色氨酸的生產(chǎn)最早主要依靠化學合成法和蛋白質(zhì)水解法,但是隨著對微生物法生產(chǎn)色氨酸研究的不斷深入,這種方法已經(jīng)走向?qū)嵱貌⑶姨幱谥鲗У匚?。微生物法大體上可以分為直接發(fā)酵法、微生物轉(zhuǎn)化法和酶法。近年來還出現(xiàn)了將直接發(fā)酵法與化學合成法相結(jié)合、直接發(fā)酵法與轉(zhuǎn)化法相結(jié)合生產(chǎn)色氨酸的研究。另外,重組DNA技術(shù)在微生物育種和酶工業(yè)上的應(yīng)用極大地推動了直接發(fā)酵法和酶法生產(chǎn)色氨酸的工業(yè)化進程。
微生物轉(zhuǎn)化法:亦稱前體發(fā)酵法。這種方法使用葡萄糖作為碳源,同時添加合成色氨酸所需的前體物如鄰氨基苯甲酸、吲哚等,利用微生物的色氨酸合成酶系來合成色氨酸。這種方法同直接發(fā)酵法一樣,需要解除生物合成途徑中大部分酶所受到的反饋調(diào)節(jié),以使色氨酸能夠高濃度蓄積。另外,所添加的前體物大都是抑制微生物生長的,因此添加量不可過高,一般采取分批少量添加的方法。同時可以篩選前體物的抗性突變株來提高前體物的添加量。微生物轉(zhuǎn)化法的不足在于當轉(zhuǎn)化液中前體物濃度較高時,轉(zhuǎn)化率有所下降。另外,前體物的價格比較昂貴,不利于降低成本。
酶法:酶法是利用微生物中色氨酸生物合成酶系的催化功能生產(chǎn)色氨酸。這些酶包括色氨酸酶、色氨酸合成酶、絲氨酸消旋酶等。根據(jù)提供這些酶的微生物種類數(shù),可以分為雙酶菌法和單酶菌法兩種類型。該法既可以直接加入細胞壁溶解酶使細胞破壁后再使用,也可以將所需的酶固定化后再使用,一般由酶源菌體的培養(yǎng)、菌體的分離洗滌、固定化和反應(yīng)幾個階段組成。酶法能夠利用化工合成的前體物為原料,既充分發(fā)揮了有機合成技術(shù)的優(yōu)勢,又具有產(chǎn)物濃度高、收率高、純度高、副產(chǎn)物少、精制操作容易的優(yōu)點,是一種成本較低的生產(chǎn)色氨酸的工業(yè)化生產(chǎn)方法。
直接發(fā)酵法:該法是以葡萄糖、甘蔗糖蜜等廉價原料為碳源,利用優(yōu)良的色氨酸生產(chǎn)菌種來生產(chǎn)色氨酸。對這種方法的研究進行的比較早,但在相當長的一段時間內(nèi)達不到工業(yè)化生產(chǎn)的要求。主要原因是從葡萄糖到色氨酸的生物合成途徑比較漫長,其代謝流也比較弱,而且色氨酸的合成需要多種前體物,若想進一步提高色氨酸的積累量就必需設(shè)法增強合成這些前體物的代謝流。另一方面,色氨酸生物合成途徑中的調(diào)控機制比較復(fù)雜,除了反饋調(diào)節(jié)這一粗調(diào)系統(tǒng)之外,還存在著細調(diào)系統(tǒng)-弱化子系統(tǒng)。隨著重組DNA技術(shù)在微生物育種中的應(yīng)用,為優(yōu)良的色氨酸生產(chǎn)菌株的篩選和產(chǎn)酸水平的提高提供了可靠的技術(shù)保障,使微生物直接發(fā)酵法生產(chǎn)色氨酸成為一種廉價的工業(yè)化生產(chǎn)方法。
其他生產(chǎn)方法
將上述幾種方法有機地結(jié)合起來進行色氨酸生產(chǎn),主要有直接發(fā)酵法與化學合成法、酶法相結(jié)合,其特點是利用發(fā)酵法廉價提供一種前體物,再結(jié)合其他方法的優(yōu)勢進行生產(chǎn)。
本文來源:中國飼料行業(yè)信息網(wǎng)
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2010-12-21 09:54 上傳
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