豬藍(lán)耳病的最新研究進(jìn)展及其啟示

wjunfeng1982

作者：朱漢守

美國(guó)明尼蘇達(dá)大學(xué)

一、典型藍(lán)耳病的臨床表現(xiàn)
在早期，典型的藍(lán)耳病表現(xiàn)如下癥狀：母豬厭食、早產(chǎn)（一般是預(yù)產(chǎn)期前2～7天早產(chǎn)），產(chǎn)生大量的弱仔和木乃伊，弱仔豬基本上很難飼養(yǎng)成活，這是藍(lán)耳病區(qū)別于其它導(dǎo)致流產(chǎn)的豬病的特點(diǎn)。母豬主要是妊娠后期流產(chǎn)，一般是一過(guò)性流產(chǎn)，4～8周恢復(fù)正常。
未流產(chǎn)母豬所產(chǎn)下的小豬，或流產(chǎn)、早產(chǎn)存活下來(lái)的小豬，這些豬斷奶進(jìn)入保育舍以后，主要的癥狀就是腹式呼吸且被毛雜亂，間質(zhì)肺炎相當(dāng)明顯（正常豬肺很軟，用手一按會(huì)塌陷，而且要很慢才能起的來(lái)，而患藍(lán)耳病豬只的肺很硬，肺間質(zhì)中充滿(mǎn)了各種細(xì)胞），但由于毒株的不同間質(zhì)肺炎嚴(yán)重程度的差異較大。
二、非典型藍(lán)耳病的特征
1997年以后，藍(lán)耳病（PRRS）發(fā)生的特征及臨床癥狀就和以往的典型藍(lán)耳病很不一樣了。
母豬妊娠早期開(kāi)始出現(xiàn)流產(chǎn)，然后到中期和晚期流產(chǎn)，流產(chǎn)會(huì)反復(fù)，幾乎整個(gè)妊娠期都存在高的流產(chǎn)率，但幾乎沒(méi)有木乃伊和死胎，同時(shí)，發(fā)病時(shí)母豬的死亡率更高，可能超過(guò)5%。
三、藍(lán)耳病病毒粒子
藍(lán)耳病病毒有6個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白，即GP3（分子量45KD）、GP4（分子量31KD）、GP2（分子量29KD）、GP5（分子量25KD）、M（分子量19KD）、N蛋白（分子量15KD）。只有病毒膜上的蛋白才有免疫原性，產(chǎn)生的抗體才能將病毒中和，即只有GP3、GP4、GP5蛋白產(chǎn)生的抗體才能夠中和病毒，換句話(huà)說(shuō)，疫苗里要有這幾種蛋白才能有效抵抗藍(lán)耳病。
如果用活的病毒，包括使用全病毒做出來(lái)的疫苗感染豬群后，大部分豬產(chǎn)生的抗體，是由N蛋白產(chǎn)生的，用ELISA測(cè)抗體可知。也就是說(shuō)，大多數(shù)時(shí)候ELISA檢測(cè)的結(jié)果同保護(hù)力沒(méi)有關(guān)系。
四、病毒序列分析
最常用的分析方法是用ORF5（5號(hào)開(kāi)放閱讀框）基因的PCR產(chǎn)物直接測(cè)序，但是病毒序列的相似性不能說(shuō)明它們之間是否具有交叉保護(hù)。 ORF5序列在豬場(chǎng)的運(yùn)用：鑒別藍(lán)耳病的爆發(fā)是由原毒株引起還是變異株引起；豬場(chǎng)是單一感染還是幾種PRRSV毒株同時(shí)存在；追溯新毒株的來(lái)源；監(jiān)控場(chǎng)內(nèi)和場(chǎng)間特定毒株的傳播；鑒別疫苗毒和野毒。
以前測(cè)序需要測(cè)整個(gè)ORF5，而現(xiàn)在毒株的多樣性分析只看ORF5的受體部分，看這一部分的差異是否造成免疫力等方面的區(qū)別。依據(jù)ORF5的受體識(shí)別區(qū)進(jìn)行分類(lèi)，同一類(lèi)的毒株可能具有交叉保護(hù)，而與其它類(lèi)之間就沒(méi)有交叉保護(hù)。
五、藍(lán)耳病的主要生物安全措施及控制策略
PRRSV的分類(lèi)和它的免疫原性迄今為止都沒(méi)有準(zhǔn)確的方法，到現(xiàn)在為止，實(shí)際上就沒(méi)法分類(lèi)。但是，豬場(chǎng)實(shí)踐中卻有很多實(shí)際有效的方法取得了巨大的成功。

