乙醚提取法（基準(zhǔn)方法）己烷提取快速法

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　　GB/T 5535.1—1998

　　前 言

　　本標(biāo)準(zhǔn)是依據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)ISO 3596-1：1988《動(dòng)植物油脂——不皂化物測(cè)定——第1部分：己醚提取法（第一方法）》對(duì)GB 5535—1985《植物油脂檢驗(yàn) 不皂化物測(cè)定法》進(jìn)行修訂的。在技術(shù)內(nèi)容上與該國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)等效，編寫(xiě)規(guī)則及表述上按照GB/T 1.1—1993《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1單元：標(biāo)準(zhǔn)的起草與表述規(guī)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)編寫(xiě)的基本規(guī)定》的要求進(jìn)行編寫(xiě)的。

　　本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)國(guó)內(nèi)貿(mào)易部提出。

　　本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：國(guó)內(nèi)貿(mào)易部谷物油脂化學(xué)研究所。

　　本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：郝希成、劉靜、應(yīng)珊紅。

　　ISO前言

　　ISO（國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織）是由各國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化團(tuán)體（ISO成員團(tuán)體）組成的世界性聯(lián)合會(huì)。制定國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的工作通常由ISO的技術(shù)委員會(huì)進(jìn)行。各成員團(tuán)體若對(duì)某技術(shù)委員會(huì)已確立的標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目感興趣均有權(quán)參加該委員會(huì)的工作。與ISO聯(lián)系的各國(guó)際組織（官方的或非官方的）也可參加有關(guān)工作。在電工技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)化方面，ISO與國(guó)際電工委員會(huì)（IEC）保持密切合作關(guān)系。

　　被技術(shù)委員會(huì)采用的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)草案由ISO委員會(huì)接受作為國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)前需提交各成員團(tuán)體通過(guò)。國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)需取得至少75%參加表決的成員團(tuán)體的通過(guò)，才能批準(zhǔn)為正式ISO標(biāo)準(zhǔn)。

　　國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)ISO 3596-1是由ISO/TC34農(nóng)產(chǎn)食品技術(shù)委員會(huì)制定的，ISO 3596的總題目是《動(dòng)物和植物脂肪和油——不皂化物測(cè)定》，由下列部分組成：

　　第1部分：乙醚提取法（基準(zhǔn)方法）

　　第2部分：己烷提取快速法

　　ISO 3596的本部分的附錄A僅供參考。

　　國(guó)家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局 1998—05—08 批準(zhǔn) 1998—12—01 實(shí)施

　　GB/T 5535.1—1998

　　中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

　　動(dòng)植物油脂 不皂化物測(cè)定

　　第1部分：乙醚提取快速法

　　Animal and vegetable fats and oils—

　　Determination of unsaponifiable matter—

　　Part 1:Method using diethyl ether extraction (Reference method)

　　GB/T 5535.1—1998

　　eqv ISO 3596-1:1988

　　代替 GB 5535-85

　　1 范圍

　　本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用己醚提取測(cè)定動(dòng)植物油脂不皂化物含量的第一方法。

　　本標(biāo)準(zhǔn)適用于所有油脂。不適用于蠟。而且對(duì)于高不皂化物含量的油脂僅能得到近似結(jié)果，如：海產(chǎn)動(dòng)物油脂。

　　當(dāng)氣候條件或環(huán)境不允許使用乙醚時(shí)可用己烷法。

　　2 引用標(biāo)準(zhǔn)

　　下列標(biāo)準(zhǔn)所包含的條文，通過(guò)在本標(biāo)準(zhǔn)中引用而構(gòu)成為本標(biāo)準(zhǔn)的條文。在標(biāo)準(zhǔn)出版時(shí)，所示版本均為有效。所有標(biāo)準(zhǔn)都會(huì)被修訂，使用本標(biāo)準(zhǔn)的各方應(yīng)探討使用下列標(biāo)準(zhǔn)最新版本的可能性。

