)
　　1.1.3試驗(yàn)儀器：
　　50ul定量移液器，移液槍?zhuān)x心機(jī)，高壓鍋，一次性注射器(2.5ml)，PC管，96孔型微量反應(yīng)板，電子天平
　　1.1.4試驗(yàn)所需藥品：
　　3.5%檸檬酸鈉溶液，0.9%NaCl氯化鈉溶液，粉劑維生素C(華北制藥)
　　1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)：
　　從49日齡海蘭賀蛋雞中挑選出重量接近的60只試驗(yàn)雞，隨機(jī)分成五組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)3只雞。試驗(yàn)從56日齡開(kāi)始至84日齡結(jié)束。五組分為A、B、C、D、E組，A組為對(duì)照組，B組為模型組， B組為注射疫苗+0㎎/㎏維生素C，C組為注射疫苗+200㎎/㎏維生素C，D組為注射疫苗+400㎎/㎏維生素C，E組為注射疫苗+800㎎/㎏維生素C。
　　1.3試驗(yàn)內(nèi)容與方法：
　　1.3.1內(nèi)容：
　　從49日齡喂基礎(chǔ)日糧，與56日齡對(duì)B、C、D、E組頸部皮下注射新誠(chéng)疫疫苗Ι系苗1ml，同時(shí)分別在其各組基礎(chǔ)日梁中添加0㎎/㎏、200㎎/㎏、400㎎/㎏、800㎎/㎏的維生素C，自由飲水，每天喂3次。在注射后第7天(即63日齡)，第14天(即70日齡)，第21天(即77日齡)，第28天(即84日齡)分別從A、B、C、D、E各組中隨機(jī)抽取三只先稱其重量，后心臟采血2ml，將注射器傾斜靜置析出血清，分離血清裝入PC管置-20℃冰箱冷凍備用。按常規(guī)方法致死，分離并測(cè)定脾臟、胸腺、法氏囊的重量，計(jì)算臟器指數(shù)(免疫器官指數(shù)=免疫器官濕重(㎎)/體重(㎏))[5]
　　1.3.2各種成分制備
　　1.3.2.1 四個(gè)血凝單位病毒抗原的制備：
　　可用新城疫Ⅳ系苗作抗原，測(cè)定其HA效價(jià)，據(jù)此配成四個(gè)血凝單位病毒抗原，然
　　裝小瓶備用
　　1.3.2.2 1%紅細(xì)胞懸液制備：
　　先用滅菌注射器吸取3.8%檸檬酸鈉溶液(其量為所需血液量的1/5)，取一只健康雞，心臟采血到需要血量，置滅菌離心管內(nèi)，加滅菌生理鹽水為抗凝血的2倍，以2000r/min離心10min，棄上清夜，把著附于紅細(xì)胞間和上清夜間的白細(xì)胞去掉，再加生理鹽水懸浮血球，同上法離心沉淀，如此將紅細(xì)胞洗滌3-5次，最后根據(jù)所需用量，用滅菌生理鹽水配成1%懸液。
　　1.3.2.3 稀釋液制備：
　　用固體NaCl和雙蒸水配成0. 9%的生理鹽水，高壓滅菌后備用
　　1.3.2.4 抗凝劑：
　　用固體檸檬酸鈉和雙蒸水配成3.8%的檸檬酸鈉100ml，高壓滅菌后備用
　　1.3.3 雞新城疫病毒的HA試驗(yàn)(β-微量法)[6]，如表1
　　1.3.3.1　用50 uL 定量移液器在1～ 12 孔內(nèi)各加稀釋液50ul。
　　1.3.3.2　用50 ul 定量移液器取病毒液50ul放入第1 孔內(nèi), 混勻, 而后從第1 孔內(nèi)用50 uL 定量移液器取50ul放入第2 孔內(nèi), 混勻后取50ul放入第3 孔內(nèi), 如此類(lèi)推直至第11 孔。第11 孔混勻后棄去50ul。第12 孔為對(duì)照孔, 不加病毒液。則病毒稀釋倍數(shù)依次為1∶2～ 1∶2 048。
　　1.3.3.3　用50uL 定量移液器取1% 雞紅細(xì)胞懸液, 每孔各加50ul。
　　1.3.3.4　把反應(yīng)板放在振蕩器上振蕩混勻約3～ 5m in, 再置18～ 22℃室溫環(huán)境中, 60 min 后觀察結(jié)果; 或置于37℃恒溫箱內(nèi), 30 m in 后觀察結(jié)果。
　　1.3.3.5結(jié)果觀察：
　　將微量反應(yīng)板傾斜成30°-45°, 沉于管底的紅細(xì)胞沿著傾斜面向下呈線狀流動(dòng)者為沉淀, 表明紅細(xì)胞未被或不完全被病毒凝集; 如果孔底的紅細(xì)胞鋪平孔底, 凝成均勻薄層, 傾斜后紅細(xì)胞不流動(dòng),說(shuō)明紅細(xì)胞被病毒所凝集。
　　表1 血細(xì)胞凝集(HA)試驗(yàn)
　　孔號(hào) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
　　病毒 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 1:512 1:1024 1:2084 血細(xì)胞
　　稀釋度 對(duì)照
　　生理鹽 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50
　　(ul)
　　病毒 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 棄去50
　　1%雞 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50
　　細(xì)胞(ul)
　　37℃ 15—30min
　　判定結(jié)果 # # # # # # # +++ ++ + ---- ----
　　注：#表示完全凝集，+表示不完全凝集，--表示不凝集
　　1.3.4 雞新城疫病毒的HI試驗(yàn)(β-微量法)[6]，如表2
　　新城疫病毒凝集紅細(xì)胞的作用能被特異性抗體所抑制, 因此可用HI 試驗(yàn)測(cè)定雞血清中的HI 抗體效價(jià)。
　　1.3.4.1　用50 uL 定量移液器每孔各加50ul稀釋液, 從第1 孔至第10 孔, 第11 孔為4單位病毒液50ul, 第12 孔為血清50ul作為對(duì)照。
　　1.3.4.2　用50 uL 定量移液器取血清50ul, 放入第1 孔, 混勻后移50ul至第2 孔, 第2 孔混勻后移50ul至第3 孔。如此連續(xù)稀釋至第10 孔, 從第10 孔取50ul棄去。
　　1.3.4.3　用50 uL 定量移液器取四單位病毒液, 1～ 11 孔每孔各加50ul，第12孔加50ul血清,輕輕振蕩，混勻置37℃溫箱作用15-30min
　　1.3.4.4　用50 uL 定量移液器1% 雞紅細(xì)胞懸液, 每孔各加1 滴。
　　1.3.4.5　把微量反應(yīng)板放在振蕩器上振蕩3～ 5 m in后, 置于37～ 38℃恒溫箱內(nèi), 30m in 后觀察結(jié)果。
　　1.3.4.6 結(jié)果：
　　將微量反應(yīng)板傾斜成30°-45°, 沉于管底的紅細(xì)胞沿著傾斜面向下呈線狀流動(dòng)者為沉淀, 表明紅細(xì)胞未被或不完全被病毒凝集; 如果孔底的紅細(xì)胞鋪平孔底, 凝成均勻薄層, 傾斜后紅細(xì)胞不流動(dòng),
　　表2 血細(xì)胞抑制凝集(HI)試驗(yàn) 單位:n㏒2
　　孔號(hào) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
　　病毒 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 1:512 1:1024 病毒 血細(xì)胞
　　稀釋度 對(duì)照 對(duì)照
　　生理鹽 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50
　　(ul)
　　新城疫 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 棄去50 50
　　抗體(ul)
　　4單位 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50
　　病毒(ul)
　　37℃ 15—30min
　　1%雞紅 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50
　　細(xì)胞(ul)
　　注：#表示完全凝集，+表示不完全凝集，--表示不凝集
　　2 結(jié)果：
　　2.1 維生素C對(duì)蛋雞HI的影響，見(jiàn)表3，圖1
　　表3 添加不同量維生素C對(duì)血清中抗體HI效價(jià)的影響 單位:n㏒2[table=98%]
[tr][td=1,1,4%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt] [/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]組別[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第7天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第14天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第21天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第28天[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,4%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]A[/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]對(duì)照組[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.0[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.0a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.4[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.3a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.4[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.2a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.6[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.1a[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,4%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc0[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]6.0[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.4b[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]6.3[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.2bA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]6.6[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.1bA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]7.7[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.3bA[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,4%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]C[/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc200[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]7.6[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.2c[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]7.6[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.4cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]7.8[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.5cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]8.1[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.2bA[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,4%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]D[/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc400[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]7.6[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.3c[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]8.7[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.2B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]8.8[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.3B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]8.9[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.1B[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,4%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]E[/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc800[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]7.8[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.2c[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]7.5[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.1cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]7.8[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.1cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]8.1[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.3bA[/size][/font][/p][/td][/tr]
[/table]
　　注：表中數(shù)據(jù)肩注大寫(xiě)字母不同表示差異極顯著(P<0.01)，小寫(xiě)字母不同表示差異顯著(P<0.05),大小寫(xiě)字母相同或不標(biāo)字母差異不顯著(P<0.05).
