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微生物和酶添加劑含量的表達(dá)方式詳解
隨著微生物制劑在養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用發(fā)展,養(yǎng)殖戶已經(jīng)越來越認(rèn)識(shí)到使用微生物制劑所帶來的好處和效益,與此同時(shí),微生物制劑與酶制劑等生物制劑對我國綠色無公害養(yǎng)殖事業(yè)的貢獻(xiàn)也越來越顯著,這些生物制劑,不僅可以提高動(dòng)物的生長繁殖性能,提高抗病力和免疫力,提高飼料報(bào)酬,增強(qiáng)養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)效益,還可以改善環(huán)境,減少環(huán)境污染,減少甚至杜絕(指發(fā)酵床養(yǎng)殖技術(shù))糞尿的排放量,更重要的是,還可以減少飼料中抗生素的使用量,甚至完全取消抗生素在飼料中的添加使用,是利國利民的環(huán)保產(chǎn)品。
但大多數(shù)養(yǎng)殖戶對微生物制劑、酶制劑的含量表達(dá)方式,或者說單位含量表達(dá),并不太了解,造成了很多的誤解和盲目,下面將這一問題作一個(gè)詳細(xì)的介紹:
1、微生物添加劑的含量表達(dá)方式
常用的微生物添加劑含量表達(dá)方式是:① 微生物細(xì)胞總數(shù),單位是“億/g或ml”;② 有效菌落形成單位總數(shù),英文是(colony forming unit,簡寫cfu),單位是“億cfu/g或ml”;
1.1 最為規(guī)范化的表達(dá)方式是后者,有效菌落形成單位總數(shù),也是規(guī)范化的企業(yè)采用的檢測單位
有效菌落形成單位總數(shù),英文是(colony forming unit,簡寫cfu);是指每克產(chǎn)品,經(jīng)過一定的稀釋后,一般是稀釋1~10億倍左右,再通過加入玻璃珠在搖床上打散細(xì)菌細(xì)胞,(為了更好地分散微生物細(xì)胞,還有使用超聲水浴處理,便微生物細(xì)胞盡量分散,以便將來在平板培養(yǎng)基上培養(yǎng)時(shí),可以得到充分分散開的,獨(dú)個(gè)的菌落,并有利于計(jì)數(shù)和觀察)
再把稀釋好的,并經(jīng)分散的微生物菌懸液,用移液管吸取一定的數(shù)量(一般是0.1~1毫升),涂抹或倒制在平板培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),得到了肉眼可見的,由一個(gè)一個(gè)細(xì)胞生長繁殖而成的菌落,再經(jīng)過鑒定和計(jì)數(shù)這些菌落,乘以稀釋倍數(shù),就是檢測結(jié)果。這個(gè)單位真實(shí)地反映了產(chǎn)品究竟有多少個(gè)活細(xì)菌活細(xì)胞,是最規(guī)范的單位;
這個(gè)方法的缺陷是檢測誤差較大,往往造成檢測結(jié)果偏低,造成結(jié)果偏低的原因有以下幾種:
① 細(xì)胞粘結(jié)造成的結(jié)果偏低;
在檢測過程中,存在很大的誤差,比如產(chǎn)品中細(xì)胞往往是粘結(jié)在一起的,使用一般的搖勻方法無法充分地分散它們,往往在平板培養(yǎng)基上看到的一個(gè)菌落,很有可能是由幾個(gè)細(xì)胞長成的,所以,在檢測中必須嚴(yán)格打散粘結(jié)的細(xì)胞,一旦打散操作不當(dāng),會(huì)造成檢測結(jié)果偏低,偏低是肯定的,好一些的方法可以用超聲波來打散,但超聲波可能會(huì)殺死細(xì)胞,所以,往往實(shí)際上產(chǎn)品超過了200億,但用這種方法檢測的結(jié)果卻只有120億;目前也有人提出先高溫水浴活化后,再用振蕩器或搖床處理30分鐘,再倒制平板上培養(yǎng),可以得到比較穩(wěn)定的檢測效果。