1．后備母豬的檢疫及適應(yīng)性飼養(yǎng)
后備母豬隔離、檢疫和馴化等是相當(dāng)有用的方法，其要點(diǎn)是時(shí)間要長(zhǎng)，共約90天。前30天是隔離檢疫期，在這期間采血、打疫苗，看看有沒(méi)有明顯的癥狀表現(xiàn)出來(lái)，30天后人工接種病毒，大部分是自家母豬場(chǎng)里采集到的病毒，理論上馴化40天以后不再散毒，但是一般是60天，然后再進(jìn)入母豬群配種。為了這樣做，母豬場(chǎng)里需要專(zhuān)門(mén)建造后備母豬隔離舍。

2．運(yùn)豬車(chē)的清潔
試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，光用高壓水槍沖洗、熏蒸的效果都非常不理想，而用合適的消毒藥、8小時(shí)干燥等措施的效果較好。

3．保育舍的清潔策略
撤去風(fēng)扇、料槽、墊料和保溫?zé)舻?，預(yù)先沖洗30分鐘，用清潔劑清洗，高壓沖洗，用合適濃度的消毒劑消毒，使豬舍干燥并檢查，再準(zhǔn)備料槽、墊料和保溫?zé)舻?，轉(zhuǎn)入豬群前6～12小時(shí)控制溫度在適合的范圍。
要想控制好PRRS，除了必要的生物安全措施還需要血清學(xué)檢測(cè)；陽(yáng)性場(chǎng)后備母豬的培育、隔離以及馴化（人工感染）；加強(qiáng)產(chǎn)仔舍管理盡可能得到陰性斷奶仔豬；穩(wěn)定母豬群及降低保育豬群飼養(yǎng)密度；場(chǎng)內(nèi)凈化，清群及監(jiān)測(cè)等策略。

六、PRRSV感染的血清學(xué)診斷
ELISA在很多地區(qū)是標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)方法，但是，相比其它很多病毒，PRRSV有很多不同的地方。

ELISA檢測(cè)呈陽(yáng)性最多能說(shuō)明被病毒感染，并不意味著會(huì)出現(xiàn)臨床問(wèn)題，也不能說(shuō)明具有保護(hù)性，這和其它的病毒情況不一樣。

ELISA檢測(cè)呈陰性說(shuō)明以下幾個(gè)可能性：豬群未感染；豬群剛感染但血清還沒(méi)有陽(yáng)轉(zhuǎn)；豬群以前感染過(guò)但現(xiàn)在血清呈陰性（藍(lán)耳病一次感染后大約4個(gè)月左右轉(zhuǎn)陰，這在母豬群最典型）；豬群中的感染被清除且血清呈陰性；試驗(yàn)敏感性低。
通過(guò)使用PCR（測(cè)抗原）、ELISA（測(cè)抗體）等方法在3周齡、6周齡、10周齡、14周齡、18周齡、22周齡時(shí)序列測(cè)樣，就知道自己的豬群是在什么時(shí)候感染的病毒。
七、公豬群的PRRSV檢測(cè)
公豬感染PRRSV以后，血清里很快就有病毒，而精液中則稍晚，因此，采集血液進(jìn)行血清PCR檢測(cè)比精液檢測(cè)更敏感。
公豬檢測(cè)有兩個(gè)方法：一是做配對(duì)ELISA，做2次，間隔1個(gè)月，如果第2次檢測(cè)發(fā)現(xiàn)抗體上升，說(shuō)明有病毒感染；二是做PCR，間隔1個(gè)月采血1次，每次都要將血樣留下一部分，下次檢測(cè)時(shí)要加上前1次的一起檢測(cè)，以免誤差。
可能有這樣的情況發(fā)生，每隔一段時(shí)間采同一頭公豬的血樣，連續(xù)4個(gè)月抗體都在下降，但是到第5個(gè)月卻又上升了，這種情況很可能是由于新的感染。
八、當(dāng)前PRRS控制中的難題
現(xiàn)在PRRS的控制還是有很多的問(wèn)題，其中最大的問(wèn)題是PRRSV有很多種亞型，而且到底怎么分型還不能準(zhǔn)確知道，亞型之間的免疫原性也很差，相互沒(méi)有交叉的保護(hù)；第二，病毒多次感染以后就可能導(dǎo)致基因變異，在豬場(chǎng)產(chǎn)生產(chǎn)生新的病毒；第三，疫苗的免疫應(yīng)答不好，弱毒苗沒(méi)有加強(qiáng)免疫的應(yīng)答；第四，可通過(guò)精液傳播。
九、PRRS爆發(fā)時(shí)的管理指導(dǎo)
藍(lán)耳病爆發(fā)時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：

