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雞球蟲病(Coccidiosis in Chicken) 雞球蟲病是雞常見(jiàn)且危害十分嚴(yán)重的寄生蟲病，它造成的經(jīng)濟(jì)損失是驚人的。據(jù)統(tǒng)計(jì)，美國(guó)在1951～1960年因禽球蟲病損失4700萬(wàn)美元；英國(guó)每年在養(yǎng)雞業(yè)上至少要花費(fèi)550萬(wàn)英鎊（其中大約有一半系用防治球蟲病的藥費(fèi)）。從世界范圍來(lái)看，雞球蟲病每年能造成6000萬(wàn)至1.2億美元的損失。我國(guó)雖無(wú)精確的統(tǒng)計(jì)，但從局部零散的資料來(lái)看，每年因雞球蟲病造成的經(jīng)濟(jì)損失，數(shù)目也是相當(dāng)可觀的。盡管現(xiàn)代在防治、營(yíng)養(yǎng)、管理和遺傳學(xué)方面取得了很大的進(jìn)展，雞球蟲病仍然是最普遍的雞病之一。因而，目前用于藥物預(yù)防的費(fèi)用，在美國(guó)已超過(guò)9000萬(wàn)美元，全世界將超過(guò)3億美元。 （一）、病原 雞球蟲是一種原蟲，分類學(xué)上隸屬于原生動(dòng)物亞界，頂器門，孢子蟲綱，真球蟲目，艾美耳科，艾美耳屬。世界各國(guó)已經(jīng)記載的雞球蟲種類共有13種之多，即1.堆型艾美耳球蟲（Eirneria acervulina），2.布氏艾美耳球蟲（E.brunetti），3.哈氏艾美耳球蟲（E.hagani），4.巨型艾美耳球蟲(E.maxima)，5.變位艾美耳球蟲(E.mivati)，6.和緩艾美耳球蟲（E.mitis），7.毒害艾美耳球蟲(E.necatrix)，8.早熟艾美耳球蟲( E.praecor)，9.柔嫩艾美耳球蟲（E.tenella），10.E.beachi，11.E.johnsoni，12.E.tyzzeri和13.E.sporadica。前述1～9種為大多數(shù)學(xué)者所公認(rèn)，10～13種的獨(dú)立性不少學(xué)者認(rèn)為是可疑的。我國(guó)何承德、張朝聘(1959)報(bào)道西安市發(fā)現(xiàn)巨型艾美耳球蟲和和緩艾美耳球蟲；甘肅(1960)記載蘭州市有柔嫩艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲及和緩艾美耳球蟲；熊大仕、林昆華(1965)報(bào)告北京存在柔嫩艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲、堆型艾美耳球蟲、和緩艾美耳球蟲、早熟艾美耳球蟲和哈氏艾美耳球蟲6種；北京農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)系寄生蟲學(xué)教研組(1977)報(bào)道北京地區(qū)除上述6種外，還有毒害艾美耳球蟲；上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院(1978)報(bào)告上海市危害雞較嚴(yán)重的有柔嫩艾美耳球蟲、毒害艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲和變位艾美耳球蟲4種；陳淑玉等(1978)報(bào)道華南地區(qū)以柔嫩艾美耳球蟲、和緩艾美耳球蟲、堆型艾美耳球蟲和巨型艾美耳球蟲最為常見(jiàn)；白啟(1981)報(bào)道廣州地區(qū)雞球蟲有9個(gè)種，即柔嫩艾美耳球蟲、堆型艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲、和緩艾美耳球蟲、變位艾美耳球蟲、早熟艾美耳球蟲、毒害艾美耳球蟲、布氏艾美耳球蟲和哈氏艾美耳球蟲，作者還報(bào)道蘭州除上述9種外，還存在等孢屬球蟲；任熙宇等(1990)報(bào)道江蘇省雞球蟲種類有為大多數(shù)學(xué)者所公認(rèn)的9種。 1989年史天衛(wèi)等對(duì)上海地區(qū)雞球蟲的初步調(diào)查，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有以下6種，即柔嫩艾美耳球蟲、毒害艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲、早熟艾美耳球蟲、堆型艾美耳球蟲和變位艾美耳球蟲。 王善志(1980)報(bào)道了烏魯本齊地區(qū)雞球蟲種類，作者以飽和食鹽水漂浮法收集雞球蟲卵囊，對(duì)未孢子發(fā)育和孢子發(fā)育完成的卵囊進(jìn)行了形態(tài)學(xué)的觀察和量度。結(jié)果發(fā)現(xiàn)烏魯術(shù)齊地區(qū)雞存在有7種艾美耳球蟲，即柔嫩艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲、和緩艾美耳球蟲、哈氏艾美耳球蟲、毒害艾美耳球蟲、早熟艾美耳球蟲及堆型艾美耳球蟲。 白啟(1981)對(duì)蘭州地區(qū)雞球蟲蟲種調(diào)查，采用混合卵囊感染法及純種卵囊感染法。用下列5項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行仔細(xì)觀測(cè):卵囊特征（包括卵囊形狀、大小及顏色，極體數(shù)目、位置和形狀，孢子囊的形狀及大小，內(nèi)、外殘?bào)w的有無(wú)）；潛隱期（純種確定到小時(shí)）；卵囊孢子化時(shí)間（即卵囊具有感染性的最短時(shí)間，純種系在28℃±1℃溫度下，于2.5%重鉻酸鉀溶液中培養(yǎng)不同時(shí)間，用感染雛雞所測(cè)定）；寄生部位（刮取死亡和撲殺試驗(yàn)雞各腸段的粘膜鏡檢）；腸管的肉眼病變（把死亡和撲殺試驗(yàn)雛雞與未感染對(duì)照雛雞進(jìn)行剖檢對(duì)比）。 通過(guò)混合卯囊感染試驗(yàn)，共鑒定出球蟲2屬10個(gè)種:堆型艾美耳球蟲、布氏艾美耳球蟲、哈氏艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲、變位艾美耳球蟲、和緩艾美耳球蟲、毒害艾美耳球蟲、早熟艾美耳球蟲、柔嫩艾美耳球蟲和Isospora sp.。 世界上大多數(shù)學(xué)者新公認(rèn)的艾美耳屬的9個(gè)種，除哈氏及毒害2個(gè)種外，其他7個(gè)種均分離出了單一種，對(duì)每一個(gè)種都作了反復(fù)感染試驗(yàn)和上述5項(xiàng)指標(biāo)的仔細(xì)觀測(cè)。等孢屬Isospora一個(gè)種的分離和傳遞試驗(yàn)尚未成功，僅作了形態(tài)學(xué)方面的觀測(cè)。 王世鈞等（1980）報(bào)道了齊齊哈爾市郊區(qū)和富?？h城區(qū)雞球蟲種類有早熟艾美耳球蟲、和緩艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲、柔嫩艾美耳球蟲和等孢屬球蟲未定種（IsospOra sp.）。 左仰賢等(1986)對(duì)云南省不同地理?xiàng)l件的8個(gè)地、州的8個(gè)縣、市的雞進(jìn)行了調(diào)查，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有9種球蟲:即柔嫩艾美耳球蟲、毒害艾美耳球蟲、堆型艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲、變位艾美耳球蟲、布氏艾美耳球蟲、和緩艾美耳球蟲、早熟艾美耳球蟲和雞等孢球蟲Isospora gallinac）。雞等孢球蟲，調(diào)查結(jié)果發(fā)現(xiàn)有1.6%的感染率。雖然Levine (1973)，Pelferdy (1974)等懷疑此種不是雞的真寄生蟲.而是麻雀等野鳥的拉氏等孢球蟲，我們經(jīng)過(guò)與I.laeazei卵囊初步測(cè)量比較觀察，認(rèn)為兩者卵囊是有差別的。 張寶祥等(1986)從陜西省8個(gè)縣（市）采集了400份糞樣，在實(shí)驗(yàn)室對(duì)每種均進(jìn)行單卵囊感染分離出純種卵囊，經(jīng)形態(tài)學(xué)、孢子化時(shí)間、潛隱期、寄生部位和病理學(xué)觀察等幾項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定后，認(rèn)定陜西省的家雞共有2屬8種球蟲，它們是:柔嫩艾美耳球蟲、毒害艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲、堆型艾美耳球蟲、變位艾美耳球蟲、早熟艾美耳球蟲、和緩艾美耳球蟲和拉氏等孢子球蟲（Isospora lacazei）。 楊春生(1986)報(bào)道了銀川地區(qū)雞球蟲蟲種有以下7種:柔嫩艾美耳球蟲、堆型艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲、毒害艾美耳球蟲、和緩艾美耳球蟲、早熟艾美耳球蟲和等孢屬球蟲（Isospora sp.）。 陳剛等(1990)報(bào)道了于1989年3～5月，用糞檢法對(duì)西寧地區(qū)成年雞進(jìn)行了球蟲種類的調(diào)查，共查到艾美耳屬球蟲6種，即柔嫩艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲、堆型艾美耳球蟲、和緩艾美耳球蟲、早熟艾美耳球蟲和布氏艾美耳球蟲，一種艾美耳屬未定種及一個(gè)等孢屬卵囊。 根據(jù)現(xiàn)有蟲種調(diào)查資料的初步匯總，9種雞的艾美耳屬球蟲在我國(guó)均存在，其中6種分布較廣，蟲種和分布情況如下。 1.堆型艾美耳球蟲分布于北京、烏魯木齊、蘭州、廣州、山東、廣西、昆明、陜西、福州、銀川、上海、云南。 2.布氏艾美耳球蟲分布于蘭州、廣州、廣西、云南。 3.哈氏艾美耳球蟲分布于北京、烏魯木齊、蘭州、廣州、山東。 4.巨型艾黃耳球蟲分布于北京、山西、烏魯木齊、蘭州、廣州、黑龍江、山東、廣西、昆明、陜西、福州、云南、銀川、上海。 5.和緩艾美耳球蟲分布于山西、北京、烏魯木齊、蘭州、廣州、黑龍江、山東、廣西、昆明、陜西、福州、云南、銀川。 6.變位艾美耳球蟲分布于蘭州、廣州、廣西、陜西、云南、上海。 7.毒害艾美耳球蟲分布于北京、烏魯木齊、蘭州、廣州、黑龍江、山東、廣西、昆明、陜西、云南、銀川、上海。 8.早熟艾美耳球蟲分布于北京、烏魯木齊、蘭州、廣州、黑龍江、廣西、昆明、陜西、云南、銀川、上海。 9.柔嫩艾美耳球蟲分布于北京、烏魯木齊、蘭州、廣州、江蘇、黑龍江、山東、廣西、昆明、陜西、福州、云南、銀川、上海。 另外，在蘭州、廣州、齊齊哈爾、陜西、云南、銀川等地的雞糞中查出等孢屬球蟲，少數(shù)作者定名為拉氏等孢球蟲（Isospora lacazei），到目前還沒(méi)有可靠證據(jù)能證明其為雞的寄生性球蟲（黃兵，1990年）。 由于現(xiàn)代交通的發(fā)展和國(guó)際間來(lái)往的頻繁，尤其是雞及其產(chǎn)品作為重要的家畜品種和貿(mào)易對(duì)象，這就會(huì)使任何一種雞球蟲都可能成為世界性的。現(xiàn)把我國(guó)發(fā)現(xiàn)的9種球蟲的形態(tài)特點(diǎn)分述如下。 1.堆型艾美耳球蟲Eimeria acervulina Tyzzer，1929 寄生部位:通常寄生于于十二指腸和空腸的上皮細(xì)胞內(nèi)，個(gè)別情況下可延及小腸后部。 形態(tài):卵囊中等大小，卵圓形，其量度最大的為22.5um×16.75um，最小的為15um×12.5um，平均大小為18.8um×14.5um。卵囊無(wú)色。卵囊壁呈淡綠黃色，厚度為1.0um。卵囊窄端的內(nèi)膜變薄，比周圍部分稍低陷，與之相應(yīng)的外膜亦下陷，構(gòu)成淺碟狀。初排出的卵囊，原生質(zhì)團(tuán)為圓形，邊緣平整。卵囊內(nèi)空隙較小。原生質(zhì)團(tuán)分裂為4個(gè)圓形細(xì)胞的時(shí)間，最早和大多數(shù)為15h左右，最晚為18h。極體出現(xiàn)在原生質(zhì)團(tuán)分裂為4個(gè)圓形細(xì)胞時(shí)，位于卵囊的窄端，多為圓形，少數(shù)為淺碟狀；多為1個(gè)（占75%左右），少數(shù)為2個(gè)，并列配置，析光性強(qiáng)。孢子形成最早時(shí)間為19.5h.最晚和大多數(shù)是24h。孢了囊的大小為7.5～10.5um×4.5～5.0um，平均為9.7um×5.0um。無(wú)內(nèi)外殘?bào)w。潛隱期為4天。 2.布氏艾美耳球蟲E.brunetti Levine，1942 寄生部位:小腸后段和直腸的上皮細(xì)胞內(nèi)。 形態(tài):較大型的卵囊，僅次于巨型艾美耳球蟲，卵圓形，量度最大的為28um×21um，最小的為17.5um×15.75um，平均大小為22.6um×18.5um。卵囊壁光滑，無(wú)卵膜孔，有一極體。孢子囊呈長(zhǎng)卵圓形，有斯氏體，并有內(nèi)殘?bào)w，無(wú)外殘?bào)w（白啟1981）。完成孢子發(fā)育的最早時(shí)間為19h。 3.哈氏艾美耳球蟲E.hagani Levine，1938 寄生部位:小腸前段上皮細(xì)胞內(nèi)。 形態(tài):卵囊中等大小，呈寬卵圓形，大小為15.5～20um×14.5～18.5um，平均為17.68um×15.78um。無(wú)色，卵囊壁呈淡黃綠色，厚l.0um。原生質(zhì)團(tuán)呈圓形，邊緣平整。卵囊內(nèi)空隙比堆型艾美耳球蟲的小。但比和緩艾美耳球蟲的大。原生質(zhì)團(tuán)分裂為4個(gè)細(xì)胞的時(shí)間最早為14.5h，最晚為17.5h。細(xì)胞初為圓形，邊緣平整。有一個(gè)圓形極體，位于孢于囊之間或卵囊側(cè)面，少數(shù)位于卵囊窄端偏下方，其出現(xiàn)時(shí)間大多數(shù)卵囊是在其中的圓形細(xì)胞變?yōu)闄E圓形時(shí)，少數(shù)出現(xiàn)在原生質(zhì)團(tuán)分裂為4個(gè)圓形細(xì)胞時(shí)。孢子形成的最早時(shí)間為23.5h，最晚和多數(shù)是在27h.，孢子囊的量度為7.5～10.5un×5urn，平均為9.1um×5um。潛隱期為6天。 4.巨型艾美耳球蟲E.maxima Tyzzer，1929 寄生部位:小腸中段上皮細(xì)胞內(nèi)。 形態(tài):大型卵囊，寬卵圓形，一端圓鈍，一端較窄。其量度最大的達(dá)40um×33um，最小的為21.75um ×17.5um，平均為30.76um×23.9um，常見(jiàn)的為30um×22.5um。卵囊呈黃褐色，卵囊壁淡黃色，厚度為0.75um。初排出的卵囊，其原生質(zhì)團(tuán)為圓形，邊緣整齊。卵囊內(nèi)空隙大，卵囊窄端的慮膜變薄，比周圍稍低陷，與之相對(duì)應(yīng)的外膜亦稍下陷，呈淺碟狀。原生質(zhì)團(tuán)分裂為4個(gè)細(xì)胞的時(shí)間，最早為23.5h.，最晚為32.5h，細(xì)胞初為圓形，周緣平滑，極體出現(xiàn)在原生質(zhì)團(tuán)分裂為4個(gè)細(xì)胞時(shí)，折光性強(qiáng)，呈圓形，位于卵囊窄端，大多數(shù)為1個(gè)（約占50%），2個(gè)的較少，3個(gè)的最少；出現(xiàn)2個(gè)或3個(gè)極體時(shí)，其排列不規(guī)律。孢子發(fā)育完成的時(shí)間最早為28.5h，最晚為48.5h，多數(shù)在48h左右。孢子囊的量度最大為17.5um×7.5um，最小的11.75um×5.75um，平均為15.6um×7.0urn。未見(jiàn)有內(nèi)外殘?bào)w。卵囊經(jīng)15.5h培養(yǎng)和原生質(zhì)團(tuán)分裂為4個(gè)細(xì)胞之前，卵囊內(nèi)外膜呈現(xiàn)波浪狀皺曲，外膜尤明顯；初期在鈍端較明顯，逐漸向窄端發(fā)展。潛隱期為6天。 5.變位艾美耳球蟲E.mivati Edgar et Siebold，1964 寄生部位:小腸前段和中段的上皮細(xì)胞內(nèi)。 形態(tài):為小型卵囊，大多呈卵圓形，也有呈橢圓形的。少數(shù)卵囊窄端囊壁變薄，變薄部位的邊緣稍稍隆起，中間凹陷若缺口。量度最大為19.25um×14.87um，最小為10.5um×9.62um，平均為14.33um×11.75um。極體1～2個(gè)，偶見(jiàn)有3個(gè)的，排列在卵囊窄端的邊緣。少數(shù)卵囊內(nèi)有1個(gè)不規(guī)則的或呈圓形的外殘?bào)w，偶爾也有2個(gè)的。孢子囊為長(zhǎng)橢圓形。有斯氏體，并且有1個(gè)不太清晰的內(nèi)殘?bào)w。完成孢子發(fā)育的時(shí)間最早為11.5h。潛隱期為93h。 6.和緩艾美耳球蟲E.mitis Tyzzer.1929 寄生部位:小腸前半部上皮細(xì)胞內(nèi)。 形態(tài):為小型卵囊，近圓形，量度最大的為19.5um×17.0um，最小的為12. 75um×12.5um，平均大小為15.34um×14.3um。卵囊無(wú)色，卵囊壁淡綠黃色，厚度為1.0um，少數(shù)卵囊壁較厚，可達(dá)1.25um。初排出的卵囊，其原生質(zhì)團(tuán)成球形，邊緣平滑，充滿卵囊內(nèi)，幾乎不留空隙。原生質(zhì)團(tuán)分裂為4個(gè)細(xì)胞的時(shí)間，最早為15h左右，最晚和大多數(shù)為18.5h。細(xì)胞初為圓形，周邊平整。極體出現(xiàn)在原生質(zhì)團(tuán)分裂為4個(gè)圓形細(xì)胞時(shí)，由于4個(gè)細(xì)胞幾乎填滿卵囊內(nèi)，極體常不易發(fā)現(xiàn)。極體為1個(gè)，折光性強(qiáng)，多為圓形，少數(shù)呈淺碟狀，位于卵囊的一端。孢子發(fā)育完成的最早時(shí)間為23.5h，最晚為26h.大多數(shù)是在24～24.5h。孢子囊量度最大的為10um×5um，最小的為7um×5um，平均為8.72urn×5um。無(wú)內(nèi)外殘?bào)w。潛隱期為5天。 7.毒害艾美耳珠蟲E.necatrix Johnson，1930 寄生部位:裂殖生殖主要在卵黃蒂前后的小腸段上皮細(xì)胞內(nèi)，配子生殖則在盲腸上皮細(xì)胞內(nèi)。 形態(tài):卵囊為中等大小，卵圓形+量度最大的為21.0um×17.5um，最小的為14.0um×10.25um，平均天小為16.59um×13.5um。卵囊壁光滑，卵囊內(nèi)空隙小。極體1個(gè)，少數(shù)有2個(gè)的。孢子囊為長(zhǎng)卵圓形，有一斯氏體。無(wú)內(nèi)外殘?bào)w。完成抱子發(fā)育的時(shí)間約18h。