② 由于死細(xì)胞是不會(huì)長成菌落的,所以,也造成檢測結(jié)果偏低;
③ 還有一些弱小的細(xì)胞,由于處于衰老期,或存在缺陷,也無法長成菌落,也造成檢測結(jié)果偏低;
即這種菌數(shù)表達(dá)方法的特點(diǎn)是:
① 一是檢測結(jié)果偏低,實(shí)際結(jié)果要高于檢測結(jié)果;
② 二是這種表達(dá)方式是最規(guī)范的,也是將來國家可能強(qiáng)制執(zhí)行的方法;
③ 三是這種表達(dá)方法檢測出來的,可以肯定都是活菌,沒有死菌,是非常真實(shí)地反映了產(chǎn)品的微生物活力的規(guī)范化的檢測單位。
1.2 但目前大多數(shù)企業(yè)使用最普遍的檢測單位還是微生物細(xì)胞總數(shù)這個(gè)單位
這種表達(dá)方法是把死菌活菌都計(jì)數(shù)在內(nèi),不分死活,往往采用比較簡單的顯微鏡計(jì)數(shù)法,如血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)方法,比較小的細(xì)菌則采用Helber 細(xì)菌計(jì)數(shù)板來計(jì)數(shù),也需要先打散細(xì)胞,再進(jìn)行稀釋處理,以使顯微視野中的細(xì)胞數(shù)在合適的范圍內(nèi),進(jìn)行數(shù)數(shù)計(jì)數(shù),再把計(jì)數(shù)結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)即得結(jié)果。
這種方法的結(jié)果顯然是偏高,因?yàn)椴徽撌撬兰?xì)胞,還是活細(xì)胞都被計(jì)數(shù)在內(nèi)了,而且甚至有一些不是產(chǎn)品規(guī)定的微生物細(xì)胞,如雜菌甚至有害細(xì)菌也被計(jì)數(shù)進(jìn)去了,甚至有一些酷似微生物細(xì)胞的雜質(zhì)也被計(jì)數(shù)進(jìn)去了,所以,得到的結(jié)果比較高,也是目前大多數(shù)企業(yè)樂于采用的表達(dá)方法;
1.3 活力99生酵劑等產(chǎn)品的微生物含量表達(dá)方式是什么?
作為一家規(guī)范化的企業(yè),我公司采用的是有效菌落形成單位的表達(dá)方式,例如活力99生酵劑的分析保證值是有效菌落形成單位總數(shù)120億cfu/g,當(dāng)然,這只是分析保證值,是企業(yè)為了合理規(guī)避質(zhì)檢部分的監(jiān)督風(fēng)險(xiǎn)而設(shè)定的一個(gè)數(shù)值,也企業(yè)所能達(dá)到的最低數(shù)值,實(shí)際上由于微生物生產(chǎn)的復(fù)雜性,我們所生產(chǎn)的出廠產(chǎn)品,都達(dá)到了220億/g以上的水平,甚至更高,說到底,寫在包裝上的只是分析保證值,是為了合理規(guī)避質(zhì)檢監(jiān)督而設(shè)定的數(shù)值而已。
活力99生酵劑在最近一次的檢測中,即2010年6月5日號(hào)在江西省飼料質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)站檢測的結(jié)果是2185×108cfu/g,即每克有2185億個(gè)有效活菌,不僅是活菌,而且是能生長形成菌活的有效活菌。
2、飼用酶制劑的含量表達(dá)方式
飼用酶制劑的含量表達(dá)方式就更為復(fù)雜了,也比較特殊,有生物常識(shí)的人都知道,酶的第一大特性就是專一性,即一種酶只對一種底物(作用對象),甚至只對某一個(gè)化學(xué)鍵才會(huì)起催化分解的作用,這自然而然就反映到酶活力的表達(dá)方式上也應(yīng)該是:不同的酶,其活力單位具有不同的,獨(dú)一無二的,專一的酶活力表達(dá)方式,換句易懂的話說:自然界存在上億種生物酶,如果要給它們定酶活力表達(dá)方式,則也一定存在上億個(gè)不同的酶活力表達(dá)方式。
