如何評判和檢測發(fā)酵豆粕的質(zhì)量?

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　　利用現(xiàn)代生物技術(shù)將豆粕轉(zhuǎn)化為優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)飼料原料，是國際研究開發(fā)熱點，產(chǎn)品問世不到十年，技術(shù)和產(chǎn)業(yè)化水平在國際上以丹麥最為突出。我國在這方面的研究始于上世紀(jì)九十年代末，目前國內(nèi)仍處于大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化的初期，已有近百家企業(yè)生產(chǎn)發(fā)酵豆粕，但品質(zhì)參差不齊，加之許多生產(chǎn)廠家片面宣傳、有意或無意誤導(dǎo)，使該類產(chǎn)品在市場上造成很大的混亂，用戶無所適從。如何評判和檢測發(fā)酵豆粕的質(zhì)量成為各飼料廠家，甚至有些發(fā)酵豆粕廠家(小廠)的一大難題。

　　1、豆粕發(fā)酵的目的

　　明確豆粕發(fā)酵的目的，才能夠確定評判發(fā)酵豆粕質(zhì)量的主要指標(biāo)。豆粕經(jīng)過發(fā)酵其主要目的有以下四個方面：

　　1.1破壞豆粕中抗?fàn)I養(yǎng)因子

　　豆粕中含有胰蛋白酶抑制因子、低聚糖、凝集素、植酸、脲酶等抗?fàn)I養(yǎng)因子，發(fā)酵過程中通過微生物、酶及發(fā)酵產(chǎn)生的有機(jī)酸的作用，使得抗?fàn)I養(yǎng)因子被降解或者鈍化，從而得到破壞。

　　1.2消除豆粕蛋白的抗原性

　　豆粕中含有的 7S 和 11S 蛋白具有很強(qiáng)的抗原性，幼齡動物對其尤為敏感。在發(fā)酵過程中，主要是通過將其降解而使其失去抗原性。

　　1.3降解大分子蛋白質(zhì)

　　豆粕中 11S 和 7S 蛋白分子量分別為 350KD 和180KD，通過發(fā)酵酶解，被降解為氨基酸及各種多肽，有利于動物的吸收利用。

　　1.4形成各種有益發(fā)酵產(chǎn)物

　　目前豆粕發(fā)酵均采用枯草芽孢桿菌、酵母菌和乳酸菌等安全菌株，產(chǎn)品發(fā)酵后往往含有較高數(shù)量的有益菌和有機(jī)酸、蛋白酶等代謝產(chǎn)物。

　　2、發(fā)酵豆粕評判程序

　　對發(fā)酵豆粕的評判，可以按四個步驟進(jìn)行，需要檢測的指標(biāo)如下：

　　2.1感官評判

　　包括色澤、氣味、細(xì)度。豆粕經(jīng)過發(fā)酵、干燥后顏色變深，優(yōu)質(zhì)的發(fā)酵豆粕皆為棕黃色或淺黃褐色。如果顏色淺而與豆粕一致，有可能發(fā)酵程度不夠或摻入其他淺色蛋白原料;如果顏色過深(如深褐色)，則表明干燥過度，發(fā)生美拉德反應(yīng)。發(fā)酵豆粕的氣味根據(jù)菌種和生產(chǎn)工藝的不同，也略有差異，但均應(yīng)無豆腥味和霉味。一般為酸香味(較濃郁)，酸味較濃的產(chǎn)品是以乳酸菌發(fā)酵為主，該類產(chǎn)品損耗低、成本低、有機(jī)酸含量較高、誘食效果較好，可部分降解抗?fàn)I養(yǎng)因子、粗蛋白一般可提高4-5%、消化吸收率較高。發(fā)酵豆粕的粉碎粒度不宜過細(xì)。粒度越細(xì)，產(chǎn)品中的活性成分損失就越多、眼觀越不易判斷是否產(chǎn)假。