潛隱期為6天。 8.早熟艾美耳球蟲E.praecox Johnsn，1930 寄生部位:小腸前1/3部分上皮細(xì)胞內(nèi)。 形態(tài):卵囊較大，大多數(shù)為橢圓形，其次為卵圓形。少數(shù)近圓形，量度最大為25um×18.25um，最小為20um×17. 5um，平均21.75um×17.73um。卵囊無(wú)色，卵囊壁淡綠黃色，厚度為1.0um。厚生質(zhì)團(tuán)圓形，邊緣平整。卵囊內(nèi)的空隙小，但比E.mitis如球蟲的稍大。厚生質(zhì)團(tuán)分裂為4個(gè)細(xì)胞的時(shí)間，最早為17.5h，最晚為23.5h，多數(shù)在17. 5h左右。4個(gè)細(xì)胞初為圓形，周緣光滑。極體1個(gè)，圓形，折光性強(qiáng)，出現(xiàn)在厚生質(zhì)團(tuán)分裂為4個(gè)圓形細(xì)胞時(shí)，大多位于孢子囊之間，少數(shù)在卵囊一端偏下方。完成孢子發(fā)育的時(shí)間，最早為23.5h，最晚為38.5h，大多數(shù)在27h左右。孢子囊的大小為10～15um×5.25～7.5um，平均為11.8um×6.4um。無(wú)內(nèi)外殘?bào)w。潛隱期為4天。 9柔嫩艾美耳球蟲E.tenella （Railliet et Lucet，1891）Fantham，1909 寄生部位:盲腸及其附近腸道上皮細(xì)胞內(nèi)。 形態(tài):卵囊較大，多數(shù)為寬卵圓形，一端稍窄，步數(shù)呈橢圓形，其量度最大為25un×20um，最小為20um×15um，平均大小為22.62um×18.05um。卵囊原生質(zhì)團(tuán)呈淡褐色，卵囊壁為潰黃綠色，厚度為1.0um。初排出的卵囊，原生質(zhì)團(tuán)膜邊緣凹凸不平，卵囊內(nèi)空隙較大。原生質(zhì)團(tuán)分裂為4個(gè)細(xì)胞的昂早時(shí)間為15h，最晚為19.5h，大多數(shù)為18.5h。細(xì)胞初為多邊形，邊緣不平整。極體出現(xiàn)在原生質(zhì)團(tuán)分裂為4個(gè)多邊形細(xì)胞時(shí)，位于卵囊的窄端，一般呈圓形，少數(shù)為淺碟狀，多為1個(gè)，少數(shù)為2個(gè)，3個(gè)的最少。出現(xiàn)2個(gè)極體時(shí)，其在卵囊內(nèi)呈并列方式排列；3個(gè)時(shí)則成三角形排列。極體折光性強(qiáng)。完成孢子發(fā)育的時(shí)間，最早為19.5h，最晚為30.5h，大多數(shù)在27h。孢子囊的量度，最大選12.75um×6.75um，最小的為7.5um×upm，平均為11.47urn×6.23um。無(wú)內(nèi)外殘?bào)w。潛隱期為7天。 國(guó)外有些學(xué)者對(duì)哈氏艾美耳球蟲和變位艾美耳球蟲的獨(dú)立性有懷疑。我國(guó)未見(jiàn)有對(duì)該兩種球蟲作深入研究的報(bào)道。 （二）、病原生物學(xué)特性 我國(guó)對(duì)致病力強(qiáng)的幾種雞球蟲（如柔嫩艾美耳球空、毒害艾美耳球蟲、堆型艾美耳球蟲和巨型艾美耳球蟲）的生物學(xué)特性做了一些較深入的研究工作，如在雞胚培養(yǎng)，細(xì)胞培養(yǎng)，早熟蟲株的選育，超徽結(jié)構(gòu)等；同時(shí)，在雞球蟲病防治方面進(jìn)行了不少的工作；在雞球蟲病免疫和蟲苗的研制和應(yīng)用方面，近幾年來(lái)也取得一些成績(jī)。 柔嫩艾美耳球蟲 韓志華等進(jìn)行了柔嫩艾美耳球蟲（Eimeria tenella）細(xì)胞培養(yǎng)的觀察。作者在雞腎細(xì)胞內(nèi)培養(yǎng)結(jié)果發(fā)現(xiàn):子孢了接種后第2天已全部鉆進(jìn)細(xì)胞呈現(xiàn)出輕微收縮運(yùn)動(dòng)，表面折光透明。第3～4天，被侵害的細(xì)胞部分明顯膨脹。第5天觀察到第1代裂殖體，排列成菜花狀，并釋放大量裂殖子，裂殖子呈放射狀排列。第6天出現(xiàn)第2代裂殖體。第7天已形成大小配子體。第9天見(jiàn)到卵圓形的卵囊。3次試驗(yàn)結(jié)果相同。子孢子發(fā)育成卵囊后，腎細(xì)胞開(kāi)始衰老變形，部分細(xì)胞脫落，有些形成空泡。 細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)育成的卵囊，孢子化后接種1日齡來(lái)航雞。接種后第6天，雛雞排血便。第7天進(jìn)行糞檢，發(fā)現(xiàn)柔嫩艾羹耳球蟲卵囊。 另外作者還指出，經(jīng)41℃培養(yǎng)9天的孢子化卵囊不能感染雛雞。 呂文順等(1984)，用體外脫囊的球蟲子孢子5×l04～10×l04個(gè)接種9～11日齡雞胚的尿囊腔中，進(jìn)行柔嫩艾美耳球蟲在雞胚培養(yǎng)中內(nèi)生性發(fā)育史的研究。觀察結(jié)果表明，球蟲在絨毛尿囊膜(CAM)細(xì)胞內(nèi)完成了無(wú)性世代和有性世代兩個(gè)發(fā)育階段，出現(xiàn)第1、2、3代裂殖體和大配子體和小配子體以及卵囊，像在雞腸黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)一樣完成全部?jī)?nèi)生發(fā)育史。成熟的卵囊最早出現(xiàn)于144h，然后逐漸增多，到192h不僅在CAM上可見(jiàn)到密集的大量卵囊，在尿囊液和尿酸鹽沉淀物中也可以獲得集聚成堆的卵囊。培養(yǎng)獲得的卵囊在形態(tài)學(xué)上完全符合柔嫩艾美耳球蟲的特征。卵囊經(jīng)孢子發(fā)育完成后仍具有感染雛雞的能力，并可經(jīng)雞胚連續(xù)傳代。 李泳等(1985)用電子顯微鏡觀察了柔嫩艾美耳球蟲配子生殖的全過(guò)程，描述了雄配予體和雌配子體生殖過(guò)程超微結(jié)構(gòu)的變化。雄配子體經(jīng)過(guò)核分裂，細(xì)胞質(zhì)膜內(nèi)陷切割細(xì)胞質(zhì)，細(xì)胞核遷移，支鏈淀粉粒形成，鞭毛體突起，配子軀干和鞭毛形成，最后雄配子成熟，離開(kāi)雄配子體殘余。雌配子體經(jīng)過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)折疊，形成大量的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)池，產(chǎn)生壁形成體Ⅰ和Ⅱ，雌配子從不規(guī)則的橢圓形發(fā)展到卵圓形，受精后，卵囊壁形成，壁形成體消失。 張振嵐等(1990)對(duì)柔嫩艾美耳球蟲內(nèi)生階段超微結(jié)構(gòu)變化進(jìn)行了研究。觀察結(jié)果，發(fā)現(xiàn)裂殖生殖過(guò)程是裂殖子或滋養(yǎng)體的核經(jīng)多次分裂后彤戚多核體或稱新生裂殖體。新形成的核被有雙層膜，每個(gè)核具有一個(gè)明顯的核仁。初生裂殖體從切面上看，有許多由單個(gè)限制膜構(gòu)成的裂縫或裂隙，似乎把多核體分成許多塊；有些裂隙或裂縫與裂殖體表面的限制膜相連，似乎由表面的限制膜內(nèi)陷而形成。在這些裂隙處和在多核體的表面一樣也可形成囊狀突起，并逐漸延長(zhǎng)而形成裂殖子。新生裂殖子脫離母體時(shí)，其后端形成一電子密度增強(qiáng)的環(huán)，謂之后極環(huán)。成熟的裂殖子的形態(tài)有細(xì)條形到矮胖形，日不同代之間無(wú)明顯差異。它們均被有一層由外膜和內(nèi)膜復(fù)合體構(gòu)成的表皮，以及類錐體、極環(huán)、微線粒、棒狀體和膜下微管構(gòu)成的頂端復(fù)合體。配子生殖過(guò)程是小配子細(xì)胞較大配子細(xì)胞小，被一層限制性單位膜，細(xì)胞核經(jīng)多次分裂后形成多核體與裂殖生殖過(guò)程中形成的多核體的區(qū)別在于這些新形成的核均定位于配予細(xì)胞的周邊，無(wú)核仁，有多個(gè)染色質(zhì)團(tuán)塊，核質(zhì)在邊緣區(qū)域較濃，隨后染色質(zhì)向外側(cè)集結(jié)，周邊核延長(zhǎng)并向表面隆起而形成小配子的“芽體”。在核不斷向外延伸過(guò)程中，可能有一線粒體也伴隨外移，因在成熟的小配子前部有一個(gè)長(zhǎng)橢圓形而內(nèi)多嵴的線粒體緊靠著核。一個(gè)成熟的小配子主要由一個(gè)長(zhǎng)條形而電子致密的核和一個(gè)長(zhǎng)橢圓形的線粒體構(gòu)成。在其前端或頂器附著有3根鞭毛，而胞質(zhì)含量很少。初生大配子細(xì)胞有一個(gè)大的核和一個(gè)呈顆粒狀的濃染的核仁，被有一層限制性單位膜，胞漿內(nèi)有大量?jī)?nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體，但很少或幾乎沒(méi)有脂肪顆粒和多糖顆粒，這兩種成分在隨后的發(fā)育中逐漸增多起來(lái)。大配子細(xì)胞進(jìn)一步發(fā)育，胞漿中出現(xiàn)許多成囊顆粒Ⅱ(WFB Ⅱ)，高倍鏡下，這些顆粒呈明暗交替的條帶狀結(jié)構(gòu)。每個(gè)WFBⅡ顆粒均位于一圍膜泡內(nèi)，散布在胞漿基質(zhì)中，據(jù)此很容易與新生裂殖體及小配子細(xì)胞相區(qū)別。隨著大配子細(xì)胞進(jìn)一步發(fā)育，除大量卵圓形的多糖顆粒增加外，另一特征就是在胞漿的邊緣區(qū)域出現(xiàn)多個(gè)圓形致密而均勻的，但大小不等的成囊顆粒I (WFBI)，它的出現(xiàn)標(biāo)志大配子的成熟。當(dāng)合子的外層限制膜分離開(kāi)來(lái)，形成一環(huán)繞的胚膜，其本身又被覆一層新的限制膜時(shí)，標(biāo)志卵囊形成的開(kāi)始。WFBⅠ顆粒物質(zhì)可能被輸送到膜I和胰Ⅱ之間的區(qū)域內(nèi)，隨著此外層的逐漸形成胞漿內(nèi)WFBⅠ逐漸減少或消失，原先所在的部位有時(shí)留下空泡。在外層形成的同時(shí)，可觀察到合子的限制膜又經(jīng)多次復(fù)制而形成膜Ⅲ、膜Ⅳ和本身的限制膜Ⅴ。WFBⅡ顆粒物質(zhì)就可能被輸送到膜Ⅲ和膜Ⅳ之間的區(qū)域內(nèi)。WFBⅠ和WFBⅡ分別構(gòu)成卵囊壁的內(nèi)外層最初在形態(tài)上呈現(xiàn)不均勻狀態(tài)，且厚度上也不一致，后經(jīng)進(jìn)一步融合、濃縮而構(gòu)成電子致密度高的外層和電子致密度稍低的內(nèi)層。 翁亞彪等(1992)進(jìn)行了柔嫩艾美耳球蟲配子形成階段的超微結(jié)構(gòu)的觀察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，小配子體的發(fā)育是在盲腸上皮細(xì)胞核上方進(jìn)行。發(fā)育早期，核經(jīng)多次分裂成數(shù)個(gè)小核，小核無(wú)核仁，染色質(zhì)邊聚，并移至小配子體邊緣，延長(zhǎng)并向帶蟲空泡突起，成為小配子的核。同時(shí)，中心粒變?yōu)榛w，鞭毛從基體發(fā)出。小配子具有3根鞭毛。大配子體的發(fā)育則是在盲腸上皮細(xì)胞核的下方進(jìn)行。早期大配子呈圓形或橢圓形，外被限制膜，膜周圍有許多細(xì)絲狀的微絨毛物。這些微絨毛狀物橫切面呈小點(diǎn)狀，縱切面呈絲狀，并與大配子相連。大配子內(nèi)有兩種成囊顆粒，成囊顆粒Ⅰ質(zhì)地均勻致密，強(qiáng)嗜餓酸性；成囊顆粒Ⅱ由細(xì)絲狀物盤曲、折疊而成。成熟的大配子內(nèi)含多量的多糖顆粒、一些小管、酯類包含體和半透明空泡，核位于中央。 朱彥鵬、華蘭英(1991)報(bào)道了柔嫩艾美耳球蟲的早熟培育及其免疫原性試驗(yàn)。作者從我國(guó)河北省的柔嫩艾美耳球蟲蟲株中發(fā)現(xiàn)了132～144h成熟的早熟蟲株，隨后進(jìn)行了早熟蟲株的培養(yǎng)，并對(duì)其致病力和免疫原性作了研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn):（1）在整個(gè)早熟培育過(guò)程中，感染2500～30000個(gè)卵囊的雞均來(lái)呈現(xiàn)柔嫩艾美耳球蟲病的任何臨診癥狀，剖檢時(shí)除個(gè)別雞的盲腸特膜上出現(xiàn)極輕微的粘膜肥厚和偶見(jiàn)小點(diǎn)出血外，未發(fā)現(xiàn)其他病理變化。(2)分別接種第22代和第23代早熟培育蟲株卵囊2×104個(gè)的試驗(yàn)雞，接種后既未出現(xiàn)任何臨診癥狀，亦未發(fā)生死亡。而分別接種原始蟲株卵囊5×103和l×l04個(gè)的試驗(yàn)雞，在接種后第5和第6天分別死亡2只和4只。剖檢見(jiàn)盲腸病變記分均達(dá)到4分。說(shuō)明早熟培育的蟲株的致病力遠(yuǎn)比原始蟲株低。(3)早熟培育的蟲株免疫接種的雞，于接種后的第17天，口服攻擊感染原始蟲株的孢子化卵囊5×104個(gè)，根據(jù)免疫接種后和攻擊感染后試驗(yàn)雞的死亡和盲腸病變記分來(lái)評(píng)價(jià)，證明早熟培育蟲株已完全喪失了免疫原性。作者認(rèn)為采用旱熟培育達(dá)到使球蟲株的潛隱期逐漸縮短或使其致病力減弱的目的并非十分困難，但為保持早熟蟲株原來(lái)的免疫原性卻不是很容易的，尚需進(jìn)行更深入的研究。 翁亞彪等(1992)應(yīng)用單卵囊分離技術(shù)獲得純種柔嫩艾美耳球蟲純種（廣州株）卵囊，進(jìn)行柔嫩艾美耳球蟲早熟蟲株的選育。試驗(yàn)結(jié)果表明，對(duì)該蟲株進(jìn)行8代的早熟選育，獲得了一個(gè)潛隱期為120h的早熟蟲株。以此早熟蟲株感染雛雞，感染量為每只10萬(wàn)個(gè)孢子化卵囊，臨診上不出現(xiàn)癥狀和病變；感染量提高到20萬(wàn)個(gè)時(shí)，也僅見(jiàn)盲腸粘膜有少量出血點(diǎn)。這表明該早熟蟲株的致病力已明顯降低。每只雛雞經(jīng)口免疫接種該蟲株5000個(gè)孢子化卵囊，7天后用8萬(wàn)個(gè)原代孢子化卵囊攻擊，免疫雞不發(fā)病，剖檢見(jiàn)盲腸不呈現(xiàn)病變。說(shuō)明該早熟蟲株具有良好的免疫原性。 謝明權(quán)等(1992)用12種脫囊液進(jìn)行廠柔嫩艾美耳球蟲子孢子脫囊比較試驗(yàn)，脫囊溫度均為40℃。結(jié)果說(shuō)明:0.25%胰酶加0.75%，膽鹽脫囊45～60min，子孢子脫囊率達(dá)85%～97%；0.25%胰酶加5%雞膽汁脫囊75～90rnin，脫囊率達(dá)65%～95%；0.25%胰酶加5%豬膽汁，脫囊75～90rmn，脫囊率為91%～96%；0.25%胰酶加5%豬膽汁，脫囊90min至105min，脫囊率達(dá)51%～75%，0.25%胰酶加10%豬肝汁，脫囊90min，脫囊率達(dá)89%～97%。其余的脫囊液如0.25%胰酶加5% OP-10；0.25%胰酶加5%十二烷基苯磺酸鈉；0.25%胰酶加10%十二烷基苯磺酸鈉；0.25%胰酶加10%土耳其紅油等7種均無(wú)脫囊效果。經(jīng)上述5種脫囊液脫囊的子孢子接種，雞腎原代單層上皮細(xì)胞，接種后24h用甲醇固定，子孢子染色法快速染色，再在高倍鏡下（400倍）計(jì)算各組子孢子穿入細(xì)胞的數(shù)量，結(jié)果平均每個(gè)視野數(shù)分別為34.65、33.62、32.65、33.32和34.1條，無(wú)顯著差異。證明上述5種脫囊液脫囊的子飽子具有很好的活性。上述結(jié)果還說(shuō)明，在子孢子脫囊液中，胰酶是不可缺少的成分。胰酶加膽鹽，脫囊力量強(qiáng)。豬膽汁和雞膽汁與胰酶合用也有很好的脫囊效果，但消化時(shí)間需延長(zhǎng)，而且高濃度的豬、雞膽汁(10%)優(yōu)于低濃度的豬、雞膽汁（5%）。pH低(6.7)的脫囊液優(yōu)于pH高的脫囊液。 陳淑玉等(1980)報(bào)道了一個(gè)簡(jiǎn)便易行的雞球蟲的單卵囊分離和感染法及其在種的鑒定上的應(yīng)用。文章詳細(xì)介紹了球蟲單卵囊的分離方法，即用干凈的滴管，吸取在2%重鉻酸鉀溶液中已培養(yǎng)4～7天的孢子化卵囊1小滴于載玻片上，并加l滴生理鹽水稀釋，使在低倍鏡下觀察時(shí)，一個(gè)視野中只有1～2個(gè)卵囊，以便于分離。然后在顯微鏡下，右手持玻璃毛細(xì)吸管，當(dāng)毛細(xì)噴管的尖端正對(duì)視野中一個(gè)卵囊時(shí)，將吸管向卵囊伸過(guò)去。由于毛細(xì)管現(xiàn)象，卵囊隨水分上升到毛細(xì)管內(nèi)。隨后把毛細(xì)吸管中的液體，吹落到鋪有瓊脂薄膜的載玻片上，置顯微鏡下觀察，確認(rèn)是1個(gè)卵囊時(shí)，單卵囊分離即告完畢。用細(xì)的解剖針在含有單卵囊的小液滴玻片上的瓊脂薄膜周圍劃出，以小液滴為中心，將前后左右的瓊脂薄膜折疊覆蓋起來(lái)，喂給1日齡雞。感染后的雛雞隔離飼養(yǎng)，并于感染后第3天開(kāi)始每天檢查糞便，觀察結(jié)果。試驗(yàn)感染14只雛雞，結(jié)果有9只雛雞于感染后5～8天，在糞檢中找到卵囊，成功率為64.3%。 對(duì)所分離出的單一種，進(jìn)行了重復(fù)感染試驗(yàn)，觀測(cè)了卵囊特征、潛隱期、孢子化時(shí)間、臨診癥狀和病理變化，就可用于球蟲種類的鑒定。 殷佩云等(1980)也報(bào)道了球蟲單卵囊分離技術(shù)。其操作方法與陳淑玉等(1980)基本相似，也取得好的結(jié)果。 白啟(1980)報(bào)道雞艾美耳球蟲單一種分離方法的探討。文中提出雞球蟲種的鑒定需分離感單一種，再結(jié)合其他的幾項(xiàng)生物學(xué)特性方能準(zhǔn)確可靠。這幾項(xiàng)生物學(xué)特性包括(l)潛隱期（preparent perid);(2)孢子化時(shí)間；(3)寄生部位、特殊病變及其形態(tài)特征。 近年來(lái)，有許多試驗(yàn)證明艾美耳屬的幾種雞球蟲可以體外培養(yǎng)，把人工脫囊的球蟲子孢子接種于雞胚尿囊腔中或雞腎細(xì)胞培養(yǎng)物上，能夠完成整個(gè)內(nèi)生性發(fā)育。這種方法已廣泛應(yīng)用于抗球蟲藥物的評(píng)價(jià)、免疫學(xué)和球蟲發(fā)育形態(tài)的研究等方面。 趙開(kāi)元等(1985)報(bào)道了柔嫩艾美耳球蟲子孢子體外脫囊試驗(yàn)及其對(duì)雞胚感染力的觀察。作者用離心洗凈的柔嫩艾美耳球蟲卵囊用4%的次氯酸鈉液殺菌30min，然后，加少許PBS液，倒入玻璃乳缽中輕輕研磨。經(jīng)研磨20min，卵囊破碎率可達(dá)88.8%～90%，30min可達(dá)90%～96%以上。 游離出來(lái)的孢子囊用1%胰酶加5%雞膽汁溶液，在40℃水溶中孵育2h，子孢予脫囊率可達(dá)92.6%。