脫霉劑使用效果評價
1 體外吸附能力評價
體外吸附:體外法評價脫霉劑是衡量其吸附效果非常有效的方法。如果一種脫霉劑不能很好在體外結(jié)合霉菌毒素,那么在體內(nèi)結(jié)合霉菌毒素的可能就非常的小或是沒有可能。
體外評價有以下三種方法:單一濃度分析、等溫吸附分析、模擬胃腸道分析。
單濃度分析方法是在穩(wěn)定的水環(huán)境中,定量的吸附劑與定量的純毒素作用,通過測定反應體系中剩余毒素的量,從而確定吸附劑對毒素的吸附效果,單濃度分析法易于操作、節(jié)省毒素,在體外分析中廣泛應用。
等溫吸附分析是指在溫度不變和其它條件一定的情況下,在不同毒素濃度環(huán)境下,單位質(zhì)量的吸附劑對毒素的吸附量進行作圖。這種方法將吸附劑吸附霉菌毒素看成是一個可逆的化學吸附平衡反應,這個過程受到毒素濃度、吸附劑的量以及兩者之間相對親和力的影響。
模擬胃腸道分析是指以胃液與小腸液為反應介質(zhì),模擬動物體內(nèi)環(huán)境的分析方法。這種方法可以模擬動物體內(nèi)所具有的復雜酶活性、各種營養(yǎng)成份和pH值波動等消化道環(huán)境,是最接近動物體內(nèi)試驗結(jié)果的分析方法。很多吸附劑由于其選擇性吸附特性較差,在水環(huán)境中可以有效的吸附霉菌毒素,但在胃腸液環(huán)境中,其吸附位點易點被其他分子所飽合。如果一種吸附劑在模擬胃腸道環(huán)境下對毒素有吸附效果;那么大動物實驗中降低霉菌毒素中毒的可能性就比較大。
墨水吸附試驗的誤區(qū):市面上有廠家利用墨水加入脫霉劑后,觀測其變色情況來衡量一個脫霉劑的吸附功能,實際上是沒有科學根據(jù)的,原因有二,第一,墨水里面顯色成分是單質(zhì)碳(C),屬于無機物;而霉菌毒素是各種不同的有機物,與碳單質(zhì)分子量、化學結(jié)構(gòu)差異巨大,能吸附碳不代表能吸附霉菌毒素。第二,墨水的介質(zhì)是中性的水溶液和動物體內(nèi)胃腸道酸堿介質(zhì)pH值相差巨大,在水里面能吸附,在胃腸道環(huán)境中可能會解離。因此利用墨水吸附試驗判斷一個脫霉劑的吸附功能一個誤區(qū)。
2 體內(nèi)臨床效果評價
2.1采食和增重、疑似病例發(fā)病率
T2、嘔吐毒素等霉菌素素可嚴重造成動物拒食、導致動物消瘦、增重慢、出欄延遲和料肉比高。觀察使用脫霉劑后,豬是否采食量有明顯增加、增重加快,或豬體重恢復、死淘降低的現(xiàn)象,從而判定脫霉劑的效果。具體可以用平均日采食量和平均日增重當做衡量指標。平均日釆食量(ADFI,Averagedaily feed intake),從試驗開始時,以組為單位記錄每天的喂料量和豬只數(shù),計算出各組豬只的平均采食量。通常用平均日增重(ADG,Averagedaily gain)來代替日增重。每21天測定一次豬的空腹總體重,并做好記錄,直到將豬轉(zhuǎn)到育肥舍時停止試驗,然后計算平均日增重。
霉菌毒素蓄積各級造成損傷后會出現(xiàn)各種臨床癥狀,如下表1.所示
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2017-3-23 09:22 上傳
通過觀測這些臨床癥狀的減緩可以從一定程度上反應脫霉劑的效果。
2.2抗氧化指標
霉菌毒素的重要作用機制是作用于細胞膜,引起細胞氧化反應的加劇,產(chǎn)生大量的氧自由基,危害機體。脫霉劑中添加像維E等多種抗氧化劑可以明顯減輕霉菌素素帶來的氧化應激。對此我們可以檢測體內(nèi)脂質(zhì)過氧化反應的終極產(chǎn)物丙二醛、和參與氧化反應的酶來衡量脫霉劑對氧化損傷的減輕作用。
考察脫霉劑的抗氧化能力,我們可以檢測的指標:丙二醛(MDA,正常豬體內(nèi)MDA值約為2.29),超氧化物歧化酶(SOD);谷胱甘肽過氧化物酶。
2.3器官修復指標
肝臟、腎臟是霉菌毒素損傷的主要靶器官,其中最典型的就是黃曲霉毒素和青霉酸、給豬飼喂含黃曲霉毒素的飼料可引起肝表面腫大、肝細胞壞死、以及一些與肝功能障礙等等。脫霉劑使得霉菌毒素減少,自然降低對肝腎組織的損傷,同時優(yōu)質(zhì)脫霉劑如果能添加修復肝腎功能的一些植物提取物,那么解毒效果會更佳。我們可以用肝腎外觀和相應的肝功能指標來衡量脫霉劑脫霉、器官修復的功效。
具體檢測指標:病理組織學,解剖,肝、腎、心等組織器官的外觀(肝重系數(shù))、病理組織切片等觀察。肝功能指標:測定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、喊性憐酸酶(ALP)、白蛋白(ALB)、總蛋白(TP)、血清尿素氮(BUN)血糖(GLU)、膽紅素的含量。
2.4解除免疫抑制指標
霉菌毒素會引起胸腺等淋巴細胞萎縮,T淋巴細胞和白細胞減少,白蛋白和球蛋白含量降低,抗體效價下降,血清抗體濃度降低,引起免疫抑制而使各種病毒病多發(fā)。有人認為,大量用疫苗后抗體仍達不到應有滴度,很可能與霉菌毒素有關。
所以我們可以從以下幾個指標來衡量脫霉劑對免疫抑制的解除作用:a)外觀指標:淚瘢、觀察胸腺、脾臟、淋巴結(jié)等免疫器官的大小形狀、被毛出亂程度、皮膚出血點。b)血液生化學指標:血液中的T淋巴細胞和B淋巴細胞水平、免疫因子(白細胞介素、干擾素)、接種疫苗后抗體水平監(jiān)測。
結(jié)束語▼:
霉菌毒素廣泛普遍存在不可避免,有人說霉菌毒素是養(yǎng)殖業(yè)的隱形殺手,尤其最近幾年,霉菌毒素的危害變得越來越明顯,已經(jīng)從隱形殺手變成養(yǎng)豬越來越難養(yǎng)的罪魁禍首,特別是它和其它幾種免疫抑制病引起的免疫抑制是我們養(yǎng)豬業(yè)疫病變得復雜的主要原因,而且霉菌毒素還危機到與人類息息相關的食品安全問題,處理飼料中霉菌及其毒素的問題,已到了刻不容緩地步。我們除了需要對作物的生產(chǎn)、糧食的儲存、飼料加工進行嚴格的把關以外,更需要選擇高效、優(yōu)質(zhì)脫霉劑。因此如何快速判斷一種脫霉劑是否優(yōu)質(zhì),如何量化使用脫霉劑后的效果顯得尤為重要,希望本文可以給同行帶來一些借鑒。
來源:PSY應用研究院
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