　　GB/T 15687—1995 油脂試樣制備（eqv ISO 661：1989）

　　3 定義

　　本標(biāo)準(zhǔn)采用下列定義。

　　不皂化物：在本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的操作條件下，試樣用氫氧化鉀皂化后的全部生成物用一種特定的溶劑提取，蒸發(fā)溶劑、干燥后的殘留物。用質(zhì)量百分含量表示。

　　注：不皂化物包括天然類(lèi)脂物，如：甾醇、高分子脂肪醇及萜烯類(lèi)化合物等。除此以外任何在103℃的溫度下被溶劑提取的不揮發(fā)的有機(jī)雜質(zhì)（如礦物油）也可能存在。

　　4 原理

　　油脂與氫氧化鉀乙醇溶液在煮沸回流情況下進(jìn)行皂化，用乙醚從肥皂液中提取不皂化物，蒸發(fā)溶劑并對(duì)殘留物干燥后稱(chēng)重。

　　5 試劑

　　本標(biāo)準(zhǔn)所列試劑均為分析純，水為蒸餾水。

　　5．1 乙醚（HG 3-1002）：不含過(guò)氧化物和殘留物。

　　5．2 丙酮。

　　國(guó)家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局 1998—05—08 批準(zhǔn) 1998—12—01 實(shí)施

　　GB/T 5535.1—1998

　　5．3 氫氧化鉀（GB 2306）乙醇溶液：c(KOH)≈1 mol/L。

　　在50 mL水中溶解60 g氫氧化鉀然后用95%（V/V）乙醇稀釋至1000 mL。溶液應(yīng)為無(wú)色或淺黃色。

　　5．3．1 氫氧化鉀乙醇溶液：c(KOH)≈0.5 mol/L。

　　5．4 氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液：c(KOH) ≈0.1 mol/L（用95%乙醇配制）

　　使用前必須知道溶液的準(zhǔn)確濃度，并應(yīng)經(jīng)校正。使用最少五天前配制的溶液，移清液于棕色玻璃瓶中貯存，用橡皮塞塞緊。溶液應(yīng)為無(wú)色或淺黃色。

　　5．5 酚酞（GB 10729）指示劑溶液：10 g/L的95%乙醇溶液。

　　6 儀器

　　6．1 圓底燒瓶：帶標(biāo)準(zhǔn)磨口的250 mL圓底燒瓶。

　　6．2 回流冷凝管：與燒瓶（6.1）磨口配套。

　　6．3 500 mL分液漏斗，最好使用聚四氟乙烯活塞和塞子。

　　6．4 水浴鍋

　　6．5 可保持（103±2）℃的電烘箱或真空干燥儀器，如旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器等相似儀器。

　　7 試樣制備

　　按GB/T 15687進(jìn)行。

　　8 分析步驟

　　8．1 試樣

　　稱(chēng)約5 g試樣（精確至0.01 g）放入250 mL燒瓶中（6.1）。

　　8．2 皂化

　　加50 mL氫氧化鉀溶液（5.3）和一些沸石。燒瓶與回流冷凝管(6.2)聯(lián)接好后煮沸回流1 h。停止加熱，從回流管項(xiàng)部加入100 mL水并旋搖。

　　8．3 不皂化物的提取

　　冷卻后轉(zhuǎn)移溶液到500 mL分液漏斗（6.3），用100 mL乙醚（5.1）分幾次洗涮燒瓶和沸石，將這些沖洗液倒入分液漏斗。蓋好塞子，用力搖1 min，倒轉(zhuǎn)分液漏斗小心打開(kāi)活塞，間歇地釋放內(nèi)壓。靜置分層后，盡量將下層皂液放入第二只分液漏斗中。

　　注：如果形成乳化液，可加少量乙醇或濃氫氧化鉀或氯化鈉破乳。

　　將乙醇肥皂水溶液提取兩次以上，每次用100 mL乙醚，并使用相同方法。收集三次乙醚提取液放入裝有40 mL水的分液漏斗中。

　　8．4 醚提取液的洗滌

　　輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)裝有40 mL水和提取液的混合液的分液漏斗。

　　注：劇烈搖動(dòng)在此階段會(huì)形成乳化液。

　　完全分層后棄去下面水層。每次用40 mL水洗滌醚溶液兩次以上，并劇烈震搖，分層后棄去下面水層，排出洗滌液時(shí)需留2 mL，然后沿其軸線旋轉(zhuǎn)分液漏斗，等幾分鐘水層繼續(xù)收集。棄去水層，當(dāng)醚溶液到達(dá)活塞口時(shí)關(guān)閉活塞。

