低聚果糖(Fructoolygosaccharidl)又稱寡果糖、果寡低聚糖、蔗果三糖族低聚糖等,分子式為G-F-Fn(G葡萄糖,果糖,n=l~3),是在蔗糖分子上以β-l,2糖節(jié)鍵結(jié)合數(shù)個D果糖所形成的一組低聚糖總稱,廣泛存在于香蕉、大麥、小麥、大蒜,洋蔥、黑麥、馬鈴薯、洋姜、萵苣、菊芋等植物及酵母中,但提取較為困難,且難以批量生產(chǎn),高品位FOS制劑主要是利用微生物和植物中具有的果糖轉(zhuǎn)移活性酶(β-吠喃果糖苷酶、果糖轉(zhuǎn)移酶)作用于蔗糖,經(jīng)脫色、過濾、脫鹽及濃縮精制而成,主要含GFn型,其產(chǎn)品是GF2、GF3 、GF4、蔗糖、葡萄糖與果糖的混合物,其中含GFn57%、葡萄糖與果糖33%、蔗糖10%。植物中的FOS存在形式多種多樣,而作為添加劑應(yīng)用于飼料中的主要為寡果三糖(GF2)、寡果四糖(GF3)和寡果五糖(GF4)。
1 FOS的理化特性
固體的FOS為無色粉末,溶解性好,溶液無色透明,其溶液的熱穩(wěn)定性受酸堿度影響較大。當(dāng)pH為中性時,12O℃條件下相當(dāng)穩(wěn)定,但在酸性條件下(pH=3)時,溫度達(dá)到70℃以后極易分解。甜度較高,比蔗糖甜味清爽,所含熱值較低,體內(nèi)測定的FOS能量僅為6.28J/g 。0~70℃范圍內(nèi),F(xiàn)OS的粘度隨溫度上升而降低。FOS的吸濕性差,添加于飼料中可緩解飼料因吸濕而發(fā)霉、變酸,防霉性能好,可延長飼料保存期。
2 FOS的作用機(jī)理
2.l FOS與腸道微生態(tài) FOS對腸道微生態(tài)具有調(diào)節(jié)作用。動物體內(nèi)分泌的α-淀粉酶、蔗糖酶、麥芽糖酶不能水解以β-1,2-糖甘鍵相連的FOS,因此FOS大都能順利通過胃和小腸而不被降解利用,而大腸中的乳酸桿菌、雙歧桿菌、梭狀芽孢桿菌可產(chǎn)生一系列的果糖苦酶,因此這些有益菌可利用FOS而大量增殖,而有害菌如大腸桿菌、沙門氏菌則不能分泌果糖苷酶,不能利用FOS。同時有益菌增殖后,會通過各種途徑抑制有害菌,從而使腸道微生態(tài)系統(tǒng)調(diào)整到正常狀態(tài)。Bailey(1991)報道,雙歧桿菌、消化道鏈球菌與克雷伯氏桿菌可利用FOS,而梭狀芽抱桿菌、大腸桿菌和沙門氏菌不能利用FOS,所測試驗的20種血清型沙門氏菌中,無一能在以FOS為惟一碳源的培養(yǎng)基上生長;當(dāng)在雞飲水中加入2%F0S時,沙門氏菌數(shù)減少,這是因為FOS改變了腸道微生物區(qū)系的組成,從而降低了雞對沙門氏菌感染的敏感性。Oyarzabal等(1995)研究了13種直接飼喂的微生物和6種血清型沙門氏菌在添加FOS或以FOS為惟一碳源的培養(yǎng)基上生長及抑制情況,結(jié)果表明,兩種雙歧桿菌、糞鏈球菌、兩種乳酸桿菌和片球菌明顯抑制了6種血清型沙門氏菌的生長;糞鏈球菌、乳酸桿菌和片球菌可在添加有FOS或以FOS為惟一碳源的培養(yǎng)基上生長;6種沙門氏菌可在添加有FOS的培養(yǎng)基上生長,而沒有一種沙門氏菌可在以FOS為惟一碳源的培養(yǎng)基上生長。埃希氏大腸桿菌等多種致病菌不能利用FOS,體外試驗表明,F(xiàn)OS能被雙歧桿菌和某些乳酸桿菌、擬桿菌、鏈球菌及腸細(xì)菌所利用。雙歧桿菌和乳酸桿菌可將腸道內(nèi)的FOS發(fā)酵生成有機(jī)酸,從而降低pH值,可以抑制包括很多革蘭氏陰性菌在內(nèi)的病源菌的繁殖,并產(chǎn)生可以抑制有害菌的細(xì)菌素、過氧化氫等。同時還可在動物腸道中合成蛋白質(zhì)及B族和K族維生素。Oyarzabal等(1994)在培養(yǎng)基中加入1%mFOS,經(jīng)6h培養(yǎng)可使pH值從6.52降至5.1O,pH值的降低是片球菌具有抑制效應(yīng)的主要原因。Gibson(1994)報道了8種雙歧桿菌對沙門氏菌及其他病源菌的抑制效應(yīng),在pH7.0時雙歧仟菌培養(yǎng)物中的甲醇、丙醇提取物對病源菌同樣具有抑制效應(yīng),這表明產(chǎn)生有機(jī)酸并不是抑制效應(yīng)的惟一原因。雙歧桿菌也可產(chǎn)生抗微生物物質(zhì)而具有抑制效應(yīng),雙歧桿菌數(shù)量的增加,可抑制有害菌的生長。此外雙歧桿菌也具有較強的免疫活性,可提高機(jī)體免疫力和延緩機(jī)體衰老。
