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不同硒源對斷奶仔豬生產(chǎn)性能、免疫指標及硒利用率的影響
四川農(nóng)業(yè)大學動物營養(yǎng)研究所 四川雅安 625014
摘 要:為了探討以亞硒酸鈉和富硒酵母作為硒的來源添加到斷奶仔豬日糧中,對仔豬的生產(chǎn)性能和免疫功能等是否有不同的效果,以及斷奶仔豬對不同來源的硒的利用情況。試驗選用40頭28日齡斷奶的杜洛克×(長白×大白)三元雜交(DLY)仔豬(體重7.17±0.11Kg)為動物模型,采用單因子試驗設計,保持各處理中硒的添加量均為0.3mg/kg,分別以S-Se(亞硒酸鈉來源的硒)0.3mg/kg、S-Se 0.2mg/kg +Y-Se (富硒酵母來源的硒)0.1mg/kg、S-Se 0.1mg/kg + Y-Se 0.2mg/kg、Y-Se 0.3mg/kg作為四個處理。測定了以下指標:ADFI、ADF和F/G,腹瀉指數(shù);血清中IgA、IgG、IgM的濃度,全血的T-淋巴細胞轉化率;飼料原料、日糧、糞、尿中硒含量,計算了硒的利用率及在體內(nèi)的存留量。采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件對試驗數(shù)據(jù)進行One-Way ANOVA方差分析和LSD多重比較。
試驗結果表明:隨著Y-Se替代比例的增大,仔豬的ADFI和ADF在數(shù)值上均有增加的趨勢,F(xiàn)/G和腹瀉指數(shù)有降低的趨勢。從全期來看,Y-Se 0.3組的ADFI顯著高于S-Se 0.3組,分別為431.96±9.64g、 403.62±5.69g;其它指標均差異均不顯著。Y-Se 0.3組與S-Se 0.3組相比,血清中IgG、IgA、IgM濃度分別升高了3.7%、18.6%(P<0.01)、8.7%;全血的T-淋巴細胞轉化率提高了31.1%(P<0.01)。隨著Y-Se替代比例的增大,仔豬對硒的表觀消化率、表觀代謝率和硒的利用率均極顯著增加,其中Y-Se 0.3組與S-Se 0.3組分別為75.58±0.96%和65.72±2.24%、70.08±1.13%和39.47±3.02%、 52.97±1.2%和26.09±2.71%。
關鍵詞:富硒酵母 斷奶仔豬 生產(chǎn)性能 免疫指標 利用率
引言
尋找高效安全的抗生素的替代品是近年來研究的熱點。近年來的研究已表明酵母油促進仔豬生長提高飼料利用率的作用;而有機硒比無機硒更容易在體內(nèi)儲存,一些研究也發(fā)現(xiàn)能提高動物的免疫機能,從而改進生產(chǎn)性能;富硒酵母約94%的硒與蛋白質、核酸結合。含有各種硒基氨基酸類似物,約40%為硒代蛋氨酸,15%為硒代半胱氨酸和少部分的其它含硒氨基酸類似物[10],因此應具有酵母和有機硒的雙重作用,但有關富硒酵母對早期斷奶仔豬的生長有何影響,其所含有機硒的生物效價的研究報道存在著差異,特別是富硒酵母的作用機制也不完全清楚,對于特定富硒酵母產(chǎn)品的適宜用量也值得研究。本試驗擬用富硒酵母(湖北安琪)和亞硒酸鈉作比較,并以富硒酵母替代不同比例的亞硒酸鈉,通過對斷奶仔豬生產(chǎn)性能、免疫功能的影響以及酵母硒和亞硒酸鈉硒吸收代謝的差異,進一步證明富硒酵母對早期斷奶仔豬的生長有無促進作用,酵母硒的生物效價及其適宜替代量,同時對酵母硒的作用機理也作一些探討。
1 材料與方法
1.1試驗設計
本試驗采用單因子試驗設計,分為4個處理,保持各處理中硒的添加量均為0.3mg/kg,以富硒酵母按不同比例替代亞硒酸鈉。每個處理5個重復,每個重復2頭豬。詳見表1。
表1 試驗設計
| | | 0.3ppm亞硒酸鈉Se
(簡寫為:S-Se0.3) | | 0.2ppm亞硒酸鈉Se +0.1ppm富硒酵母Se(100g/T)
(簡寫為:Y-Se0.1) | | 0.1ppm亞硒酸鈉Se+0.2ppm富硒酵母Se(200g/T)
(簡寫為:Y-Se0.2) | | 0.3ppm富硒酵母Se(300g/T)
(簡寫為:Y-Se0.3) | 1.2試驗動物