　　圖1 不同量Vc對(duì)HI的影響
　　蛋雞接種雞新城疫疫苗后，HI逐漸升高。第3，4周達(dá)到高峰。從表中得出，B組與A組比四周內(nèi)都差異顯著(P<0.05);第7天，C、D、E組與B組比差異顯著(P<0.05);第14、21中，C、E與B比差異顯著(P<0.05)、D與B比差異極顯著(P<0.01);28天，C、E與B差異不顯著(P>0.05)， D組與B組比差異極顯著(P<0.01)。
　　2.2 維生素C對(duì)蛋雞脾臟指數(shù)的影響，見(jiàn)表4
　　表4 添加不同量維生素C對(duì)脾臟指數(shù)的影響 單位：mg/㎏[table=98%]
[tr][td=1,1,11%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt] [/size][/font][/p][/td][td=1,1,14%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]組別[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第7天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第14天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第21天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第28天[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,11%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]A[/size][/font][/p][/td][td=1,1,14%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]對(duì)照組[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]1.96[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.12a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.153[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.25a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.318[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.36a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.795[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.45a[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,11%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,14%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc0[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.108[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.54bA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.234[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.24bA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.464[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.78bA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.909[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.25bA[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,11%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]C[/size][/font][/p][/td][td=1,1,14%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc200[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.44[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.36cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.418[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.05cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.717[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.29cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.108[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.69bA[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,11%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]D[/size][/font][/p][/td][td=1,1,14%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc400[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.679[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.43cB[/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.943[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.23B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.256[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.25B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.665[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.52B[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,11%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]E[/size][/font][/p][/td][td=1,1,14%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc800[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.470[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.65cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.504[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.12cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.844[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.31cdA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.103[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.58bA[/size][/font][/p][/td][/tr]
[/table]
　　注：表中數(shù)據(jù)肩注大寫(xiě)字母不同表示差異極顯著(P<0.01)，小寫(xiě)字母不同表示差異顯著(P<0.05),大
　　寫(xiě)字母相同或不標(biāo)字母差異不顯著(P<0.05).
　　圖1 不同量Vc對(duì)脾臟指數(shù)的影響
　　隨著雞的成長(zhǎng)，體重增加，脾臟逐漸增大，脾臟指數(shù)逐漸增加。B組與A組比四周內(nèi)都差異顯著(P<0.05);第7，14，21天，C、E組與B組比差異顯著(P<0.05)，D與B比差異極顯著(P<0.01);28天，C、E與B差異不顯著(P>0.05)， D組與B組比差異極顯著(P<0.01)。
　　2.3 維生素C對(duì)蛋雞胸腺指數(shù)的影響，見(jiàn)表5
　　表5 添加不同量維生素C對(duì)胸腺指數(shù)的影響 單位：mg/㎏[table=98%]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt] [/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]組別[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第7天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第14天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第21天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,19%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第28天[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]A[/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]對(duì)照組[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]5.174[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.13a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]5.234[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.65a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.845[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.21a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,19%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]1.997[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.49a[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc0[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]5.385[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.38bA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]5.451[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.33bA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.074[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.58bA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,19%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.303[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.12b[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]C[/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc200[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]5.774[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.21cB[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]5.862[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.24cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.417[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.46cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,19%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.661[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.32c[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]D[/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc400[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]6.103[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.13cB[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]6.282[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.09B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.859[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.41B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,19%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.748[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.21c[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]E[/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc800[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]6.165[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.45cB[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]5.674[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.21cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.495[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.31cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,19%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.541[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.26c[/size][/font][/p][/td][/tr]
[/table]
　　注：表中數(shù)據(jù)肩注大寫(xiě)字母不同表示差異極顯著(P<0.01)，小寫(xiě)字母不同表示差異顯著(P<0.05),大
　　寫(xiě)字母相同或不標(biāo)字母差異不顯著(P<0.05).
