肉仔雞對(duì)不同錳源生物學(xué)效價(jià)的研究

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　　肉仔雞對(duì)不同錳源生物學(xué)效價(jià)的研究

　　李軍，湯莉(信陽(yáng)農(nóng)業(yè)高等?？茖W(xué)校，河南信陽(yáng)，464000)

　　[摘 要] 目的：試驗(yàn)用1日齡AVAINS肉仔雞200只研究不同錳源的生物學(xué)效價(jià)。試驗(yàn)采用3×3因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，3種錳源分別為硫酸錳、乙酸錳和酵母錳。在玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧(對(duì)照組)的基礎(chǔ)上分別添加60、120、180mg/kg錳構(gòu)成試驗(yàn)日糧，試驗(yàn)共10理，每個(gè)處理4個(gè)重復(fù)。試驗(yàn)期為21天，自由采食和飲水。結(jié)果：在本試驗(yàn)條件下，試驗(yàn)組各組錳源日糧錳源對(duì)肉仔雞生產(chǎn)性能、心肌、肝臟、腎臟、脛骨錳含量以及心肌MnSOD活力影響不顯著。日糧中添加酵母錳由改善肉仔雞生產(chǎn)性能的趨勢(shì)。隨日糧錳水平的增加，肉仔雞生產(chǎn)性能沒(méi)有表現(xiàn)出規(guī)律性變化，心肌、肝臟、腎臟及脛骨錳含量極顯著增加，而血紅蛋白含量顯著降低。結(jié)論：利用斜率比法，不同判據(jù)指標(biāo)得到的乙酸錳和酵母錳的相對(duì)生物學(xué)效價(jià)不同;綜合考慮本試驗(yàn)獲得的回歸方程的顯著性和日糧錳水平對(duì)各測(cè)定指標(biāo)的影響，本次試驗(yàn)所測(cè)指標(biāo)均可以作為適合本試驗(yàn)條件的評(píng)價(jià)不同錳源生物學(xué)利用率指標(biāo)。
　　關(guān)鍵詞： 硫酸錳 乙酸錳 酵母錳 生物學(xué)效價(jià)
　　生物學(xué)效價(jià)指吸收后的營(yíng)養(yǎng)素中能被動(dòng)物利用的比例①。這一概念反映的是所有影響營(yíng)養(yǎng)與吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)、貯存和排泄的因素(日糧和非日糧的)綜合效應(yīng)②。自從Black(1984)③ 首次采用斜率比法，在錳缺乏或不足的飼糧中添加不同水平的錳，然后通過(guò)測(cè)定不同錳水平的反應(yīng)，在飼糧錳與反應(yīng)指標(biāo)間建立回歸模式，以某種錳源斜率為100%，而將其它錳源的斜率與之相比進(jìn)行測(cè)定。此法來(lái)測(cè)定不同錳源間生物學(xué)利用率取得成功，創(chuàng)立了錳源生物學(xué)效價(jià)的生物學(xué)評(píng)定體系，并得到了廣泛應(yīng)用。
　　前人評(píng)價(jià)有機(jī)錳源利用率時(shí)多以骨灰錳濃度為指標(biāo)④⑤。本研究在實(shí)用日糧的基礎(chǔ)上添加各種錳源，利用斜率比法來(lái)測(cè)定不同錳源間的生物學(xué)利用率，旨在觀察飼糧添加不同形態(tài)錳源及錳水平對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能、組織錳濃度和心肌細(xì)胞線粒體中MnSOD活性，為研制新型高效錳添加劑提供試驗(yàn)數(shù)據(jù)。
　　1. 材料和方法
　　1.1 動(dòng)物與飼糧
　　采用3×3兩因子完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，3種錳源分別為硫酸錳、乙酸錳和酵母錳。根據(jù)前人的研究結(jié)果報(bào)道，肉仔雞玉米-豆粕型飼糧中錳的需要量為120mg/kg⑥，而設(shè)0、60、120、180 mg/kg4個(gè)添加錳水平，共組成10個(gè)組(1個(gè)對(duì)照組，9個(gè)處理組)，每個(gè)處理4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5只雞。