鑒于雞膽汁產(chǎn)量小，曾用牛、羊膽汁進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果證明，子孢子脫囊率分別達(dá)70.6%和65.4%，還不如雞膽汁效果。 用1%胰酶加5%雞膽汁脫囊的子孢子對(duì)雞有感染力。將子孢子接種于雞胚尿囊腔中，在40℃下孵化7天，子孢子在絨毛尿囊膜細(xì)胞中完成了全部?jī)?nèi)生性發(fā)育，最后形成第2代卵囊。經(jīng)檢查，卵囊形成后不僅局限在絨毛尿囊膜細(xì)胞內(nèi)，也可游離到尿囊液中。 張勤等(1980)應(yīng)用柔嫩艾美耳球蟲（保定株）進(jìn)行了雞胚傳代致弱培育的研究。其研究?jī)?nèi)容包括(1)雞胚內(nèi)的發(fā)育；(2)雞胚傳代株的建立和第35代雞胚傳代株的致病力；(3)免疫原性的測(cè)定。結(jié)果表明柔嫩艾美耳球蟲（保定株）經(jīng)雞胚傳38代后，又通過(guò)小雞繁殖了一次，接著連續(xù)通過(guò)雞胚傳到47代。在傳代過(guò)程中觀察了柔嫩艾美耳球蟲在雞胚內(nèi)發(fā)育的各階段，隨著傳代次數(shù)的增加，柔嫩艾美耳球蟲在雞胚內(nèi)的卵囊產(chǎn)量和回收卵囊的孢子形成率隨傳代經(jīng)過(guò)逐漸增高，終于顯示出對(duì)雞胚的良好“適應(yīng)”。 在雞胚內(nèi)傳了35代的柔嫩艾美耳球蟲雞胚傳代株跟未經(jīng)傳代的原始蟲株比較，傳代株對(duì)雞胚和小雞的致病力，尤其是對(duì)小雞的致病力顯著地降低了。投給104個(gè)雞胚傳代株卵囊的小雞經(jīng)3周后以6 ×104個(gè)未經(jīng)傳代的原始蟲株攻擊，顯示出有高度的保護(hù)作用。 自Long (1965)首次完成用脫囊的柔嫩艾羹耳球蟲子孢子，感染雞胚成功之后，國(guó)內(nèi)外的學(xué)者相繼用他的方法或略加改進(jìn)，成功地進(jìn)行了多種雞艾美耳球蟲的雞胚培養(yǎng)。但Long的方法獲得的子孢子懸浮液中，糞渣等雜質(zhì)較多，雖然對(duì)雞胚的感染影響不大，但不適于進(jìn)行球蟲免疫學(xué)、組織培養(yǎng)和生化分析。因此提純有活力的球蟲子孢子，是進(jìn)行上述試驗(yàn)研究的基礎(chǔ)。 田廣孚、田增義(1989)進(jìn)行了柔嫩艾美耳球蟲子孢子的提純?cè)囼?yàn)。作者崩DEAE纖維素(DF52)柱層析柔嫩艾美耳球蟲子孢子的粗提懸浮液，纖維素柱高5cm，直徑2cm，pH8.0甘氨酸緩沖液作為洗脫液。流速為4ml/min，每個(gè)集份10ml，16集份以后再未觀察到子抱子。子孢子回收率為62.94%。純化后的子孢子懸浮液雜質(zhì)極少，達(dá)到了純化的目的。顯微鏡下可看到純化后的子孢子蠕動(dòng)。 蔣建林等(1994)用改進(jìn)的DEAE-Cellulose 52柱層法純化柔嫩艾美耳球蟲子孢子。纖維素柱高5cm，管的直徑1.6cm，洗脫液為pH8.0 Tris-Hel等滲緩沖液，流速為1ml/min，得到了極純的子孢子，且子孢子運(yùn)動(dòng)性好，回收率在63%以上。作者認(rèn)為子孢子之所以能用DEAE-Cellulose 52來(lái)純化，是因?yàn)樽渔咦拥倪\(yùn)動(dòng)和電荷差異擺脫了DE-52的離子交換吸附，并且體積小，能通過(guò)纖維素形成的篩網(wǎng)，而卵囊、卵囊壁、孢子囊、孢子囊壁及其他一些有機(jī)物卻被纖維素網(wǎng)擋住和離子交換吸附上去了，于是只有子孢子被洗脫下來(lái)。 翁亞彪等(1992)通過(guò)經(jīng)口感染的方法，使每只雞感染10萬(wàn)個(gè)柔嫩艾美耳球蟲孢子化卵囊，然后觀察感染雞的血細(xì)胞的變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)感染雞的紅細(xì)胞數(shù)于感染后第4天開(kāi)始降低，第5天降到147.35萬(wàn)/mm3（感染前為296.09萬(wàn)/mm3），笫6天后逐漸回升，第10天時(shí)恢復(fù)到感染前的水平。凝血細(xì)胞數(shù)在感染前為2.60萬(wàn)/mm3，感染后第5、6天有所減少，分別為2.06萬(wàn)/mm3和2.19萬(wàn)/mm3。白細(xì)胞總數(shù)感染前為3.38萬(wàn)/mm3，感染后第4天開(kāi)始升高，第8天高達(dá)4.05萬(wàn)/mm3，第10天后逐日回降。在白細(xì)胞分類中，異嗜性白細(xì)胞的比例感染前為24.6%，感染后第5天增至31.7%；而淋巴細(xì)胞感染前為64.4%.感染后第5天則下降到54.5%；嗜酸性白細(xì)胞感染前為0.2%，感染后第4天開(kāi)始增加，第10天時(shí)增至7.7%；嗜堿性白細(xì)胞為l.5%，單核細(xì)胞為5.9%，感染前后沒(méi)有明顯的變化。 瀕死雞的紅細(xì)胞數(shù)為82萬(wàn)/mm3，與感染前相比，降低了72.3%，表明柔嫩艾美耳球蟲病雞的致死原因主要是失血過(guò)多。瀕死期白細(xì)胞總數(shù)為3.85萬(wàn)/mm3，顯著高于存活雞的2.75萬(wàn)/mm3，這與在許多疾病中，動(dòng)物在瀨死時(shí)白細(xì)胞數(shù)通常下降的現(xiàn)象有所不同。 謝明權(quán)等(1993)用純化的孢子化的柔嫩艾美耳球蟲卵囊（威斯康星株）和裂殖子，經(jīng)用C-50超聲波粉碎機(jī)處理后，進(jìn)行了水解氨基酸和游離氨基酸的測(cè)定。結(jié)果發(fā)現(xiàn)柔嫩艾美耳球蟲卵囊有6種游離氨基酸（天門冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、蘇氨酸、賴氨酸和異亮氨酸），其中以異亮氨酸含量較高，為0.072；檢出l5種水解氨基酸，其中異亮氨酸含量較高，為0.688。柔嫩艾美耳球蟲第2代裂殖子檢出11種游離氨基酸，其中精氨酸含量最高，為0.13；檢出17種水解氨基酸，其中以谷氨酸含量較高為1.397。 謝明權(quán)等(1992)在“不同血清在細(xì)胞培養(yǎng)中對(duì)球蟲子孢子的活力及發(fā)育相關(guān)試驗(yàn)”一文中指出:采用雞血清、小牛血清、兔血清及豬血清作球蟲細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基成分，然后比較這4種血清（各有2種濃度:5%和10%）對(duì)柔嫩艾美耳球蟲的子孢子活力及其在細(xì)胞中發(fā)育的作用。檢測(cè)指標(biāo)為(a)接種后l、4、8、12、24h，細(xì)胞內(nèi)子孢子數(shù)量差異。(b)第Ⅰ代成熟裂殖子數(shù)量變化。(c)第Ⅱ代成熟裂殖體數(shù)量變化。結(jié)果表明:(1)雞血清培養(yǎng)蒸在113種指標(biāo)上均高于另外3種血清，而豬血清培養(yǎng)基均低于別的血清；(2)含5%血清與10%血清培養(yǎng)基在這3個(gè)指標(biāo)上無(wú)顯著差異；(3)予孢子在接種后4h，穿透細(xì)胞的數(shù)目達(dá)到高峰，此后有所下降。作者認(rèn)為采用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)作抗球蟲藥篩選，可首先選用雞血清作培養(yǎng)基成分。 段嘉樹、張秀云(1992)報(bào)道了次氯酸鈉處理對(duì)柔搬艾美耳球蟲卵囊活力的影響，用10%和20%的次氯酸鈉溶液對(duì)收集的新鮮柔嫩艾美耳球蟲卵囊液，分別處理10min和20min.然后用常規(guī)方法徹底清洗后放在2.5%重鉻酸鉀溶液中，置29℃溫度下培養(yǎng)48h，觀察卵囊孢子發(fā)育率。以生物統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明各處理組間無(wú)顯著差異。 有人對(duì)柔嫩艾美耳球蟲的致病力進(jìn)行過(guò)研究，如黃兵等(1994)從現(xiàn)場(chǎng)采集分離獲得的純種柔嫩艾美耳球蟲，孢子化后，分別以每只雞感染1萬(wàn)、5萬(wàn)、10萬(wàn)和20萬(wàn)個(gè)的不同劑量，人工感染10～13日齡的伊莎公雞，感染后7天結(jié)束試驗(yàn)，最后以平均增重、死亡率和病變記分作致病力的判定指標(biāo)。試驗(yàn)結(jié)果顯示柔嫩艾美耳球蟲致病力很強(qiáng)，感染10萬(wàn)個(gè)孢子化卵囊的死亡率為50%；感染20萬(wàn)個(gè)的死亡率達(dá)75%；感染5萬(wàn)個(gè)孢子化卵囊的平均增重極顯著低于不感染對(duì)照組(P＜0.01)。4個(gè)不同感染劑量的腸道病變記分為2.75～3.92。 汪明等(1994)也報(bào)道了柔嫩艾美耳球蟲致病力的試驗(yàn)。作者采用單卵囊分離技術(shù)從雞場(chǎng)的混合卵囊中提純出柔嫩艾美耳球蟲。卵囊孢子化后，按每只5萬(wàn)、7.5萬(wàn)、10.5萬(wàn)和20萬(wàn)個(gè)的不同感染量人工感染14日齡的AA肉雞。結(jié)果致死率分別為10%、20%、40%和50%。試驗(yàn)說(shuō)明柔嫩艾美耳球蟲是致病力很強(qiáng)的一種球蟲。 有人研究抗球蟲藥對(duì)柔嫩艾美耳球蟲的影響，如張振嵐等(1991)報(bào)道了尾卡巴嗪l.25×10-4能引起柔嫩艾美耳球蟲裂殖生殖階段的滋養(yǎng)體或初生裂殖體及裂殖子的線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等膜結(jié)構(gòu)系統(tǒng)和核異常變化。1.68×10-4磺胺喹惡啉對(duì)裂殖生殖階段的影響主要表現(xiàn)為核膜的增生復(fù)制等一系列核的異常變化；對(duì)配子生殖階段的影響表現(xiàn)為Ⅰ型和Ⅱ型卵囊壁形成顆粒(WFBⅠ，WFBⅡ)的異常變化。8×10-5鹽霉素對(duì)上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞(IEL)中的子孢子及黏膜中成熟裂殖子的影響表現(xiàn)為表皮的分離或破裂及胞漿內(nèi)微線粒和多糖顆粒等的輪廓模糊。 謝明權(quán)等(1994)應(yīng)用3種聚醚類抗生素和7種化學(xué)合成的抗球蟲劑作用于柔嫩艾美耳球蟲的裂殖子30min，然后用Hank's平衡鹽溶液洗去藥物再接種10～11日齡的雞胚。2.5天后收集雞胚中的卵囊，以卵囊生成數(shù)判斷藥物的效果。結(jié)果證明，除氨丙啉外，其余的抗球蟲劑對(duì)裂殖子是有效的。各種藥物的最低濃度，拉沙菌素、鹽霉素、莫能霉素、殺球靈 (Diclazuril)、常山酮為10ug/ml；氯苯胍、乙羥喹酯（Decoquinate）為l00ug/ml；氯吡醇(Clopidol)為500ug/ml和尼卡巴嗪為1000ug/ml可以降低裂殖子的活力，但不明顯。當(dāng)拉沙菌素、鹽霉素、莫能霉素、殺球靈、常山酮、氯苯胍的劑量分別提高到350、150、120、200、500和700ug/ml時(shí)，可以殺死裂殖子。作者還進(jìn)行了藥物作用方式的比較，一種是如前述的藥物直接作用于裂殖子，然后接種于雞胚；另一種是先將子孢子接種于雞胚后3天，當(dāng)柔嫩艾美耳球蟲第2代裂殖體發(fā)育時(shí)，從尿囊腔注入藥物。結(jié)果發(fā)現(xiàn)10ug/ml的常山酮對(duì)上述兩種方法均有很好的抗球蟲效果。10ug/ml的殺球靈或100ug/ml的氯苯胍直接作用于裂殖子時(shí)，顯示出很好的效果，但在第二種方法中則未顯示抗球蟲效力。尼卡巴嗪在以上兩種投藥方法均無(wú)效。作者提出雞胚是球蟲進(jìn)行體外培養(yǎng)的模型，然而有些藥物需在雞體內(nèi)轉(zhuǎn)化后方能發(fā)揮作用，故雞胚模型作為篩選抗球蟲藥是有一定價(jià)值的，但真正確定藥物劑量和最終確定棄留，最好在雞體中作鑒別。 球蟲的抗藥性是生產(chǎn)中的課題，國(guó)內(nèi)外不少的寄生蟲學(xué)者都很注意。我國(guó)對(duì)這問(wèn)題近年來(lái)也有些研究資料。 秦澤云等(1992)應(yīng)用國(guó)內(nèi)不同地區(qū)分離到的柔嫩艾美耳球蟲進(jìn)行了對(duì)氯苯胍和克球粉的抗藥性檢測(cè)。每只2周齡雛雞感染6×104個(gè)孢子化卵囊，以美國(guó)默克公司的抗球蟲指數(shù)(ACI)作為判斷標(biāo)準(zhǔn)。ACI大干160，判為無(wú)抗藥性；介于160和120之間的，判為有部分抗藥性；小于120的則判為具有抗藥性。結(jié)果表明，克球粉1.25×10-4對(duì)3株柔嫩艾美耳球史的抗球蟲指數(shù)分別為182、141和l83，說(shuō)明克球多對(duì)其中一株柔嫩艾美耳球蟲已具有部分抗藥性。氯苯胍6.6×l0-5對(duì)3株柔嫩艾美耳球蟲的抗球蟲指數(shù)分別為120、68和193，這表明其中2株已對(duì)氯苯胍產(chǎn)生抗藥性，比推薦用量3.3×l0-5高出一倍已無(wú)抗球蟲作用。試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明國(guó)內(nèi)存在球蟲抗藥性問(wèn)題，有必要作進(jìn)一步調(diào)查。 孔繁瑤等(1994)對(duì)我國(guó)12個(gè)省、區(qū)的15株柔嫩艾美耳球蟲對(duì)5種抗球蟲藥的抗藥性進(jìn)行了調(diào)查研究.，文中提出“最適抗球蟲活性百分率( POAA)、病變記分減少率(RLS)和相對(duì)盲腸卵囊產(chǎn)量(ROP)3項(xiàng)參數(shù)指標(biāo)為綜合判定球蟲對(duì)藥物的抗藥性（或敏感性），具體判定標(biāo)準(zhǔn)為，+:輕度抗藥；++:中度抗藥；+++:嚴(yán)重抗藥；-:敏感。(1) POAA=（感染用藥組GSR-感染不用藥對(duì)照組CSR）/（不感染不用藥對(duì)照組GSR-感染不用藥對(duì)照組CSR）×100%。GSR=籠末重/籠初重。POAA≤50%:有抗藥性；＞50%:無(wú)抗藥性。(2) RLS=（感染不用藥對(duì)照組平均病變記分-感染用藥組平均病變記分）/（感染不用藥對(duì)照組平均病變記分）×100%。RLS≥50%:無(wú)抗藥性；＜50%:有抗藥性。(3)ROP=感染用藥組平均卵囊百萬(wàn)數(shù)/感染不用藥組平均卵囊百萬(wàn)數(shù)×100%。ROP≥15%:有抗藥性；＜15%:無(wú)抗藥性。 作者通過(guò)15株柔嫩艾美耳球蟲對(duì)5種抗球蟲藥的敏感性檢測(cè)，首次實(shí)驗(yàn)證實(shí)柔嫩艾美耳球蟲的抗藥性在我國(guó)12個(gè)省、區(qū)普遍存在。試驗(yàn)提出的結(jié)論是:(1)實(shí)驗(yàn)證實(shí)柔嫩艾美耳球蟲對(duì)莫能霉素、氨丙啉、克球粉和氯苯胍（均用推薦劑量）的抗藥性在我國(guó)l2個(gè)省、區(qū)普遍存在。(2)不用地區(qū)蟲株的抗藥譜不同，抗性程度亦不同。多數(shù)蟲株對(duì)2種或2種以上的抗球蟲藥有復(fù)合抗藥性。(3)8株柔嫩艾美耳球蟲對(duì)殺球靈（Diclazuril）均無(wú)抗藥性。(4)研究制訂了比較適用的檢測(cè)球蟲抗藥性的判定方法和標(biāo)準(zhǔn)，即以POAA、RLS和ROP 3項(xiàng)參數(shù)指標(biāo)綜合判定球蟲對(duì)藥物的抗藥性（或敏感性）。 作者在討論中提到，對(duì)于現(xiàn)場(chǎng)雞球蟲的抗藥性，幣同研究者所采用的抗藥性劃定指標(biāo)和標(biāo)準(zhǔn)不盡相同。國(guó)外采用的判定標(biāo)準(zhǔn)包括(1)卵囊產(chǎn)量:用藥組的每克糞便的卵囊數(shù)≥50000，判為有抗藥性；或用藥組的卵囊總數(shù)大于或等于感染不用藥對(duì)照組的5%，判為有抗藥性；或當(dāng)使用2倍推薦量藥物時(shí)仍有卵囊產(chǎn)生者判為有抗藥性。(2)病變?cè)u(píng)分:用藥組的病變計(jì)分比感染不用藥對(duì)照組減少不足50%者為有抗藥性。(3)增重:用藥組增重低于不感染不用藥對(duì)照組增重的75%，劃為有抗藥性；或用藥組增重不顯著高于感染不用藥對(duì)照組為有抗藥性，高于感染不用藥對(duì)照組但低于不感染不用藥對(duì)照組為有部分抗藥性。(4)最適抗球蟲活性百分率小于或等于50%，判為有抗藥性。(5)糞便評(píng)分:用藥組平均糞便計(jì)分大于或等于感染不用藥對(duì)照組50%，判為有抗藥性。(6)抗球蟲指數(shù):如果抗球蟲指數(shù)小于120，判為有抗藥性；介于121～159之間，判為有部分抗藥性。 由于藥物在實(shí)用條件下不可能完全排除卵囊產(chǎn)生，且目前還沒(méi)有一種藥物（除殺球靈外）在養(yǎng)禽場(chǎng)按規(guī)定濃度使用時(shí)能完全阻止卵囊產(chǎn)生，所以，若以卵囊產(chǎn)量為標(biāo)準(zhǔn)判定球蟲的抗藥性，很可能產(chǎn)生抗藥性蟲株比率增高的后果。試驗(yàn)觀察，某些蟲株在用藥情況下雖仍有一定量的卵囊產(chǎn)生，但不影響增重，且有少量蟲體的存在還會(huì)有益于雞免疫力的產(chǎn)生，所以，如固有卵囊排放而判為有抗藥性并否定藥物效用似亦欠妥；但另一方面，如用藥后雖增重正常，但有大量卵囊產(chǎn)生，則存在著病原散播、污染環(huán)境的潛在威脅，故增重與卵囊產(chǎn)量二者應(yīng)作為兩個(gè)藥效指標(biāo)綜合評(píng)定。有鑒于此，作者建議以最適抗球蟲活性百分率、相對(duì)卵囊產(chǎn)量和病變記分減少率3項(xiàng)指標(biāo)綜合判定球蟲的抗藥性，并擬制了判定標(biāo)準(zhǔn)。 李淥等(1986)報(bào)道了蒽環(huán)類抗生素80334對(duì)柔嫩艾美耳球蟲作用后裂殖體階段超微結(jié)構(gòu)的觀察。作者觀察到用藥后，藥物對(duì)球蟲裂殖體起作用，導(dǎo)致裂殖體的自身裂解。同時(shí)，在后期大量的白細(xì)胞位于盲腸的固有膜層，寄生有蟲體的宿主細(xì)胞破裂死亡，巨噬細(xì)胞向蟲體逼近并吞噬。證明80334對(duì)球蟲有很好的防治效果。對(duì)照組，觀察到的是密集的，正在發(fā)育過(guò)程中的裂殖體，大而清晰，巨噬細(xì)胞沒(méi)機(jī)會(huì)同裂殖體接觸，所以就沒(méi)有上述情況出現(xiàn)。 曾明華、沈詠舟(1991)對(duì)疑似對(duì)氨丙啉和氯甲吡啶酚產(chǎn)生耐藥性的柔嫩艾美耳球蟲蟲株（安徽株）進(jìn)行了研究。