　　先用40 mL氫氧化鉀溶液（5.3.1）后用40 mL水連續(xù)洗滌溶液兩次。最后按上法用40 mL水洗滌兩次以上。

　　繼續(xù)用水洗滌，直到加入一滴酚酞溶液（5.5）的洗滌液不再呈粉紅色為止。

　　8．5 蒸發(fā)溶劑

　　國(guó)家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局 1998—05—08 批準(zhǔn) 1998—12—01 實(shí)施

　　GB/T 5535.1—1998

　　通過(guò)分液漏斗的上口每次少量的將醚溶液定量轉(zhuǎn)移至預(yù)先在（103±2）℃的烘箱(6.5)中干燥，冷卻后稱(chēng)重，稱(chēng)準(zhǔn)至0.1 mg的250 mL燒瓶（6.1）中。在沸水浴（6.4）上蒸餾回收溶劑。

　　加入5 mL丙酮，在緩緩的空氣流下，將揮發(fā)性溶劑完全蒸發(fā)。

　　8．6 殘留物的干燥和測(cè)定

　　殘留物在（103±2）℃的烘箱中干燥殘留物15 min，燒瓶水平放置。在干燥器中冷卻，并稱(chēng)重準(zhǔn)確至0.1 mg。

　　按上法重復(fù)干燥直至兩次稱(chēng)重質(zhì)量不超過(guò)1.5 mg。如果三次干燥后還不恒重，則不皂化物可能被污染，需重新進(jìn)行測(cè)定。

　　當(dāng)以游離脂肪酸的含量來(lái)校正殘留物的重量時(shí)，將稱(chēng)重后的殘留物溶于4 mL乙醚中，然后加入20 mL預(yù)先中和到對(duì)酚酞指示液（5.3）呈淡粉色的乙醇。用氫氧化鉀溶液（5.4）滴定到相同的最終顏色。

　　用油酸計(jì)算游離脂肪酸的質(zhì)量，并以此校正殘留物的質(zhì)量（見(jiàn)第9章）。

　　8．7 測(cè)定次數(shù)

　　同一試樣需進(jìn)行兩次測(cè)定。

　　8．8 空白試驗(yàn)

　　用相同步驟及相同量的所有試劑，但不加試樣。如果殘留物超過(guò)1.5 mg，需對(duì)試劑和方法進(jìn)行改進(jìn)。

　　9 結(jié)果計(jì)算

　　不皂化物含量用樣品的質(zhì)量百分含量表示，并按式（1）進(jìn)行計(jì)算：

　　()100%0321×??=mmmm不皂化物 ………………（1）

　　式中：m0——試樣的質(zhì)量，g；

　　m1——?dú)埩粑锏馁|(zhì)量，g；

　　m2——空白的殘留物質(zhì)量，g；

　　m3——游離脂肪酸的質(zhì)量，等于0.28Vc,g；

　　V——標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鉀乙醇溶液的體積，mL；

　　c——?dú)溲趸浺掖紭?biāo)準(zhǔn)溶液的準(zhǔn)確濃度，mol/L。

　　用兩次測(cè)定的算術(shù)平均值作為結(jié)果。

　　10 試驗(yàn)報(bào)告

　　試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)規(guī)定得到結(jié)果的使用方法。還要對(duì)使用本標(biāo)準(zhǔn)沒(méi)有規(guī)定的任何方法以及任何可能影響結(jié)果的所有操作細(xì)節(jié)進(jìn)行描述。

　　試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)該包括樣品鑒定所需的完整資料。

　　國(guó)家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局 1998—05—08 批準(zhǔn) 1998—12—01 實(shí)施

guomin

萃取實(shí)驗(yàn)