于重慶市武隆縣購買健康的、體重接近的4周齡斷奶DLY仔豬46頭,公母各半,公豬已閹割。預飼期內(nèi)驅蟲,預飼一周后,選擇40頭,公母各半,分成20組,每組平均體重性別一致,然后隨機分配到四個處理。正式試驗期間未注射任何疫苗。
1.3試驗日糧
1.3.1富硒酵母產(chǎn)品介紹
富硒酵母是安琪公司生產(chǎn)的安琪福邦硒酵母。產(chǎn)品成分:富硒干酵母≥94%,水分≤6%,乳化劑微量,生物硒含量≥1000mg/kg;菌 種:釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),是國際上公認的安全菌株。
1.3.2 日糧配方
飼料原料中硒的含量見表2,試驗日糧組成及營養(yǎng)水平見表3。日糧配制參照NRC(1998)5-10Kg體重仔豬的營養(yǎng)需要設計。
表2 飼料原料中硒含量(實測)
1.4 飼養(yǎng)管理
試驗在重慶市畜牧科學研究院試驗場進行,試豬飼養(yǎng)在1.2m2的金屬籠中,試驗期與預飼期間,保持舍內(nèi)溫度在25—28℃,相對濕度在55-70%。每天兩次(8:00、14:00)清潔和消毒,并保持圈舍通風、干燥。預飼7天,期間喂乳豬顆粒料。
表3 基礎日糧的組成及營養(yǎng)水平
注:1. 每kg基礎日糧中含F(xiàn)e—100 ppm;Cu—6ppm;Zn—100ppm;Mn—8ppm;Se—0.04ppm;I—0.3ppm。
2. 每kg多維預混料中含VA 50,000,000IU VD3 10,000,000 IU VE 25000 IU VK3 5000mg VB1 2000 mg VB2 16000 mg VB6 6000 mg VB12 30 mg 煙酸 35000 mg 泛酸鈣 25000 mg 葉酸 500 mg 抗氧化劑 500 mg
3. D表示可消化氨基酸基礎。
1.5 測定指標
1.5.1 生產(chǎn)性能指標
生長試驗28天,試豬日喂4次(8:00、12:00、16:00、20:00),喂量以食后料槽略有剩余為度,自由飲水。飼養(yǎng)期間每隔7天稱重一次,采食量、剩料、污染飼料每天結余。每周統(tǒng)計各重復豬的飼料消耗、增重,并以此計算ADFI、ADF和F/G。
1.5.2 腹瀉指數(shù)
每天記錄仔豬腹瀉頭數(shù)。腹瀉指數(shù)( %) = ∑(腹瀉仔豬頭數(shù)×仔豬腹瀉天數(shù)) / (試驗仔豬頭數(shù)×正試期天數(shù)) ×100
1.5.3 硒的利用率
生長試驗結束后,每個處理選擇健康、接近平均體重的4頭公豬,分別單獨關到代謝籠中,預試3天,正試4天,收集糞和尿。試豬采食量為生長試驗中各處理平均采食量的90%,所有豬只日喂2次,8:00與18:00,自由飲水。每天結算采食量、排糞量和排尿量,糞和尿中分別加入10%的硫酸(糞按100g加10ml,尿按100ml加10ml)。試驗結束后將四天的糞和尿混合均勻,再取樣。
用原子熒光法測定飼料、糞、尿中的硒含量,所用儀器為北京海光儀器公司生產(chǎn)的AFS—230E型雙道原子熒光光度計。
1.5.4 血清中IgA、IgG、IgM濃度
試驗結束第二天早晨6:00空腹,分別對第一、第四處理的4頭仔豬前腔靜脈采血5ml, 制備的血清樣品分裝于Eppendorf試管中,于-20℃冰箱中保存。采用免疫透射比濁法和試劑盒測定血清免疫球蛋白G、免疫球蛋白A及免疫球蛋白M(IgA、IgG、IgM) 。
1.5.5 T-淋巴細胞轉化率
試驗結束第三天早晨6:00空腹,分別對第一、第四處理的4頭仔豬前腔靜脈采血5ml,IgA、IgG、IgM測定血漿T-淋巴細胞轉化率。用PHA 刺激培養(yǎng)的形態(tài)學方法(杜念興,2000)測定[18]。
1.6 數(shù)據(jù)處理
以每個重復為單位進行統(tǒng)計分析。采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件對試驗數(shù)據(jù)進行方差分析,用Duncan法進行多重比較。
2 試驗結果
2.1 生產(chǎn)性能
表4 不同硒源對斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響
