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[技術研發(fā)] 全球基因工程實驗室都在使用耐熱達93℃的DNA聚合酶……

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樓主
發(fā)表于 2010-12-7 12:47:30 | 只看該作者 回帖獎勵 |倒序瀏覽 |閱讀模式
本帖最后由 saturnbio 于 2010-12-7 12:52 編輯

    當飼料行業(yè)還在質疑酶制劑是否可能做到天然耐熱的時候,天然耐熱93℃以上的DNA聚合酶早已在基因工程的PCR技術中普遍應用。
    PCR技術是指聚合酶鏈式反應,其英文Polymease Chain Reaction(PCR)是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應組成一個周期,循環(huán)進行,使目的DNA得以迅速擴增,具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點。它不僅可用于基因分離、克隆和核酸序列分析等基礎研究,還可用于疾病病的診斷或任何有DNA,RNA的地方.聚合酶鏈式反應又稱無細胞分子克隆或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴增技術。 由美國科學家PE(Perkin Elmer珀金-埃爾默)公司遺傳部的Dr. Mullis發(fā)明,由于PCR技術在理論和應用上的跨時代意義,因此Mullis獲得了1993年諾貝爾化學獎。

技術原理  
    DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。在
聚合酶鏈式反應
實驗中發(fā)現,DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。

  但是,DNA聚合酶在高溫時會失活,因此,每次循環(huán)都得加入新的DNA聚合酶,不僅操作煩瑣,而且價格昂貴,制約了PCR技術的應用和發(fā)展。發(fā)現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受93℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。

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沙發(fā)
發(fā)表于 2010-12-7 20:48:16 | 只看該作者
Taq酶雖然耐熱,但是他的最適溫度是75度左右,在動物體內環(huán)境下無法發(fā)揮作用。


sailingbbs于2010-12-8 15:46補充以下內容:
不給動物用,你耐1000度也沒用啊。也沒必要放在這個版塊來討論了吧。

點評

我覺得該文的意思好像不是要說Taq酶可用于動物,而是在說酶是完全可能做到天然耐熱的,對嗎?  發(fā)表于 2010-12-8 14:15

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板凳
發(fā)表于 2010-12-11 11:12:17 | 只看該作者
其實飼用酶方面,也有達到天然耐熱94℃的產品,例如云師大酶工程所開發(fā)的3位植酸酶。具體產品就是諾偉司的諾偉磷。
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地毯
發(fā)表于 2011-8-11 07:13:56 | 只看該作者
希望早點讓三正使這種耐更高溫的酶應用于工業(yè)生產,期待云師大酶工所的精英們智慧
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