試驗(yàn)研究用的敏感蟲株是由上海農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所球蟲病組提供，試驗(yàn)用藥物氨丙啉（上海紅衛(wèi)獸藥廠），氯甲吡啶酚（南京農(nóng)業(yè)大學(xué)藥理組提供），以球蟲引起的死亡率、病變記分、盲腸內(nèi)容物中的卵囊數(shù)、增重率、飼料利用率和抗球蟲指數(shù)為藥效判定指標(biāo)。試驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn)，在使用推薦劑量的藥物時(shí)，接種柔嫩艾美耳球蟲敏感株和疑似耐藥株，其上述各項(xiàng)指標(biāo)均有顯著差異，從而說(shuō)明作者從雞場(chǎng)分離的柔嫩美耳球蟲株對(duì)氨丙啉和氯甲吡啶酚都產(chǎn)生了耐藥性。從實(shí)際情況來(lái)看，該雞場(chǎng)應(yīng)用該兩種抗球蟲藥已有5年以上，由于球蟲長(zhǎng)期接觸這些低濃度藥物而產(chǎn)生了耐藥性。所以盡管在飼料中添加上述抗球蟲藥，仍然會(huì)因球蟲病而造成大批雛雞發(fā)病和死產(chǎn)。 （三）、流行情況 世界上幾乎每一個(gè)國(guó)家都有雞球蟲病發(fā)生，可以說(shuō)，只要有雞，就有球蟲存在(鄒瑩，1988)。雞球蟲在我國(guó)的分布情況，也證實(shí)了這一點(diǎn)。我國(guó)從南到北，從東到西均有雞球蟲存在，每年都有球蟲病爆發(fā)的報(bào)道，只有程度上的不同。造成經(jīng)濟(jì)損失的大小隨各地獸醫(yī)技術(shù)力量的不同而不同，可惜我國(guó)無(wú)全面精確的統(tǒng)計(jì)。 我國(guó)公開(kāi)報(bào)道的文獻(xiàn)，雞球蟲病幾乎皆集中在柔嫩艾美耳球蟲病和毒害艾美耳球蟲病。誠(chéng)然這兩種艾美耳球蟲病確是雞的9種艾美耳球蟲中致病力最強(qiáng)的，常引起顯著的臨診癥狀，并導(dǎo)致大批雞只發(fā)生死亡，易為人們所認(rèn)識(shí)和重視。巨型艾美耳球蟲病和堆型艾美耳球蟲病臨診表現(xiàn)較輕微，死亡率不如上述兩種球蟲病高，在生產(chǎn)中容易被忽視。據(jù)調(diào)查，我國(guó)華北地區(qū)雛雞爆發(fā)柔嫩艾美耳球蟲病大多是在3～6周齡，少數(shù)是在2周齡或95日齡（張守發(fā)等，1990）。毒害艾美耳球蟲病發(fā)生在6周齡以上的雞。曾在北京地區(qū)發(fā)現(xiàn)110日齡的大中雛發(fā)生毒害艾美耳球蟲病，死亡率高達(dá)10%～15%。 球蟲病的發(fā)生季節(jié)，一般在每年的4～9月，而以6～7月最為嚴(yán)重。我國(guó)地域跨度大，球蟲病的發(fā)生季節(jié)，南北方會(huì)有所不同。密閉式大規(guī)模集約化雞舍，則長(zhǎng)年都可發(fā)生。但在溫度高、濕度大的季節(jié)發(fā)病較厲害。 雞球蟲的感染率有人作過(guò)調(diào)查，如左仰賢等(1986)對(duì)云南的312只雞進(jìn)行球蟲調(diào)查時(shí)，發(fā)現(xiàn)有252只雞感染球蟲，總的感染率為80.8%，其中20～60日齡雞感染率為84.1%，90～120日齡雞感染率為83.9%，1～1.5年的雞感染率為57.6%。 張寶祥等(1986)報(bào)道，陜西省400份雞糞樣檢查結(jié)果，發(fā)現(xiàn)感染率為74.75%，感染強(qiáng)度平均為37600個(gè)卵囊/1g糞便，范圍在100～1440000個(gè)/1g糞便。調(diào)查還發(fā)現(xiàn)2月齡以下的雛雞感染率和感染強(qiáng)度均比成年雞要高得多。從上可見(jiàn)，雞球蟲在我國(guó)的雞群中的感染率是很高的。 （四）、防治 迄今為止。國(guó)內(nèi)外對(duì)雞球蟲病的防治主要是依靠藥物。使用的藥物有化學(xué)合成的和抗生素兩大類，從1936年首次出現(xiàn)專用抗球蟲藥以來(lái)，已報(bào)道的抗球蟲藥達(dá)40余種（鄒瑩，1988），現(xiàn)今廣泛使用的不下20種左右。我國(guó)養(yǎng)雞生產(chǎn)上使用的抗球蟲藥品種，包括進(jìn)口和國(guó)產(chǎn)的，估計(jì)也有10余種，介紹如下。 張勤等(1986)進(jìn)行了速丹(Stenorol)對(duì)雞的柔嫩艾美耳球蟲、毒害艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲和堆型艾美耳球蟲混合感染的抗球蟲效力籠飼試驗(yàn)和田間試驗(yàn)。以可愛(ài)丹和氯苯胍做了比較?；\飼試驗(yàn)結(jié)果表明:于人工感染前2天日糧中投給3×10-6的速丹，直到感染后l4天結(jié)束，完全防止了由球蟲病引起的死亡，同飼喂1.25×10-4可愛(ài)丹和3×10-5氯苯胍的組和感染不給藥組比較，不論是增重和飼料利用率的提高，還是腸道病變程度的減輕都是明顯的，唯有感染后第5～11天期間的卵囊排出總數(shù)高于可愛(ài)丹和氯苯胍組。 2000只白來(lái)航雛雞進(jìn)行田間試驗(yàn)的結(jié)果是在4～8周期喂3×10-6速丹的組比可愛(ài)丹和氯苯胍組救果更好。 張勤等(1986)報(bào)道了速丹和鹽霉素對(duì)籠飼肉雞混合球蟲感染的療效對(duì)比試驗(yàn)。結(jié)果表明，速丹的抗球蟲效果比鹽霉素好。3×l0-6和6×10-6的速丹完全有效地防止了4種球蟲（Eimeria tenella、E.necatrix、E.acervulina和E.maxima）混合感染引起的死亡，3×10-6在提高增重和飼料利用率方面優(yōu)于6×10-6，但在消除卵囊產(chǎn)生和控制病變發(fā)生上不如6×10-6。鹽霉素（5×10-5和1×10-4）都沒(méi)有完全控制球蟲病引起的死亡。5×10-5不論是對(duì)增重和飼料利用率的提高，還是病變記分和卵囊產(chǎn)量的降低都不如1×10-4。l×10-4的鹽霉素的增重和飼料利用率水平和3×10-6速丹組的接近，說(shuō)明1×10-4的鹽霉素是防治雞球蟲病的最有效的劑量。 孫浴東等(1986)用常山酮(4×10-6)、可愛(ài)丹(0.05%)和氯苯胍(3.3×10-5)對(duì)自然感染的雞球蟲病進(jìn)行了療效試驗(yàn)。藥物混入飼料中喂服，連喂1個(gè)月。試驗(yàn)結(jié)果表明:3個(gè)喂藥組雞的藥前球蟲感染率分別為50%、60%和40%，用藥后下降到0，其療效均顯著。而不喂藥組球蟲感染率保持在80%。常山酮、可愛(ài)丹、氯苯胍組平均增重分別為735g、630g、705g，而不喂藥組平均增重為540g。以上3種抗球蟲藥防治雞球蟲病的效果顯著。以常山酮效果最好，可愛(ài)丹、氯苯胍次之。 孫浴東等(1986)報(bào)道了常山酮、可愛(ài)丹、沙氏三球粉（Unistat）3種抗球蟲藥對(duì)柔嫩艾美耳球蟲病的預(yù)防效果的對(duì)比試驗(yàn)。結(jié)果表明:連續(xù)喂服8天含5×10-6常山酮的15只雞，僅在感染后第4天發(fā)現(xiàn)3堆血糞。試驗(yàn)雞精神、食欲、增重均正常。感染后第9天剖檢7只雞，腸道均無(wú)病變，腸內(nèi)容物和排出的糞便中均查不到卵囊。余下的8只雞，放養(yǎng)于污染的環(huán)境中，仍連續(xù)喂藥22天后剖檢，腸道均無(wú)病變，糞便中查不到卵囊?？蓯?ài)丹與常山酮的療效對(duì)比試驗(yàn)的結(jié)果大體相似，唯在感染后第4天發(fā)現(xiàn)血便比常山酮多1倍，并有1只雞的糞便中有少量球蟲的卵囊。沙氏三球粉組中，少數(shù)雞既有臨診癥狀，又有較重的病變，體重略有降低，并有個(gè)別雞死亡，僅有一定的預(yù)防效果。 史天衛(wèi)等（1985）對(duì)國(guó)產(chǎn)尼卡巴嗪防治雞球蟲病進(jìn)行了二批籠飼試驗(yàn)，以抗球蟲指數(shù)（相對(duì)增重率+存活率）-（病變值+卵囊值）作為療效標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果表明，國(guó)產(chǎn)尼卡巴嗪屬高效抗球蟲藥物。其抗球蟲指數(shù)分別為191.25和190.56。從試驗(yàn)結(jié)果看，該藥物l.25:10-4的劑量不但不影響雞只增重，還能促進(jìn)生長(zhǎng)。作者曾以1.5×10-4的劑量作試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)雞只增重更明顯，其抗球蟲指數(shù)超過(guò)200，達(dá)到210.47。但文中指出，根據(jù)對(duì)該藥物進(jìn)行安全試驗(yàn)結(jié)果看，加大劑量亦會(huì)出現(xiàn)體重下降，1.25×l0-4足以對(duì)付球蟲病對(duì)雞的危害。 林盂初等(1986)對(duì)江蘇省江都合成獸藥廠生產(chǎn)的數(shù)種抗球蟲藥。進(jìn)行抗柔嫩艾美耳球蟲的效果試驗(yàn)。試驗(yàn)證明，所試藥物中具有十分滿意效果的藥物依次為:強(qiáng)效氨丙啉預(yù)混劑（0.5g/kg飼料），常山酮預(yù)混劑（0.5mg/kg飼料），強(qiáng)效氨丙啉預(yù)混劑（0.5g/kg飼料）。磺胺喹惡啉5份+ DVD 1份（0.12g/kg飼料）4種。單用磺胺喹惡啉 (0.12g/kg飼料)不易控制雛雞盲腸球蟲病。 史天衛(wèi)等(1986)報(bào)道了國(guó)產(chǎn)尼卡巴嚷（Nicarbazin）防治雞球蟲病的田間試驗(yàn)與對(duì)雞的安全試驗(yàn)研究。作者通過(guò)10967只雞的田間試驗(yàn)證明，在飼料中添加1. 25×10-4的尼卡巴嗪，存活率比可愛(ài)丹、球蟲寧、痢特靈、鹽霉素組增加1.19%；相對(duì)增重每只增加達(dá)100g左右。飼料利用率尼卡巴嗪組與可愛(ài)丹、球蟲寧、痢特靈、鹽霉素組差異不明顯。 飼料中尼卡巴嚷，以含量分別為1.25×10-4，2.5×l0-4，6. 25×10-4，1.25×10-3任雞自由采食60天，臨診上未發(fā)現(xiàn)各組雞有中毒癥狀。各組雞只進(jìn)行組織切片觀察，未發(fā)現(xiàn)肌胃、腸、腎有任何明顯的中毒性病變。1.25×10-3組，有腸絨毛斷裂，腸腔內(nèi)有漿液性滲出物，集合管上皮也見(jiàn)脫落。 史天衛(wèi)等(1986)進(jìn)行了球蟲酯（Ethopabate）防治雞球蟲病的舍飼試驗(yàn)、藥物比較試驗(yàn)、對(duì)雞的安全試驗(yàn)。舍飼試驗(yàn)表明:氨丙啉（1.25×10-4）加球蟲酯(4×10-6)的抗球蟲結(jié)果與可愛(ài)丹(2.5×l0-4)相近似或略強(qiáng)一些。藥物比較試驗(yàn)，以抗球蟲指數(shù)(Anticoccidial Index，ACI)作為判定標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果以氨丙啉+球蟲酯(1.25×10-4+4×10-6)為最高，達(dá)239。球蟲寧的ACI僅為105.33。安全試驗(yàn)結(jié)果是1×10-4，2×10-4的球蟲酯對(duì)雞是安全的，4×10-4，雞的體重有所減輕。組織切片觀察，肌胃、肝、脾、肺、腎、腺胃、腸、腦、腔上囊，均未發(fā)現(xiàn)各組器官有任何中毒性病變，只有輕度出血，淋巴細(xì)胞漫潤(rùn)。 殷佩云等(1986)報(bào)道了鹽霉素對(duì)球蟲病的療效。5×10-5、7×10-5、9×10-5的鹽霉素混于飼料中皆有預(yù)防雞球蟲?。ㄈ崮郯蓝蛳x、堆型艾美耳球蟲和巨型艾美耳球蟲）的效果，能控制或降低死亡率，減輕或不產(chǎn)生病變，使排出的卵囊數(shù)目減少，并有促進(jìn)增重和提高飼料轉(zhuǎn)化率的作用。其中以7×10-5效果最好，其次為9×10-5和5×10-5。 試驗(yàn)結(jié)果證明使用低劑量的鹽霉素知5×10-5，其增重?cái)?shù)值與不感染不給藥組幾乎相等，相當(dāng)于不感染不給藥組的92%或99%。反之，高劑量時(shí)則影響增重，如使用9××10-5，則相當(dāng)于不感染不給藥組的82%或89%。所以使用鹽霉素劑量不能高于9×10-5。 林昆華等(1990)進(jìn)行了鹽霉素預(yù)防肉雞球蟲病的田間試驗(yàn)。試驗(yàn)雞為羅曼肉雞，第一組給予5×10-5鹽霉素，第二組投予7×10-5鹽霉素。兩組雞均從1日齡開(kāi)始到51日齡止，連續(xù)投藥。各組試驗(yàn)雞均于0、14、28、42和56日齡時(shí)各抽樣（100只）稱重；l4、28、42和56日齡各進(jìn)行糞檢卵囊一次。試驗(yàn)過(guò)程中死亡的雞均進(jìn)行剖檢，以確定死因。試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)，以統(tǒng)計(jì)學(xué)方法處理。試驗(yàn)結(jié)果是: 1.5×10-5或7×10-5組的試驗(yàn)雞均未見(jiàn)因球蟲病死亡的，亦未見(jiàn)因藥物中毒死亡的。 2.每只雞的平均增重和料肉比，不論是5×10-5或是7×10-5組，在1～6周齡時(shí)，無(wú)顯著差異。7～8周齡時(shí)，7×10-5組比5×10-5組試驗(yàn)雞每只平均增重和料肉比差異顯著。 3.14、28和42日齡3次糞檢結(jié)果，兩組對(duì)比無(wú)明顯差異，但在56日齡糞檢時(shí)，5×10-5組每克糞便卵囊數(shù)卻比7×10-5組明顯增多，且有10%的糞樣有不同程度帶血。 殷佩云等（1986)進(jìn)行了莫能霉素對(duì)人工引發(fā)的雞球蟲病的療效觀察。試驗(yàn)以鹽霉素和氨丙啉作對(duì)比。結(jié)果證明:莫能霉素接1×10-4，1.1×10-4，11×10-4，2×10-4混于飼料中給予，皆有預(yù)防雞混合型球蟲病的效果。其中以1.1×10-4效果最好。從相對(duì)增重率和飼料轉(zhuǎn)化率結(jié)果來(lái)看，莫能霉素的適宜劑量為l ×10-4～1.1×10-4。 林昆華等(1990)報(bào)道了國(guó)產(chǎn)莫能霉素預(yù)防肉雞球蟲病的田間試驗(yàn)。試驗(yàn)以克球粉(1.25×10-4)為對(duì)比，莫能霉素劑量為1.1×10-4。試驗(yàn)雞從17～51日齡連續(xù)投藥。克球粉組雞在4周齡時(shí)，由于某些原因停藥7天，導(dǎo)致發(fā)生了急性球蟲病，經(jīng)治療，死亡86只。 試驗(yàn)結(jié)果以統(tǒng)計(jì)學(xué)方法處理。得出的結(jié)果: 1.4周齡前兩組雞在增重上無(wú)顯著差異，5～6周齡時(shí)差異極顯著，7～8同齡時(shí)其差異又趨不顯著。56天試驗(yàn)期間，莫能霉素組比克球粉組增重率高13%。 2.整個(gè)試驗(yàn)期間，兩組的料肉比值間差異極顯著。 3. 21～49日齡檢查，克球粉組試驗(yàn)雞的糞便性狀有變化的堆數(shù)比莫能霉素組高。 殷佩云等(1986)報(bào)道了國(guó)產(chǎn)球痢靈(Zoalene)中試產(chǎn)品對(duì)雞球蟲病的療效試驗(yàn)，試驗(yàn)分預(yù)防和治療兩項(xiàng)，無(wú)論預(yù)防或治療試驗(yàn)，試驗(yàn)雞（除不感染不給藥組外）皆采用人工感染卵囊的方法。 試驗(yàn)結(jié)果證明1.25×10-4，1.5×10-4和2×10-4的球痢靈混于飼料中喂服，對(duì)單一感染柔嫩艾美耳球蟲卵囊l×105個(gè)或感染混合卵囊3×l05個(gè)引起的雞球蟲病均有良好的預(yù)防作用，但l.5×10-4和2×10-4對(duì)增重有些影響，因此生產(chǎn)上應(yīng)用以l.25×10-4為適宜劑量。 試驗(yàn)結(jié)果還證明，球痢靈的服藥時(shí)間以在感染卵囊前或感染當(dāng)天為宜。隨著服藥時(shí)間的推后，其發(fā)病程度、相對(duì)增重率和排出卵囊數(shù)量即隨之加重、降低和增多，所以在生產(chǎn)中球痢靈用于雞球蟲病的預(yù)防為最好。 楊振中等(1986)報(bào)道了國(guó)產(chǎn)尼卡巴嗪對(duì)雞球蟲病的防治研究。作者以1×10-4～4×10-4劑量分批進(jìn)行籠飼試驗(yàn)，結(jié)果表明l.25×10-4的劑量對(duì)盲腸球蟲和小腸球蟲都有效。田間試驗(yàn)以克球粉為對(duì)照。結(jié)果是以1.25×10-4連續(xù)投服50天，雞群因球蟲病死亡6只，為試驗(yàn)雞的0.3%，平均增重為1400g。對(duì)照組因球蟲病死亡21只，死亡率為2.3%，平均增重為1175克。 作者還以小鼠、雞對(duì)國(guó)產(chǎn)尼卡巴嗪進(jìn)行了急性和慢性毒性試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明:小鼠的急性毒性試驗(yàn)，每公斤體重2400mg、4800mg是安全的；雞的急性毒性試驗(yàn)，每公斤體重2400mg、3000mg、4800mg，9600mg也是安全的。雞的慢性毒性試驗(yàn)，藥的劑量為2×10-4、4×10-4、8×10-4，連續(xù)投服40天，無(wú)中毒死亡，生長(zhǎng)發(fā)育與不給藥對(duì)照雞相似。至于肉雞體內(nèi)尼卡巴嚓的殘留測(cè)定，采用紫外分光方法測(cè)定結(jié)果，除了腹脂在停藥0天和1天有殘留外，停藥2天后各組織內(nèi)的殘留量已全部消失。 據(jù)現(xiàn)有抗雞球蟲藥研究的資料表明，各種抗球蟲藥，均有在球蟲生活史的特定時(shí)期發(fā)揮最大作用的活性峰期。樊生超(1990)用雞胚感染球蟲子孢子作為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，探討了其用于測(cè)定抗球蟲藥活性峰期的可能性。作者將孵化至10日齡的雞胚、蛋殼用碘酊消毒后，給每一雞胚無(wú)菌注入2000個(gè)柔嫩艾美耳球蟲的子孢子和青霉素、鏈霉素各2000單位于尿囊腔內(nèi)，然后分別在感染的當(dāng)天，第2天，第3天和第4天注入抗球蟲藥，放入40℃溫度孵化箱內(nèi)培養(yǎng)。在感染后第8天。將不同注藥時(shí)間的各組雞胚逐只剖檢，回收并計(jì)卵囊數(shù)，以感染不給藥組的卵囊產(chǎn)量為100%，最后根據(jù)不同注藥時(shí)間的雞胚卵囊抑制率來(lái)判定藥物作用的活性蜂期。作者共測(cè)試了8種抗球蟲藥。結(jié)果如下:氯甲吡啶酚和丁氧喹啉的作用峰期在球蟲生活史的第1天，卵囊抑制率分別為100%和99.97%；奠能霉素和鹽霉素的活性峰期為第2天，卵囊抑制率分別為100%和99.97%；氨丙啉和四環(huán)素的峰期是第3天，卵囊抑制率均為100%；尼卡巴嗪和磺胺二甲基嘧啶的活性峰期在第4天，其卵囊抑制率分別為99.98%和98.68%。