　　2.2常規(guī)理化分析

　　常規(guī)理化指標(biāo)(蛋白含量、水分、灰分、酸度等)在大多數(shù)飼料廠的實驗室里都可以完成，根據(jù)這幾個指標(biāo)和感官指標(biāo)，可以初步判定發(fā)酵豆粕質(zhì)量的優(yōu)劣和穩(wěn)定性。蛋白含量一般都能夠達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)，建議各廠家檢測發(fā)酵豆粕中真蛋白質(zhì)的含量，簡單判斷是否產(chǎn)假。以去皮豆粕為原料生產(chǎn)發(fā)酵豆粕的真蛋白一般在44%～49%之間，但這也跟發(fā)酵產(chǎn)品中游離氨基酸的含量有關(guān)，游離氨基酸高，真蛋白相應(yīng)就會低些。廠家一般對發(fā)酵豆粕的水分含量不太注重，只要不超出標(biāo)準(zhǔn)就行。其實，不同廠家對制定發(fā)酵豆粕的水分含量標(biāo)準(zhǔn)上有很大的不同，可能會給部分用戶造成誤解。有些廠家灌輸“水分低則產(chǎn)品有效物質(zhì)多”這樣的概念，其實不然，比如有兩個產(chǎn)品：A水分12%，蛋白50%;B水分8%，蛋白50%。假如A將水分降到8%，則蛋白52.27%;B將水分升到12%，蛋白47.83%。從這個例子上我們可以看出：水分高并不能代表產(chǎn)品有效物質(zhì)少，相反，水分低，則需要進(jìn)一步提高干燥溫度或者延長干燥時間，不可避免會對活性物質(zhì)造成破壞。發(fā)酵工藝的不成熟或菌種的選取不當(dāng)?shù)膹S家，一般會以此方法來提高蛋白含量。豆粕通常含有5.5%～6.5%的總灰分。因為在發(fā)酵過程中，成品有一定的損耗，所以，發(fā)酵豆粕的粗灰分通常會比原料豆粕高一些。一般各廠家發(fā)酵豆粕的pH值在5左右，并不是pH越低的產(chǎn)品越好。

　　2.3酸度

　　采用滴定法測定，簡單快速。發(fā)酵豆粕的酸度大于2%，過低則可能發(fā)酵程度不足或者發(fā)酵控制不當(dāng)而產(chǎn)氨。

　　2.4抗?fàn)I養(yǎng)因子

　　2.4.1抗原蛋白

　　大豆抗原蛋白是一種熱穩(wěn)定性抗?fàn)I養(yǎng)因子，是大豆中對動物(特別是幼齡動物)影響最大的一類物質(zhì)。按離心時沉降系數(shù)和免疫學(xué)方法可將大豆蛋白質(zhì)分為11S球蛋白(大豆球蛋白)和7S球蛋白(β和γ伴球蛋白)，其中大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白是免疫原性最強(qiáng)的大豆抗原蛋白，兩者共占大豆籽實總蛋白的65%～80% 。根據(jù)抗原蛋白特性建立了許多7S球蛋白和11S球蛋白分離及測定的方法，主要有：等電點沉淀法、冷沉淀法、鹽析法、按離子強(qiáng)度不同而沉淀的分離法、免疫法。目前發(fā)酵豆粕廠家主要是通過SDS-PAGE聚丙酰胺凝膠電泳的方法，測定蛋白分子量分布大致情況。通過標(biāo)準(zhǔn)分子量圖譜比較，可以從一定程度上反映出蛋白類抗?fàn)I養(yǎng)因子的去除程度。使用ELISA方法和免疫擴(kuò)散法對抗原蛋白進(jìn)行定量測定。發(fā)酵豆粕的主要目的之一就是降解大豆抗原，但對于飼料廠而言，基本上都檢測不了，只能靠廠家提供資料進(jìn)行判斷。就目前市場上發(fā)酵豆粕的生產(chǎn)工藝而言，抗原蛋白并不可能完全降解。但是很多廠家宣稱其發(fā)酵豆粕是“零抗原”或者“無抗原”，標(biāo)稱抗原含量低于1mg/kg，這不符合實際情況。另外，某些發(fā)酵豆粕由于干燥溫度過高，蛋白質(zhì)不能提取，上樣時蛋白質(zhì)濃度很低，會出現(xiàn)SDS-PAGE顯示蛋白降解很好的假象，此時我們可以通過福林酚法或改良的Lorry法檢測水溶性蛋白質(zhì)的含量，如果水溶性蛋白含量很低，則說明產(chǎn)品有問題。