舉幾個(gè)例子:
① 植酸酶的活力表達(dá)方式是:待測樣品在植酸鈉濃度為5.0mmol/L、溫度37℃、pH值5.50的條件下,每分鐘從植酸鈉中釋放1μmol無機(jī)磷,即為一個(gè)植酸酶活性單位,以U表示。
② 綜合纖維素酶(FPA酶)活力的國際酶活單位的定義:在最適測定條件下,每分鐘水解濾紙產(chǎn)生1μmol還原糖(以葡萄糖計(jì))所需酶量定義為一個(gè)酶活力單位(IU)。
③ 木聚糖酶活力的國際酶活單位的定義:在最適測定條件下,每分鐘水解木聚糖產(chǎn)生1μmol還原糖(以木糖計(jì))所需酶量定義為一個(gè)酶活力單位(IU)
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所以說,不同的酶具有不同的酶活力表達(dá)方式,筆者曾經(jīng)看到過一家自稱是有n年實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的著名微生物專家開辦的企業(yè),竟然在產(chǎn)品包裝的【主要成分】中,赫然寫著:復(fù)合酶活力≥20000u/克,這是完全違背科學(xué)的外行話,也是極不嚴(yán)肅的,因?yàn)閺?fù)合酶只是一個(gè)概念名詞,只是代表這是一種由多個(gè)酶混合在一起的復(fù)配物,由于不同的酶有各自獨(dú)特不同的酶活力表達(dá)方式,所以,是不能把各種酶的活力進(jìn)行簡單的數(shù)學(xué)相加的,換句話說,復(fù)合酶是無法用活力單位來表達(dá)的,或者說,復(fù)合酶根本就不存在酶活力表達(dá)方式;由此可見,這家企業(yè)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是假的,因?yàn)榧夹g(shù)標(biāo)準(zhǔn)局在備案時(shí)不可能不知道這點(diǎn)常識(shí),如果連最基本的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)都是假的,則其他的又如何能讓人相信?
由于國家對常用的酶還沒有強(qiáng)制性的標(biāo)準(zhǔn),所以,目前,各酶制劑企業(yè)都是采用的企業(yè)標(biāo)準(zhǔn),即自己制定標(biāo)準(zhǔn),這是為什么呢,因?yàn)榧词雇瑯邮墙心揪厶敲?,但不同生產(chǎn)工藝,不同生產(chǎn)菌種來源的酶,它們在不同的測定條件下,其活力還是有所不同的,如有的企業(yè)的酶在40℃ 和PH7的檢測條件下,活力最好,而有的企業(yè)的酶在35℃和PH5的檢測條件下活力最好,所以,為了達(dá)到最大的活力單位,各企業(yè)都會(huì)根據(jù)自己所生產(chǎn)的酶的特點(diǎn),來設(shè)定自己檢測標(biāo)準(zhǔn)中的最適檢測條件,以達(dá)到出廠檢測活力最高。
所以,您的購買某種酶時(shí),一定要清楚您購買它的目的是什么,如您購買蛋白酶,要在酸性環(huán)境中來分解豆粕,則一定要購買酸性蛋白酶,不要去購買堿性蛋白酶,酸性蛋白酶是在酸性環(huán)境中檢測活力最高。
所以,酶制劑的表達(dá)方式的特點(diǎn)是:
① 不同的酶,甚至不同來源的同一種酶,有不同的酶活力表達(dá)方式,即使同樣是叫蛋白酶,也有酸性和堿性的活力表達(dá)方式;
② 酶活力的表達(dá)與檢測條件密切相關(guān),如溫度、PH值、作用時(shí)間、底物濃度等等。
2.1 我公司的粗飼料降解劑的酶活力表達(dá)方式是怎樣的?
