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蒙脫石對金黃色葡萄球菌吸附作用的研究

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發(fā)表于 2017-4-19 17:03:36 | 只看該作者 回帖獎勵 |倒序瀏覽 |閱讀模式
  蒙脫石(MMT)又叫膨潤土,是一種礦物藥。據(jù)記載我國蒙脫石的藥用已有悠久歷史,唐代醫(yī)學名著《本草拾遺》中的干土即為蒙脫石。除傳統(tǒng)的礦物藥之外,粘土礦物的藥用價值研究已成為該領域之熱點。國內(nèi)的蒙脫石資源豐富,自20世紀80年代開始被歐美國家制做藥用賦形劑,并分別納入美國、歐洲和英國藥典。法國IPSEN制藥公司生產(chǎn)的西藥西密達(Smeeta)是近年來應用于治療消化系統(tǒng)疾病的藥用。本品系由氧化硅及氧化鋁組成的不溶性層狀硅酸鹽固體物質(zhì),由于其特殊的內(nèi)部結(jié)構(gòu),帶有不飽和的負電荷及具強烈的陽離子產(chǎn)換能力,對進入人體的病毒細菌有絕對的吸附固定作用。臨床上用作治療腹瀉和消化潰瘍的藥物。天然蒙脫石比表面積較小,影響了它的吸附性能,蒙脫石是層狀硅鹽,其單元層間距大約1nm。在蒙脫石層間插入有機修飾劑,能改性成有機蒙脫石(納米蒙脫石),使蒙脫石比表面積大幅提高,吸附能力顯著增強;利用納米蒙脫石的無毒性、高比表面積、高吸附性等特性,研究其對細菌、病毒以及毒素等的吸附性,為進一步開發(fā)新藥提供理論依據(jù),為此我們將聚乙二醇插入蒙脫石的片層間,制備出納米蒙脫石,并對金黃色葡萄球菌的吸附效果進行了探討。
  1、材料與方法:
  1.1、材料:菌珠:金黃色葡萄球菌(ATCC25923)、肉湯培養(yǎng)基,PH7.0~7.2,121℃滅菌15 min。
  菌液的配制:將金黃色葡萄球菌培養(yǎng)至對數(shù)生長期,取少許,用滅菌生理鹽水配成菌液,濃度為0.5×105cfu/ml。試劑:蒙脫石購于佛山南海市非金屬開發(fā)公司:不同分子量聚乙二醇購于天津市科歐化學試劑開發(fā)中心。
  1.2、方法
  1.2.1  制備納米蒙脫石   參照盧其明【2】實驗方法,分別取不同相對分子質(zhì)量的PEG1.00g于200ml燒杯中,加100ml蒸溜水,放在電磁攪拌器上攪拌至完全溶解。加入膨潤土5.00g,再于電磁攪拌器上攪拌1h,離心分離(4500r/min,2 h).將沉淀轉(zhuǎn)入蒸發(fā)皿,于65℃真空干燥6h,研磨至200目,再于65℃真空干燥2 h,密封保存。
  1.2.2  抑菌實驗  在接種了金黃色葡萄球菌的平板培養(yǎng)基,點樣PGE400、PEG6000和蒙脫石的粉末;在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,觀察細菌生長情況。
  1.2.3  細菌吸附作用的檢測  取4個三解燒瓶,1、2、3號瓶分別加入0.02g PEG400/蒙脫石、PEG6000/蒙脫石插層復合物,和蒙脫石,4號瓶為空白對照,各燒瓶分別吸5 ml菌液振搖20 min,靜置6 h,各吸上清液100ml,分別按稀釋平板計數(shù),重復2次。據(jù)此計算和比較各瓶中細菌的濃度。按下式計算三者對金黃色葡萄球菌的吸咐率;吸咐率=(1-試驗管上清液中細菌濃度/空白對照管上清液中細菌濃度×100%。
  牧之驕(北京)生物科技有限公司開發(fā)產(chǎn)品有:蒙脫石飼料添加劑、蒙脫石干燥劑、蒙脫石助留劑、蒙脫石脫霉劑、蒙脫石貓砂、藥品級輔料砂等系列產(chǎn)品,遠銷美國、歐洲及東南亞地區(qū)。

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