注:表中數(shù)值為平均數(shù)±標準誤;肩注不同小寫字母者表示差異顯著 (P<0.05),肩注不同大寫字母者表示差異極顯著 (P<0.01),下同。
由表4可見前,兩周ADFI、ADG、F/G各處理組沒有明顯的差異(P>0.05)和變化規(guī)律。從第三周開始,隨著富硒酵母替代比例的增加, 各項指標均有不同程度的改善。 后兩周,Y-Se 0.3組的ADFI極顯著高于S-Se 0.3組和Y-Se 0.2組。從全期來看,Y-Se 0.3組的ADFI比S-Se 0.3組提高了7.02%。第4周 ,Y-Se 0.3組的ADFI比S-Se 0.3組提高了13.2%(P<0.01)。Y-Se 0.3組從第2周開始就呈現(xiàn)出優(yōu)于其它各組的趨勢,到第4周,其ADG極顯著的高于S-Se 0.3組,Y-Se 0.3組比S-Se 0.3組提高了19.98%(P<0.05)。但從全期看,各處理組之間差異均不顯著(P>0.05)。F/G前兩周沒有改善,后兩周隨著富硒酵母替代比例的增加,F(xiàn)/G在數(shù)值上有降低的趨勢(P>0.05)。腹瀉指數(shù)隨著富硒酵母替代比例的增加,仔豬腹瀉大有改善,Y-Se 0.3組的腹瀉指數(shù)比S-Se 0.3組降低了2.5個百分點。但是不知什么原因,Y-Se 0.2組腹瀉指數(shù)最高, Y-Se 0.2組的生產(chǎn)性能指標均不理想。
2.2 免疫指標
Y-Se 0.3組血清中IgG、IgA、IgM濃度比S-Se 0.3組分別升高了3.7%、18.6%、8.7%,其中IgA(P<0.01);全血的T-淋巴細胞轉化率提高了31.1%(P<0.01)。
表5 兩種硒源對免疫指標的影響
2.3 硒的利用
攝入硒:雖然采食量不同,4天代謝試驗期內(nèi)攝入的日糧總硒量,各處理之間差異不顯著。糞中硒含量:數(shù)值上隨著Y-Se替代比例的增加依次降低。S-Se 0.3組與Y-Se 0.3組之間差異極顯著,
S-Se 0.3組與Y-Se 0.2組、Y-Se 0.1組與Y-Se 0.3組都差異顯著
尿中硒含量:隨著Y-Se替代比例的增加而降低,各處理之間都差異極顯著。
表6 攝入、排出(糞、尿)的硒總量及硒的表觀消化率、表觀代謝率
表觀消化率:S-Se 0.3組為65.72%,隨著Y-Se替代比例的增加依次增加,Y-Se 0.3組達到75.78%(P<0.01)。除了Y-Se 0.1組與Y-Se 0.2組之間P>0.05外,其它各組之間都差異顯著。表觀代謝率:S-Se 0.3組為39.47%,依次增加,Y-Se 0.3組最高,達到70.08%。四個處理之間P<0.01。硒的利用率:S-Se 0.3組為26.09%,隨著Y-Se替代比例的增加而極顯著的升高, Y-Se 0.3組硒利用率達到52.97%。除了Y-Se 0.1組與Y-Se 0.2組之間P<0.05外,其它各組之間P<0.01。糞硒占攝入硒的比例:S-Se 0.3組為34.28%,依次減少,Y-Se 0.3組為24.42%(P<0.05)。除了Y-Se 0.1組與Y-Se 0.2組之間P>0.05外,其它各組之間P<0.05。尿硒占攝入硒的比例:隨著Y-Se添加比例的增加而依次降低,各處理之間P<0.01。不同硒源的排泄途徑:日糧中以亞硒酸鈉形式添加硒時,其尿硒/糞硒為1.16,以富硒酵母形式添加時,尿硒/糞硒為0.93。
3 討論
3.1 不同硒源對斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響
從本試驗的結果來看,隨著Y-Se替代比例的增加,斷奶仔豬的各個生產(chǎn)性能指標均有改善。Y-Se 0.3組與S-Se 0.3組比較:末重提高了5.54%,全期采食量提高了7.02%(P<0.05),全期平均日增重提高了11.67%,全期料重比降低了4.47%。
