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酶工程是生物工程的一個重要組成部分,而糖化酶從來就是酶工程研究的重點方向之一。目前,糖化酶的理論研究主要集中在酶結(jié)構(gòu)的多型性、催化反應(yīng)動力學(xué)、酶基因及其代謝調(diào)控等方面,而應(yīng)用研究依然集中在糖化酶高活力菌株的選育、酶的固定化和酶制劑的推廣應(yīng)用技術(shù)等方面。
在糖化酶高活力菌株選育及酶制劑應(yīng)用技術(shù)方面,曾經(jīng)在我國出現(xiàn)過一個研究高潮,取得了一批成果,并且有一些糖化酶高活力菌株實現(xiàn)了產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn),有力地推動了相關(guān)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。然而由于種種原因,近10年來這方面的研究工作處于一個低潮期,相關(guān)的成果報道銳減,于是造成了當前研究工作滯后于生產(chǎn)發(fā)展需求的尷尬局面。目前,糖化酶研究與應(yīng)用的基本現(xiàn)狀是:
1、酶活力單位不統(tǒng)一,輕工部GB/T1803-93標準(輕工部部頒標準:工業(yè)用糖化型淀粉酶質(zhì)量標準)規(guī)定:“在最適條件下,每小時轉(zhuǎn)化淀粉質(zhì)底物產(chǎn)生1mg葡萄糖稱為1個酶活單位”(定義1)。但也有人將“在最適條件下,每分鐘轉(zhuǎn)化淀粉質(zhì)底物產(chǎn)生1ug葡萄糖定義為1個酶活單位”(定義2)。兩個酶活單位差別較大,造成了概念混亂與使用錯誤,有些文獻報道甚至出現(xiàn)自相矛盾的結(jié)果。
2、由于菌種選育過程耗時長,工作量大,定向性差,成功率低,近年來對這一研究的人力、財力、精力投入越來越少。因此,近10年來只有少數(shù)研究報道,例如 1999年,無錫輕院的谷海先等報道其選育的糖化酶高產(chǎn)菌株發(fā)酵液糖化酶酶活為1736單位/ml,折合定義2表示為28991單位/ml。
3、目前,國內(nèi)糖化酶制劑的生產(chǎn)方式主要有兩種,即液態(tài)發(fā)酵法和固態(tài)發(fā)酵法。液態(tài)發(fā)酵法的糖化酶活力處在如下水平:例如,1998年大連釀酒廠報道其發(fā)酵生產(chǎn)水平為890單位/ml,折合定義2表示為14863單位/ml。又如,2001年江西豪德集團生物工程有限公司德糖化酶生產(chǎn)水平平均在1800單位 /ml,折合定義2表示為30060單位/ml,通過補料發(fā)酵方式可以提高至2280~2400單位/ml,折合定義2表示為38076~40080單位 /ml。糖化酶活力普遍不高。采用固態(tài)發(fā)酵法,糖化酶發(fā)酵產(chǎn)品包括麩曲和大曲兩種,麩曲是由糖化酶活力較高的菌株制備的固態(tài)糖化酶制劑,而大曲則是由多種功能微生物組成的固態(tài)混合發(fā)酵劑。麩曲的糖化酶活多在2400單位/g,折合定義2表示為40080單位/g以下,而大曲的糖化酶活則更低,一般在 1000單位/g,折合定義2表示為16700單位/g左右。例如,2006年湘西河溪香醋廠使用的麩曲優(yōu)勢菌種糖化酶活力為1798單位/g,折合定義 2表示為30026單位/g。汾酒大曲的糖化酶活平均在1200單位/g左右,折合定義2表示為20040單位/g。此外,多數(shù)麩曲糖化酶生產(chǎn)菌株會產(chǎn)生大量的色素,且成曲后有難聞的霉腐味,嚴重影響著糖化酶制劑的應(yīng)用。
4、目前,糖化酶制劑被廣泛地應(yīng)用于酒精、白酒、黃酒、抗生素、有機酸、食醋等產(chǎn)品的生產(chǎn)中。精制糖化酶不僅運用于很多的發(fā)酵生產(chǎn)中,也被一些食品加工行業(yè)使用,例如有報道在雪糕生產(chǎn)中可使用糖化酶降解淀粉原料以改善產(chǎn)品的組織構(gòu)造和形體狀態(tài)。而粗酶制劑(例如大曲或麩曲)則多用于傳統(tǒng)釀造產(chǎn)品的生產(chǎn)過程中,例如山西的汾酒、老陳醋等釀造產(chǎn)品就是使用特制的大曲作為其糖化發(fā)酵劑。
但是,無論是液態(tài)發(fā)酵還是固態(tài)發(fā)酵制備的糖化酶制劑,當前存在的主要問題是生產(chǎn)菌株的糖化酶活力不高,尤其是在生產(chǎn)固態(tài)糖化酶制劑時會產(chǎn)生難聞的霉腐味及大量色素,嚴重影響固態(tài)糖化酶制劑的應(yīng)用。
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