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不同水平硒酵母對(duì)奶??寡趸芰Φ挠绊?br />
摘 要:本試驗(yàn)選取8頭體況、奶產(chǎn)量、泌乳天數(shù)相近的奶牛,分為四組分別添加4種不同的預(yù)混料:①對(duì)照組不添加硒酵母而添加亞硒酸鈉,0.3mgSe/kg日糧,②~④添加硒酵母,硒水平分別為:②0.3mg/kg,③0.45mg/kg,④0.6mg/kg,試驗(yàn)結(jié)束后,采集血樣同時(shí)制備血清,用于檢測硒含量和相關(guān)抗氧化能力指標(biāo)。結(jié)果表明:與亞硒酸鈉相比,添加酵母硒可以提高全血硒含量及血清中總抗氧化能力(T-AOC),谷胱苷肽過氧化物酶(GSH-PX)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力,降低丙二醛(MDA)含量;試驗(yàn)中以酵母硒0.3 mgSe/kgDM 組的奶牛上述指標(biāo)有顯著的改善。
關(guān)鍵詞:硒酵母 添加量 消化率
目前硒對(duì)動(dòng)物機(jī)體的功效已被人們所熟悉,并且還發(fā)現(xiàn)高于國際標(biāo)準(zhǔn)建議的動(dòng)物日糧中硒添加水平能夠帶來較好的效果。當(dāng)前的動(dòng)物預(yù)混料中普遍使用的是廉價(jià)的亞硒酸鈉作為硒源,它不僅毒性強(qiáng)用量不易掌握而且生物利用率低,會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染。有機(jī)硒低毒高效的特點(diǎn)使它正在國際上逐步取代亞硒酸鈉作為預(yù)混料的硒源。硒酵母與其他有機(jī)硒相比有價(jià)格優(yōu)勢推廣前景廣闊。目前已經(jīng)知道有機(jī)硒可以提高機(jī)體的免疫和抗氧化能力,但關(guān)于硒酵母對(duì)奶??寡趸芰τ绊懙膱?bào)道還很少。本試驗(yàn)研究了不同硒酵母添加量對(duì)奶牛抗氧化能力的影響,為硒酵母在奶牛上的應(yīng)用和對(duì)奶牛營養(yǎng)調(diào)控提供參考。
1 試驗(yàn)材料與方法
1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
1.1.1選取宜昌京都奶牛場體況、奶產(chǎn)量、泌乳天數(shù)相近的8頭奶牛。
1.1.2分組與處理:將8頭奶牛隨機(jī)分為四組,采用4×4拉丁方設(shè)計(jì):①對(duì)照組不添加硒酵母而添加亞硒酸鈉,0.3mgSe/kg日糧,處理組添加硒酵母,水平如下②0.3mgSe/kg,③0.45mgSe/kg,④0.6mgSe/kg。預(yù)飼期10天,正飼5天。
所用硒酵母為安琪酵母提供,每克酵母含硒量不低于1mg。
1.1.3 飼養(yǎng)管理
每天飼喂3次,先粗后精,精料一次2.8kg,擠3次奶,日糧成分見表1,自由采食草料和飲水。
表1 奶牛日糧成分
1.2測定項(xiàng)目與方法
血樣:正飼最后一天,采集血樣40ml,其中20ml抗凝處理測全血硒含量,另20ml離心制備血清。
檢測指標(biāo):血硒,血清中總抗氧化能力(T-AOC),超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),谷胱苷肽過氧化物酶(GSH-PX)活力。試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。
1.3 數(shù)據(jù)處理
采用SPSS13.0進(jìn)行單因素方差分析,并進(jìn)行驗(yàn)后多重比較。
2 結(jié)果與分析
2. 1 不同水平酵母硒對(duì)全血硒含量的影響
由表2可以看出,隨著酵母硒添加量的提高,全血硒含量呈上升趨勢,添加酵母硒0.45Se/kgDM和0.6mgSe/kgDM比添加亞硒酸鈉0.3Se/kgDM分別提高26.67%和40%(P<0.01),在相同水平添加量下酵母硒組比亞硒酸鈉組的全血硒含量高20%(P<0.05)。這說明奶牛機(jī)體可以吸收較高水平的酵母硒,其利用率比亞硒酸鈉高。
表2 不同水平酵母硒下全血硒、血清T-AOC、SOD、MDA、GSH-PX含量
注:同列肩注不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01),不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)
2.2 不同水平酵母硒對(duì)血清GSH-PX的影響
本試驗(yàn)添加酵母硒后,各組奶牛血清GSH-PX極顯著高于對(duì)照組(P<0.01),試驗(yàn)各組分別比對(duì)照組高44.12%,29.82%,19.93%;0.3水平的酵母硒組高出0.6水平20.17%(P<0.01)。隨著添加量的提高血清GSH-PX呈下降的趨勢。