楊華(2002)研究表明,酵母硒有提高杜長大和長大商品豬生產(chǎn)性能的趨勢,但統(tǒng)計學上未達到顯著水平[19]。Kornegay等(1993)[20]在斷奶仔豬上研究發(fā)現(xiàn)在達到硒的正常需要量后,硒的水平對仔豬生產(chǎn)性能沒有影響。目前關于在滿足硒需要量前提下,有機硒與無機硒對動物生產(chǎn)性能有影響的報道不多并且結果不一致。本試驗結果跟前人的研究相比,富硒酵母較無機硒對斷奶仔豬的生產(chǎn)性能有更好的效果,并且腹瀉指數(shù)隨著富硒酵母添加比例的增加,有降低的趨勢。分析原因,除了富硒酵母中與蛋白結合的硒可能對動物生長有一定的促進作用外,富硒酵母產(chǎn)品中所含有的各種活性成分、未知生長因子等,能促進腸道的發(fā)育,改善腸道菌群,提高機體的免疫能力,從而減少仔豬腹瀉,促進了養(yǎng)分的消化吸收,改善了生產(chǎn)性能。
關于酵母產(chǎn)品促進動物生產(chǎn)性能,已有大量研究報道。斷奶仔豬日糧中添加活性酵母培養(yǎng)物,提高采食量和生產(chǎn)性能[21],改善了日增重和料肉比[22]。添加酵母沒有影響仔豬生產(chǎn)性能, 養(yǎng)分的消化和糞中微生物受添加的活性酵母的影響不顯著[23]。洪奇華等(2005)證實富酶活性酵母降低仔豬的腹瀉頻率、提高日增重,提高養(yǎng)分的表觀消化率[24]。胡友軍等(2003)分別做了活性酵母對早期斷奶仔豬的影響的研究:試驗末重、日增重和飼料轉化率極顯著高于對照組;T淋巴細胞轉化率升高(P<0. 01)、降低腹瀉率,豬血液中CD4+/ CD8+比例提高(P<0. 01);降低腸道內(nèi)容物大腸埃希氏菌數(shù)(P<0. 05)和調節(jié)腸道微生物菌群平衡;提高斷奶仔豬腸絨毛高度;有降低斷奶仔豬結腸揮發(fā)性鹽基氮的趨勢[25,26]。
3.2 不同硒源對斷奶仔豬體液免疫和細胞免疫功能的影響
硒顯著地影響免疫,這是已經(jīng)得到公認的。Julian等(1973)就證明鼠日糧里添加亞硒酸鈉提高IgG、IgM抗體滴度[27]。日糧添加硒增強了血中淋巴細胞的轉化率及其調節(jié)的免疫功能[28,29]。Anne Peretz等(1991)在老年人上證明富硒酵母免疫刺激的特性[30]。
本試驗在體液免疫上,富硒酵母組比亞硒酸鈉組更有利于提高仔豬血清中的三種免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)濃度,特別是IgA極顯著增加。在細胞免疫上,富硒酵母組極顯著的增強了T-淋巴細胞的轉化率。
目前關于有機硒與無機硒對動物免疫方面的影響是否有差異、其差異的具體機制等,很少研究報道。Schumacher等(1990)研究發(fā)現(xiàn)硒的水平和來源顯著影響淋巴細胞在PHA等抗原刺激下的轉化率,而對IL-2和IL-1的水平的影響差異不顯著,表明硒對淋巴細胞增殖的作用機制與IL-2和IL-1無關[34]。
本試驗Y-Se 0.3組與S-Se 0.3組相比,免疫指標的這些差異,歸結為兩方面原因:(1)硒的不同化學形式在動物體內(nèi)的消化、吸收、轉化、代謝等的差異,有機硒能更好的發(fā)揮影響免疫的作用,這需要進行更多的基礎研究。(2)富硒酵母產(chǎn)品里含的豐富的B族維生素類、谷胱甘肽、酵母蛋白質、酵母其他無機鹽、多種酶類及其它活性物質等的作用。White等(2002)研究發(fā)現(xiàn)添加3%的啤酒干酵母提高了早期斷奶仔豬的免疫活性,比對照組有更高的血清IgG水平[35]。
3.3 斷奶仔豬對不同硒源提供的硒的利用率的差異
從本試驗的結果來看,(1)斷奶仔豬對Y-Se 0.3組的表觀消化率(75.58%)極顯著高于S-Se 0.3組(65.72%);斷奶仔豬對Y-Se 0.3組的表觀代謝率(70.08%)極顯著高于S-Se 0.3組(39.47%)。在數(shù)值上,仔豬對Y-Se的消化率與S-Se差別不大,代謝率卻是S-Se的1.8倍。(2)仔豬對Y-Se的利用率(52.97%)極顯著的高于S-Se(26.09%),提高了26.9個百分點,是S-Se的2.03倍。表明仔豬對Y-Se的利用率大大高于S-Se,在動物生產(chǎn)中以富硒酵母代替亞硒酸鈉作為硒來源,能夠降低硒的排泄量減少污染。(3)日糧中以亞硒酸鈉形式添加硒時,其尿硒/糞硒為1.16;以富硒酵母形式添加時,尿硒/糞硒為0.93;即亞硒酸鈉組以尿為硒的主要代謝途徑,富硒酵母組則以糞為其主要途徑。
表 7 本試驗與Mahan等 (1996)結果比較
| | Mahan,