　　圖2 不同量Vc對(duì)胸腺指數(shù)的影響
　　隨著雞的成長(zhǎng),體重增加,胸腺先增加后減小，胸腺指數(shù)先增加后減小。B組與A組比四周內(nèi)都差異顯著(P<0.05);第7天，C、D、E組與B組比差異極顯著(P<0.01)，第14、21中，C、E與B比差異顯著(P<0.05)、D與B比差異極顯著(P<0.01);28天，C、D、E與B差異顯著(P<0.05) 。
　　2.4 維生素C對(duì)蛋雞法氏囊指數(shù)的影響，見(jiàn)表6
　　表6 添加不同量維生素C對(duì)法氏囊指數(shù)的影響 單位：mg/㎏[table=98%]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt] [/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]組別[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第7天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第14天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第21天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第28天[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]A[/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]對(duì)照組[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.004[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.35a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.493[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.21a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.044[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.49a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.086[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.56a[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc0[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.247[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.38b[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.493[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.22bA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.285[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.25bA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.217[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.23bA[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]C[/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc200[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.433[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.32c[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.493[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.23cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.678[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.36cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.417[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.38bA[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]D[/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc400[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.598[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.71c[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.493[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.24B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.021[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.47B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.841[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.41B[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]E[/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc800[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.671[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.57c[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.493[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.25cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.712[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.25cdA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.54[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.42bA[/size][/font][/p][/td][/tr]