2.2 FOS與腸道生理FOS可以促進(jìn)動物腸道發(fā)育。Tokunaga(1986)發(fā)現(xiàn),F(xiàn)OS增加了大鼠的盲腸與結(jié)腸濕重。Howard(1993)發(fā)現(xiàn)了FOS增加大鼠盲腸壁的重量,促進(jìn)了盲腸上皮細(xì)胞的增殖;新生仔豬補飼FOS后,盲腸上皮粘膜細(xì)胞密度及標(biāo)記細(xì)胞數(shù)增加;結(jié)腸近端上皮粘膜隱窩深度、標(biāo)記細(xì)胞高度、標(biāo)記細(xì)胞數(shù)、增殖區(qū)細(xì)胞數(shù)、標(biāo)記指數(shù)及細(xì)胞密度增加;結(jié)腸遠(yuǎn)端上皮細(xì)胞粘膜隱窩深度、標(biāo)記細(xì)胞高度、細(xì)胞密度、標(biāo)記細(xì)胞、增殖區(qū)細(xì)胞及橋記指數(shù)增加。lto(1993)認(rèn)為,F(xiàn)OS對腸道內(nèi)源糖分解酶具有抗性,可完整地通過腸道而到達(dá)后腸,在后腸被發(fā)酵,其發(fā)酵的產(chǎn)物丁酸是結(jié)腸粘膜的主要能源物質(zhì),并可刺激上皮細(xì)胞的生長。日糧中添加FOS后,盲腸丁酸濃度含量上升,短鏈脂肪酸上升,pH值降低,盲腸總重及盲腸壁重增加,但對結(jié)腸壁沒有影響;盲腸中雙歧桿菌及總厭氧菌數(shù)增加,好氧菌數(shù)減少。日糧中的FOS被代謝后產(chǎn)生短鏈脂肪酸,降低了pH值及促進(jìn)雙歧桿菌的增殖而改善了腸道健康。結(jié)腸細(xì)胞生長的營養(yǎng)物質(zhì),主要來源于細(xì)胞發(fā)酵產(chǎn)生的短鏈脂肪酸,而丁酸氧化提供了人結(jié)腸組織生長所需能量的70%,大鼠結(jié)腸粘膜可優(yōu)先利用丁酸作為能源物質(zhì)。Ohta用FOS飼喂大鼠,結(jié)果使大腸、小腸粘膜重及其總蛋白含量都得到增加。因此FOS可通過腸道細(xì)菌發(fā)酵產(chǎn)生的短鏈脂肪酸,而促進(jìn)粘膜細(xì)胞的增殖。飼喂FOS促進(jìn)了丁酸水平的提高,結(jié)腸細(xì)胞優(yōu)先利用丁酸,從而促進(jìn)結(jié)腸細(xì)胞增生。FOS增加了盲腸總重及盲腸壁重,是因為FOS通過發(fā)酵產(chǎn)生丁酸提供能源而增加了隱窩深度及細(xì)胞密度。
2.3 FOS與脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)代謝 FOS具有降脂效應(yīng)。高血脂病人和糖尿病人服用Fos后,脂質(zhì)代謝可得到改善。日糧中加入FOS后,大鼠腸道微生物發(fā)酵產(chǎn)生的乙酸減少,而丙酸與丁酸的量上升,乙酸極少被利用,而丁酸則從肝臟中被清除掉。因此FOS在大鼠肝臟中主要代謝形式為丙酸,丙酸通過門靜脈到達(dá)肝臟后,對膽固醇的合成進(jìn)行調(diào)控,從而改善脂質(zhì)代謝。