Parrett (1996),生長豬 | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | Mahan等 (1996)在生長豬上的研究,(1)豬對Y-Se的表觀消化率與S-Se非常接近。(2)豬對Y-Se的表觀代謝率(72.4%)比S-Se(46.0%)提高了26.4個百分點,在數(shù)值上是亞硒酸鈉的1.57倍,利用率是S-Se的1.58倍,均比本試驗結果低。(3)以亞硒酸鈉形式添加硒時,其尿硒/糞硒為1.91;以富硒酵母形式添加時,尿硒/糞硒為0.78;與本試驗規(guī)律一致。說明有機硒與無機硒在動物體內(nèi)有的確不同的消化代謝機制。(4)在數(shù)值上,本試驗酵母硒組糞硒占攝入硒比例(24.42%)比亞硒酸鈉組(34.28%)低,而Mahan (1996) 是酵母硒組糞硒占攝入硒比例(27%)比亞硒酸鈉組(22%)高。
本試驗測得富硒酵母的表觀消化率、表觀代謝率、表觀利用率與亞硒酸鈉硒的差異度都比Mahan等 (1996)的大。分析原因可能是生長豬對無機硒的消化率比仔豬高,也可能是本試驗所用富硒酵母消化率高。有機硒比無機硒提高了硒在機體內(nèi)的存留量,已經(jīng)被許多學者證實。如下表:
表 8 其它學者有機硒與無機硒的試驗結果
| | | | | 亞硒酸鈉組血硒水平顯著低于酵母硒組,酵母硒組肝臟 硒濃度顯著高于亞硒酸鈉組 | | | 硒代蛋氨酸和亞硒酸鈉均使血清和組織中硒含量 增加(P<0.01),硒代蛋氨酸的這一作用較亞硒酸鈉明顯
| | | 對富硒酵母比S-Se能更有效的利用硒和形成此元素 在體內(nèi)的沉積和周轉 | | | | 以富硒酵母取代亞硒酸鈉作為硒的來源添加到仔豬日糧中,由于富硒酵母里的硒的利用率顯著高于亞硒酸鈉,是亞硒酸鈉的1.5~2倍,所以如果只為提供滿足動物需要量的硒時,用富硒酵母提供硒時不必達到0.3ppm,0.15~0.2 ppm即可保證其需要 。
從本試驗以及前人的大量研究可以看出,以富硒酵母作為硒源提高了硒的利用率降低了硒的排泄量,同時提高了動物免疫功能和生產(chǎn)性能,并且增加了機體組織中硒的含量,所以,在滿足動物對硒的需要量又低于中毒劑量的前提下,添加富硒酵母以生產(chǎn)富硒動物產(chǎn)品是 可行的 。
4 結論
(1)隨著富硒酵母替代比例的增大,斷奶仔豬日采食量、日增重都有提高的趨勢,料重比和腹瀉指數(shù)有下降的趨勢,提高了生產(chǎn)性能。
(2)富硒酵母完全替代亞硒酸鈉,血清中IgG、IgM的濃度均有升高的趨勢,IgA極顯著提高,增強了仔豬體液免疫水平;全血中T-淋巴細胞轉化率亦極顯著提高,增強了仔豬的細胞免疫功能。
(3)斷奶仔豬富硒酵母硒的表觀消化率、表觀代謝率和表觀利用率分別較亞硒酸鈉高15%、78%和103%;用富硒酵母提供硒時 0.15~0.2 ppm 可滿足動物硒的需要。
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Effect of Different Sources of Selenium on Growth Performance, Immunological Index and the Utility ratios of selenium in weaned Piglet
Zhong Chonghua,Wang Kangning
(Institute of Animal Nutrition, Sichuan Agricultural University,
Sichuan Yaan, 625014, China)
The research, by adding sodium selenite and Selenium-Enriched Yeast as the sources of selenium to the daily dietary, was to study the effect of different sources of selenium on growth performance, immunological index and the utility ratios of selenium in weaned piglet. Forty crossbred