[/table]
　　注：表中數(shù)據(jù)肩注大寫(xiě)字母不同表示差異極顯著(P<0.01)，小寫(xiě)字母不同表示差異顯著(P<0.05),大
　　寫(xiě)字母相同或不標(biāo)字母差異不顯著(P<0.05).
　　圖3 不同量Vc對(duì)法氏囊指數(shù)的影響
　　隨著雞的成長(zhǎng),體重增加,法氏囊先增加后減小，法氏囊指數(shù)先增加后減小。 B組與A組比差異顯著(P<0.05)。第7天，C、D、E組與B組比異顯著(P<0.05)，第14、21、28天中D、E與B比差異顯著(P<0.05)， D組與B組比差異極顯著(P<0.01); 14、21中，C、E與B比差異顯著(P<0.05)、D與B比差異極顯著(P<0.01);第28天，C、E與B比差異不顯著(P<0.05)、D與B比差異極顯著(P<0.01)
　　3討論
　　3.1 維生素C對(duì)雞新城疫HI效價(jià)的影響
　　從表3看出，B與A差異顯著，表明接種雞新城疫Ⅰ系苗與不接種疫苗比可提高HI滴度水平，增強(qiáng)機(jī)體免疫力。免疫后第7天Vc200mg/kg、Vc400mg/kg，Vc800mg/kg添加組顯著高于模型組Vc0mg/kg(p<0.05)，表明添加添加維生素C可提高HI滴度水平，第14、21天Vc400mg/kg添加組極顯著高于模型組Vc0mg/kg，，表明400mg/kg Vc可延長(zhǎng)HI值高峰期，這與盛清凱等所得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相一致[8]。
　　3.2 維生素C對(duì)免疫器官等臟器指數(shù)的影響
　　在生物醫(yī)學(xué)研究中組織形態(tài)學(xué)及臟器重量、臟器指數(shù)也是衡量動(dòng)物功能的重要指標(biāo)，尤其是臟器重量和體積是一個(gè)重要的觀察指標(biāo)。動(dòng)物主要臟器重量和臟器指數(shù)動(dòng)物慢性實(shí)驗(yàn)指定測(cè)驗(yàn)項(xiàng)目。根據(jù)臟器重量、臟器指數(shù)可以判定內(nèi)臟器官病變的性質(zhì)和程度，所以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物臟器重量、臟器指數(shù)是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中常用的重要基礎(chǔ)數(shù)據(jù)[9]。
　　通常認(rèn)為雞的免疫系統(tǒng)分為三個(gè)系統(tǒng)，即體液免疫系統(tǒng)、分泌系統(tǒng)及細(xì)胞免疫系統(tǒng)。體液和分泌免疫系統(tǒng)又屬于腔上囊(B細(xì)胞)依賴系統(tǒng)，而細(xì)胞免疫系統(tǒng)為胸腺(T細(xì)胞)依賴系統(tǒng)，腔上囊(法式囊)是一個(gè)重要的中樞免疫器官，為禽類(lèi)所特有，他對(duì)體液免疫的形成和功能具有特別的重要作用，法氏囊是禽類(lèi)B淋巴細(xì)胞的發(fā)源地，在B淋巴細(xì)胞成熟過(guò)程中起著非常重要的作用。脾臟為外周免疫器官，在體液免疫中發(fā)揮重要作用;在捕獲和處理抗原方面具有重要作用。胸腺為中樞免疫器官是T淋巴細(xì)胞成熟分化的場(chǎng)所;脾臟、胸腺、法式囊能反映免疫器官發(fā)育和免疫細(xì)胞功能狀況，間接反映了機(jī)體的免疫水平[10]。
　　3.2.1維生素C對(duì)脾臟發(fā)育的影響：
　　從表4得出，四周B組都顯著高于A組，表明接種雞新城疫系苗可促進(jìn)脾臟的生長(zhǎng)發(fā)育。免疫后第7、14、21天，Vc200mg/kg、Vc800mg/kg添加組顯著高于模型組Vc0mg/kg(p<0.05)，免疫后第7、14、21、28天Vc400mg/kg添加組極顯著高于模型組Vc0mg/kg，，表明添加Vc可促進(jìn)脾臟的生長(zhǎng)發(fā)育，其中Vc400mg/kg添加組與Vc200mg/kg、Vc800mg/kg添加組比更能促進(jìn)脾臟的發(fā)育，這正與討論3.1得出的結(jié)論相吻合。
　　3.2.2維生素C對(duì)胸腺發(fā)育的影響：
　　從表5得出，四周內(nèi)B組都顯著高于A組，表明接種雞新城疫系苗可促進(jìn)脾臟的生長(zhǎng)發(fā)育。免疫后第7、14、21、28天，Vc200mg/kg、Vc400mg/kg，Vc800mg/kg添加組顯著或極顯著高于模型組Vc0mg/kg(p<0.05)，說(shuō)明添加Vc可促進(jìn)胸腺的發(fā)育。由于胸腺是機(jī)體T淋巴細(xì)胞發(fā)育地方，本實(shí)驗(yàn)中添加200mg/kg、400mg/kg，800mg/kgVc都能促進(jìn)胸腺的發(fā)育，從而延緩胸腺的萎縮，維持機(jī)體特異與非特異免疫功能。
　　3.2.3維生素C對(duì)法氏囊發(fā)育的影響：
　　從表6得出，四周B組都顯著高于A組，表明接種雞新城疫系苗可促進(jìn)法氏囊的生長(zhǎng)發(fā)育。免疫后第7、14、21天，Vc200mg/kg、Vc800mg/kg添加組顯著高于模型Vc0mg/kg(p<0.05)，14、21、28天Vc400mg/kg添加組極顯著高于模型組Vc0mg/kg，表明添加Vc可促進(jìn)脾臟的生長(zhǎng)發(fā)育，其中Vc400mg/kg添加組效果較好。由于法氏囊是禽類(lèi)B淋巴細(xì)胞發(fā)育成熟的地方，本試驗(yàn)也證明添加Vc能影響法氏囊的發(fā)育，促進(jìn)B淋巴細(xì)胞的生長(zhǎng)，從而提高抗體水平。
　　4 結(jié)論：
　　本試驗(yàn)驗(yàn)證了在飼料中添加Vc可提高機(jī)體抗體效價(jià)，增強(qiáng)免疫力，其中添加400mg/kg產(chǎn)生的效果較好;同時(shí)也會(huì)促進(jìn)脾臟、胸腺、法氏囊等免疫器官的發(fā)育，從而通過(guò)體液免疫和細(xì)胞免疫兩種途徑增強(qiáng)機(jī)體抵抗力。
　　近年來(lái)，人們發(fā)現(xiàn)添加某些成份對(duì)機(jī)體免疫功能的調(diào)節(jié)有劑量依賴性，表現(xiàn)為小劑量(或低濃度)促進(jìn)機(jī)體免疫功能，大劑量(高濃度)抑制機(jī)體免疫功能[10]。本實(shí)驗(yàn)由于時(shí)間和其他方面的因素，更大劑量的維生素C對(duì)動(dòng)物機(jī)體免疫是否有抑制作用，還有待進(jìn)一步研究。
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　　作者簡(jiǎn)介：孟翠紅，女，運(yùn)城農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院 教師, 在山西農(nóng)業(yè)大學(xué)功讀碩士研究生 ， 從事動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)方面的研究與教學(xué)。Email:mengcuihong88@hotmail.com
　　通訊地址：運(yùn)城農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院 運(yùn)城市紅旗東街46號(hào) 郵編：044000
　　樊麗軍：男，2004年畢業(yè)于山西農(nóng)業(yè)大學(xué)，動(dòng)物科學(xué)專(zhuān)業(yè)，現(xiàn)在山西省晉城市沁水縣畜牧局從事本專(zhuān)業(yè)工作。

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