試驗(yàn)結(jié)果與Reid (1975)報(bào)道的用其他方法測(cè)得的結(jié)果基本一致，證明了本方法的可用性。 是薛患等(1990)進(jìn)行了水溶性氨丙啉治療雞柔嫩艾美耳球蟲病的籠飼試驗(yàn)。試驗(yàn)以抗球蟲指數(shù)為判定藥效標(biāo)準(zhǔn)。試驗(yàn)結(jié)果表明20%水溶性氨丙啉的抗球蟲指數(shù)為188. 01，達(dá)到高效水平。從試驗(yàn)組和對(duì)照組飲水量測(cè)定，沒(méi)有明顯的差別，說(shuō)明水溶性氨丙啉溶于水后不產(chǎn)生異味。 蔣金書等(1991)報(bào)道了殺球靈（Diclazuril，商品名Clinacox，刻利禽）對(duì)雞球蟲病的防治效果?；\飼試驗(yàn)結(jié)果表明:殺球靈l×10-6混于飼料，連續(xù)喂服，可完全有效地控制雞盲腸球蟲病和堆型艾美耳球蟲病的發(fā)生和死亡。5批試驗(yàn)的抗球蟲指數(shù)為195.7~207.9，比同時(shí)試驗(yàn)的對(duì)照藥物莫能霉素(1.2×10-4)，氨丙啉(l.25 ×10-4)，腐霉素(1.8×10-4)，拉抄洛菌素(1×10-4)，拉那菌素(8×10-5)，尼卡巴囔（1.25 ×10-4)的效果好。 平養(yǎng)肉雞的田間試驗(yàn)表明:以1×10-6的殺球靈混入飼料中，連續(xù)服用，可完全控制雞球蟲病的發(fā)生。其飼料報(bào)酬、病變記分和糞便中的卵囊數(shù)，均較對(duì)照藥物克球粉(1.25×10-4)的效果好。 黃兵等(1990)用殺球靈在兩個(gè)雞場(chǎng)進(jìn)行了防治雞球蟲病的田間試驗(yàn)。試驗(yàn)組用殺球靈1×10-6，對(duì)照組兩組，一組用克球粉(2.5×10-4)，二組用尼卡巴嗪(1.3×10-4)。試驗(yàn)組和對(duì)照組雞均從1日齡開(kāi)始投藥，隨到56日齡試驗(yàn)結(jié)束。以雞只體重、死亡率、腸道病變記分、每克糞便的卵囊數(shù)和料肉比作為效果判定指標(biāo)。結(jié)果為:1.系球靈組平均體重超過(guò)克球粉組；死亡率和料肉比則分別低于克球粉組0.6%和0.278；腸道病變記分和每克糞便卵囊數(shù)皆明顯低于克球粉組。2.殺球靈組平均體重比尼卡巴嗪組高；死亡率比尼卡巴嗪組高1.231%；腸道均未發(fā)現(xiàn)球蟲引起的病變；殺球靈組糞檢未查到卵囊，尼卡巴唪組有少量卵囊。兩藥組的料肉比幾乎無(wú)差異。試驗(yàn)結(jié)果證明殺球靈防治雞球蟲病的效果接近或超過(guò)所用對(duì)照藥物的水平。 俞海等(1991)就殺球靈對(duì)雞柔嫩艾美耳球蟲的殺滅作用，作用峰期及停藥后持續(xù)時(shí)間作了試驗(yàn)觀察。以1×10-6濃度混入飼科，于感染前2天和感染當(dāng)天開(kāi)始給藥組，臨診和盲腸病變檢查未發(fā)現(xiàn)異常，盲腸組織學(xué)檢查也未發(fā)現(xiàn)任何發(fā)育階段的球蟲。感染后l天開(kāi)始喂藥組，盲腸組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)變性和發(fā)育不良的裂殖體，可認(rèn)為殺球靈抗球蟲作用峰期在子孢子和第一代裂殖體早期階段，對(duì)其呈殺滅作用。試驗(yàn)雞在給藥期和停藥后始終未檢出卵囊，說(shuō)明其殺滅作用極強(qiáng)。本藥持效時(shí)間短，停藥l天明顯減弱，停藥2天即基本消失，提示此藥在用藥期間不可間斷。 陳淑玉等(1992)對(duì)殺球靈進(jìn)行了抗雞球蟲病的籠飼試驗(yàn)和圍欄試驗(yàn)?；\飼試驗(yàn)結(jié)果表明:殺球靈組對(duì)每只雞感染5萬(wàn)個(gè)柔嫩艾美耳球蟲孢子化卵囊的保護(hù)率為100%，而感染不給藥組死亡率達(dá)45%；與不感染不給藥組相比，殺球靈組感染后第7天的相對(duì)增重率為95%，而感染不給藥組相對(duì)增重率僅68.7%；殺球靈組感染后第7天的盲腸病變值和卵囊值均為零，感染不給藥組盲腸病變值為34.5，卵囊值為20。殺球靈組的抗球蟲指數(shù)為195.6，表明有顯著抗球蟲效力。圍欄試驗(yàn)結(jié)果表明:當(dāng)采用每只雞混合感染孢子化卵囊（柔嫩艾美耳球蟲5萬(wàn)個(gè)，堆型艾美耳球蟲10萬(wàn)個(gè)和巨型艾美耳球蟲5萬(wàn)個(gè)）時(shí)，殺球靈組的平均增重和飼料報(bào)酬明顯高于速丹組和感染不給藥組；殺球靈組在感染后第7天和第14天的病變記分為零，而速丹組分別為4和1.0，感染不給藥組為4和1.3；殺球靈組的死亡率為零，速丹組為40.83W，感染不給藥組為62.08%；殺球靈組在整個(gè)飼養(yǎng)期間都無(wú)卵囊排出，而速丹組和感染不給藥組在感染后的第7天均有大量卵囊排出，第14天仍有不少卵囊排出。以上結(jié)果表明，殺球靈防治雞球蟲病效果理想，值得推廣。 劉毅等(1990)報(bào)道了湖南省化工研究所研制的阿克洛胺(Aklomide)對(duì)柔嫩艾美耳球蟲病的防治效果。試驗(yàn)雞每只感染柔嫩艾美耳球蟲孢子化卵囊3萬(wàn)個(gè)（除不感染不給藥組外），感染卵囊前2天在飼料中拌入0.1%，0.05%，0.025%的阿克洛胺，以氯苯胍組(3.3×10-5)作藥物對(duì)照。試驗(yàn)以平均只增重、血糞記分、病變記分、飼抖報(bào)酬等作療效判定指標(biāo)。結(jié)果表明:不感染不給藥組的平均只增重為86克，飼料報(bào)酬為3.95。0.05%和0.l%的阿克洛胺組無(wú)血糞，盲腸無(wú)肉眼可見(jiàn)球蟲病變，平均其增重分別為70.9和82.9，飼料報(bào)酬分別為5.4及4.02，比0.025%組及氯苯胍組為優(yōu)。作者認(rèn)為該藥以0.05%濃度加入飼料中對(duì)于防治雞柔嫩艾美耳球蟲病有良效。 張勤等（1990)報(bào)道了菌必滅對(duì)雞的試驗(yàn)性盲腸球蟲病的治療效果。菌必滅為磺胺二甲基嘧啶制劑，配制成濃度為0.15%的溶液，飲水給藥，連飲7天。結(jié)果證明從感染前l天開(kāi)始給藥直到感染后72h開(kāi)始給藥，都能有效地消除血糞排出和防止球蟲病引起的死亡。 孫浴東等(1990)報(bào)道了鹽霉素、康樂(lè)安對(duì)內(nèi)用仔雞防治球蟲病的試驗(yàn)。飼喂時(shí)間49天，7日齡開(kāi)始投藥，上市前5天停藥。從成活率、飼料轉(zhuǎn)化率、增重及屠宰測(cè)定看，鹽霉素組比康樂(lè)安組要好。 孫寶貴蕁(1990)報(bào)道了二甲硫胺與其他抗球蟲藥對(duì)人工感染柔嫩艾美耳球蟲病的療效對(duì)比試驗(yàn)。作者采用人工感染卵囊的方法，試驗(yàn)雞于感染前l天投藥。試驗(yàn)結(jié)果證明，二甲硫胺6.2×10-5，氯苯胍3.3×10-5，氨丙啉l××10-4，對(duì)5萬(wàn)個(gè)柔嫩艾美耳球蟲卵囊攻擊的雛雞，都有明顯的保護(hù)作用，3種藥物組雞的增重率均比不感染不給藥組為高，說(shuō)明這3種藥物不僅能預(yù)防雞球蟲病，并有增重效果。試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明呋喃唑酮2×10-4、復(fù)方敵苗凈2×10-4拌飼，不能使感染雛雞得到完全保護(hù)。隨明這兩種藥物長(zhǎng)期應(yīng)用，產(chǎn)生了抗藥性蟲株。 孫寶貴、何新民(1990)應(yīng)用二甲硫胺6.2×10-5進(jìn)行對(duì)自然感染雞球蟲病的預(yù)防試驗(yàn)。以氯苯胍3.3×10-5作藥物對(duì)照，另設(shè)不用藥對(duì)照組。藥效判定按死亡率、增重、卵囊數(shù)3項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行考核。試驗(yàn)結(jié)果證明，6.2×10-5二甲硫胺拌飼，完全可以控制生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)雞球蟲病的發(fā)生，而且安全。 童村等(1984)報(bào)道了蒽環(huán)類抗生素防治雞球蟲病的初步研究。文中介紹80334菌種是從我國(guó)湖北省襄樊地區(qū)的土壤中分離獲得的一株鏈霉素菌，它產(chǎn)生紅色蒽環(huán)類抗生素80334（相似于1-羥基阿克拉霉素）。經(jīng)初步試驗(yàn)表明:抗生素80334對(duì)柔嫩艾美耳球蟲具有明顯的防治作用。 史天衛(wèi)等（1984)進(jìn)行了蒽環(huán)類抗生素防治雞柔嫩艾美耳球蟲的籠飼試驗(yàn)。試驗(yàn)“鹽霉素(7.5×10-5)為藥對(duì)組。試驗(yàn)結(jié)果表明，80334菌絲體組的臨診血便、死亡率與鹽霉素組無(wú)顯著差異。盲腸病變80334菌絲體組略好于鹽霉素組，增重80334菌絲體組則比鹽霉素組差。為了彌補(bǔ)80334菌絲體減重的缺點(diǎn)，作者在試驗(yàn)組里又增加了其他抗生素（青霉素與潔霉素），將以上兩種抗生素混合于80334菌絲體中進(jìn)行藥物對(duì)比試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果表明，其臨診血便、死亡率、盲腸病變記分均與以前未加青霉素、潔霉素的試驗(yàn)結(jié)果相同，但其增重則超過(guò)了鹽霉素組15.2%～19.45%。 李揚(yáng)等（1986)以常山酮、可愛(ài)丹和上海獸藥廠生產(chǎn)的強(qiáng)效氨丙啉對(duì)雛雞柔嫩艾美耳球蟲病進(jìn)行了藥效對(duì)比試驗(yàn)。藥效以抗球蟲指數(shù)為判定標(biāo)準(zhǔn)。試驗(yàn)結(jié)果，常山酮的抗球蟲指數(shù)為205.59，可愛(ài)丹為169.6，強(qiáng)效氨丙啉為160.14（每公斤飼料0.5g藥飼）。作者文中提到另一試驗(yàn)中，每公斤飼料加1g強(qiáng)效氨丙啉藥飼，則有十分滿意的抗球蟲效果。 楊振中等(1980)對(duì)國(guó)產(chǎn)氨丙啉進(jìn)行了抗柔嫩艾美耳球蟲病的舍飼試驗(yàn)。試驗(yàn)用21日齡來(lái)航雛雞，分國(guó)產(chǎn)氨丙啉1×10-4組和不用藥對(duì)照組兩個(gè)組，每組100只雞，每組雞群都掛有一鐵絲籠，籠內(nèi)飼養(yǎng)3只雞，每只經(jīng)人工感染4萬(wàn)個(gè)柔嫩艾美耳球蟲孢子化卵囊的“種子雞”，感染卵囊后第5天掛入，連續(xù)掛籠25天?！胺N子雞”籠下雞舍地面木屑上每天噴灑適量的水，以保持有利于卵囊發(fā)育的濕度?！胺N子雞”掛入后的第10、15、20、25、30天每次分別剖檢5-10只雞，作病變觀察和卵囊檢查，試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí)以群體稱重各一次。 通過(guò)試驗(yàn)表明:1.氨丙啉1×10-4混入飼料內(nèi)進(jìn)行1個(gè)月的喂雞試驗(yàn)，因球蟲病引起死亡的為1%，不用藥對(duì)照組因球蟲病致死為10%，兩組相比差異顯著。2.解剖雞的盲腸病變與卵囊檢出相符合；氨丙啉組剖檢40只雞中觀察到有輕微病變，又在盲腸內(nèi)容物中查到卵囊的僅1例，占2.5%。對(duì)照組剖檢的40只雞中盲腸病變嚴(yán)重的有38例（同時(shí)都查到多量的球蟲卵囊），占抽殺剖檢雞的85%。兩組相比差異非常顯著。3.試驗(yàn)結(jié)束時(shí)兩組的實(shí)際增重?cái)?shù)值也有明顯的差別。不用藥對(duì)照組平均增重142.5克作為100%，氨丙啉組平均增重165克，為對(duì)照組增重116.2%。 呂文順等(1981)對(duì)進(jìn)口的強(qiáng)力氨丙啉作了抗球蟲病效力和毒性試驗(yàn)。強(qiáng)力氨丙啉分6.3×10-5、1.25×10-4、2.5×10-4、，5×10-4、和l×10-3（以Amprolium計(jì)算）5個(gè)組，以氯苯胍3×10-5、和6×10-5為對(duì)照組。藥物均勻混于飼料中喂服，人工感染球蟲卵囊前2日投喂，直到試驗(yàn)結(jié)束。除不感染不給藥組外，各組雞均經(jīng)口感染孢子化的混合種球蟲卵囊（柔嫩艾美耳球蟲、毒害艾美耳球蟲、和緩艾美耳球蟲、布氏艾美耳球蟲、變位艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲、堆型艾美耳球蟲和早熟艾美耳球蟲）10萬(wàn)個(gè)。試驗(yàn)結(jié)果:感染不給藥組于人工感染卵囊后第5天全部發(fā)病，死亡8/10，剖檢證實(shí)皆死于盲腸球蟲和小腸球蟲病。強(qiáng)力氨丙啉6.3×10-5、組保護(hù)5/5，1.25×10-4、組保護(hù)10/10，2.5×10-4、、5×10-4、1×10-3組各保護(hù)5/5，氯苯胍3×10-5、和6×10-5組保護(hù)10/10。各試驗(yàn)組感染后第5～7天的增重率，強(qiáng)力氨丙啉6.3×10-5組為68.1%，1.25×10-4組平均為96.8%，2.5×10-4組為113.6%，5×10-4和1×10-3組為102.2%；氯苯胍3×10-5、6×10-5組平均為97.8%。試驗(yàn)證明，強(qiáng)力氨丙啉是一種較好的抗雞球蟲病藥物，1.25×10-4以上濃度拌料飼喂，可抗大量艾美耳球蟲混合種卵囊的感染，防止球蟲病的發(fā)生。本藥安全幅度大，1×10-3連續(xù)飼喂16天，2.5×10-4連續(xù)喂18日齡小雞40天未見(jiàn)有毒性反應(yīng)。 張毅強(qiáng)等(1980)報(bào)道了國(guó)產(chǎn)氯苯胍對(duì)雛雞球蟲病的療效和毒性試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果表明:l.國(guó)產(chǎn)氯苯胍對(duì)人工感染引發(fā)的雛雞球蟲病以3.3×10-5的劑量混飼、飲服和混飼加飲服3個(gè)治療組的防病率分別為92%、100%和95.5%；保護(hù)率分別為96%、100%和100%，證明國(guó)產(chǎn)氯苯胍對(duì)雞球蟲有滿意的抑制作用，其中飲服效果更為滿意。增重方面，試驗(yàn)結(jié)束后3個(gè)治療組每雛平均增重率分別為24.1%、24.1%和14.5%，與不感染不給藥組（增重率為31.9%）相比稍差，但與感染不給藥組（增重率為5.3%）相比就好多了。2.自然感染試驗(yàn)中，以3.3×10-5劑量混飼，防病率為92%，保護(hù)率為96%，增重率為31.6%，與對(duì)照組（發(fā)病率81.1%，死亡率24.3%，減重率5.9%）相比，效果顯著。這證明國(guó)產(chǎn)氯苯胍對(duì)雞球蟲病有很高的預(yù)防作用。3.毒性試驗(yàn)以治療量的4倍、6倍、8倍和10倍的劑量連續(xù)服用10天，各組受試雞在整個(gè)試驗(yàn)期間食欲正常，耐受良好，除發(fā)現(xiàn)3.3×10-4組在試驗(yàn)后期體重降低外。其余各組雞生長(zhǎng)發(fā)育良好，未發(fā)病任何中毒和死亡現(xiàn)象，與不用藥對(duì)照組相比無(wú)差別。證明國(guó)產(chǎn)氯苯胍毒性較小安全范圍較大，接3.3×10-4劑量混飼防治雞球蟲病是安全的。 張紹昌(1988)進(jìn)行了磷酸伯氨喹對(duì)籠養(yǎng)雞柔嫩艾美耳球蟲病的療效試驗(yàn)。試驗(yàn)以氯苯胍為對(duì)照藥物。結(jié)果在發(fā)病率、死亡率、病變記分方面與氯苯胍組無(wú)差異，而相對(duì)增重率、飼料利用率均優(yōu)于氯苯胍組，接近不感染不給藥組，但排出球蟲卵囊數(shù)較高。 吳薛忠等(1994)用我國(guó)研制成功的代號(hào)為AC-Ⅰ的抗球蟲藥，作了防治雞柔嫩艾美耳球蟲病的籠飼試驗(yàn)，試驗(yàn)共進(jìn)行了4批。一、二批的試驗(yàn)單用AC-Ⅰ感染卵囊前24h開(kāi)始服藥，直至感染后第7天結(jié)束，每只雞人工感染5萬(wàn)個(gè)柔嫩艾美耳球蟲卵囊（除白對(duì)照組雞外），療效評(píng)定以抗球蟲指數(shù)(ACI)為標(biāo)準(zhǔn)。試驗(yàn)結(jié)果顯示1、2批AC-Ⅰ的抗球蟲指數(shù)為191.6和196 67，而感染不用藥組為113.6和140. 91。第3、4批試驗(yàn)，以同患產(chǎn)品Diclazuril進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果AC-Ⅰ的抗球蟲指數(shù)為194.36和194.25，Diclazuril的抗球蟲指數(shù)為193 .88和194. 12，感染不用藥組僅為77.54和58.07。結(jié)果表明我國(guó)合成的AC-Ⅰ性能穩(wěn)定，效果可靠，與國(guó)外同類產(chǎn)品Diclazuril的抗球蟲水平完全一致。 吳薛忠等(1994)報(bào)道了我國(guó)自行研制的抗球蟲新藥-海南霉素預(yù)混劑（商品名為雞球素）對(duì)柔嫩艾美耳球蟲、毒害艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲、堆型艾美耳球蟲和變位艾美耳球蟲籠飼試驗(yàn)研究。海南霉素用了兩種劑量，一為5×10-6另一為7.5×10-6，以鹽霉素6×10-5作藥物對(duì)照。感染卵囊前l天開(kāi)始服藥，喂至感染后7～8天試驗(yàn)結(jié)束。療效評(píng)定以抗球蟲指數(shù)(ACI)為標(biāo)準(zhǔn)。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4-!。