2.3 不同水平酵母硒對(duì)血清總抗氧化能力的影響
添加酵母硒后,奶牛血清總抗氧化能力極顯著高于對(duì)照組(P<0.01),隨著酵母硒添加量的提高分別比對(duì)照組高37.67%,34.00%,27.67%,而酵母硒組間并無差異,但隨著添加量的提高總抗氧化能力有下降的趨勢。
2.4 不同水平酵母硒對(duì)血清超氧化物歧化酶的影響
由表16可以看出血清SOD酶活的變化趨勢與T-AOC一致,并且與GSH-Px顯著正相關(guān)(r=0.987),與丙二醛顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.955)。酵母硒組間SOD酶活并無差異,隨著酵母硒添加量的提高SOD分別比對(duì)照組顯著提高15.31%,8.15%,6.03%(P<0.05)。
2.5 不同水平酵母硒對(duì)血清丙二醛的影響
添加酵母硒后,MDA比對(duì)照組降低了,這與黃志堅(jiān)(2004)報(bào)道有機(jī)硒能夠降低MDA的結(jié)果一致。其中0.3 mg/kg水平的酵母硒和對(duì)照組有顯著差異,下降了25.87%(P<0.05);說明0.3 mg/kg酵母硒水平可以有效降低不飽和脂肪酸脂質(zhì)過氧化反應(yīng)。但隨著添加量的提高血清中丙二醛含量有上升的趨勢,其中0.6水平比0.3水平顯著提高30.32%(P<0.05)。
3 討論
硒參與GSH-Px的合成,以促進(jìn)過氧化氫或脂類過氧化物轉(zhuǎn)化成水和無害的酒精,防止脂類化合物的過氧化反應(yīng),保護(hù)細(xì)胞膜不受過氧化物的侵害,以維持細(xì)胞的正常結(jié)構(gòu)和功能。所以人們常用GSH-Px酶活的高低作為硒在體內(nèi)發(fā)揮生物活性的指示劑(Surai,2006b)。Gunter(2003)就曾報(bào)道過添加相同水平的酵母比亞硒酸鈉可以顯著提高奶牛全血硒含量和GSH-Px的活性。本試驗(yàn)無機(jī)硒——亞硒酸鈉添加組血硒達(dá)到0.15mg/L,已在GSH-Px發(fā)揮生物活性的范圍內(nèi)(60-150ng/ml) (Gunter,2003),添加酵母硒后血硒顯著增加達(dá)到0.18-0.21mg/L, 這與Nicholson(1991)Johansson(1990)報(bào)道的與無機(jī)硒相比,給反芻動(dòng)物飼喂有機(jī)硒(酵母硒)能提高血液和組織中的硒濃度和提高GSH-PX的活性一致。另外Puls(1989)報(bào)道血硒在160-1200ng/ml時(shí), 機(jī)體的GSH-Px活性最佳而且免疫功能也處于最佳狀態(tài)。由此可見添加酵母硒可以使奶牛機(jī)體處于最佳狀態(tài)。
機(jī)體抗氧化的防御體系有酶促和非酶促兩個(gè)。酶促體系中許多酶以微量元素為活性中心,如GSH-Px、SOD、過氧化氫酶(CAT)等,非酶促體系則包括括維生素E、維生素C、β-胡蘿卜素等。因此,T-AOC與機(jī)體內(nèi)的多種因素有關(guān)。機(jī)體通過酶系統(tǒng)和非酶系統(tǒng)產(chǎn)生氧自由基,攻擊生物細(xì)胞膜中的不飽和脂肪酸引發(fā)脂質(zhì)過氧化作用形成脂質(zhì)過氧化物,如醛基(丙二醛)、酮基、羥基等,所以丙二醛的量可以反映機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度,間接反映細(xì)胞損傷程度。從本試驗(yàn)可以看出,酵母硒0.3水平添加量的奶牛整體抗氧化能力最好,該能力隨添加量的提高呈下降趨勢。但Jukola(1996)曾報(bào)道如考慮硒對(duì)乳房炎的作用,全血中硒濃度應(yīng)比0.18μg/ml高,或者血漿中硒達(dá)到約0.08μg/ml,本試驗(yàn)0.45水平下全血硒含量恰好高于0.18 μg/ml,并且綜合上文Puls(1989)的報(bào)道及養(yǎng)分的表觀消化率來看0.45水平應(yīng)該效果最好,因此對(duì)于酵母硒0.45添加量下,全血硒含量在機(jī)體最佳狀態(tài)范圍內(nèi),而測定血清中抗氧化能力反而下降這一現(xiàn)象,還有待進(jìn)一步研究。
4 結(jié)論
與亞硒酸鈉相比,添加酵母硒可以提高全血硒含量及血清中總抗氧化能力(T-AOC),谷胱苷肽過氧化物酶(GSH-PX)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力,降低丙二醛(MDA)含量;試驗(yàn)中以酵母硒0.3 mgSe/kgDM 組的奶牛上述指標(biāo)有顯著的改善。
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