我公司的粗飼料降解劑的酶活力表達(dá)方式中規(guī)定了
① Beta—葡聚糖酶活力表達(dá)方式:在最適測定條件下,每分鐘水解β—葡聚糖產(chǎn)生1μg還原糖(以葡萄糖計(jì))所需酶量定義為一個(gè)酶活力單位(u)。
分析保證值是:50000 u/g
② 纖維素酶活性表達(dá)方式:在最適測定條件下,每分鐘水解CMC—Na產(chǎn)生1μg還原糖(以葡萄糖計(jì))所需酶量定義為一個(gè)酶活力單位(u)。
纖維素酶分析保證值:2500 u/g
③ 木聚糖酶活性表達(dá)方式:在最適測定條件下,每分鐘水解木聚糖產(chǎn)生1μg還原糖(以木糖計(jì))所需酶量定義為一個(gè)酶活力單位(u)。
木聚糖酶活性分析保證值:30000u/g
3、什么是分析保證值
經(jīng)??梢栽诋a(chǎn)品包裝上看到分析保證值這一項(xiàng)內(nèi)容,例如我公司的產(chǎn)品包裝上都有分析保證值這一項(xiàng),這是相當(dāng)于是對養(yǎng)殖戶出具了具有法律效力的承諾書,
我國的飼料標(biāo)簽標(biāo)準(zhǔn)(GB 10648-1999)是一項(xiàng)強(qiáng)制性質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),要求各飼料和飼料添加劑、以及飼料預(yù)混料生產(chǎn)企業(yè)必須在飼料標(biāo)簽上注明“產(chǎn)品成分分析保證值”,但這一項(xiàng)措施并非所有的企業(yè)都認(rèn)真執(zhí)行了。
分析保證值是法律規(guī)定必須達(dá)到的產(chǎn)品最小含量,消費(fèi)者有權(quán)知道這個(gè)數(shù)據(jù),規(guī)范化的企業(yè)也必須定期接受技術(shù)質(zhì)檢部門的檢查檢測,并為消費(fèi)者提供合乎要求的“產(chǎn)品檢測報(bào)告”,判斷一個(gè)生物添加劑產(chǎn)品是否規(guī)范,標(biāo)簽上必須注明分析保證值;
作為規(guī)范的企業(yè)來講,往往并不愿意把分析保證值定得太高,因?yàn)槠髽I(yè)必須定期接受檢測部門的檢測,如果定得太高,則可能會(huì)因?yàn)楦鞣N原因造成被動(dòng)的局面,所以,越是規(guī)范的企業(yè)往往為了規(guī)避檢測風(fēng)險(xiǎn),會(huì)把分析保證值定低一些,這樣做只是為了合理規(guī)避檢測風(fēng)險(xiǎn)而已,并不能根據(jù)分析保證值的數(shù)據(jù)來判斷這個(gè)企業(yè)的技術(shù)水平。
例如活力99生酵劑,分析保證值是有效菌落形成單位120億cfu/g,其實(shí)這已經(jīng)非常高了,如果是細(xì)胞數(shù)的話(包括死細(xì)胞、弱細(xì)胞等),則遠(yuǎn)遠(yuǎn)不止120億/克,一般可達(dá)到220億/克以上,而且在生產(chǎn)中,我們也沒打算按分析保證值來生產(chǎn),實(shí)際上我們的產(chǎn)品在權(quán)威檢測站檢測的結(jié)果是:充分打散(采用超聲水浴分散細(xì)胞)檢測達(dá)到了2185億cfu/g的驚人含量。
一些不規(guī)范的企業(yè),或者說假冒偽劣產(chǎn)品,為了加大銷售量,則往往定一個(gè)非常大的分析保證值,原因很簡單,他們不需要定期接受技術(shù)質(zhì)檢部門的抽檢檢測,所以定得再高也不要緊,反正也不會(huì)有質(zhì)量監(jiān)督部門來檢測,除非有人舉報(bào),所以,當(dāng)您遇到類似的產(chǎn)品,懷疑其產(chǎn)品有問題時(shí),只需要向他索取相關(guān)的檢測報(bào)告就知道是否是假劣產(chǎn)品,因?yàn)檫@類企業(yè)往往是拿不出相關(guān)的檢測報(bào)告的。