表4-1海南霉素療效評(píng)定結(jié)果 整個(gè)試驗(yàn)結(jié)果表明海南霉素對(duì)雞的主要5種球蟲都有明顯的抗球蟲效果，是一種值得推廣的高效低量的抗球蟲藥物。 聶奎等(1994)報(bào)道丁海南霉素對(duì)雞球蟲病治療和預(yù)防效果。作者對(duì)發(fā)病雞群施用海南霉素7.5×10-6拌料喂服，用藥后第1天雞死亡率下降，第3天后停止死亡。用藥后共死7只（藥前3天已死亡38只）。對(duì)飼喂在同一雞場(chǎng)的l200只伊莎雛雞（10日齡）及200只雅康雛雞（7日齡）給予海南霉素5×10-6，拌飼喂服，結(jié)果無(wú)一死亡，存活率100%。 聶奎等(1994)用海南霉素進(jìn)行預(yù)防柔嫩艾美耳球蟲病的療效試驗(yàn)。l5日齡無(wú)球蟲雞每只人工感染柔嫩艾美耳球蟲孢于化卵囊10萬(wàn)個(gè)，給予5×10-6的海南霉素拌飼，有很好的預(yù)防效果，其存活率為100%，血便記分0.44，病變記分1.13，抗球蟲指數(shù)為172.75。與感染不給藥組抗球蟲指數(shù)相比，差異極顯著(P＜0.01)。作者將海南霉素與氯苯胍聯(lián)合使用，顯示出很好的相加作用，病變記分0.38，血便記分0.13，比海南霉素單用為低；抗球蟲指數(shù)為180.25，比海南霉素單用時(shí)為高。而氯苯胍因長(zhǎng)期單一使用和不合理使用，柔嫩艾美耳球蟲對(duì)它已產(chǎn)生耐藥性，單用氯苯胍死亡率高達(dá)62.5%，血便記分l.59。病變記分3.63，抗球蟲指數(shù)僅達(dá)28.25。 黃兵等(1994)在人工感染柔嫩艾美耳球蟲卵囊下，對(duì)殺球靈、常山酮、氯羥吡啶、馬杜拉霉素和鹽霉素5種抗球蟲藥，進(jìn)行了3批防治雞柔嫩艾美耳球蟲病的療效對(duì)比試驗(yàn)。療效評(píng)定以抗球蟲指數(shù)為標(biāo)準(zhǔn)。試驗(yàn)結(jié)果顯示上述5種抗球蟲藥的抗球蟲指數(shù)分別為，殺球靈195.52，195.29和192.74；常山酮為200.60、199.04和187.45；氯羥吡啶為179. 64，174.42和167.93；馬杜拉霉素為194.23，194.23和198.89；鹽霉素為167.32，170.95和164.82。用之為對(duì)照的感染不給藥組的抗球蟲指數(shù)分126.50，130.97和93.31。殺球靈、常山酮和馬杜拉霉素的抗柔嫩艾美耳球蟲效果非常好，抗球蟲指數(shù)超過(guò)190；氯羥吡啶和鹽霉素的效果次之，其抗球蟲指數(shù)在160～180之間。 吳兆敏(1990)報(bào)道了短小棒狀桿菌菌苗(CPV)預(yù)防雛雞柔嫩艾美耳球蟲病的研究。作者通過(guò)對(duì)不同時(shí)期（4，7，15天）小雞血清中溶菌酶含量的測(cè)定，顯示出CPV對(duì)小雞腹腔巨噬細(xì)胞有明顯的激活作用。通過(guò)試驗(yàn)組，腹腔注射40億CPV/只，血清溶菌酶的含量平均為18. 00±0.43。對(duì)照組腹腔注射同量的生理鹽水，血清溶菌酶的含量平均為10.20±0.11。溶菌酶含量的顯著增高尤以注射CPV后第4天最為明顯。到2周仍維持在一定水平上。試驗(yàn)設(shè)兩組，每組20只雞，同時(shí)口服接種柔嫩艾美耳球蟲卵囊（1.5萬(wàn)/只）。試驗(yàn)組于接種后1天腹腔注射40億CPV/只，7天后計(jì)算死亡率。對(duì)照組不注射CPV。試驗(yàn)結(jié)果對(duì)照組死亡率達(dá)80%，并伴有大量血便，而試驗(yàn)組無(wú)一死亡，也未見(jiàn)血便。在初次感染后2周，每只雞用15萬(wàn)柔嫩艾美耳球蟲卵囊攻擊，試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明試驗(yàn)雞對(duì)再感染具有100%保護(hù)率，而健康對(duì)照組雞95%死亡，僅有5%雖未死亡，但大量排血便，奄奄一息。說(shuō)明CPV對(duì)小雞腹腔巨噬細(xì)胞有明顯激活作用，從而增強(qiáng)了小雞對(duì)柔嫩艾美耳球蟲病的抵抗能力。這一結(jié)果與Eng-Hong-Lee等研究的Carragenan有破壞和殺傷雞腹腔巨噬細(xì)胞的功能，以致使球蟲感染大大增強(qiáng)的報(bào)道是一致的。 陳國(guó)慶等（1992)進(jìn)行了不同飼料營(yíng)養(yǎng)成分抗球蟲效力對(duì)比試驗(yàn)。試驗(yàn)選用塔特姆(Tatum)品種商品代同一批雛雞50只，雌雄各半，發(fā)育良好，初生重均在0.041～0.042kg。按雌雄各半，隨機(jī)將50只雛雞分為5個(gè)組，即對(duì)照l組，對(duì)照2組，試驗(yàn)1，2、3組，每組10只，均飼養(yǎng)在經(jīng)消毒處理后的鐵絲籠中。試驗(yàn)1組喂飼魚粉蛋白型飼料配方組合的日糧，試驗(yàn)2組喂飼植物蛋白型（大豆餅）飼料配方組合的日糧，試驗(yàn)3組喂飼酵母蛋白型飼料配方組合的日糧。試驗(yàn)1、2、3組的飼料中，按等量遞加法加入同一種代號(hào)為E的高效添加劑（內(nèi)含超標(biāo)多維，礦微及限制性氨基酸，促進(jìn)生長(zhǎng)的藥物和抗球蟲藥物）。飼養(yǎng)管理及免疫程序按肉用仔雞生產(chǎn)常規(guī)進(jìn)行。 雛雞喂至14日齡時(shí)，除對(duì)照1組外，其余各組雞每只均經(jīng)口感染10萬(wàn)個(gè)柔嫩艾美耳球蟲孢子化卵囊。試驗(yàn)結(jié)果:對(duì)照1組，對(duì)照2組，試驗(yàn)1、2、3組相對(duì)增重率分別為100，43.3，108，79.4，82.3；存活率分別為100，50，100，100，90；病變值分別為0，3.9，1，5.5，5.0；卵囊值分別為0，4，0，5，5；抗球蟲指數(shù)分別為200，85.4，207.6，168.9，162.3。由此可見(jiàn)同一種具有高效抗球蟲藥添加到不同飼料營(yíng)養(yǎng)成分所組成的肉用仔雞日糧中，通過(guò)喂飼之后，肉雞所獲得的抗球蟲效力是不同的。 林昆華等(1993)對(duì)國(guó)產(chǎn)馬杜拉霉素的純結(jié)晶體、馬杜拉霉素菌絲體、馬杜拉霉素粗提液進(jìn)行了預(yù)防肉用仔雞球蟲病的療效試驗(yàn)，共進(jìn)行兩個(gè)試驗(yàn)，試驗(yàn)一，每只雛雞人工感染柔嫩艾美耳球蟲孢子化卵囊7萬(wàn)個(gè)，試驗(yàn)二的感染卵囊量提高高10萬(wàn)個(gè)。試驗(yàn)以進(jìn)口的同類產(chǎn)品“加福”為藥物對(duì)照。療效評(píng)定以抗球蟲指數(shù)(ACI)為標(biāo)準(zhǔn)。服藥組雞于人工感染卵囊前2天開(kāi)始喂藥，直到試驗(yàn)結(jié)束，即感染卵囊后第8天。 試驗(yàn)一3批雞試驗(yàn)結(jié)果表明，國(guó)產(chǎn)馬杜拉霉素純結(jié)晶體5×10-6。和馬杜拉霉素菌絲體5×10-6的抗柔嫩艾美耳球蟲的效力可與“加福”相媲美。馬杜拉霉素純結(jié)晶體的ACI分別為199.5、197.1和199.8，馬杜拉霉素純結(jié)晶體的ACI分別為198.2、199.2和199.6，加福ACI分別由199.4、195.1和197.0，均屬高效抗球蟲藥物。馬杜拉霉素粗提液5×10-6混飼，所得抗球蟲指數(shù)分別為189.2、191.2和189.2，不如馬杜拉霉素純結(jié)晶體和菌絲體，相對(duì)增重率較低。 試驗(yàn)二試驗(yàn)結(jié)果顯示，國(guó)產(chǎn)馬杜拉霉素純結(jié)晶體和菌絲體1%預(yù)混劑，按5×10-6劑量混飼，對(duì)人工感染10萬(wàn)個(gè)/只柔嫩艾美耳球蟲卵囊的雛雞，可有效地防止球蟲病的發(fā)生，盲腸不產(chǎn)生病變，糞便中不出現(xiàn)卵囊，對(duì)增重?zé)o不良影響，抗球蟲指數(shù)達(dá)到或超過(guò)美國(guó)氰胺公司生產(chǎn)的加福。馬杜拉霉素粗提液1%預(yù)餛劑，按5×10-6飼，可預(yù)防雞柔嫩艾美耳球蟲病的發(fā)生，但盲腸出現(xiàn)輕微病變，糞便中出現(xiàn)少量卵囊，適口性稍差，對(duì)增重有一定影響。 林昆華等（1994)報(bào)道，在籠飼試驗(yàn)中，曾應(yīng)用國(guó)產(chǎn)馬杜拉霉素（商品名抗球王）和加福各3×10-6、4×10-6、7×10-6、9×10-6和1.5×10-5的劑量進(jìn)行試驗(yàn)，取得滿意的結(jié)果，唯9×10-6和1.54×10-5的結(jié)果與美國(guó)氰胺公司報(bào)告的材料不一致，可能是籠飼試驗(yàn)用藥時(shí)間短的緣故。為了解釋這一問(wèn)題，作者做了不同劑量的國(guó)產(chǎn)馬杜拉霉素在肉雞生產(chǎn)全程應(yīng)用的試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果顯示，以雞增重率、相對(duì)增重率（以推薦劑量5×10-6作基礎(chǔ)算）有隨藥物濃度的增高，呈下降趨勢(shì)。與5×10-6組相比，使用9×10-6劑量的相對(duì)增重率要損失12個(gè)百分點(diǎn)?？骨蛲?font face="Times New Roman">1.5×10-5組、加福1.5×10-5組的增重率和相對(duì)增重率與5×10-6、7×10-6、9×10-6組相比，差異甚大，但抗球王組比加福組顯得要好些。從臨診表現(xiàn)來(lái)看，抗球王5×10-6、7×10-6、9×10-6組雞只均顯示正常；抗球王1.5×10-5和加福l.5×10-5組雞只的精神、食欲均明顯較差。生長(zhǎng)緩饅，羽毛無(wú)光澤，較零亂，加福1.5×10-5組比抗球土1.5×10-5組顯得更為嚴(yán)重，但沒(méi)有發(fā)生死亡。 汪明等(1994)進(jìn)行了國(guó)產(chǎn)馬杜拉霉素（抗球王）結(jié)晶體5×10-6、菌絲體(5×10-6)預(yù)防肉雞球蟲病的田間試驗(yàn)。試驗(yàn)以加福(5×10-6)為對(duì)照。試驗(yàn)結(jié)果是:1.1～43日齡7次抽樣稱重的數(shù)據(jù)顯示，在投藥期間，馬杜拉霉素結(jié)晶體組平均增重1480g、菌絲休組為1475g，加福組為1521g，加福組略高于結(jié)晶體和菌絲體組，統(tǒng)計(jì)分析表明，3組之間無(wú)顯著差異。2.糞便卵囊檢查結(jié)果，3組在1、14、38和45日齡，每克糞便卵囊數(shù)均為0，說(shuō)明馬杜拉霉素結(jié)晶體、菌絲體和加福都有好的抗球蟲效果。3.在整個(gè)試驗(yàn)期間，試驗(yàn)組和對(duì)照組均未發(fā)現(xiàn)毒副反應(yīng)，也未發(fā)現(xiàn)因球蟲病死亡的雞只。 林昆華等(1994)對(duì)德國(guó)拜耳藥廠生產(chǎn)的新抗球蟲藥百球清（Baycox，為Toltrazuril2.5%溶液）進(jìn)行了抗球蟲效果的驗(yàn)證試驗(yàn)。試驗(yàn)以加福（美國(guó)氰胺公司生產(chǎn)的馬杜拉霉素1%預(yù)混劑）為對(duì)照藥物。百球清2.5×10-5飲服，于人工感染柔嫩艾美耳球蟲孢子化卵囊后第3、4兩天給藥，馬杜拉霉素5×10-6混飼，于人工感染柔嫩艾美耳球蟲孢子化卵囊前2天開(kāi)始服藥，直至試驗(yàn)結(jié)束。卵囊感染量為每只8萬(wàn)個(gè)。療效判定以抗球蟲指數(shù)(ACI)為標(biāo)準(zhǔn)。試驗(yàn)結(jié)果:百球清組3批試驗(yàn)所得ACI分別為188.9、197.3和196.7；馬杜拉霉素組的ACI分別為175.7、193.1和195.7；感染不給藥組分別為80.4、111.1和91.5。 謝明權(quán)等(1989)進(jìn)行了球安(Avatec)防治雞球蟲病的試驗(yàn)。球安有效成分為拉薩洛菌素( Lasalocid)。以抗球蟲指數(shù)(ACI)為療效判定標(biāo)準(zhǔn)。試驗(yàn)結(jié)果表明:7.5×10-5球安效果達(dá)優(yōu)秀水平，5批試驗(yàn)的ACI分別為236.5，186.9，196.6，195.1和198.9而感染不給藥組的ACI分別為108.8，23.2，107，5，531和58。 田間試驗(yàn)，對(duì)照組球蟲病死亡率達(dá)46.53%～55.84%，而球安組則無(wú)一例因雞球蟲病死亡的。 黃兵等(1991)對(duì)加福（Cygro馬杜拉霉素）用3批共150只21日齡伊莎公雞人工感染柔嫩艾美耳球蟲孢子化卵囊8萬(wàn)個(gè)，進(jìn)行了抗球蟲的籠飼試驗(yàn)，以鹽霉素(6×10-5)和克球多（Clopidol，1.25×10-4）為藥物對(duì)照，以抗球蟲指數(shù)(ACI)為療效判定標(biāo)準(zhǔn)，3批試驗(yàn)結(jié)果:加福的抗球蟲指數(shù)分別為193.51、190.05和199.23；鹽霉素的抗球蟲指數(shù)分別為168.74、168.24和179.43；克球多的抗球蟲指數(shù)分別為176.84、183.05和171.26。證明加福能有效預(yù)防柔嫩艾美耳球蟲病，其效果優(yōu)于鹽霉素和克球多。 史天衛(wèi)等(1992)進(jìn)行的田間試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明，5×10-6的馬杜拉霉素混飼，可預(yù)防雞球蟲病，對(duì)雞增重、育成率，飼料利用率無(wú)不良影響。試驗(yàn)結(jié)果比呋喃唑酮預(yù)防雞球蟲病的效果更好。 謝明權(quán)等(1987)用速丹(3×10-6)，球凈(Necoxine，1.25×10-4)，球安( Avatec，7.5×10-5，優(yōu)素精（Salinomycin，5×10-5），加強(qiáng)安保樂(lè)(1.55×10-4)，欲可胖(Coban，l×l0-4)，球痢靈（1.25×10-4)，敵球素(Doccox，3×l0-5)，氯苯胍(3.3×10-5)9種抗球蟲藥對(duì)廣東省惠陽(yáng)和湛江兩地的柔嫩艾美耳球蟲病進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)室和叫間的預(yù)防試驗(yàn)。藥物療效以抗球蟲指數(shù)( ACI)為考核標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)結(jié)果:速丹、球凈，球安3種藥物對(duì)惠陽(yáng)、湛江兩地的柔嫩艾美耳球蟲效果均非常好，抗球蟲指數(shù)均達(dá)到優(yōu)秀水平（180以上）。加強(qiáng)安保樂(lè)對(duì)湛江的柔嫩艾美耳球蟲效果很好，ACI達(dá)優(yōu)秀水平，但對(duì)惠陽(yáng)蟲株效果較差，其ACI僅為151。優(yōu)素精對(duì)惠陽(yáng)的柔嫩艾美耳球蟲很敏感，ACI達(dá)196.78，但對(duì)湛江蟲株則效果較差，其ACI僅這133.3。其他3種藥物（欲可胖、球痢靈、氯苯胍）則對(duì)惠陽(yáng)、湛江兩地的柔嫩艾美耳球蟲效果均差。 田間試驗(yàn)結(jié)果，從增重和飼料報(bào)酬比較，各組雞全期平均日增重以球痢靈、速丹、敵球素、球安為優(yōu)，而球凈則增重較少，但經(jīng)方差分析，僅球痢靈組與球凈組有顯著差異，其他均顯差異不顯著。從料肉比結(jié)果看，速丹、敵球素、球痢靈、球安較其他組為低，而球凈較高。各組在排血便、球蟲病死亡和糞檢卵囊數(shù)結(jié)果，速丹、球凈、敵球素、球安組在整個(gè)試驗(yàn)期間均無(wú)發(fā)現(xiàn)球蟲病。從糞便卵囊數(shù)看，速丹、球凈、敵球素、優(yōu)素精、氯苯胍組數(shù)較低。 作者認(rèn)為，廣東省面臨港、澳，引入新一代球蟲藥時(shí)間較長(zhǎng)，目前為止，國(guó)際上常用的球蟲藥，除極少數(shù)以外，如加福，大部分已在省內(nèi)部分飼料廠和雞場(chǎng)進(jìn)行了不同程度的驗(yàn)證或使用。生產(chǎn)單位對(duì)球蟲藥性能及使用方法不十分了解，故往往出現(xiàn)盲目用藥現(xiàn)象。有些雞場(chǎng)長(zhǎng)期使用一種可愛(ài)丹或優(yōu)素精，盡管使用初期效果好，但不久便產(chǎn)生抗藥性，療效迅速下降。在試驗(yàn)中，球痢靈、氯苯胍等的療效差是由于這個(gè)原因引起?？朔顾幮援a(chǎn)生的主要方法是選擇幾種較好抗球蟲藥進(jìn)行交互使用，但適合大面積使用而抗球蟲效果優(yōu)秀的藥物種類并不多，故在交互使用時(shí)，可在球蟲病低發(fā)季節(jié)使用抗球蟲效果較差的藥物，這樣既可防止球蟲病嚴(yán)重暴發(fā)，又可延長(zhǎng)球蟲藥使用的壽命。 為了全面控制雞球蟲病，國(guó)外一直在探索雞球蟲病的免疫問(wèn)題，近十幾年來(lái)進(jìn)行了大量研究工作，取得不少成果。我國(guó)對(duì)雞球蟲病的免疫研究，起步較晚，但也獲得一些可喜的成績(jī)。 王宗儀等(1986)進(jìn)行了雞柔嫩艾美耳球蟲計(jì)劃感染免疫的研究。作者以雞柔嫩艾美耳球蟲孢子化卵囊有計(jì)劃地感染21日齡來(lái)航雛雞，有3組每雞分別以500、5000、50000個(gè)卵囊一次經(jīng)口感染；另一組每雞以500、5000、50000個(gè)卵囊每隔10天依次感染。上述3組雞均于感染10天后以50000個(gè)同種孢子化卵囊經(jīng)口進(jìn)行攻擊，依次感染組于第3次感染后的第10天再以50000個(gè)柔嫩艾美耳球蟲孢予化卵囊進(jìn)行攻擊，最后于感染后或攻擊后觀察血便和體重變化，每克糞便卵囊數(shù)和盲腸病變記分為免疫效果的評(píng)判內(nèi)容。結(jié)果表現(xiàn)了初次投服的卵囊數(shù)量越多，耐過(guò)的雛雞所獲得的免疫力就越大些，但初次以較大劑量卵囊投服，對(duì)機(jī)體有不良影晌，甚至可造成死亡。而通過(guò)依次增加卵囊的數(shù)量反復(fù)輕微感染雛雞對(duì)機(jī)體的正常生理狀態(tài)幾乎無(wú)不良影響，并且獲得的免疫力也較牢固。 田廣孚(1986)報(bào)道了用柔嫩艾美耳球蟲子孢子接種雞胚對(duì)雛雞進(jìn)行免疫的探索。作者用孵化11天的雞胚，每胚接種2000個(gè)子孢子。接種后第7天解剖3只活雞胚，均在尿囊膜上發(fā)現(xiàn)裂殖體、大小配子、合子或未成熟卵囊，證明接種成功。接種的雞胚和未接種的雞胚兩者孵化率比較沒(méi)有顯著差異。對(duì)接種子孢子后孵出的2周齡雛雞，每只用80000個(gè)柔嫩艾美耳球蟲孢子化的卵囊攻擊，與對(duì)照雞比較，其死亡率、盲腸病變、體重、排出的卵囊數(shù)和卵囊孢子化率均無(wú)顯著差異，而只有血便堆數(shù)接種的雞比對(duì)照雞的排出量多。分析試驗(yàn)結(jié)果，認(rèn)為用2000個(gè)子孢子接種雞胚孵出雛雞，對(duì)80000個(gè)孢子化卵囊的一次性攻擊，和對(duì)照雞比較來(lái)看出具有免疫力。 吳兆敏等（1990）應(yīng)用化學(xué)誘變劑N-metheyl-N-nitroso-guanidine（簡(jiǎn)稱NTC）處理雞柔嫩艾姜耳球蟲卵囊，以5ug/ml、10ug/ml、20ug/ml、40ug/ml、80ug/ml、100ug/ml濃度。處理30min、60 min、120min、240min，處理溫度為4℃，37℃兩種。