氯化膽堿原料的摻假識(shí)別（轉(zhuǎn)）

verdanki_576 · 發(fā)表于 2011-4-10 18:26:57

　　膽堿是生物體內(nèi)不可缺少的基本組分之一，通常被認(rèn)為是B族維生素類的一種（也稱為維生素B4），它在生物體內(nèi)具有不可替代的基本功能，主要體現(xiàn)在3個(gè)方面：它是細(xì)胞膜的組成成分之一；促進(jìn)脂肪的分解（避免脂肪肝）；傳遞神經(jīng)信號(hào)。當(dāng)動(dòng)物體內(nèi)膽堿不足時(shí)，將表現(xiàn)膽堿缺乏癥：家禽表現(xiàn)為生長(zhǎng)受阻；肝臟和腎臟出現(xiàn)脂肪浸潤(rùn)；脛骨短粗，出現(xiàn)滑腱癥；死亡率提高；產(chǎn)蛋率下降；蛋規(guī)格縮小。豬表現(xiàn)出生長(zhǎng)緩慢；行為紊亂，神經(jīng)錯(cuò)亂；營(yíng)養(yǎng)不良，繁殖力差；脂肪肝等。因此滿足動(dòng)物體內(nèi)膽堿需要量，對(duì)于維持動(dòng)物健康成長(zhǎng)和正常生產(chǎn)力具有重要意義。雖然天然飼料原料中都存在膽堿，但其數(shù)量不足以滿足動(dòng)物每天的生長(zhǎng)需要，必須在飼料中添加。在飼料工業(yè)中，膽堿通常以氯化膽堿的形式添加，目前我國(guó)氯化膽堿添加劑主要是50％的粉劑，另外還有60％的粉劑和70％的水劑，但最常用的是50％的粉劑。該產(chǎn)品執(zhí)行GB10818－89，含量測(cè)定為高氯酸滴定法，測(cè)定原理是先用甲醇將氯化膽堿萃取出來(lái)，將溶劑蒸發(fā)掉，然后用乙酸汞將氯化膽堿轉(zhuǎn)化為乙酸鹽和難電離的氯化汞，在乙酸介質(zhì)中用高氯酸對(duì)生成的乙酸鹽進(jìn)行滴定。對(duì)于真正的氯化膽堿，用該法測(cè)出的氯化膽堿含量準(zhǔn)確、可靠。但最近幾年隨著市場(chǎng)的供大于求，一些不法廠家在壓低價(jià)格的同時(shí)，在氯化膽堿中摻入其它低成本的物質(zhì)如氯化物、銨鹽或三甲胺原料等，這種摻假的氯化膽堿用國(guó)標(biāo)方法檢測(cè)無(wú)法發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，若使用于飼料中，會(huì)給飼料廠家的飼料質(zhì)量信譽(yù)度帶來(lái)極大的負(fù)面影響，并使養(yǎng)殖戶蒙受經(jīng)濟(jì)上的損失。因此如何有效識(shí)別氯化膽堿的摻假，得出氯化膽堿的真實(shí)含量對(duì)于飼料廠來(lái)說(shuō)具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。筆者根據(jù)工作實(shí)踐，參考有關(guān)資料，在這方面積累了一定經(jīng)驗(yàn)，進(jìn)行以下總結(jié)。

　　目前國(guó)內(nèi)通常有4種測(cè)定50％氯化膽堿粉劑中氯化膽堿含量的方法：（1）非水滴定法；（2）銀量法；（3）定氮法；（4）四苯硼鈉重量法。

　　一、方法介紹

　　1、非水滴定法（GB10818－89）

　　稱取80℃下干燥3h的樣品0.7g（稱準(zhǔn)至0.0002 g），置于250 ml三角瓶中，加甲醇40 ml，充分搖動(dòng)30 min后過(guò)濾，再分別用20ml、15ml、15ml甲醇洗滌沉淀3次，將濾液和洗液合并，在水浴上蒸發(fā)至干，備用。在上述三角瓶中加入20ml冰乙酸使溶解，再加2ml乙酸酐，10ml乙酸汞試液和兩滴結(jié)晶紫指示液，搖勻，用高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至溶液呈純藍(lán)色。同時(shí)做空白試驗(yàn)。

　　2、銀量法（莫爾法）

　　稱取樣品1.4g（稱準(zhǔn)至0.0002g），置于100ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，放置20min，過(guò)濾，棄去初濾液，準(zhǔn)確量取續(xù)濾液50ml于250ml三角瓶中，加鉻酸鉀指示液0.5ml，用0.1ml硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至呈紅色即為終點(diǎn)。同時(shí)進(jìn)行空白試驗(yàn)。

　　3、定氮法

　　(1)稱取樣品3g（稱準(zhǔn)至0.0002g），置于250ml干燥的三角瓶?jī)?nèi)，加水100ml，充分振蕩15min，過(guò)濾，吸取濾液10ml，按凱氏定氮法先消化再蒸餾測(cè)其總氮量N總。