FOS對動物的糞氮代謝與尿氮代謝具有調(diào)節(jié)作用。用菊粉飼喂大鼠,促進(jìn)了盲腸的擴(kuò)張與盲腸內(nèi)容物的酸化。菊粉對凈氮平衡沒有影響,但明顯抑制了氮消化率,這表明氮排泄由腎臟轉(zhuǎn)向腸道。尿素氮轉(zhuǎn)移(血漿-盲腸)與氨態(tài)氮轉(zhuǎn)移(盲腸血漿)間的平衡為正,表明菊粉使盲腸中的尿素氮沉積為正。飼喂菊粉(含45%酪蛋白)日糧,尿素氮轉(zhuǎn)移量高,但大部分都以氨的形式被重新吸收,這表明細(xì)菌對其利用率很低。菊粉提高了盲腸中游離氨基酸的濃度,但盲腸對氨基酸的重吸收很少,因此菊粉顯著增加了糞氮排泄而抑制了尿氮排泄,但對蛋自質(zhì)的總利用率沒有影響。菊粉之所以能有效地促進(jìn)尿素氮向腸道轉(zhuǎn)移,是因為菊粉對小腸滲透壓產(chǎn)生影響,從而增加回腸末端尿素的量,或者菊粉通過促進(jìn)尿素分解菌的繁殖或通過促進(jìn)尿素氮的擴(kuò)散,而增加了尿素的分解。
FOS可促進(jìn)鈣、鎂、鐵等礦物質(zhì)的吸收。Ohta(1993、1994、1995)報道,日糧中補充5%F0S使大鼠對鈣、鎂的吸收率分別增加28%和41%。0hta(1998a)報道,大腸中鈣的吸收率與鈣結(jié)合蛋目的相對含量呈正相關(guān),而小腸中鈣的吸收率與鈣結(jié)合蛋白D9K的相對含量呈負(fù)相關(guān),補充FOS后增加了大腸中而減少了小腸中鈣結(jié)合蛋白D9K的水平,這表明FOS可能通過轉(zhuǎn)細(xì)胞途徑刺激了大腸中鈣的吸收。Ohta(1997)證實,FOS促進(jìn)鈣吸收的主要途徑是大腸 -盲腸、結(jié)腸、直腸。FOS可完整地經(jīng)過小腸而進(jìn)入大腸,被腸腔中的細(xì)菌發(fā)酵產(chǎn)生有機(jī)酸如乙酸、丙酸和丁酸,這些有機(jī)酸可溶解腸腔內(nèi)容物中的不溶性鈣鹽,并通過旁細(xì)胞途徑促進(jìn)了鈣的吸收。另據(jù)報道,雞腎細(xì)胞培養(yǎng)物中加入丁酸鈉促進(jìn)了1,25-VD3受體活性及鈣結(jié)合蛋白D28K的量增加,而FOS經(jīng)發(fā)酵可產(chǎn)生丁酸,因而飼喂FOS通過產(chǎn)生丁酸以類似的機(jī)制刺激了大腸粘膜細(xì)胞中鈣結(jié)合蛋白D9K產(chǎn)生。Ohta(1995、1997、1998b)報道,大鼠胃切除后導(dǎo)致貧血及骨質(zhì)減少,而攝人FOS可增加鐵的吸收,并促進(jìn)貧血的恢復(fù),盲腸內(nèi)容物可溶性提取物中鐵的濃度升高,這表明,鐵不僅在小腸內(nèi)吸收,還可以在大腸內(nèi)吸收。FOS促進(jìn)鐵吸收的主要機(jī)制:1)FOS可使蛋白質(zhì)的組成發(fā)生改變從而增加鐵在小腸內(nèi)的吸收增加;2)FOS所致的鈣吸收,也增加了鐵的吸收;3)FOS代謝所產(chǎn)生的丙酸,可刺激血紅素的合成。
2.4 FOS與機(jī)體免疫 在20世紀(jì)60年代,F(xiàn)OS就被認(rèn)為是一種免疫促進(jìn)劑,可提高動物的免疫功能,主要是通過以下幾方面來實現(xiàn):
2.4.1 促進(jìn)雙歧桿菌增殖及增強動物免疫機(jī)能試驗證明,攝入雙歧桿菌活西域死菌均可提高機(jī)體的抗體水平,激活巨噬細(xì)胞的吞噬活性,這對提高機(jī)體的抗感染能力,預(yù)防、抑制和殺死腫瘤細(xì)胞有重要作用,而胃腸道中乳酸桿菌、雙歧桿菌在腸壁的定植,可激發(fā)機(jī)體發(fā)生特異免疫反應(yīng)。
2.4.2 有免疫佐劑和抗原特性 FOS具有免疫佐劑及免疫調(diào)節(jié)作用。FOS對脂多糖有輔助作用,從而增強細(xì)胞和體液免疫功能,此外FOS還具有抗原作用,可引起直接的抗體應(yīng)答。
2.4.3 激活機(jī)體體液免疫和細(xì)胞免疫。
3 FOs在飼料中的應(yīng)用