piglets Yorkshire×Landrace×Duroc(DLY) weaned at aged 28 days (weight 7.17±0.11Kg )were used as animal models. A signal factor design was employed with the supplementation of 0.3mg/kg selenium in four treatments: group S-Se (source of sodium selenite) 0.3mg/kg, group S-Se 0.2mg/kg+Y-Se (source of Selenium-Enriched Yeast) 0.1mg/kg, group S-Se 0.1mg/kg+ Y-Se 0.2mg/kg and group Y-Se 0.3mg/kg. ADFI, ADF and F/G, diarrhea index; serum titer of IgA, IgG, IgM and T-lymphocyte transformation ratio; content of selenium in feed material, daily dietary, feces, urine; utility ratios and accumulation of selenium in the body were counted. The data were analyzed using one-way analyses of variance procedures (ANOVAs) and LSD's multiple range tests by SPSS11.5.
Results of this research indicated as follows:
With the ratio of Y-Se increasing, ADFI and ADF showed a trend of increase while F/G and diarrhea index showed a trend of decrease. Seen from the whole period, ADFI of group Y-Se 0.3 was significantly higher than that of group S-Se 0.3, 403.62±5.69g、431.96±9.64g respectively;while other indexes showed no significant differences.
Compared with group S-Se 0.3, group Y-Se 0.3, of which IgA increased by 18.6 %(P<0.01), IgG increased by 3.7% ,and IgM increased d 7293 as follows: (1by 8.7% ,showed a trend of increase;T-lymphocyte transformation ratio increased by 31.1%(P<0.01).
With the ratio of Y-Se increasing, the apparent digestion of Se, the apparent absorption of Se and the retention to weaned piglet increased significantly, group Y-Se 0.3 and group S-Se 0.3, 75.58±0.96%and 65.72±2.24%、70.08±1.13% and 39.47±3.02%、 52.97±1.2% and 26.09±2.71% respectively.
Key words: Yeast-selenium; Weaned piglets; Growth performance;
immunological index; utility ratio
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