再求飼料中TBA值的測(cè)定方法一個(gè)

綠緣

[i=s] 本帖最后由 szhilei 于 2009-9-8 15:06 編輯 [/i]

過(guò)氧化值尚未解決，再急求飼料中TBA值測(cè)定方法，大蝦們多多指教啊！                  http://ffers.com.cn/thread-175323-1-2.html 看一下上面這個(gè)帖子

綠緣

哦？沒(méi)有人知道嗎？
TBA值又叫硫代巴比妥值，在醫(yī)院里面是血液的一項(xiàng)指標(biāo)，他們用試劑盒去做，油脂中也有國(guó)標(biāo)方法，但是飼料中的可溶性糖對(duì)其吸光值影響很大，不知道有什么合適的方法　

粗蛋白

沒(méi)接觸過(guò)...期待知道的朋友快快到來(lái)!!

綠緣

9494,知道的朋友趕快來(lái)啊?。?！

紫末

我也沒(méi)有接觸過(guò)這方面的檢測(cè).誰(shuí)能幫忙呢?

綠緣

我來(lái)發(fā)一個(gè)吧植物中的
植物組織中丙二醛含量的測(cè)定
植物器官衰老或在逆境下遭受傷害，往往發(fā)生膜脂過(guò)氧化作用，丙二醛（MDA）是膜脂過(guò)氧化的最終分解產(chǎn)物，從膜上產(chǎn)生的位置釋放出后，與蛋白質(zhì)、核酸起反應(yīng)修飾其特征；使纖維素分子間的橋鍵松馳，或抑制蛋白質(zhì)的合成。MDA的積累可能對(duì)膜和細(xì)胞造成一定的傷害。
原理
丙二醛（MDA）是常用的膜脂過(guò)氧化指標(biāo)，在酸性和高溫度條件下，可以與硫代巴比妥酸（TBA）反應(yīng)生成紅棕色的三甲川（3,5,5-三甲基惡唑2,4-二酮），其最大吸收波長(zhǎng)在532nm。但是測(cè)定植物組織中MDA時(shí)受多種物質(zhì)的干擾，其中最主要的是可溶性糖，糖與TBA顯色反應(yīng)產(chǎn)物的最大吸收波長(zhǎng)在450nm，532nm處也有吸收。植物遭受干旱、高溫、低溫等逆境脅迫時(shí)可溶性糖增加，因此測(cè)定植物組織中MDA—TBA反應(yīng)物質(zhì)含量時(shí)一定要排除可溶性糖的干擾。低濃度的鐵離子能夠顯著增加TBA與蔗糖或MDA顯色反應(yīng)物在532、450nm處的消光度值，所以在蔗糖、MDA與TBA顯色反應(yīng)中需一定量的鐵離子，通常植物組織中鐵離子的含量為100～300μg/g DW，根據(jù)植物樣品量和提取液的體積，加入Fe3＋的終濃度為0.5μmol/L。A. 直線回歸法
MDA與TBA顯色反應(yīng)產(chǎn)物在450nm波長(zhǎng)下的消光度值為零。不同濃度的蔗糖（0～25mmol/L）與TBA顯色反應(yīng)產(chǎn)物在450nm的消光度值與532nm和600nm處的消光度值之差成正相關(guān)，配制一系列濃度的蔗糖與TBA顯色反應(yīng)后，測(cè)定上述三個(gè)波長(zhǎng)的消光度值，求其直線方程，可求算糖分在532nm處的消光度值。UV-120型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的直線方程為：
Y532＝﹣0.00198＋0.088D450 ①
B．雙組分分光光度計(jì)法
據(jù)朗伯-比爾定律：D＝kCL，當(dāng)液層厚度為1cm時(shí)，k=D/C，k稱為該物質(zhì)的比吸收系數(shù)。當(dāng)某一溶液中有數(shù)種吸光物質(zhì)時(shí)，某一波長(zhǎng)下的消光度值等于此混合液在該波長(zhǎng)下各顯色物質(zhì)的消光度之和。
已知蔗糖與TBA顯色反應(yīng)產(chǎn)物在450nm和532nm波長(zhǎng)下的比吸收系數(shù)分別為85.40，7.40。MDA在450nm波長(zhǎng)下無(wú)吸收，故該波長(zhǎng)的比吸收系數(shù)為0，532nm波長(zhǎng)下的比吸收系數(shù)為155，根據(jù)雙組分分光度計(jì)法建立方程組，求解方程得計(jì)算公式：
C1(mmol/L)=11.71D450 ②
C2(μmol/L)=6.45(D532－D600)－0.56D450 ③
式中 C1－為可溶性糖的濃度；
C2－為MDA的濃度；
D450、D532、D600分別代表450nm、532nm和600nm波長(zhǎng)下的消光度值。
試劑
10%三氯乙酸（TCA）；0.6%硫代巴比妥酸，先加少量的氫氧化鈉（1mol/L）溶解，再用10％的三氯乙酸定容；石英砂。
方法
1. 實(shí)驗(yàn)材料 受干旱、高溫、低溫等逆境脅迫的植物葉片或衰老的植物器官。
2. MDA的提取 稱取剪碎的試材1g，加入2ml 10％TCA和少量石英砂，研磨至勻漿，再加8ml TCA進(jìn)一步研磨，勻漿離心（4000×g）10min，上清液為樣品提取液。
3. 顯色反應(yīng)和測(cè)定 吸取離心的上清液2ml（對(duì)照加2ml蒸餾水），加入2ml 0.6%TBA溶液，混勻物于沸水浴上反應(yīng)15min，迅速冷卻后再離心。取上清液測(cè)定532nm、600nm和450nm波長(zhǎng)下的消光度。
4. 計(jì)算含量
(1) 直線方程法 按公式①求出樣品中糖分在532nm處的消光度值Y532，用實(shí)測(cè)532nm的消光度值減去600nm非特異吸收的消光度值再減去Y532，其差值為測(cè)定樣品中MDA-TBA反應(yīng)產(chǎn)物在532nm的消光度值。按MDA在532nm處的毫摩爾消光系數(shù)為155換算求出提取液中MDA濃度。
(2) 雙組分分光光度法 按公式③可直接求得植物樣品提取液中MDA的濃度。
用上述任一方法求得MDA的濃度，根據(jù)植物組織的重量計(jì)算測(cè)定樣品中MDA的含量：
MDA（μmol/g FW）＝C×V/W
式中 C－MDA濃度（μＭ）；
V－提取液總體積（ml）；
W－植物組織鮮重（g）。

泥鰍

求原料新鮮度-ＴＢＡ的測(cè)定方法

綠緣

呵呵，這個(gè)東東以前我也求過(guò)，就是沒(méi)人給，樓上的要耐心等待高人的出現(xiàn)哦！

泥鰍

好的，我會(huì)耐心的等待，我相信會(huì)有貴人的

居心良苦

別求了，不會(huì)有的。原料不同，即使有測(cè)定指標(biāo)，指標(biāo)也不一樣；即使統(tǒng)一原料，測(cè)新鮮度指標(biāo)，也不會(huì)有標(biāo)準(zhǔn)，沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)的東西，怎么去表達(dá)，去要求別人。
真要采購(gòu)好原料，就要品管采購(gòu)多溝通，或者干脆將兩個(gè)部門(mén)合在一塊?，F(xiàn)在很多公司做統(tǒng)一采購(gòu)就有這方面的味道