3.1 FOS在豬日糧中的應(yīng)用 Farnworth等(1992)報道,斷奶仔豬日糧中添加寡果三糖、寡果四糖和寡果五糖的混合物(比例為7:15:37),添加量為l.5%,結(jié)果日增重顯著提高。盧福莊等(1999)在仔豬日糧中添加FOS發(fā)現(xiàn),仔豬日增重提高6.4%,單位增重的飼料消耗下降11.7%,飼料效率提高10%。Russe1等(1996)報道,給斷奶仔豬每天補充0.1gF0S,促進(jìn)了仔豬結(jié)腸中有益微生物的增殖,而阻止病原微生物的定植,并改善了斷奶后的生長性能,但Krngay(l992)則認(rèn)為,F(xiàn)OS對仔豬生長性能沒有影響。Aoudijk(1998)認(rèn)為,仔豬對FOS具有一段適應(yīng)期,且飼喂FOS具有補償生長效應(yīng)。王亞軍等(2000)報道,仔豬日糧中添加0.1%的FOS,提高了斷奶仔豬的日增重19.88%(P<0.01),提高采食量18.04%(P>0.05),降低料重比2.2%(P>0.05),降低斷奶仔豬腹瀉發(fā)病率46.7%。日本北里大學(xué)報道,FOS可提高母豬泌乳量,同時末成熟胎兒發(fā)生率降低10%,母豬從斷奶至發(fā)情的時間間隔從10d縮短至7d。日本農(nóng)場長期使用FOS后發(fā)現(xiàn),母豬產(chǎn)仔數(shù)平均增加0.7頭,公豬精子密度提高20%-25%,受胎率提高,母豬便秘減少,斷奶仔豬體重從5.4kg提高到6.3kg,腹瀉大幅下降,亦可改善夏季采食量下降對豬造成的不利影響。Howard等(1993)在乳豬日糧中添加0.3%FOS,新生仔豬(36h~15d)盲腸上皮粘膜、細(xì)胞密度、標(biāo)記細(xì)胞數(shù)、結(jié)腸上皮粘膜、隱窩深度、標(biāo)記細(xì)胞高度、邊緣、增值區(qū)均上升。
3.2 F0S在雞日糧中的應(yīng)用 吳天星(1998)將200只15日齡狄高雞隨機(jī)分為4組,日糧中FOS添加量分別為0、0.25%、0.50%和1.00%,飼養(yǎng)至56日齡,試驗結(jié)果見表l。 表1 不同水平S的FPS對狄高雞生產(chǎn)性能的影響
添加水平(%)
|
存活率(%)
|
體增重(g)
|
料重比
|
腹瀉率(%)
|
0
|
86
|
1407
|
2057
|
15.61
|
0.25
|
96
|
1452
|
2.40
|
4.90
|
0.50
|
96
|
1511
|
2.24
|
1.50
|
1.00
|
92
|
1454
|
2.38
|
10.20
|
表1 表明,肉雞日糧中FOS的添加水平C 0.25%~0.50%為宜,當(dāng)添加量達(dá)到1.00%以后肉雞腹瀉增加,飼料報酬及日重低于添加水平為0.50%的組,認(rèn)為是雞腸道微生物對FOS的利用能力有限所致。
在肉雞日糧中添加一定量的FOS,可改善采食量、增重和飼料報酬,腸道乳酸桿菌、雙歧桿菌顯著增加,沙門氏桿菌、大腸桿菌減少。在熱應(yīng)激條件下添加FOS的效果更好。
3.3 FOS在魚日糧中的應(yīng)用 FOS在魚日糧中應(yīng)用的研究目前雖然很少,但零星的研究結(jié)果,卻帶來了巨大的希望。木源鯰等(1996)在他們的專利中,介紹了將FOS能促進(jìn)魚類生長,減少死亡率,降低糞便中氨排放量,防止污染水質(zhì)。他們使用了1000條魚試驗,結(jié)果表明,添加FOS可促進(jìn)生長,F(xiàn)OS在魚飼料中的用量以0.1%~1%為宜,詳見表2。 表2 不同含量的FOS對魚增重的影響
|
FOS含量(%)
|
超媽重(g)
|
平均體重(g)
|
2周
|
4周
|
6周
|
8周
|
對照組
|
|
|
|
|
|
|
|
0
|
50
|
64
|
81.9
|
104.9
|
134.2
|
|
0.005
|
50
|
67
|
80.5
|
103.2
|
136
|
|
0.01
|
50
|
64
|
83.2
|
108.1
|
140.5
|
試驗組
|
|
|
|
|
|
|
|
0.1
|
50
|
60
|
85
|
118
|
145.1
|
|
1
|
50
|
65.6
|
84.3
|
118
|
145.1
|
|
10
|
50
|
68
|
82
|
107.7
|
140.1
|
|
15
|
50
|
60
|
82
|
106.6
|
135.4
|
|