我公司曾經(jīng)采集市場上12種同類產(chǎn)品,包括微生物添加劑產(chǎn)品,光是包裝上的許可證和批文號(hào)不正規(guī)的就占一半以上,我們再利用我們先進(jìn)的檢測設(shè)備對它們進(jìn)行檢測,果然不正規(guī)包裝的產(chǎn)品,檢測結(jié)果讓人吃驚,某產(chǎn)品包裝上標(biāo)的的分析保證值是200億/克,我們檢測的結(jié)果居然只有2億/克還不到。
4、如何鑒別一個(gè)飼用微生物或酶制劑產(chǎn)品是否是正規(guī)產(chǎn)品
規(guī)范化的產(chǎn)品,在其包裝或標(biāo)簽上都會(huì)注明相關(guān)的證照信息,如下:
① 包裝或標(biāo)簽上必須注明微生物或酶的專業(yè)生產(chǎn)許可證號(hào)碼,一般形式為飼添(20**)****(必須是國家農(nóng)業(yè)部頒發(fā)的,許可證上明確地注明了該企業(yè)允許生產(chǎn)的微生物菌種名稱和酶制劑品種名稱);如我公司的許可證號(hào)是“飼添(2010)2750”,文件上面非常清楚地列出了微生物品種和酶品種。
如果許可證上沒有注明微生物或酶制劑的名稱,則不是專業(yè)生產(chǎn)微生物或酶制劑產(chǎn)品的許可證,其企業(yè)也就不具備生產(chǎn)微生物或酶的能力。
② 包裝或標(biāo)簽上必須注明企業(yè)所在省農(nóng)業(yè)廳頒發(fā)的產(chǎn)品批準(zhǔn)文號(hào),一個(gè)產(chǎn)品對應(yīng)一個(gè)批準(zhǔn)文號(hào),不允許多個(gè)產(chǎn)品同用一個(gè)批準(zhǔn)文號(hào),批準(zhǔn)文號(hào)形式一般是:*飼添字(20**)****,第一個(gè)“*”表示該省的簡稱,如江西省是“贛”字,如粗飼料降解劑的批準(zhǔn)文號(hào)是贛飼添字(2010)209005。
③ 包裝或標(biāo)簽上必須注明該產(chǎn)品的執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn),即質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),任何產(chǎn)品都必須有產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),不然憑什么說您的產(chǎn)品是合格的呢,必須得有一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)才行,再根據(jù)這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)來檢測判斷,企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中,往往一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)中會(huì)寫入多個(gè)同類型的產(chǎn)品,或者說,多個(gè)產(chǎn)品可以同用一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)號(hào);但不同類型的產(chǎn)品,肯定具有不同的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
④ 產(chǎn)品包裝上必須注明廠址,廠名,電話號(hào)碼,同時(shí),廠址應(yīng)該與生產(chǎn)許可證文件上的生產(chǎn)地址是一至的,絕對不允許例如“湖南的生產(chǎn)許可證,生產(chǎn)地址卻是在四川省”這樣的情況是不允許的,即異地生產(chǎn)是不允許的。
⑤ 最好是向生產(chǎn)企業(yè)索取“產(chǎn)品檢測報(bào)告”,這是最重要的,有的企業(yè)往往可以提供生產(chǎn)許可證和批準(zhǔn)文號(hào)證書,但卻無法提供檢測報(bào)告,這種情況也是有問題的,因?yàn)檫@里可能存在套用證號(hào)的現(xiàn)象。 |
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