活性酵母對(duì)斷奶仔豬盲腸微生物區(qū)系的影響

邦士富—漁

試驗(yàn)選取 96頭 21 日齡斷奶的三元(杜×大×長(zhǎng))雜種仔豬，按體重和性別隨機(jī)分為4組，每組 3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)8頭仔豬，探討活性酵母對(duì)斷奶仔豬微生物區(qū)系、胃腸道發(fā)育和揮發(fā)性鹽基氮的影響。結(jié)果表明，單獨(dú)添加耐熱性活性酵母(10l0 CFU／kg 飼糧)能顯著(p<0.05)降低腸道內(nèi)容物大腸埃希氏菌數(shù)和調(diào)節(jié)腸道微生物菌群平衡。耐熱性活性酵母與金霉素組合以及普利菌+金霉素組合也有一定程度調(diào)節(jié)腸道微生物菌群平衡的能力。添加耐熱性活性酵母與金霉素組合能顯著提高(p<0.05)28 日齡和 56 日齡斷奶仔豬腸絨毛高度。單獨(dú)添加耐熱性活性酵母也能提高 28日齡和 56日齡斷奶仔豬腸絨毛高度(p>0.05)。添加普利菌＋金霉素組合對(duì)斷奶仔豬腸絨毛高度無(wú)顯著影響(p>0.05)，56 日齡甚至低于添加金霉素的水平。28 日齡和 56日齡斷奶仔豬飼糧中添加耐熱性活性酵母絨毛整齊，高度明顯大于對(duì)照組。添加耐熱性活性酵母組的結(jié)腸揮發(fā)性鹽基氮含量最低，有降低斷奶仔豬結(jié)腸揮發(fā)性鹽基氮的趨勢(shì)。高溫制粒后，普通活性酵母(＋金霉素)在早期斷奶仔豬中應(yīng)用未發(fā)現(xiàn)有添加效應(yīng)。

在自然狀態(tài)下，豬胃腸道存在平衡的微生物區(qū)系。實(shí)際生產(chǎn)中，由于食物形態(tài)和環(huán)境的變化，仔豬早期斷奶等應(yīng)激往往導(dǎo)致消化道微生物菌群失調(diào)，使病原菌更易接觸胃腸道黏膜上皮靶細(xì)胞和大量繁殖，結(jié)果導(dǎo)致仔豬腹瀉和生長(zhǎng)不良。益生菌可通過(guò)維持腸道內(nèi)微生態(tài)平衡而發(fā)揮作用，因此用益生菌來(lái)代替抗生素調(diào)節(jié)胃腸道微生物區(qū)系的平衡，提高動(dòng)物生產(chǎn)性能已成為動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究熱點(diǎn)之一；國(guó)內(nèi)外研究主要集中在乳酸桿菌、芽孢桿菌和雙歧桿菌上?；钚越湍笧槊绹?guó) FDA規(guī)定允許飼喂的益生菌和我國(guó)農(nóng)業(yè)部1999 年批準(zhǔn)使用的益生素品種。國(guó)外有少量研究報(bào)道活性酵母在單胃動(dòng)物中發(fā)揮益生菌作用，但結(jié)果并不一致，國(guó)內(nèi)尚無(wú)活性酵母應(yīng)用的系統(tǒng)研究報(bào)道。研究結(jié)果表明，在早期斷奶仔豬飼糧中添加耐高溫活性酵母有助于提高生產(chǎn)性能，降低腹瀉率和提高機(jī)體細(xì)胞免疫水平。本試驗(yàn)研究活性酵母對(duì)斷奶仔豬微生物區(qū)系、腸黏膜形態(tài)和揮發(fā)性鹽基氮的影響，探討活性酵母對(duì)仔豬的作用效果和機(jī)理。

1   材料與方法

1.1   試驗(yàn)動(dòng)物

選取 21日齡斷奶三元(杜×大·長(zhǎng))雜種仔豬 96 頭，平均體重為 5.06±0.49 kg，按體重和性別隨機(jī)分為 4 個(gè)處理組，每個(gè)處理組 3 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù) 8 頭仔豬，公母各半。試驗(yàn)時(shí)間從仔豬 3 周齡斷奶開(kāi)始，7 周齡結(jié)束。