處理過(guò)的柔嫩艾美耳球蟲卵囊反復(fù)漂洗3次以上。然后口服接種2周齡小雞(5000個(gè)卵囊/只)，1周后再口服接種相同劑量的卵囊。在初次感染后3周，用10萬(wàn)個(gè)柔嫩艾美耳球蟲卵囊/只口服攻擊小雞，觀察其保護(hù)效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，NTG處理濃度在5ug/ml，4℃，120min或者5ug/ml，37℃，30rnin的兩組均具有100%的保護(hù)力，而相應(yīng)對(duì)照雛雞僅有10%保護(hù)力。但NTG 20ug/ml濃度處理30min，37℃，卵囊已開(kāi)始出現(xiàn)破損，溶解。隨著處理濃度的增高，卵囊破壞數(shù)也增高。與此同時(shí)，作者對(duì)二次口服免疫接種后雛雞盲腸病變作了觀察，發(fā)現(xiàn)免疫組盲腸30%未見(jiàn)病變，65%有輕度病變、5%病變略為明顯；而對(duì)照組雞盲腸95%嚴(yán)重病變，大量出血，僅5%病變較輕。說(shuō)明NTG對(duì)雞柔嫩艾美耳球蟲有明顯的致弱效果，但仍保持其抗原性水變，具有對(duì)攻擊感染極好的保護(hù)力。 陳明勇、蔣金書(1990)通過(guò)利用雞柔嫩艾美耳球蟲卵囊及子孢子可溶性抗原，成功地建立了酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELSA)，確定了試驗(yàn)最適條件，并用于幾種不同的免疫方法免疫雞血清抗體的檢測(cè)。結(jié)果表明，卵囊和子孢子可溶性抗原的最適工作濃度分別為33ug/ml和28ug/ml；兩種抗原在最適包被濃度工作時(shí)檢測(cè)雞柔嫩艾美耳球蟲血清抗體，效價(jià)幾乎一致（陽(yáng)性血清為1:640～1:5120）。運(yùn)用卵囊抗原檢測(cè)3種免疫方法免疫雞血清抗體，一次免疫呈現(xiàn)很高的抗體水平(1:160～1:2560)，二次免疫可以出現(xiàn)再次反應(yīng)(1:1280～1:5120)，而涓滴免疫血清抗體效價(jià)很低(1:80)，試驗(yàn)對(duì)照組（即藥物預(yù)防對(duì)照和紅對(duì)照組）只有極弱陽(yáng)性反應(yīng)(1:10～1:20)，不免疫不攻擊組呈陰性。試驗(yàn)表明，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)方法操作簡(jiǎn)便，靈敏度高，所需抗原量少，適合于雞球蟲血清抗體水平的檢測(cè)。 陳明勇等(1990)研究了分別使用一次、二次和涓滴免疫方法對(duì)柔嫩艾美耳球蟲卵囊活苗免疫白來(lái)航雛雞的保護(hù)性，以兩種抗球蟲藥作為對(duì)照，對(duì)死亡率、病變、增重、飼料報(bào)酬、卵囊排出量、免疫器官重量及白細(xì)胞數(shù)等指標(biāo)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。結(jié)果表明涓滴免疫和一次免疫獲得了完全的保護(hù)性，二者的免疫保護(hù)性效果幾乎一致，均好于一次免疫。一次免疫只能給予一定程度的保護(hù)。免疫劑量，免疫宿主日齡及免疫間隔時(shí)間等相關(guān)因素均對(duì)宿主免疫保護(hù)性呈現(xiàn)不同程度的影響。 各項(xiàng)監(jiān)測(cè)指標(biāo)比較，所有免疫組較感染對(duì)照組呈現(xiàn)顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或0.01)；涓滴免疫、—二次免疫及1250、2500、3750、5000個(gè)/只一次免疫劑量組多項(xiàng)指標(biāo)均優(yōu)于l.25×10-4克球多( Clopidol)和莫能霉素藥物預(yù)防組，而100、500個(gè)/只一次免疫組的保護(hù)效果優(yōu)于克球多藥物預(yù)防組，接近于莫能霉素藥物預(yù)防組。 試驗(yàn)證明，二次免疫和涓滴免疫方法一樣均能刺激機(jī)體產(chǎn)生有效的免疫應(yīng)答，對(duì)大劑量卵囊的攻擊產(chǎn)生完全的保護(hù)作用；對(duì)于一次免疫，只要取得合適的相關(guān)因素，還是可以給予相當(dāng)程度乃至完全的免疫保護(hù)。 段嘉樹等(1990)采用一次多量卵曩（5000個(gè)）或初生后1周內(nèi)每日小量卵囊（總量為210個(gè)）的所謂涓滴方法對(duì)1日齡或7日齡雛雞進(jìn)行免疫。14日齡以10萬(wàn)個(gè)柔嫩艾美耳球蟲卵囊（毒株）攻擊，然后根據(jù)增重與盲腸病變判斷免疫效果。 試驗(yàn)結(jié)果表明:1日齡和7日齡一次毒株卵囊免疫組產(chǎn)生有效的保護(hù)作用；1日齡一次致弱株免疫組和毒株涓滴免疫組可產(chǎn)生部分保護(hù)作用。7日齡一次致弱株免疫組和致弱株涓滴免疫組未產(chǎn)生保護(hù)作用。 林孟初等(1986)報(bào)道15日齡雛雞以11500個(gè)柔嫩艾美耳球蟲孢子化卵囊感染后，不論是自然康復(fù)的或以強(qiáng)效氨丙啉藥飼康復(fù)的鴉，于35日齡時(shí)對(duì)372000個(gè)同種卵囊的再感染均有良好的保護(hù)力。藥飼康復(fù)雞的增重率略低于自然康復(fù)雞，而排血糞堆數(shù)和排卵囊數(shù)則略高，但兩組間差異不顯著。 黃希寶等(1990)報(bào)道了對(duì)柔嫩艾美耳球蟲幾個(gè)不同發(fā)育階段的抗原性分析及球蟲接種免疫反應(yīng)比較。作者通過(guò)SDS-PAGE分析比較了柔嫩艾美耳球蟲生活史中成熟卵囊、未成熟卵囊和裂殖子的可溶性抗原的抗原圖譜，進(jìn)而作硝酸纖維素膜轉(zhuǎn)移電泳鑒定其免疫原性。同時(shí)用Dot-ELISA方法檢測(cè)了3種可溶性抗原的存在并對(duì)雞球蟲的免疫抗體進(jìn)行了研究。從電泳圖譜和分子量對(duì)數(shù)及遷移率圖看出，其中有12條蛋白帶為共同抗原，但未成熟卵囊的蛋白帶最多，至少有20條。硝酸纖維素膜轉(zhuǎn)移后，檢測(cè)到蛋白帶中一條分子量為42000D的有效抗原，這是一條主帶，并且是共同抗原條帶，經(jīng)Dot-ELISA檢測(cè)3種可溶性抗原均具有與雞抗球蟲抗體反應(yīng)的抗原存在，其抗原性強(qiáng)弱的順序是:成熟卵囊＞裂殖子＞未成熟卵囊。用ELISA方法對(duì)雞球蟲免疫抗體的研究證實(shí):(1)在一定范圍內(nèi)的感染強(qiáng)度，對(duì)雞死亡率有明顯影響，而對(duì)抗體散價(jià)消長(zhǎng)無(wú)明顯差異。(2)在最初1、2周感染后可引起抗體效價(jià)急劇上升，到4周后達(dá)高峰，以后即使用高劑量同種球蟲卵囊攻擊，抗體效價(jià)也趨于穩(wěn)定，有時(shí)略有下降，但都已具備對(duì)再感染的高度保護(hù)力。(3)重鉻酸鉀保存卵囊的理想時(shí)間是不超過(guò)3個(gè)月，但其抗原性在一年內(nèi)不受影響。 谷胱甘肽(Glutaihion，GSH)，它廣泛存在于生物細(xì)胞內(nèi)，是由γ-谷氨酸、半胱氨酸和甘氨組成的三肽分子。近年來(lái)國(guó)外學(xué)者應(yīng)用選擇性升高或降低體內(nèi)谷胱甘肽水平的方法，對(duì)GSH的功能有了進(jìn)一步的認(rèn)識(shí)，除傳統(tǒng)所認(rèn)為的抗氧化作用外，GSH還具有抗毒、抗痛、抗衰老、抗癌作用，參與DNA的合成，影響酶的活性，在提高細(xì)胞防衛(wèi)功能方面，其作用更為明顯。正由于GSH的功能廣泛多樣，近年來(lái)引起各國(guó)學(xué)者極大興趣。金衛(wèi)東等(1990)進(jìn)行了谷胱甘肽水平與雞球蟲免疫的相關(guān)性研究。試驗(yàn)用28～48日齡，50～70日齡尼克公雛，共140只，隨機(jī)分組，給予不同的處理。分別用馬拉酸二乙酯(Dithylmaleale，DEM)及Buthionine Sufoximine(BSO)來(lái)選擇性降低血漿中谷胱甘肽水平，用蛋氨酸添加劑維持谷胱甘肽水平。對(duì)比了試驗(yàn)組和對(duì)照組因GSH水平的不同，在感染雞球蟲后，對(duì)死亡率、增重效率、細(xì)胞免疫、體液免疫、抗球蟲藥效等方面產(chǎn)生的影響。采用酶催化法監(jiān)測(cè)血漿中谷胱甘肽的水平，應(yīng)用火箭免疫電泳技術(shù)，ANAE染色法檢測(cè)抗體IgG水平和T細(xì)胞百分率的變化。試驗(yàn)結(jié)果表明:1.本試驗(yàn)對(duì)細(xì)胞免疫和體液免疫進(jìn)行了檢測(cè)，對(duì)雞球蟲感染的全過(guò)程進(jìn)行了分析，認(rèn)為IgG抗體與球蟲免疫關(guān)系不大，而細(xì)胞免疫在抗雞球蟲感染中起主導(dǎo)作用。2.雞感染球蟲時(shí)，谷胱甘肽水平的降低，會(huì)減弱細(xì)胞免疫的效果，二者呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=0.93左右，而且呈直線回歸，說(shuō)明谷胱甘肽能提高機(jī)體的細(xì)胞免疫力，抵抗球蟲感染。3.球蟲感染的最初4天，谷胱甘肽消耗最多，此期是影響病情發(fā)展的敏感階段，也是決定免疫保護(hù)作用強(qiáng)弱的關(guān)鍵階段，因此，在球蟲感染之前預(yù)防用藥方能起到更好的保護(hù)作用。4.含硫氨基酸，在機(jī)體感染球蟲時(shí)，能轉(zhuǎn)化為半胱氨酸來(lái)維持GSH的正常水平，它們?cè)跍p少死亡和促進(jìn)增重兩方面均有較好的效果，因此，在球蟲易感染期應(yīng)增加飼料中含硫氨基酸數(shù)量，蛋氨酸添加劑效果較好。5.GSH能影響呋哺唑酮藥物的抗球蟲作用。GSH在正常水平時(shí)，呋喃唑酮才有較好的抗球蟲效果。 黃兵等(1994)進(jìn)行柔嫩艾美耳球蟲、毒害艾美耳球蟲和變位艾美耳球蟲交叉免疫試驗(yàn)。每個(gè)蟲種設(shè)3個(gè)免疫組和1個(gè)不免疫組，各蟲種免疫劑量均為1萬(wàn)個(gè)。28日齡進(jìn)行攻擊，每個(gè)蟲種的3個(gè)免疫組各攻擊1個(gè)蟲種，3個(gè)不免疫組也各攻擊1個(gè)蟲種，作為免疫攻擊組的對(duì)照。柔嫩艾美耳球蟲和毒害艾美耳球蟲的攻擊劑量為1000個(gè)，變位艾美耳球蟲為1萬(wàn)個(gè)。攻擊后第4天起，每日收集各組糞便，用McMaster's計(jì)數(shù)法計(jì)算每克糞便卵囊數(shù)和每日每只雞排卵囊總量，至攻擊后第11天結(jié)束試驗(yàn)，以卵囊相對(duì)減少率（保護(hù)率）作為試驗(yàn)指標(biāo)。結(jié)果顯示:柔嫩艾美耳球蟲免疫組抗同種攻擊的保護(hù)率為92.25%，抗毒害艾美耳球蟲攻擊的保護(hù)率為30.24%，與變位艾美耳球蟲攻擊不存在交叉保護(hù)。毒害艾差耳球蟲免疫組抗同種攻擊的保護(hù)率為86.16%，與變位艾美耳球蟲和柔嫩艾美耳球蟲攻擊的交叉保護(hù)率分別為30.37%和63.42%。變位艾美耳球蟲免疫組對(duì)同種攻擊的保護(hù)率達(dá)99.98%，對(duì)柔嫩艾美耳球蟲攻擊無(wú)交叉保護(hù)，對(duì)毒害艾美耳球蟲攻擊的保護(hù)率為43.28%。文中還討論了毒害艾美耳球蟲與柔嫩艾美耳球蟲和變位柔嫩艾美耳球蟲存在一些相互交叉保護(hù)的原因。 韓謙等(1994)報(bào)道了北京農(nóng)業(yè)大學(xué)研制的球蟲活苗的實(shí)驗(yàn)室免疫效果研究。試驗(yàn)設(shè)4組，即不免疫不給藥組，活苗免疫組（雞10日齡時(shí)飲水免疫）.藥物對(duì)照組（飼料中添加5×10-6馬杜拉霉素），以上3組雞于52日齡時(shí)，用柔嫩艾美耳球蟲、毒害艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲和堆型艾美耳球蟲，按每只20萬(wàn)的劑量攻擊，另設(shè)一對(duì)照組（飼料中添加5×10-6馬杜拉霉素，不攻擊），攻擊后第8天剖殺全部試驗(yàn)雞只，計(jì)算各組抗球蟲指數(shù)，判定免疫效果。試驗(yàn)結(jié)果表明:球蟲活苗免疫組的雞只可完全抵抗20萬(wàn)個(gè)上進(jìn)4種球蟲混合卵囊的攻擊，保護(hù)率為100%，未出現(xiàn)臨診癥狀，腸道病變值低于1分，增重率與藥物對(duì)照組和不免疫不給藥組無(wú)明顯差異，抗球蟲指數(shù)達(dá)186。本試驗(yàn)還對(duì)墊料中球蟲卵囊數(shù)量進(jìn)行了監(jiān)測(cè)，活苗免疫組在免疫后第2周達(dá)到高峰，每克糞便中卵囊數(shù)為20000個(gè)，第3周降至5000，以后保持平穩(wěn)下降。試驗(yàn)證明，北京農(nóng)業(yè)大學(xué)研制的球蟲活蟲苗接種是成功的，使用是安全的，可以進(jìn)行田間擴(kuò)大試驗(yàn)。 孫維東等(1992)介紹了吉林省獸醫(yī)研究所從國(guó)外引進(jìn)多種球蟲混合蟲苗技術(shù)，試制了一批弱毒蟲苗，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室初步觀察，效果良好。該弱毒蟲苗含7種雞球蟲卵囊，定量裝入一個(gè)特制顆粒中，混入飼料內(nèi)投給雛雞，保護(hù)率達(dá)85%～100%。輕度污染的雞場(chǎng)應(yīng)用，劑量為每日每只雞l粒，連喂7天，可控制球蟲病的發(fā)生；嚴(yán)重污染的雞場(chǎng)應(yīng)用，劑量為每日每只雞1粒，連續(xù)投料2周，預(yù)防效果可達(dá)100%。該蟲苗于4℃環(huán)境中可保持半年。 陳金偉等(1992)報(bào)道了雞柔嫩艾美耳球蟲雞胚致弱蟲苗飲水免疫、灌服免疫和拌料免疫方法的比較試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果表明，球蟲蟲苗飲水免疫方法免疫預(yù)防球蟲病效果好，使用方便，省時(shí)省力，適用于各養(yǎng)雞場(chǎng)。 楊振中等(1985)報(bào)道了自上海市某雞場(chǎng)分離到的柔嫩艾美耳球蟲株，經(jīng)雞胚傳代培育，然后對(duì)培育株進(jìn)行了安全性和免疫原性測(cè)定以及野外免疫試驗(yàn)。安全性測(cè)定用雞胚傳代到74代和77代的蟲株，免疫原性測(cè)定用的蟲株是84～100代的。試驗(yàn)結(jié)果:1.雛雞安全性測(cè)定除74代有1只雛雞(1/20)由球蟲引起死亡外，其余均無(wú)臨診血便和盲腸病變，盲腸內(nèi)容物進(jìn)行球蟲卵囊檢查，其指數(shù)平均都在7.5左右，而強(qiáng)毒對(duì)照組的球蟲病死亡數(shù)為2/10，臨診上都有大量血便，剖檢見(jiàn)盲腸腫大有血芯或血便，卵囊指數(shù)都高達(dá)16，由此可見(jiàn)74代和77代基本是安全的。2.84代蟲株一次免疫接種卵囊數(shù)量為4.5萬(wàn)后，以強(qiáng)毒株卵囊攻擊后雞只未出現(xiàn)死亡，血便記分為0，盲腸病變記分為0.2，平均卵囊數(shù)為3.5；而強(qiáng)毒株死亡了10%，血便記分為3，盲腸病變記分為3.5，平均卵囊教為14.3。作者在另一試驗(yàn)中，測(cè)定了84代蟲株用3次免疫（卵囊數(shù)量為1500/次）后。強(qiáng)毒株（4.5萬(wàn)的數(shù)量）攻擊，結(jié)果死亡1/20，血便記分為0，盲腸病變記分為0.1，平均卵囊數(shù)為5.0。為了世一步確證蟲株的免疫性，作者對(duì)雞胚傳代傳了86～100代的蟲株各批次蟲苗進(jìn)行了重復(fù)試驗(yàn)。免疫雞于免疫結(jié)束后的l4天以強(qiáng)毒株（4.5萬(wàn)）攻擊，分7、14、21天3次剖撿，均取得很好的結(jié)果。3.蟲苗在野外現(xiàn)場(chǎng)試用，雛雞從7日齡（隔天1次，3次免疫）開(kāi)始免疫，直到肉雞上市。保護(hù)率高達(dá)99%，從糞便抽樣檢查球蟲卵囊的結(jié)果來(lái)看，免疫效果顯著。 1986年楊振中等對(duì)雞柔嫩艾美耳球蟲（上海株）致弱苗的保存期和免疫期進(jìn)行了試驗(yàn)。保存期測(cè)試選用了85、86、89、95代次蟲苗，在4℃普通冰箱內(nèi)分別保存36～360天，分別以l500劑量對(duì)雛雞隔日1次，于11日齡內(nèi)3次口服免疫，進(jìn)行5批測(cè)試，免疫后經(jīng)14天再行強(qiáng)毒卵囊4.5萬(wàn)攻擊（毒害等5種小腸球蟲9.5萬(wàn)攻擊），結(jié)果未發(fā)生死亡，亦無(wú)病變，具良好的免疫力。免疫期測(cè)試，選用91代、95代次蟲苗，1000或1500致弱卵囊，分6批對(duì)70只雛雞進(jìn)行免疫接種，免疫31、75、105、133、150、215天后，每雞以5萬(wàn)～10萬(wàn)強(qiáng)毒卵囊一次攻擊，除第一組非球蟲死亡1只外，其余各組都存活，臨診無(wú)血便，剖檢無(wú)病變，盲腸內(nèi)容物也未查到球蟲卵囊。根據(jù)測(cè)試結(jié)果，均具有堅(jiān)強(qiáng)的保護(hù)力。 作者指出，通過(guò)雞胚培養(yǎng)傳代致弱的柔嫩艾美耳球蟲弱毒蟲苗，保存在4℃普通冰箱內(nèi)1年，仍具有堅(jiān)強(qiáng)的免疫力。經(jīng)6批免疫期測(cè)試，免疫有效時(shí)間可達(dá)7個(gè)月。因此，該蟲苗適用于肉雞和產(chǎn)蛋雞的免疫預(yù)防。 楊振中等(1987)對(duì)柔嫩艾美珥球蟲（上海株）致弱蟲苗的最小免疫量和免疫力產(chǎn)生期進(jìn)行了測(cè)定。測(cè)定結(jié)果表明:柔嫩艾美耳球蟲（上海株）弱毒蟲苗最小的免疫量為800個(gè)卵囊，以70000個(gè)強(qiáng)毒卵囊攻擊沒(méi)有出現(xiàn)病雞。蟲苗劑量加大到5000個(gè)也證明是安全的。不經(jīng)免疫的對(duì)照組，以相同劑量的強(qiáng)毒卵囊攻擊時(shí)，雛雞全部發(fā)病。因此，選用1000個(gè)致弱卵囊為免疫劑量是適當(dāng)?shù)摹Ｔ囼?yàn)結(jié)果證明，雛雞免疫后第7天已產(chǎn)生免疫力，第14天，免疫雞經(jīng)5萬(wàn)個(gè)強(qiáng)毒攻擊，除1只雞盲腸有輕微病變外，其余免疫雞的盲腸均正常。免疫后第21天和28天，用同樣劑量強(qiáng)毒卵囊攻擊，免疫雞都能得到保護(hù)。由此也可說(shuō)明，經(jīng)致弱后的柔嫩艾美耳球蟲（上海株）的免疫力是穩(wěn)定的。 