　　(2)另取濾液10ml于消化管內(nèi)，加水20ml，加400g/L的NaOH溶液20ml，直接在定氮儀上蒸餾，測(cè)定其含氮量N0。

　　(3)再取濾液10ml于消化管內(nèi)，加400g/L的NaOH溶液5ml，在電爐上蒸餾至無(wú)堿性氣體跑出（pH試紙呈中性），按凱氏定氮法先消化再蒸餾測(cè)其含氮量N1。

　　4、四苯硼鈉重量法

　　精確稱取樣品1g（稱準(zhǔn)至0.0002g），置于100ml容量瓶?jī)?nèi)，加水80ml充分搖動(dòng)20min，用水定容，過(guò)濾，棄去初濾液，準(zhǔn)確量取續(xù)濾液10ml于100ml燒杯中，加水20ml，1滴10％AlCl3溶液，20ml 2％四苯硼鈉溶液，振蕩30min，在預(yù)先稱好重量的G4砂芯漏斗上過(guò)濾，置105℃恒溫干燥箱中烘至恒重。計(jì)算：氯化膽堿重量W1=殘?jiān)兀╣）×0.3298×100/10。

　　氯化膽堿含量=W1×100/樣品重

　　二、實(shí)驗(yàn)室中如何利用各檢測(cè)方法進(jìn)行摻假識(shí)別，得出氯化膽堿的真實(shí)含量

　　上述4種檢測(cè)方法中前3種都不是針對(duì)氯化膽堿的特定結(jié)構(gòu)或特異理化性質(zhì)而建立的，四苯硼鈉法會(huì)受到K＋、NH4＋干擾，對(duì)于不同的摻假物，用其中一種方法檢測(cè)不一定能夠識(shí)別，因此在具體檢測(cè)中不同樣品應(yīng)具體對(duì)待。下面就如何利用各檢測(cè)方法進(jìn)行氯化膽堿粉劑原料的摻假識(shí)別進(jìn)行總結(jié)。

　　1、高氯酸滴定法雖然不是氯化膽堿的特異性反應(yīng)，但在用此法檢測(cè)時(shí)，對(duì)于真正的氯化膽堿粉劑原料，溶劑蒸發(fā)完后，三角瓶瓶壁附著物呈半透明的結(jié)晶物，冰乙酸溶解后溶液澄清，滴定終點(diǎn)明顯。若瓶壁附著物為較厚的一層不透明物，冰乙酸溶解后溶液混濁，且滴定終點(diǎn)不明顯，盡管最終也能變成終點(diǎn)的顏色，但不是在一滴之間突然飛躍，對(duì)該樣品的純真性就值得懷疑。

　　2、對(duì)于上述方法檢測(cè)可疑的樣品，用定氮法進(jìn)行檢測(cè)。根據(jù)氯化膽堿的分子式C5H14NClO（其分子量為139.63），理論上50％的粉劑原料含氮量為5％，因此若含氮量N總很低，可以斷定為摻假樣品。正常情況下N0很低，一般不超過(guò)0.1％，相當(dāng)于一般試驗(yàn)的空白值，N1≈N總。若不是這樣，則為摻假樣品。下面是筆者在日常工作中所遇到的一些樣品定氮法的檢測(cè)情況，見(jiàn)下表：

　　定氮法檢測(cè)結(jié)果

　　樣品編號(hào)

　　N總 5.86％ 5.02％ 4.85％

　　N0 5.06％ 0.91％ 0.08％

　　N1 0.78％ 4.10％ 4.80％

　　樣品1中，N0≈N總，說(shuō)明樣品中幾乎全是三甲胺、銨鹽或其它可與氫氧化鈉反應(yīng)的含氮物，為假的氯化膽堿。

　　樣品2中，N0較高，說(shuō)明該樣品中三甲胺殘留較高，為不合格的氯化膽堿。

　　樣品3中，N1≈N總，可以斷定該樣品中沒(méi)有摻入銨鹽、三甲胺或其它可以與氫氧化鈉反應(yīng)的含氮物。對(duì)于此樣品，需進(jìn)一步用重量法測(cè)定。我們?cè)龅揭粋€(gè)樣品，用定氮法、銀量法測(cè)定含量均正常，用高氯酸法滴定時(shí)滴定終點(diǎn)不太明顯，這3種方法測(cè)定結(jié)果均在55％左右，但用重量法測(cè)定時(shí)氯化膽堿含量只有27.1％，為摻假樣品。

　　3、在檢測(cè)中我們還發(fā)現(xiàn)用重量法、高氯酸法、銀量法檢測(cè)合格，用定氮法卻發(fā)現(xiàn)為摻假樣品。N0很高，N0≈N總。

　　三、結(jié) 論

　　目前市場(chǎng)上利用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)氯化膽堿含量方法的局限性，摻假現(xiàn)象五花八門(mén)。針對(duì)不同的摻假情況，用上述其中一種方法不一定都能識(shí)別，通常用不同方法逐步排除。因此對(duì)于一個(gè)氯化膽堿粉劑原料，不能根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)合格就算完事，還需用不同的方法進(jìn)一步驗(yàn)證。特別是在一個(gè)樣品用高氯酸滴定終點(diǎn)不明顯時(shí)，更須認(rèn)真對(duì)待，用其它幾種方法進(jìn)一步驗(yàn)證。只有4種方法檢測(cè)結(jié)果一致，才能下合格的結(jié)論，保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。