　　2.4.2.胰蛋白酶抑制因子

　　豆粕中的胰蛋白酶抑制因子雖是熱敏性因子，但豆粕中胰蛋白酶抑制因子活性仍可達(dá)到2000TIU/g左右，優(yōu)質(zhì)發(fā)酵豆粕可以達(dá)到400TIU/g以下。一般可采用NY/T1103.2-2006的方法對胰蛋白酶抑制因子進(jìn)行定量分析。

　　2.5 發(fā)酵豆粕中小分子蛋白的含量測定

　　發(fā)酵豆粕的另外一個主要目的就是：將豆粕中的大分子蛋白降解成為小分子蛋白，甚至降解成多肽和小肽，從而提高其在動物體內(nèi)的消化吸收率和機(jī)體的免疫力。目前各廠家測定小分子蛋白使用的都是三氯乙酸(TCA-N)法，而部分發(fā)酵豆粕廠家利用此法測定的小分子蛋白卻聲稱為“小肽”(小于1000道爾頓)，而且未扣除非蛋白氮(NPN)和游離氨基酸，這是混淆概念的。一般用三氯乙酸(TCA-N)法測定的是發(fā)酵豆粕中的分子量小于10000Da的小分子蛋白物質(zhì)，而非生物學(xué)家及動物營養(yǎng)學(xué)上真正具有“小肽”意義的肽類物質(zhì)。分子量段在5000Da～180Da之間的稱為“肽”，分子量段5000Da～3000Da 之間的肽稱為“大肽”，分子量段在3000Da～1000Da之間的肽稱為“多肽”，分子量段在1000Da～180Da之間的稱為“小肽”、“寡肽”、“低聚肽”，也稱為小分子活性多肽，一般由2～6個氨基酸組成。有些廠家為了提高產(chǎn)品粗蛋白含量、降低成本，在發(fā)酵前添加一些非蛋白氮(如尿素、蛋白精)類的物質(zhì)。如果用此法檢測小分子蛋白含量時，一定要注意檢測非蛋白氮的含量。

　　2.6 微生物種類和數(shù)量的檢測

　　大豆作為發(fā)酵豆粕的主要原料其最大的安全隱患是可能產(chǎn)生黃曲霉素。黃曲霉毒素是迄今為止發(fā)現(xiàn)污染農(nóng)產(chǎn)品最強(qiáng)的一類生物毒素，屬于強(qiáng)致癌物質(zhì)，可在大豆的生長、收獲、晾干、加工和貯藏中的任何環(huán)節(jié)產(chǎn)生，并能直接進(jìn)入食物鏈，在大豆作為水產(chǎn)動物飼料原料受到污染時，其多種加工成品中都能發(fā)現(xiàn)黃曲霉素殘留，從而造成水產(chǎn)動物，甚至人的連鎖污染。因此，檢測發(fā)酵豆粕中的微生物種類與數(shù)量也是必要的。檢測黃曲霉素對照國家標(biāo)準(zhǔn)GB 8381-87進(jìn)行。

　　綜上所述，筆者建議要想發(fā)酵豆粕質(zhì)量穩(wěn)定可靠，需選擇正規(guī)廠家的發(fā)酵劑，把控好發(fā)酵過程中的關(guān)鍵點，才能得到高質(zhì)量的發(fā)酵產(chǎn)品!比如有著19年發(fā)酵技術(shù)優(yōu)勢的寶來利來就值得信賴。針對主題，可選用寶來利來常規(guī)飼料原料發(fā)酵劑。其不僅能將豆粕、棉粕、菜籽粕內(nèi)的有害物質(zhì)和抗?fàn)I養(yǎng)因子有效降解，更能顯著提高其飼用價值。

　　來源：互聯(lián)網(wǎng)