　　將200只1日齡健康A(chǔ)VAIN肉仔雞隨機(jī)分成10個(gè)組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5只雞，飼養(yǎng)于一個(gè)不銹鋼鍍塑肉雞籠內(nèi)，試驗(yàn)時(shí)間從2003.7.4～25日，試驗(yàn)開(kāi)始前對(duì)雞舍、雞籠、水槽和料槽進(jìn)行消毒，按免疫程序進(jìn)行免疫。自由采食和飲水，第三周末以重復(fù)籠為單元稱雞空腹體重和耗料量。
　　1.2 基礎(chǔ)日糧組成
　　參照美國(guó)NRC家禽營(yíng)養(yǎng)需要量中0~3周齡肉仔雞營(yíng)養(yǎng)建議量配制玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧(表1)。
　　表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平
　　Table1.Composition and Nutrition level of experimental diets
　　
　　基礎(chǔ)日糧中錳的含量為實(shí)測(cè)值。其它微量元素每公斤基礎(chǔ)日糧的添加量分別為:
　　Fe(以FeSO4.7H2O形式):80mg; Zn(以ZnSO4.7H2O形式):40mg; Cu(以CuSO4.5H2O形式):8mg
　　1.3 樣品的采集與制備
　　21日齡次日晨空腹稱重，從每個(gè)重復(fù)的雞心臟采血，肝素抗凝，制備血漿。然后屠宰，立即取出心、肝、腎、脛骨，用生理鹽水沖洗數(shù)次，濾紙吸干后，放入標(biāo)號(hào)自封塑料袋中，心肌-80℃液氮凍存，以備分析心肌錳含量和心肌細(xì)胞線粒體中MnSOD活性。其他組織和血漿 -20℃凍存，以備分析。
　　1.4 樣品的分析
　　飼糧及組織含錳量的測(cè)定：飼糧、脛骨灰、心肌以及其它組織器官均用濃硝酸和濃鹽酸干法消化，用WFX-IE2型原子吸收分光光度計(jì)測(cè)定其中的含錳量。
　　心肌細(xì)胞線粒體中MnSOD活性的測(cè)定：采用黃嘌呤氧化酶法測(cè)定超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase SOD)活力。每毫升反應(yīng)液中SOD抑制率達(dá)50%時(shí)所對(duì)應(yīng)的SOD量為一個(gè)亞硝酸單位(UN)。
　　1.5 測(cè)定項(xiàng)目
　　試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)以組為單位體重，結(jié)束時(shí)逐只稱重，并稱取剩余飼料末重，以此來(lái)計(jì)算平均日增重、平均采食量和飼料轉(zhuǎn)化效率等，以此來(lái)評(píng)定不同錳源和錳水平對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響。
　　試驗(yàn)結(jié)束時(shí)屠宰取樣，測(cè)定血紅蛋白含量、肝臟、心肌、腎臟、脛骨錳濃度以及心肌MnSOD活力。
　　1.6 數(shù)據(jù)整理和統(tǒng)計(jì)分析
　　用SAS軟件中GLM程序?qū)λ性囼?yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，差異顯著者，以LSD法比較平均數(shù)間的差異顯著性;以現(xiàn)行的多元線性回歸斜率比法計(jì)算有機(jī)錳源相對(duì)于硫酸錳的生物學(xué)利用率。
　　2 結(jié) 果 與 討 論
　　2.1 不同錳源和錳水平對(duì)肉仔雞生產(chǎn)性能的影響
　　肉仔雞生產(chǎn)性能的試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。不同錳源對(duì)肉仔雞各項(xiàng)生產(chǎn)性能指標(biāo)影響均不顯著(P>0.05);但從采食量看，酵母錳組高于硫酸錳組和乙酸錳組。從日增重看，對(duì)照組與其他兩個(gè)試驗(yàn)組均顯著低于日糧中添加了180mg/kg錳的處理組(P<0.05)，其它各處理組之間差異不顯著(P>0.05)。從采食量來(lái)看，對(duì)照組與其它處理組相比差異顯著(P<0.05)，而處理組之間比較差異不顯著(P>0.05);在飼料轉(zhuǎn)化效率方面，對(duì)照組以及各處理組之間差異都不顯著(P>0.05)。但由表2可見(jiàn)，隨日糧錳水平的增加，肉仔雞采食量和日增重沒(méi)有出現(xiàn)規(guī)律性變化，飼料轉(zhuǎn)化效率呈現(xiàn)出上升趨勢(shì)。本次試驗(yàn)生產(chǎn)性能的結(jié)果與前人⑦的結(jié)果一致，即飼喂不同錳源肉仔雞的生長(zhǎng)性能影響不顯著(P>0.05)。