1.2   試驗(yàn)飼糧及試驗(yàn)設(shè)計(jì)

基礎(chǔ)飼糧組成(%)：玉米 58.55；黃粉 3.00；麩皮 2.00；魚(yú)粉 5.00；乳清粉 2.00；豆粕 25.4；石粉 0.74；磷酸氫鈣 0.77；豆油 1.00；鹽酸賴(lài)氨酸 0.32；食鹽 0.25；復(fù)合預(yù)混料 1.00。營(yíng)養(yǎng)成分含量：消化能 13.56 MJ／kg，粗蛋白質(zhì) 20.00％，鈣 0.76％，磷 0.63％，有效磷 0.42％，賴(lài)氨酸 1.35％，蛋氨酸 0.35％。（活性酵母細(xì)胞來(lái)源為法國(guó)樂(lè)斯福公司生產(chǎn)的百福菌和普利菌）活細(xì)胞數(shù)分別為 8×109個(gè)／克和 15×109個(gè)／克，其中百福菌為特殊包被處理的耐高溫產(chǎn)品。

試驗(yàn)共分 4 組：即對(duì)照組(添加金霉素 75 克／噸)，百福菌組(1 500 克／噸，不加抗生素)，百＋金組(添加百福菌 1 500 克／噸、金霉素 75 克／噸)，普＋金組(添加普利菌 1 500 克／噸、金霉素 75 克／噸)。

1.3   飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)豬飼養(yǎng)于封閉、半漏縫地板式豬舍，每個(gè)重復(fù)仔豬飼養(yǎng)于一欄。自由采食、飲水。按照常規(guī)飼養(yǎng)和免疫程序進(jìn)行飼養(yǎng)管理。試驗(yàn)過(guò)程中每天測(cè)定最高、最低舍溫，在每天 6:00、14:00、22:00 測(cè)定溫度、濕度，保持溫濕度相對(duì)恒定。

1.4   測(cè)定指標(biāo)

1.4.1   試驗(yàn) 10 天屠宰測(cè)定，取結(jié)腸中段 1 cm，立即置于含甲醛 3.8％的福爾馬林液中，經(jīng)脫水、包蠟、切片、染色、顯微鏡觀察鏡下取圖和拍照，計(jì)算小腸絨毛高度。

1.4.2    試驗(yàn)結(jié)束時(shí)測(cè)定小腸絨毛高度；無(wú)菌法采集盲腸內(nèi)容物 15 克測(cè)定微生物區(qū)系(乳酸菌數(shù)、大腸桿菌數(shù))；采集結(jié)腸內(nèi)容物 10 克，測(cè)定揮發(fā)性鹽基氮(VBN)。

1.5   統(tǒng)計(jì)分析

測(cè)定結(jié)果利用 SAS 軟件采用 GLM 程序進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，并進(jìn)行多重比較。

2   結(jié)果與討論

2.1   微生物區(qū)系

活性酵母對(duì)斷奶仔豬盲腸微生物區(qū)系的影響見(jiàn)表 1。

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一般健康動(dòng)物體的腸道均具有自身保護(hù)功能，以維持胃腸道中菌群的常態(tài)平衡，但優(yōu)勢(shì)均衡會(huì)因仔豬早期斷奶應(yīng)激等因素造成腸道微生物失調(diào)。若飼糧中連續(xù)使用益生菌，可有效的維持腸中有益菌群常態(tài)平衡。酵母菌調(diào)節(jié)豬腸道菌群代謝的資料較少。采用體外結(jié)腸模擬技術(shù)發(fā)現(xiàn)一種活性酵母菌促進(jìn)豬后腸微生物代謝。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，單獨(dú)添加耐高溫活性酵母顯著降低(P<0.05) 仔豬盲腸食糜中大腸埃希氏菌數(shù)，因而顯著降低大腸埃希氏菌／乳腺酸菌的比例(p<0.05)。百福菌十金霉素組合飼糧和普利菌＋金霉素組也有降低盲腸中大腸埃希氏菌濃度和大腸埃希氏菌/乳酸菌的比例的趨(p>O.05)。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)添加活性酵母對(duì)結(jié)腸乳酸菌影響較小，可能因乳酸菌為豬后腸微生物區(qū)系中的優(yōu)勢(shì)菌之一。本試驗(yàn)表明，單獨(dú)添加耐熱性活性酵母能顯著降低仔豬腸道內(nèi)容物中大腸埃希氏菌數(shù)和調(diào)節(jié)腸道微生物菌群平衡。百福菌＋金霉素組合飼糧和普利菌＋金霉素組也有一定程度調(diào)節(jié)腸道微生物菌群平衡的能力。此外，普通活性酵母＋金霉素對(duì)腸道微生物菌群平衡的調(diào)節(jié)作用不顯著，可能與普通活性酵母的熱穩(wěn)定性不佳有關(guān)。本試驗(yàn)未對(duì)熱加工后飼糧中的活性酵母的含量變化進(jìn)行分析，因此溫度等加工工藝參數(shù)對(duì)活性酵母的穩(wěn)定性的影響需進(jìn)一步研究。