1．確保所有的母豬盡快感染（人工感染），千萬(wàn)不要再隔離，否則1年都結(jié)束不了。
（1）條件
后備豬是自己場(chǎng)生產(chǎn)的這種情況，如果這些豬在保育舍里已經(jīng)感染過(guò)PRRSV，就沒(méi)有必要做人工感染；如果后備豬在保育舍沒(méi)感染過(guò)或剛從外面引進(jìn)的陰性后備母豬，就須做人工的血清感染。
（2）病毒接種液的制備
收集疑似藍(lán)耳病豬如流產(chǎn)母豬、弱仔等的血清，混合起來(lái)，感染陰性的小豬，再?gòu)年幮缘男∝i身上采集病毒血清。
（3）效果評(píng)價(jià)
接種血清3周以后，ELISA檢測(cè)100%呈陽(yáng)性，這就說(shuō)明接種的血清里含有足夠量的病毒，接種有效果。出問(wèn)題的場(chǎng)其原因主要是：接種血清里病毒量不足；其它病原污染；錯(cuò)誤的免疫方法；錯(cuò)誤的病毒測(cè)定方法。

2．不要返飼母豬的胎衣等病料，因?yàn)槔锩娴牟《玖亢苌?，基本上沒(méi)什么作用。

3．禁止24小時(shí)以外的交叉代養(yǎng)，尤其不要在產(chǎn)房之間代養(yǎng)小豬，要避免仔豬在產(chǎn)仔舍之間的移動(dòng)。

4．PRRS爆發(fā)期間，要多淘、快淘病仔和弱仔豬.

5．轉(zhuǎn)入保育舍前淘汰體重過(guò)輕的斷奶仔豬，保育舍嚴(yán)格的全進(jìn)全出措施，防止繼發(fā)感染等。
十、藍(lán)耳病的凈化
對(duì)于母豬舍、保育舍、育肥舍分開(kāi)的豬場(chǎng)，其凈化起來(lái)就比較容易。通過(guò)血清學(xué)調(diào)查了解豬場(chǎng)病毒感染情況，找到陰性豬來(lái)源，并檢查生物安全。一次購(gòu)入2個(gè)月用的后備母豬，同時(shí)接種本場(chǎng)血清，然后封群，停止引進(jìn)陰性后備豬6個(gè)月（藍(lán)耳病的散毒期約是40多天，再長(zhǎng)也就是80多天，而凈化則需要2倍的時(shí)間，一般是200d）。6個(gè)月封群快結(jié)束時(shí)，清空保育舍仔豬。這樣的豬場(chǎng)就凈化了藍(lán)耳病。（詳見(jiàn)《今日養(yǎng)豬業(yè)》2009年第3期）
十一、PRRSV疫苗的新進(jìn)展
美國(guó)在PRRS疫苗方面有一些新的嘗試，其中一個(gè)就是做區(qū)域性的自家的亞單位疫苗，從豬場(chǎng)或某一地區(qū)的病毒分離出來(lái)，并選擇特定的毒株進(jìn)行培養(yǎng)，用特定的方法只把病毒膜蛋白提取出來(lái)，做成亞單位疫苗。
美國(guó)農(nóng)業(yè)部調(diào)查顯示，藍(lán)耳病弱毒苗的用量在美國(guó)已大大的降低了。現(xiàn)在看來(lái)，藍(lán)耳病的基因測(cè)序?qū)ΡＷo(hù)力沒(méi)有什么指導(dǎo)意義。至于疫苗是否有效，沒(méi)有統(tǒng)一的經(jīng)驗(yàn)，最好的判斷方法是測(cè)試，測(cè)試疫苗是否有效的方法如下：
已經(jīng)感染過(guò)藍(lán)耳病即將淘汰的母豬，采血測(cè)抗體，然后注射疫苗，4周后再采血測(cè)抗體，如果抗體變化很小或不變，就說(shuō)明母豬的抗體能夠中和疫苗的病毒，則認(rèn)為弱毒苗有效；如果抗體上升了，就說(shuō)明原來(lái)母豬有的抗體對(duì)疫苗病毒是沒(méi)用的，疫苗還能產(chǎn)生新的抗體。

hujinshui

沒(méi)見(jiàn)到確有效的疫苗