　　表2 不同錳源和錳水平對(duì)肉仔雞生產(chǎn)性能的影響
　　Table2.Effect of manganese source and level on growth performance in broiler chicks
　　
　?、俦碇袛?shù)據(jù)為M±SD,下同;②錳源顯著性指3種錳源之間比較，下同;③水平顯著性指4個(gè)錳添加水平之間比較，下同;④字母相同者差異不顯著，大寫字母顯著水平為0.01，小寫字母為0.05，下同。
　　2.2 不同錳源和錳水平對(duì)肉仔雞心肌錳含量、心肌細(xì)胞線粒體中MnSOD活性的影響
　　由表3可見(jiàn)，不同錳源對(duì)肉仔雞心肌錳濃度影響不顯著(P>0.05)，不同錳水平對(duì)肉仔雞心肌錳有極顯著影響(P<0.01),心肌錳濃度隨日糧錳水平的增加而增加;心肌錳含量與飼糧添加錳間擬合的多元線性歸方程為：
　　Y=0.243X1+0.235 X2+0.244 X3+1.733(p<0.01,R=0.999)
　　其中Y為心肌含錳量(ug/g dry wt),X1、X2、X3分別為硫酸錳、乙酸錳、酵母錳的飼糧添加錳進(jìn)食量mg/(Capta﹒d)。
　　如以硫酸錳中錳的利用率為100%，則乙酸錳、酵母錳兩種有機(jī)錳源的生物學(xué)利用率分別為96.71%、100.41%,其中酵母錳的生物學(xué)利用率高于硫酸錳，但乙酸錳的生物學(xué)利用率低于硫酸錳。
　　不同錳源對(duì)21日齡肉仔雞心肌細(xì)胞線粒體中MnSOD活性影響不顯著(P>0.05)，但在日糧中添加60mg/kg、120mg/kg和180mg/kg錳的各個(gè)處理組與對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05)，而各處理組間差異不顯著(P>0.05)，心肌MnSOD的活力隨飼糧添加錳水平的升高有上升的趨勢(shì)。心肌細(xì)胞線粒體中MnSOD活性與飼糧添加錳間擬合的多元線性歸方程為：
　　Y=0.834 X1+0.548 X2+1.004 X3+34.901
　　其中Y為心肌細(xì)胞線粒體中MnSOD活性,X1、X2、X3分別為硫酸錳、乙酸錳、酵母錳的飼糧添加錳進(jìn)食量mg/(Capta﹒d)。
　　如以硫酸錳中錳的利用率為100%，則乙酸錳、酵母錳兩種有機(jī)錳源的生物學(xué)利用率分別為65.71%、120.38%,其中酵母錳的生物學(xué)利用率顯著高于硫酸錳，但乙酸錳的生物學(xué)利用率低于硫酸錳。
　　錳作為金屬輔基為MnSOD活性所必需，缺錳可明顯降低動(dòng)物組織中MnSOD的活性。羅緒剛[8]等發(fā)現(xiàn)，肉仔雞實(shí)用玉米-豆粕型飼糧中添加錳明顯提高心肌細(xì)胞線粒體中MnSOD活性，而肝和胰中MnSOD活性無(wú)明顯變化;心肌細(xì)胞線粒體中MnSOD活性的顯著降低進(jìn)而導(dǎo)致心肌細(xì)胞內(nèi)的線粒體超微結(jié)構(gòu)明顯異常、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)明顯擴(kuò)張，表明心肌細(xì)胞線粒體中活性是評(píng)價(jià)肉仔雞錳營(yíng)養(yǎng)狀況及錳營(yíng)養(yǎng)需要的特異性敏感指標(biāo)。李素芬[9]報(bào)道MnSOD活性隨飼糧添加錳水平升高而升高，不同錳源對(duì)心肌細(xì)胞線粒體中MnSOD活性影響不顯著。本次試驗(yàn)與此結(jié)果相一致。考慮表3描述的各項(xiàng)指標(biāo)隨日糧錳水平的變化情況和建立的線性方程的相關(guān)系數(shù)、顯著性，心肌MnSOD活力可以作為本次試驗(yàn)反映肉仔雞對(duì)不同錳源間生物學(xué)利用率差異的指標(biāo)。
　　2.3 不同錳源和錳水平對(duì)肉仔雞脛骨灰錳含量的影響
　　由表3可見(jiàn)，脛骨灰錳，不同錳源對(duì)肉仔雞脛骨灰錳含量影響不顯著(P>0.05)，不同錳水平對(duì)脛骨錳影響極顯著(P<0.01)。脛骨灰錳含量隨日糧錳水平的增加而增加;脛骨灰錳含量與飼糧添加錳間擬合的多元線性歸方程為：
　　Y=0.367 X1+0.366 X2+0.403 X3+3.930(p<0.01,R=0.973)
　　其中Y為脛骨灰含錳量(ug/g dry wt),X1、X2、X3分別為硫酸錳、乙酸錳、酵母錳的飼糧添加錳進(jìn)食量mg/(Capta﹒d)。