彭德旺、楊廷桂(1990)報(bào)道了3群自然暴發(fā)雞球蟲病的850其雞用速丹3×10-6的濃度混飼進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)治療試驗(yàn)。以臨診癥狀、死亡情況、血糞堆數(shù)和卵囊數(shù)的變化判定療效。試驗(yàn)結(jié)果，投藥后第2天血糞和卵囊明顯減少；第3天血糞消失，雞群狀況好轉(zhuǎn)，食欲開(kāi)始恢復(fù)，第4天糞中仍有少量卵囊。3群雞除死亡8只外，余均得到保護(hù)。治愈率為89.65%～100%。 赫怡、張學(xué)斌(1986)應(yīng)用河北省畜牧獸醫(yī)研究所的雞胚傳代致弱的柔嫩艾美耳球蟲株( P158)進(jìn)行了免疫試驗(yàn)。供試驗(yàn)1日齡雛雞400只，分成兩組，一為免疫組，另一為對(duì)照組。試驗(yàn)雞飼于無(wú)球蟲污染的舍內(nèi)。免疫組雞于14日齡每只飲水接種3000個(gè)P158卵囊。接種后l周和3周，每組隨機(jī)抽取l5只雞剖檢，均未發(fā)現(xiàn)盲腸球蟲病病變。又從各組捕取12只雞，分別飼養(yǎng)于單籠中，每只雞以20萬(wàn)個(gè)柔嫩艾美耳球蟲強(qiáng)毒株卵囊進(jìn)行攻擊，于攻擊后1周內(nèi)觀察發(fā)病和死亡情況，至攻擊后第7天將未死亡的試驗(yàn)雞進(jìn)行剖檢，按盲腸病變程度記分，免疫組與對(duì)照組比較。結(jié)果免疫組死亡率為8.33%，病變記分為22分；對(duì)照組死亡率為41.67%，病變記分36分。接種后3周抽樣攻擊，免疫組死亡率為0，病變記分為27；對(duì)照組死亡率為8，33%，病變記分為29分。接種后5周進(jìn)行攻擊，免疫組和對(duì)照組均無(wú)死亡，病變記分免疫組為10分，對(duì)照組為l5分。 沈瑞洲等(1988)報(bào)道了3種復(fù)方藥物對(duì)雛雞柔嫩艾美耳球蟲病的療效。供試雛雞每只人工接種柔嫩艾美耳球蟲孢子化卵囊5萬(wàn)個(gè)。3種復(fù)方藥物為：1.氨丙啉+磺胺喹惡啉（各1.8×10-4），飲服，連用7天；2.三甲氧芐胺嘧啶+磺胺喹惡啉(1:3.25) 2.5×10-4，混飼，連用7天；3.乙胺嘧啶十磺胺喹惡啉（1:5）2×10-4，混飼，連用7天。以抗球蟲指數(shù)的高低作為判定療效標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果表明3種復(fù)方藥物均可完全控制因球蟲病引起的死亡。增重方面，前兩個(gè)組與不感染不給藥組相比差異不顯著，后一組療教雖高，但對(duì)增重有明顯的抑制作用。 林昆華等(1991)進(jìn)行了后備種雞球蟲病的預(yù)防試驗(yàn)。供試雞共4組，每組300只雞。第1組l從4～20周齡，連續(xù)投服1.25×10-4氨丙啉；第2組雞4～12周齡時(shí)，連續(xù)投服1. 25×10-4氨丙啉，13～14周齡，氨丙啉劑量減為8×10-5，15～16周齡藥量減至6×10-5，17周齡停藥；第3組雞4～10周齡，連續(xù)投服1.25×10-4尼卡巴嗪，11～20周齡改投1.25×10-4克球粉；第4組雞不給藥。以球蟲病控制情況和體重為療效判定標(biāo)準(zhǔn)。各試驗(yàn)組，20周齡試驗(yàn)結(jié)束后，各隨機(jī)抽取5只，分別飼于籠內(nèi)，隔3日后，每只雞人工感染7萬(wàn)個(gè)柔嫩艾美耳球蟲孢子化卵囊。觀察停藥后有無(wú)抗球蟲的免疫力。試驗(yàn)結(jié)果表明:1.雞從4～20周齡，連續(xù)或從4～12周齡，13～14周齡，15～16周齡逐漸減量投服氨丙啉，均可有效地預(yù)防種雞群在育成期暴發(fā)球蟲病，且對(duì)雞不產(chǎn)生不良影響。停藥后，雞具有抗球蟲感染的免疫力。2.尼卡巴嗪和克球粉“穿梭”用藥，有很好的抗球蟲感染的作用，可防止種雞群在育成期暴發(fā)球蟲病，對(duì)雞無(wú)不良影響。停藥后，雞具有抗球蟲攻擊的足夠強(qiáng)的免疫力。 劉群、韓謙(1994)報(bào)道了自行研制的球蟲苗飲用佐劑的效果。在相同條件下，自制飲用佐劑對(duì)卵囊的漂浮效果相當(dāng)于甚至優(yōu)于美國(guó)產(chǎn)球蟲苗穩(wěn)定劑。在田間試驗(yàn)時(shí)，將飲用佐劑用于5000只種雞的球蟲苗的飲水免疫。免疫后2周檢查雞舍各處糞便，結(jié)果發(fā)覡每克糞便的卵囊數(shù)均勻，所有雞在產(chǎn)蛋前均未發(fā)生球蟲病。 雞的其他致病力強(qiáng)的球蟲種類的研究，國(guó)內(nèi)也有一些報(bào)道，下面僅就收集到的作個(gè)介紹。 秦建華等(1992)進(jìn)行了堆型艾美耳球蟲早熟減毒株的選育。作者用早熟選育方法對(duì)堆型艾美耳球蟲保定株進(jìn)行了12代早熟選育，獲得了潛隱期為74h和62h兩個(gè)早熟株。兩個(gè)早熟株不經(jīng)選擇傳遞2代，仍保持了早熟的特性。早熟株較其親代株繁殖能力下降，致病力降低，但仍然保持了良好的免疫原性。早熟選育改變了蟲體的內(nèi)生性發(fā)育過(guò)程，引起了潛隱期的縮短。潛隱期為74h的蟲株的裂殖生殖為3代，62h的蟲株的裂殖生殖為2代。 熊大仕、林昆華(1965)報(bào)道了堆型艾美耳球蟲和早熟艾美耳球蟲孢子形成過(guò)程朗初步觀察。初排出的卵囊，原生質(zhì)團(tuán)內(nèi)的顆粒是較分散的，培養(yǎng)一定時(shí)間后，原生質(zhì)團(tuán)內(nèi)的顆粒就向中間聚縮，細(xì)胞核開(kāi)始分裂。細(xì)胞核分裂的同時(shí)，原生質(zhì)團(tuán)的膜發(fā)生橫向和縱向的內(nèi)陷，使原生質(zhì)團(tuán)出現(xiàn)4個(gè)洼陷。當(dāng)固定一個(gè)觀察面觀察時(shí)，是橫向比縱向的內(nèi)陷的速度更快。當(dāng)橫向洼陷形成裂縫而到達(dá)原生質(zhì)團(tuán)的中央部時(shí)，則使原生質(zhì)團(tuán)呈現(xiàn)“四葉狀”.即4個(gè)小團(tuán)塊樣。在此基礎(chǔ)上原生質(zhì)團(tuán)進(jìn)一步分裂成4個(gè)圓形細(xì)胞。圓形細(xì)胞繼而變成橢圓，最后形成孢子囊。與此同時(shí)，原生質(zhì)團(tuán)內(nèi)的顆粒也發(fā)生變化，粗顆粒逐漸融合成更大的顆粒；細(xì)顆粒逐漸減少，以致完全消失。每個(gè)孢子囊的尖端頂部均出現(xiàn)一無(wú)原生質(zhì)顆粒的空白明亮部分，即為斯氏體（Stiedai body）。4個(gè)孢子囊之間未見(jiàn)有殘?bào)w存在。根據(jù)對(duì)這兩種球蟲孢子形成的坫果來(lái)分析，作者認(rèn)為可能雞的艾美耳屬的各種球蟲孢子形成的過(guò)程是相似的。但由于各種球蟲孢子發(fā)育完成所需的時(shí)間長(zhǎng)短不一，因此在一定時(shí)間內(nèi)的發(fā)育進(jìn)度存在著差異。 汪明等(1994)測(cè)定了來(lái)自雞場(chǎng)的堆型艾美耳球蟲、毒害艾美耳球蟲和巨型艾美耳球蟲的毒力和這3種混合球蟲的毒力。結(jié)果表明:接種30萬(wàn)、60萬(wàn)、90萬(wàn)、150萬(wàn)堆型艾美耳球蟲卵囊給14日齡AA肉雞雛未引起死亡，小腸病變記分分別為1.4、1.8、2.3和2.9，增重明顯下降；接種5萬(wàn)、10萬(wàn)、20萬(wàn)、40萬(wàn)毒害艾美耳球蟲卵囊給l4日齡AA肉雞雛，致死率分別為0、20%、50%和60%；接種30萬(wàn)、60萬(wàn)、90萬(wàn)、200萬(wàn)巨型艾美耳球蟲卵囊給14日齡AA肉雞雛，均未引起死亡，小腸病變記分分別為1.5、2.2、2.8和3.2，增重明顯下降?；旌戏N卵囊分別按10萬(wàn)、20萬(wàn)、40萬(wàn)、80萬(wàn)個(gè)接種14日齡肉雞，致死率分別為0、10%、30%和30%，小腸和盲腸病變綜合記分分別為1.5、2.4、2.9和3.3。 黃兵等(1994)從現(xiàn)場(chǎng)采集分離獲得的毒害艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲、變位艾美耳球蟲和堆型艾美耳球蟲純種，采用人工感染方法，分別以每只雞1萬(wàn)、5萬(wàn)、10萬(wàn)和20萬(wàn)個(gè)孢子化卵囊，感染10～13日齡伊莎公雛，觀察各蟲種不同劑量對(duì)雞致病情況。人工感染后7天結(jié)束試驗(yàn)，以平均增重、死亡率和腸道病變記分作為試驗(yàn)指標(biāo)。結(jié)果顯示毒害艾美耳球蟲毒力最強(qiáng)，感染10萬(wàn)死亡率為41.67 %，感染20萬(wàn)死亡率為50%。感染l萬(wàn)個(gè)毒害艾美耳球蟲的雞平均增重極明顯低于不感染對(duì)照組。毒害艾美耳球蟲4個(gè)感染劑量組的腸道病變記分為1.33～3.83。巨型艾美耳球蟲致病力次之，感染20萬(wàn)組的死亡率為16.67%，4個(gè)感染劑量組的增重與不感染對(duì)照組的差異為感染1萬(wàn)組顯著，5萬(wàn)～20萬(wàn)組極顯著，其病變記分為1.33～3.08。堆型艾美耳球蟲和變位艾美耳球蟲高劑量感染引起死亡的很少見(jiàn)，但增重與不感染對(duì)照組相比下降明顯，5萬(wàn)組減少顯著，10萬(wàn)～20萬(wàn)組則極顯著。這兩個(gè)蟲種各感染組的腸道病變記分1.25～3.08和0.75～2.07。 汪明等(1992)進(jìn)行了雞巨型艾美耳球蟲內(nèi)生發(fā)育的研究。作者應(yīng)用單卵囊接種技術(shù)分離出純種巨型艾美耳球蟲，繼代收集卵囊后，按30萬(wàn)～60萬(wàn)個(gè)卵囊/只劑量接種雛雞24只，8只不感染作對(duì)照。感染后1～8天定時(shí)剖檢感染雞和對(duì)照雞，取腸道組織，10%福爾馬林固定，石蠟包埋，制戚切片，切片以HE染色，光鏡下觀察發(fā)育史。結(jié)果發(fā)現(xiàn)巨型艾美耳球蟲有2代裂殖生殖，多出現(xiàn)在小腸絨毛上皮。第一代裂殖體出現(xiàn)在感染后的第2～3天，第二代裂殖體出現(xiàn)在感染后的第3～5天。裂殖體體積較小，大小約8.8um×6.4um。配子體出現(xiàn)在感染后的第5～8天，主要發(fā)生于小腸的固有膜內(nèi)，少數(shù)在腸腺細(xì)胞內(nèi)。大配子體細(xì)胞內(nèi)含有明顯的成囊體，小配子體含有許多紫色的小核。在感染后6～8天，觀察到合子和卵囊。 余銳萍等(1992)觀察了人工感染純種巨型艾美耳球蟲后不同時(shí)間雞的腸道組織病理學(xué)變化。結(jié)果表明:巨型艾差耳球蟲主要寄生于雞的十二指腸及空腸中。子孢子主要在腸粘膜上皮細(xì)胞的頂端發(fā)育，引起粘膜上皮脫落。在裂殖生殖階段，裂殖子不僅寄生于上皮細(xì)胞內(nèi)，還可穿過(guò)粘膜上皮進(jìn)入固有膜和深部的腸腺上皮細(xì)胞內(nèi)，此時(shí)可見(jiàn)固有膜內(nèi)小血管損傷，呈點(diǎn)狀出血，粘膜上皮大量脫落伴隨粘膜上皮顯著增生及單核細(xì)胞浸潤(rùn)。裂殖生殖后蟲體繼續(xù)在上述組織細(xì)胞中發(fā)育成配子體及配子。此階段可見(jiàn)腸黏膜絨毛頂部變短寬，固有膜內(nèi)淋巴管高度擴(kuò)張，出現(xiàn)明顯的炎性水腫?；啬c粘膜內(nèi)未見(jiàn)蟲體寄生。盲腸扁桃體內(nèi)淋巴濾泡生發(fā)中心消失，淋巴細(xì)胞排空，并見(jiàn)大量異嗜細(xì)胞浸潤(rùn)。 徐鑌蕊等(1994)利用組織化學(xué)技術(shù)對(duì)巨型艾美耳球蟲內(nèi)生發(fā)育階段細(xì)胞內(nèi)的多糖、核酸、堿性核蛋白、非特異性酯酶、堿性磷酸酶和酸性磷酸酶分布定位進(jìn)行了研究，結(jié)果如表4-2。 表4-2 王江青等(1991)進(jìn)行了巨型艾美耳球蟲早熟減毒株的選育試駐。試驗(yàn)結(jié)果表明巨型艾美耳球蟲（長(zhǎng)春株）經(jīng)20代的早熟選育，其潛隱期由132h縮短到116h，成為早熟株。該早熟株不經(jīng)選擇傳遞2代，仍保持了早熟的特性。早熟株比其親代株的繁殖力下降74%，致病力降低，但仍保持其免疫原性。 趙樹英等(1990)報(bào)道了殺球靈(Diclazuril)等5種藥物對(duì)堆型艾美耳球蟲的抗球蟲效力。供試雞每只人工感染堆型艾美耳球蟲孢子化卵囊37.6萬(wàn)個(gè)。以抗球蟲指數(shù)為藥效判定標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果表明:l×10-6的殺球靈效力最強(qiáng)，抗球蟲指數(shù)是203，腸道未發(fā)現(xiàn)病變，糞中未檢出卵囊。馬杜拉霉素、那拉霉素、拉薩洛菌素的抗球蟲指數(shù)分別為290.2、193.5和190.5。尼卡巴嗪效力較差，抗球蟲指數(shù)僅達(dá)136.2。 段嘉樹等(1990)對(duì)殺球靈和4種聚醚類抗球蟲藥物馬杜拉霉素、那拉霉素、拉薩洛菌素和莫能霉素的抗巨型艾美耳球蟲效力進(jìn)行了籠飼試驗(yàn)。在重度感染情況下，5×10-6馬杜拉霉素，8×10-5那拉菌素，1×10-4拉薩洛菌素和l×10-4莫能霉素均可防止雞只死亡，改善增重，減弱腸道病變和減少卵囊數(shù)量。1×10-6殺球靈組出現(xiàn)10%死亡，但從增重和病變來(lái)看，雞只仍然受到保護(hù)，糞便中卵囊少。對(duì)腸粘膜涂片的觀察顯示殺球靈明顯抑制了巨型艾美耳球蟲的有性生殖，即配子生殖階段的發(fā)育。 從抗球蟲指數(shù)來(lái)看，以上5種藥對(duì)巨型艾美耳球蟲的效力依次為:拉薩洛菌素，馬杜拉霉素，殺球靈，那拉霉素和莫能霉素。 吳薛忠等(1994)報(bào)道了海南霉素（商品名為雞球素）對(duì)毒害艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲、堆型艾美耳球蟲和變位艾美耳球蟲的籠飼試驗(yàn)。海南霉素用5×10-6和7.5×10-6，以鹽霉素6×10-5為藥物對(duì)照組。人工感染各蟲種卵囊的劑量為:毒害艾美耳球蟲5萬(wàn)個(gè)/只，巨型艾美耳球蟲10萬(wàn)個(gè)/只，堆型艾美耳球蟲15萬(wàn)個(gè)/只，變位艾美耳球蟲12萬(wàn)個(gè)/只。人工感染卵囊前1天開(kāi)始投服藥物，感染后7～8天結(jié)束試驗(yàn)。藥效判定以抗球蟲指數(shù)(ACI)為標(biāo)準(zhǔn)。試驗(yàn)結(jié)果:對(duì)毒害艾美耳球蟲的ACI，海南霉素5×10-6為186.1，7.5×10-6為l85.3，鹽霉素為155.1；對(duì)巨型艾美耳球蟲的ACI，海南霉素5×10-6為182.2，7.5×10-6的為180.8，鹽霉素195.4；對(duì)堆型艾美耳球蟲的ACI，海南霉素5×10-6為193.2，7.5×10-6的為185，鹽霉素為189.8；對(duì)變位艾美耳球蟲的ACI，海南霉素5×10-6為196.8，7.5×10-6的189.6，鹽霉素205.2，整個(gè)結(jié)果顯示海南霉素對(duì)上述雞球蟲均有明顯的抗球蟲效力。 謝明權(quán)等(1993)應(yīng)用人工感染后，定期剖殺試驗(yàn)雞，取寄生部位腸粘膜直接涂片，在顯微鏡下觀察裂殖體成熟程度及密度，確定最適收集時(shí)間的方法，對(duì)毒害艾美耳球蟲、堆型艾美耳球蟲和布氏艾美耳球蟲裂殖子進(jìn)行純化試驗(yàn)。選取材料的位置，毒害艾美耳球蟲在小腸中段，堆型艾美耳球蟲在小腸前段，布氏艾美耳球蟲在小腸后段。感染球蟲的腸道用剪刀縱向剪開(kāi)，棄去腸內(nèi)容物，用PBS (pH7.2)洗2～3次后，以刀片輕刮腸粘膜，置含0.25%胰酶加0.75%膽酸鈉消化液中，40℃消化30～40min。當(dāng)大多數(shù)裂殖體破裂后即停止消化。消化渣用Hank’s平衡鹽溶髓稀釋，200rpm離心淘洗2～3次，每次10min.最后用紅細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)算收獲的裂殖子數(shù)量。結(jié)果是堆型艾美耳球蟲裂殖子最適收獲時(shí)間是人工感染后80～84h，毒害艾美耳球蟲是在人工感染后120h，布氏艾美耳球蟲是95h。作者提出裂殖子的收獲量與人工感染的卵囊數(shù)量成正相關(guān)。供感染的雞日齡最好是3周齡的。感染卵囊數(shù)量，毒害艾美耳球蟲40萬(wàn)/只，堆型艾美耳球蟲是60萬(wàn)/只，布氏艾美耳球蟲是80萬(wàn)/只，便能獲得較理想的感染腸道，供分離裂殖子用。 國(guó)內(nèi)有幾篇關(guān)于藥物殺滅雞球蟲卵囊的報(bào)告。曾衡秀等(1988)報(bào)道了國(guó)產(chǎn)消毒劑-“速爾”抑殺微生物和球蟲卵囊的試驗(yàn)。報(bào)告中提到用國(guó)產(chǎn)速爾1%的濃度，可抑殺97.5%的球蟲卵囊，用2%的濃度則可100%抑殺球蟲卵囊，使之不能進(jìn)行孢子化，試驗(yàn)結(jié)果與國(guó)外同類產(chǎn)品相比，其效力相當(dāng)。 劉毅等(1990)也對(duì)國(guó)產(chǎn)消毒劑-“速爾1號(hào)”進(jìn)行抑殺雞球蟲卵囊的試驗(yàn)。試驗(yàn)與農(nóng)樂(lè)、日本產(chǎn)速爾、新浩爾滅、燒堿等（推薦濃度）作了對(duì)比。結(jié)果證明，遞爾1號(hào)在2.5%、3%的濃度時(shí)能抑殺試管內(nèi)的所有卵囊，0.3%以上的濃度時(shí)能使90%的試管內(nèi)卵囊滅活，2.5%的濃度時(shí)能殺滅試驗(yàn)環(huán)境及雞場(chǎng)現(xiàn)場(chǎng)中的球蟲卵囊。在60天的試驗(yàn)期內(nèi)，試驗(yàn)組雞無(wú)球蟲感染。速爾l號(hào)的抑殺雞球蟲卵囊的效果與農(nóng)樂(lè)和日本產(chǎn)速爾相似。推薦濃度的新潔爾滅及燒堿對(duì)雞球蟲卵囊無(wú)作用。 汪明等(1994)用英國(guó)出品的體外殺滅球蟲卵囊的消毒藥劑OO-cide(殺卵靈)進(jìn)行了殺滅雞柔嫩艾美耳球蟲卵囊的試驗(yàn)。試驗(yàn)表明:經(jīng)殺卵靈處理過(guò)的未孢子化卵囊的孢子化率為2%，對(duì)照卵囊的孢子化率為80%，孢子化減少率為97.6%；用殺卵靈處理過(guò)的孢子化卵囊，按10萬(wàn)/只劑量接種雛雞，第8天剖殺試驗(yàn)雞，計(jì)算出抗球蟲指數(shù)為169，試驗(yàn)雞無(wú)臨診癥狀，盲腸病變記分不超過(guò)1分，對(duì)照組ACI為121，臨診癥狀明顯。 （林昆華） | 
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