2.2   絨毛結(jié)構(gòu)

小腸絨毛作為小腸的重要組成部分，不但在吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)上至關(guān)重要，且其強(qiáng)有力和有規(guī)律的擺動(dòng)也有助于排斥有害菌群的定植。有報(bào)道表明，產(chǎn)酸型活菌制劑按照每頭 1.2億活菌數(shù)飼喂新生仔豬，4 日齡小腸絨毛形態(tài)發(fā)育普遍良好。仔豬斷奶往往造成小腸絨毛組織和形態(tài)發(fā)生很大變化。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，添加耐熱性活性酵母與金霉素組合顯著提高(p<0.05)28 日齡和 56 日齡斷奶仔豬腸絨毛高度，同時(shí)從表 2可知，小腸絨毛高度隨著年齡的增加而逐步增加，但56 日齡對(duì)照組仍然顯著低于(p<O.05)添加耐熱性活性酵母＋金霉素的水平。單獨(dú)添加耐熱性活性酵母也能提高28日齡和56日齡斷奶仔豬腸絨毛高度(p>0.05)。添加普利菌＋金霉素組合對(duì)斷奶仔豬 28 日齡腸絨毛高度無(wú)顯著影響(p>O.05)，56 日齡甚至顯著低于添加金霉素的水平(p<O.05)。

file:///C:/DOCUME~1/ADMINI~1/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image004.jpg活性酵母對(duì)斷奶仔豬小腸黏膜絨毛形態(tài)的組織切片結(jié)果見(jiàn)圖1。28 日齡和 56 日齡斷奶仔豬飼糧中添加耐熱性活性酵母絨毛整齊，高度明顯大于對(duì)照組，且排列更加整齊。與對(duì)照組相比，添加普利菌十金霉素組合對(duì)斷奶仔豬腸絨毛結(jié)構(gòu)無(wú)顯著改善。結(jié)果表明，添加耐熱性活性酵母顯著提高斷奶仔豬腸絨毛高度，一定程度上克服斷奶應(yīng)激對(duì)腸道造成的損傷。

2.3   揮發(fā)性鹽基氮

揮發(fā)性鹽基氮為蛋白質(zhì)腐敗產(chǎn)物中的氨態(tài)氮和胺基態(tài)氮的總和。尿素在腸黏膜中分解產(chǎn)生氨氣，后者嚴(yán)重破壞腸細(xì)胞的表面，胺類(lèi)大多數(shù)對(duì)動(dòng)物也是有害的。若能抑制胺類(lèi)和氨產(chǎn)生，可促進(jìn)動(dòng)物體的健康及提高生長(zhǎng)。由表 3 可知，添加耐熱性活性酵母組的仔豬結(jié)腸揮發(fā)性鹽基氮含量最低．有降低斷奶仔豬結(jié)腸揮發(fā)性鹽基氮的趨勢(shì)。結(jié)果表明，添加耐熱性活性酵母一定程度上降低了蛋白質(zhì)在大腸內(nèi)的腐敗產(chǎn)物濃度，降低了胺類(lèi)物質(zhì)對(duì)腸道黏膜的損傷。高溫蒸汽制粒后，普通活性酵母＋金霉素未有類(lèi)似的添加效應(yīng)。