　　如以硫酸錳中錳的利用率為100%，則乙酸錳、酵母錳兩種有機(jī)錳源的生物學(xué)利用率分別為99.73%、109.81%,其中酵母錳的生物學(xué)利用率高于硫酸錳，但乙酸錳的生物學(xué)利用率低于硫酸錳。
　　由于骨灰錳含量隨飼糧添加錳水平升高而升高，且有較寬的線性范圍，因此骨灰錳含量常被用于測(cè)定雞對(duì)不同錳源的生物利用率。Black【10】等在實(shí)用玉米-豆粕型飼糧(含錳116mg/kg)中，以氧化錳、碳酸錳和硫酸錳形式添加1000、2000、4000mg/kg錳，以骨灰錳含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)時(shí)，各錳源間生物學(xué)利用率差異極顯著。Henry【11】等在實(shí)用玉米-豆粕基礎(chǔ)飼糧(含錳35mg/kg)中，在NRC(1984)錳需要量上下添加40mg/kg、80mg/kg或120mg/kg錳，所用錳源氧化錳和硫酸錳，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不管哪一種錳源，肝、腎、骨灰錳含量均隨添加錳水平增加而線性升高，其中骨灰錳線性擬合最優(yōu)，其次時(shí)腎錳濃度和肝錳濃度，但以3種指標(biāo)分別評(píng)價(jià)不同錳源的生物學(xué)利用率時(shí)，只有以腎錳濃度為指標(biāo)時(shí)，二種無(wú)機(jī)錳源間差異顯著。盡管高劑量添加錳可提高組織錳的反映敏感性，但添加非致毒量的錳引起的組織高錳積累可能反映的是機(jī)體平衡能力的失控，而不是錳的成功貯存【12】?？紤]表2中描述的各項(xiàng)指標(biāo)隨日糧錳水平的變化情況和所建立的線性方程的顯著性和相關(guān)系數(shù)，本次試驗(yàn)在肉仔雞錳需要量上下添加不同錳源所獲試驗(yàn)結(jié)果，可以以骨灰錳含量作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，敏感地反映出肉仔雞對(duì)不同錳源間生物學(xué)利用率的差異。
　　2.4 不同錳源和錳水平對(duì)肉仔雞其它組織錳含量的影響
　　關(guān)于肝臟錳，由表3可見(jiàn)，不同錳源對(duì)肉仔雞肝臟錳濃度影響不顯著(P>0.05);不同錳水平對(duì)肝臟錳有極顯著差異(P<0.01)，三個(gè)錳源組均表現(xiàn)為，隨日糧錳水平增加，肝臟錳濃度增加。肝臟錳含量與飼糧添加錳間擬合的多元線形回歸方程為：
　　Y=0.215 X1+0.212 X2+0.233 X3+5.734(P<0.01,R=0.947)
　　其中Y為肝臟含錳量(ug/g dry wt),X1、X2、X3分別為硫酸錳、乙酸錳、酵母錳的飼糧添加錳進(jìn)食量mg/(Capta﹒d)。
　　如以硫酸錳中錳的利用率為100%，則乙酸錳、酵母錳兩種有機(jī)錳源的生物學(xué)利用率分別為98.60%、108.37%，其中酵母錳的生物學(xué)利用率高于硫酸錳，但乙酸錳的生物學(xué)利用率低于硫酸錳。
　　關(guān)于腎臟錳，不同錳源對(duì)肉仔雞腎臟錳濃度影響不顯著(P>0.05)，不同錳水平對(duì)腎臟錳濃度極顯著影響(P<0.05)，腎臟錳濃度隨日糧錳水平的增加而增加。腎臟錳含量與飼糧添加錳間擬合的多元線形回歸方程為：
　　Y=0.431 X1+0.461 X2+0.412X3+3.798(P<0.01,R=0.989)
　　其中Y為腎臟含錳量(ug/g dry wt),X1、X2、X3分別為硫酸錳、乙酸錳、酵母錳的飼糧添加錳進(jìn)食量mg/(Capta﹒d)。
　　如以硫酸錳中錳的利用率為100%，則乙酸錳、酵母錳兩種有機(jī)錳源的生物學(xué)利用率分別為106.96%、95.59%，其中酵母錳的生物學(xué)利用率低于硫酸錳，但乙酸錳的生物學(xué)利用率高于硫酸錳。
　　朱玉琴、索愛(ài)萍【13】在實(shí)用日糧的基礎(chǔ)上對(duì)0～4周齡肉仔雞進(jìn)行錳源錳含量的測(cè)定中，以肝錳為指標(biāo)，蛋氨酸錳的生物學(xué)效價(jià)為126。本次試驗(yàn)以肝臟錳測(cè)定錳的相對(duì)生物學(xué)效價(jià)時(shí)，酵母錳相對(duì)于硫酸錳的生物學(xué)效價(jià)為108.37，乙酸錳的生物學(xué)效價(jià)為98.60;但當(dāng)以腎臟錳為指標(biāo)時(shí)，酵母錳生物學(xué)效價(jià)為95.59，低于100，而乙酸錳的生物學(xué)效價(jià)為106.96。
　　考慮表3中日糧錳水平對(duì)肉仔雞組織器官錳含量的影響和所獲得的回歸方程的顯著性和相關(guān)性，本次試驗(yàn)中所選用的各組織器官指標(biāo)均可以評(píng)價(jià)不同錳源的生物學(xué)利用率。
　　表3:日糧錳源和錳水平對(duì)肉仔雞組織的影響
　　Table3. Effect of manganese sources and level in diet on the manganese concetration in tissue and organ of broiler chicks
　　
　　[參 考 文 獻(xiàn)]
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　　THE RELATIVE BIOAVAIIBILITIES OF MANGANESE SOURCES FOR BROILERS
　　Lijun,tangli(Xinyang Agricultural college,Xinyang,Henan,464000)
　　【Abstrat】 Objectives: To study the relative bioavailabilities of Mn sources for broilers. Methods: 3×3 factorial design was used in every experiment. Broiler chicks were allotted randomly to ten dietary treatments with four duplicates that included an unsupplemental corn-soybean basal diet (44mg/kg Mn) or this basal diet supplemented with 60, 120 or 180mg/kg Mn either as MnSO4.H2O, manganese acetate or yeast manganese for 21d in the the experiment. Results: Under the conditions of this experiment, performance, liver, cardiac, kidney，tiabia Mn concentration and MnSOD were not affected by dietary Mn. Under the conditions of this experiment, with increasing dietary Mn, F/G decreased, but liver, cardiac, kidney Mn concentration significantly increased. Conclusion: Under the conditions of this experiment, using the slope-ratio technique from the value of different indexes on mean daily Mn intake, relative bioavailability of manganese acetate or yeast manganese was different. Synthetically analysis of the significance of regression equation and the effect of dietary Mn on indexes determined in this study showed that all determined were sensitive indicators.
　　Key words: MnSO4·H2O;manganese acetate;yeast manganese;bioavailability
　　作者簡(jiǎn)介：李軍，男，湖北宜昌人，助教，信陽(yáng)農(nóng)業(yè)高等?？茖W(xué)校畜牧師，主攻動(dòng)物生產(chǎn)方向。導(dǎo)師陳喜斌教授。
　　湯莉，女，河南平頂山人，碩士，講師，主攻動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料檢測(cè)分析方向。導(dǎo)師陳喜斌教授。

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